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文档简介
实验四、血小板计数,南通大学附属医院丛辉,1,血小板(platelet,PLT)是由骨髓造血组织中的巨核细胞产生,具有维持血管内皮完整性以及黏附、聚集、释放、促凝和血块收缩等功能。血小板计数是止血、凝血检查最常用的筛检试验之一。血小板计数(PLT)是测定单位容积的血液中血小板的数量。,血小板特点,2,血小板形态检查,在血涂片上血小板往往散在或成簇分布,多为圆形、椭圆形或略欠规则形;胞质呈淡蓝或淡红色,有细小、分布均匀而相聚或分散于胞质中的紫红色颗粒。,正常血小板形态:正常血小板呈两面微凸的圆盘状,直径约1.53m,新生血小板体积大,成熟者体积小。,3,异常血小板形态:1大小异常血小板可出现明显的大小不均变化。(1)大血小板:直径为47m,巨型血小板直径大于7m,常为720m,也可大于20m,胞质中嗜天青颗粒细小或融合为大颗粒。,主要见于ITP、粒细胞白血病、血小板无力症、巨大血小板综合征、MDS和脾切除后等。,血小板形态检查,4,(2)小血小板:直径小于1.5m,主要见于缺铁性贫血、再生障碍性贫血、ITP等。2形态异常血小板可以出现杆状、逗点状、蝌蚪状、蛇形和丝状突起等异常形态,健康人偶见(少于2%)。,影响血小板形状改变的因素很多,各种形态异常又无特异性。因此,不规则和畸形的血小板比值超过10%时才有临床意义。,血小板形态检查,5,3聚集性和分布异常血小板聚集、分布状态可间接反映其功能。聚集功能正常的血小板在非抗凝血的外周血涂片中常可见35个聚集成簇或成团,聚集与散在血小板之比为201。,在EDTA抗凝血的血涂片中,可见血小板不聚集而呈散在分布状态或出现诱发的血小板聚集现象。,6,(1)血小板卫星现象:血小板黏附、围绕于中性粒细胞周围(或偶尔黏附于单核细胞)的现象,有时可见血小板吞噬现象。此时,血小板和中性粒细胞形态和功能均正常。血小板卫星现象偶见于EDTA抗凝血。,因EDTA和免疫球蛋白相互作用、非特异性结合血小板之故,被抗体包被的血小板与中性粒细胞结合。血小板卫星现象是血液分析仪血小板计数假性减少的原因之一(血小板被误计为白细胞)。,7,(2)血小板片状聚集:原发性血小板增多症和血小板增多的慢性粒细胞白血病,血小板可呈大片聚集(图2-57)。,(3)血小板减少:再生障碍性贫血和ITP因血小板数量少,血小板聚集成团的情况明显减少。(4)血小板功能异常:血小板无力症时血小板无聚集功能,且散在分布,不出现聚集成团的现象。,8,血小板计数,9,血小板计数方法,10,血小板计数方法学评价,12,血小板计数原理,血液经血小板稀释液稀释后,红细胞被溶解,注入计数池后,在显微镜下计数血小板。经换算求出每升血液中的血小板数。,13,试剂器材,试剂草酸铵稀释液草酸铵10克EDTA0.12克蒸馏水加至1000ml,过滤后备用。,14,试剂器材,器材改良牛鲍计数板采血针微量吸管显微镜,15,操作步骤,吸取血小板稀释液0.38ml于康氏试管中。用一次性微量吸管吸血20ul于上述稀释液中。充分混匀后取一小滴于血球计数池内,静止10-15分钟.用低倍镜或高倍镜计数中央大方格中五个中方格内之血小板数。,16,计算,按下列公式计算血小板数,参考值(100-300)109/L,17,质量控制,有少数患者可能红细胞溶解不完全。稀释液可放室温使用,但应密闭以防灰尖及水份蒸发,最好放冰箱保存为妥。采血时,如同时做WBC等,应先采血做血小板。悬液制备,充分混匀,摇动标本2min或200次以上。计数时应等待充液静止10-15min后方可计数,时间过短因血小板尚未下沉,使计数结果偏低,但时间不宜放置过长,否则出现颗粒沉淀物,使计数无法进行。血小板在镜下为富于折光之小点,约为红细胞的1/21/3大小。计数光线不可太强,1h内计数完成。如红细胞不完全溶解,影响血小板计数时,可加大稀释倍数,或另换稀释液。,18,血小板减少是引起出血的常见原因2050109/L时,可有轻度出血或手术后出血;400109/L为血小板增多,临床意义,19,毛细血管采血标准操作程序,操作步骤采血部位成人以左手无名指内侧为宜,半岁以下婴幼儿通常自拇指内侧或足跟两侧采血。轻轻按摩采血部位。用洗必泰碘棉签消毒局部皮肤、待干。?紧捏刺血部位,使其自然充血。用无菌刺针穿刺取血,动作应迅速,深度23mm,稍加挤压以血液流出为宜。用干棉球擦去第一滴血。?按需要依次采血。采血完毕,用干棉球压住伤口,止血片刻。,20,质量保证,除特殊情况外,不要在耳垂采血。若在耳垂采血应避开冻疮、炎症、水肿等部位。皮肤消毒,严格无菌操作。快、准,深度适宜。微量吸管吸血准确,血液弯面达到刻度线即可,标本
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