肿瘤免疫和检验PPT课件.ppt

临床免疫学检验,吉林医药学院检验学院,1,肿瘤免疫和检验,2,第一节概述,实践表明，内在的遗传因素、免疫状态和外部的诱变因子，是构成肿瘤发生发展的基础和条件。其中，机体的免疫状态，尤其是细胞免疫功能的强弱，已被视为是否发生肿瘤的重要内在因素。,3,最普遍的恶性肿瘤死亡原因,4,临床：病史、体症,物理检查：X光、CT、磁共振、B超,术前：穿刺、刮片、拉网术后：组织切片,免疫：肿瘤抗原和代谢物测定,分子生物：肿瘤相关基因分析,肿瘤诊断,辅助,病理,5,肿瘤抗原（tumorantigen）：是指在肿瘤发生、发展过程中新出现的或过度表达的抗原物质。,6,肿瘤的发展及诊断期,7,肿瘤的免疫逃避机制？,肿瘤细胞缺乏有效的抗原性表位，难以触发足够的抗肿瘤免疫效应肿瘤细胞的MHC分子表达发生改变，异常表达的MHC分子，有碍机体免疫细胞对肿瘤细胞的识别，影响抗原递呈作用不能正常表达B7等活化免疫细胞的共刺激分子和黏附分子患者血清中存在着封闭因子。肿瘤细胞产生的某些细胞因子对T细胞的产生有抑制作用肿瘤细胞表达FasL，和活化CTL的Fas结合，介导CTL凋亡,8,体液免疫效应（熟悉）,激活补体的溶细胞作用介导杀伤细胞的细胞毒作用调理吞噬作用干扰肿瘤细胞的生物学行为其他作用,第二节机体的抗肿瘤免效应机制,9,细胞免疫效应,T细胞生物学效应包括T细胞的直接杀伤和对免疫系统其它成分的活化。（1）CD4阳性的辅助T细胞（2）CD8阳性的细胞毒T细胞,10,（1）CD4阳性的辅助T细胞与肿瘤免疫关系密切的是Th1细胞。Th1的激活：肿瘤抗原+抗原递呈细胞（树突状细胞）+MHCII类分子Th1的效应：通过释放细胞因子（TNF，IFN-）发挥抗肿瘤作用。,11,（2）CD8阳性的细胞毒T细胞是肿瘤免疫的主要途径。通过释放毒性物质或促发靶细胞上的死亡受体，而直接溶解靶细胞，或通过分泌IFN-间接杀伤肿瘤细胞。,12,NK细胞NK细胞是宿主固有免疫或一线防御机制的一部分，非MHC限制性，不需要对宿主或其免疫功能进行调整适应。对肿瘤细胞和病毒感染细胞比对大多数正常细胞更具有毒性作用。其作用机制类似于CTL，还可分泌大量的细胞因子以调节机体免疫反应。,13,巨噬细胞活化的巨噬细胞与肿瘤细胞的结合可触发细胞毒活性，细胞毒性介质有细胞溶解蛋白酶、TNF-及其相关因子、IFN-和IFN-、IL-1，过氧化氢，NO、精氨酸酶。,14,树突状细胞是一类专职抗原递呈细胞，辅佐T、B细胞参与特异性杀伤肿瘤的过程。制备肿瘤特异性树突状细胞以进行肿瘤的生物治疗。,15,第三节肿瘤抗原的分类,肿瘤特异性抗原,肿瘤相关性抗原,16,一、肿瘤特异性抗原（TSA）为肿瘤细胞所特有，只表达于肿瘤细胞，而不存在于任何处于不同发育阶段的正常细胞。,1.化学物质诱发,17,2.病毒诱发无严格的特异性，通常由同一种病毒诱发的所有肿瘤，都具有相同的TSA。血清学试验和肿瘤特异性CTL的检测，均有助于抗原的检定。其可诱导机体的免疫应答，故又被称为肿瘤特异性移植抗原。其成分多系病毒基因的表达成分。,18,3.自发自发肿瘤系无明显诱因的肿瘤，很难检测到特异性的抗原标志物，其原因可能有：早期肿瘤细胞及近亲本子代细胞一定时间内可以表达，但后代细胞因为染色体的随机突变而失去表达。可能存在，但单独使用抗原抗体方法难以得到确定答案。,19,二、肿瘤相关抗原（TAA）,指非肿瘤细胞所特有的抗原成分，也少量存在于正常细胞，但在肿瘤发生的机体可异常表达，可分为胚胎性抗原和分化抗原两种类型。,胚胎抗原分化抗原,20,第四节常见肿瘤的免疫诊断及应用原则,21,肿瘤标志物及其特点,是显示肿瘤存在的生物化学指示物，其特点与肿瘤相伴产生抗原或激素或酶蛋白存在于血液、体液及组织中可定量或定性检测到可以作为辨认和追踪肿瘤存在和发展的标志,22,肿瘤标志物研究历史,1845Bence-Jones本周蛋白1930ZondekHCG1959Markert同工酶1963AbelevAFP1965Gold&FreemanCEA1969Hubner&Todaro癌基因1975Kohler&Milstein单克隆抗体1978Herberman提出肿瘤标志物概念1979英国第7届肿瘤发生生物学和医学会议肿瘤标志物被确认并应用临床1980KoprowskiCA19-91981BastetalCA1251981ColcheretalCA72-41984KufeetalCA15-3.,23,已建立的肿瘤标志物,24,常用肿瘤标志物联合检测的临床应用,肿瘤首选标志物补充标志物,肺癌NSE、CYFRA21-1CEA、TPA、SCC、ACTH、降钙素肝癌AFPAFU、GT、CEA、ALP乳腺癌CA15-3、CA549CEA、hCG、降钙素、铁蛋白胃癌CA72-4CEA、CA19-9、CA50前列腺癌PSAf-PSA、c-PSA、PAP结肠直肠癌CEACA19-9、CA50胰腺癌CA19-9CA50、CEA、CA125卵巢癌CA125CEA、hCG、CA72-4睾丸肿瘤AFP、hCG宫颈癌SCCCEA、CA125、TPA膀胱癌无TPA、CEA骨髓瘤2-M、本周蛋白,25,肿瘤标志物的分类,细胞肿瘤标志物：位于细胞中的物质或抗原，如激素受体、白血病表型。体液肿瘤标志物：病理情况下，浓度增加时可在血液、尿液或其他体液中测得的物质，如AFP、CA19-9、CEA、CA15-3等。肿瘤表型标志物：酶、胚胎性抗原、异位性蛋白、激素等。出现于癌细胞转化和临床进展阶段。肿瘤基因标志物：基因突变、基因表达异常等，出现于癌前起动阶段。,26,体液肿瘤标志物的分类和命名尚未完全统一，一般分为：胚胎抗原类：如AFP，CEA等，糖链抗原类：如CA125，CA15-3，CA19-9等。激素类：如患甲状腺髓样癌时降钙素升高，患绒毛膜细胞癌时hCG明显升高。酶和同工酶类：GT，PAP等。蛋白质类：2微球蛋白，铁蛋白，本周蛋白等癌基因产物类:如ras基因蛋白，myc基因蛋白，p53抑癌基因蛋白等。,27,特异性好,与肿瘤类型(大小/分期)有关,灵敏度高，能肿瘤能早期发现。,具有器官特异性,监测肿瘤治疗效果,监测肿瘤的复发,理想的肿瘤标志物,预测肿瘤的预后,28,2019/12/13,29,一、常见的肿瘤抗原及其意义,30,1.甲胎蛋白（AFP）,AFP是胎儿发育早期合成的一种糖蛋白(1球蛋白)，分子量70kD，胎儿出生后不久即逐渐消失。参考值：血清AFP300g/L，但有部分患者AFP始终不升高；病毒性肝炎与肝硬化患者，血清中AFP可有不同程度的增高，但一般在300g/L以下；生殖系统肿瘤和胚胎性肿瘤，如睾丸癌、畸胎瘤等升高；妊娠三个月后，血清AFP含量开始升高，分娩后三周恢复正常。若孕妇血清中AFP异常升高，应考虑有胎儿神经管缺损畸形的可能性。,32,2.癌胚抗原（CEA）,1965年CEA发现于成人结肠癌组织中，分子量约为200kD，可溶性糖蛋白，主要存在于成人癌组织以及胎儿的胃肠管组织中，故名癌胚抗原，是一种广谱肿瘤标志物。参考值：血清CEA35U/ml的病人中有95%在第二次手术时仍有肿瘤存在,39,5.糖类抗原19-9（CA199）CA19-9是胰腺、胃和肠癌的标记物。正常人群血清CA19-9阳性的临界值为37U/ml,40,诊断可以作为胰腺和胆管癌较好的标志物用于临床，胰腺癌的阳性率可达70%92%，胆管癌为66.7%对胃癌、肝癌和结直肠癌的阳性率分别可达25%60%、56%60%，18%58%,CA199的应用,41,疗效监测治疗中及术后含量下降乃至正常表示治疗方案正确复发跟踪升高可作为肿瘤复发转移的亚临床诊断或重要的辅助诊断指标,42,6.神经原特异性烯醇化酶（NSE）,同功酶类肿瘤标志物，正常仅存于神经组织和红细胞中正常人血清值为13g/L小细胞肺癌、神经母细胞瘤和神经内分泌肿瘤及脑损伤时升高待测标本绝对禁止溶血，溶血可出现NSE血清水平升高,43,跟踪监测癌肿病情进展和疗效判断-肺癌NSE高于11.8g/L预示肺癌患者生存期较短化疗24小时后NSE下降是治疗效果良好的标志,神经原特异性烯醇化酶的临床应用,44,7.人绒毛膜促性腺激素（HCG）,糖蛋白类激素，由蛋白核心与位于羧基端的以唾液酸为终止的侧链组成两个亚基组成:&:与-LH,TSH和FSH相同:与-LH有交叉由合胞体滋养层细胞产生被证实是一种原始物质(可作为一种有用的肿瘤标志物),45,HCG的临床应用：HCG上升：几乎所有绒毛膜上皮细胞癌、70%的非精原细胞性睾丸癌，胃肠道、肺、乳腺肿瘤时亦可见HCG水平与肿瘤大小、疾病预后有关脑脊液中HCG上升提示肿瘤有脑转移可用于监测治疗,46,二、常见肿瘤标志物检测的免疫方法,47,待测物质浓度与检测手段,临床化学分析,pg/mL,ng/mL,mg/mL,mg/mL,g/L,免疫分析,TherapeuticDrugs,ThyroidHormone,FertilityHormone,Allergy,CancerMarkers,InfectiousDisease,Vitamins,SerumProteins,48,三、肿瘤标志物的应用价值,49,肿瘤标志物的总体应用价值,普查定位辅助诊断分期疗效监测预后预测,50,肿瘤标志物普查五项原则,应十分清楚该肿瘤的发病率该肿瘤标志物应能检测早期肿瘤该肿瘤的早期治疗比晚期治疗更经济有效测定方法的灵敏度、特异性和重复性良好普查所需费用能被接受,51,术后肿瘤标志物水平的变化,52,肿瘤标志物水平,52,四、肿瘤标志物的其它几个问题,正常参考范围的界定方法学不同而导