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文档简介

实验四维生素C测定,固蓝盐B分光光度法,【实验目的】,掌握固蓝盐B分光光度法测定维生素C的原理；2.熟悉固蓝盐B分光光度法测定维生素C的测定方法。,【实验原理】,在乙酸溶液中，维生素C与固蓝盐B反应生成黄色的草酰肼-2-羟基丁酰内酯衍生物。在420nm处测定吸光度，与标准系列比较定量。,仪器,紫外可见分光光度计,试剂,乙酸锌溶液：亚铁氰化钾溶液：乙酸溶液（2mol/L）：乙酸溶液（0.5mol/L）：乙二胺四乙酸二钠溶液（0.25mol/L）；固蓝盐B溶液（2g/L）：抗坏血酸标准储备溶液（2.0g/L）：抗坏血酸标准储备溶液（0.1g/L）：（临用时配制）。,【方法】,1.基本步骤：用框或图形表示流程。,2.操作：,（1）试样溶液的制备蔬菜、水果:称取鲜样可食部分600g猕猴桃于捣碎机中，加等量的乙酸溶液（2mol/L），捣碎、混匀。取20ml均浆至100ml容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀。滤纸过滤，滤液备用。不易过滤的试样可用离心机离心后，上清液供测定。,（2）样品测定,（2）样品测定,将上述10个管，静置20分钟以后，用1cm比色皿，以标准0管调节零点，在分光光度计420nm处测定各标准管的吸光度。以测出的吸光度对维生素C含量绘制标准曲线或计算回归方程。,计算,X样品中抗坏血酸含量，单位为mg/KgA测定液吸光度m试样质量,单位为g,【注意事项】,1.抗坏血酸有较强的还原性，很容易被氧化，因此操作过程要迅速，并尽量避免与金属离子接触。2.本法适用于各类食品中还原型抗坏血酸的测定，不适用于脱氢型抗坏血酸的测定。,【检测结果意义】,维生素C促进体内胶原的形成，促进铁的吸收，降低血胆固醇，减缓动脉粥样硬化，增强免疫力，促进伤口愈合，具有防癌抗癌的作用；缺乏
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