坎地沙坦对高盐致心室肥厚的作用及对炎症因子表达的影响.doc

坎地沙坦对高盐致心室肥厚的作用及对炎症因子表达的影响【摘要】 目的 研究血管紧张素1型受体（AT1R）拮抗剂干预在高盐饮食大鼠心室肥厚中的作用及与炎症因子表达的关系。方法 将Wistar大鼠30只随机分为高盐组、高盐+坎地沙坦干预组（2 mg/kg/d）、高盐+三联干预组（mg/kg/d：肼屈嗪20+氢氯噻嗪7+ 利血平0.15）；每组10只。各组均以8% NaCl高盐颗粒饲料喂食；干预组分别予以坎地沙坦或三联药物灌胃。分别在实验前、实验4 w和8 w后测定尾动脉血压，8 w后称左心室重量(LVM)，计算左室/体重指数(LVI)；用酶联免疫法（ELISA）测定各组血清白细胞介素1（IL1）、白细胞介素6（IL6）的表达。结果 高盐喂养8 w后，高盐组较基础血压明显升高（P<0.01），坎地沙坦或三联药物干预组血压较高盐组明显降低（均P<0.01），且两组干预组血压无明显差异(P>0.05)。坎地沙坦组较高盐组LVM减轻、LVI降低(P<0.01)；而三联药物组虽降低但未达到统计学差异（P>0.05）。坎地沙坦组较高盐组或三联药物组都有明显的IL1、IL6表达降低(均P<0.01)，而三联药物组与高盐组间无明显差异(P>0.05)。结论 高盐喂食可以导致心肌肥厚的发生，不完全依赖于血压的升高。AT1R拮抗剂能够逆转高盐对心肌的影响，独立于降压作用之外，与其抗炎作用有关。 【关键词】 高盐；心室肥厚；炎症因子；血管紧张素受体拮抗剂高盐摄入是重要的心脑血管危险因素，可通过血压之外的作用对心脏等靶器官产生不良作用1；血管紧张素（Ang）1型受体（AT1R）拮抗剂作为一个有效的降压药物，在心血管保护方面的作用与其拮抗循环或局部组织Ang有关。目前认为AT1R拮抗剂还能降低炎症因子，改善心血管微炎症反应2。本实验旨在观察AT1R拮抗剂坎地沙坦对高盐摄入所致左室结构的影响，并探讨其与炎症因子的关系。1 材料与方法1.1 实验动物清洁级雄性Wistar大鼠30只，体质量（20010）g,由中科院动物实验中心提供。1.2 主要试剂或药物大鼠白细胞介素(IL)6、IL1 ELISA试剂盒由R&D公司提供；坎地沙坦由广州白云山天心制药股份有限公司提供；肼屈嗪由江苏大丰天生制药提供；氢氯噻嗪由天津力生制药股份有限公司提供；利血平由上海齐奥化工有限公司提供。1.3 主要仪器RBP1型尾动脉血压计（北京中日友好临床研究所），AB104N型1/万电子天平（MetterToledo上海公司），自动平衡式离心机（北京医用离心机厂），STARlet酶联免疫分析仪（Hamilton Bonaduz AG） 。1.4 方法1.4.1 实验模型与分组将30只雄性Wistar大鼠随机分为3组：高盐组、高盐+坎地沙坦干预组、高盐+三联干预组；每组10只。适应性喂养2 w后开始实验。1.4.2 动物喂养与给药各组均以8%氯化钠(NaCl)颗粒饲料喂养，每只大鼠等量喂食，自由饮用自来水。坎地沙坦组大鼠每日按坎地沙坦2 mg/kg灌胃给药，三联干预组每日按（肼屈嗪20+氢氯噻嗪7+ 利血平0.15）mg/kg灌胃给药，高盐组则以等量蒸馏水灌胃作对照；灌胃时间均为8 w。1.4.3 取材高盐饲料喂养8 w后，大鼠用氯胺酮腹腔注射麻醉，剖开胸腔，暴露心脏并取血，分别注入相关试管内，离心，分离血浆或血清，取上清分装，-80冰箱冻存备用；取出心脏装入冻存管内，冻存于液氮中，再转移至-80冰箱中备用。1.4.4 大鼠血压测定实验前、高盐饲料喂养4 w和8 w后，用尾动脉脉压法监测各组动物清醒状态下的血压，连续测定3次，取平均值。1.4.5 左室质量（LVM）及左室/体重指数（LVI）测定，血浆IL1、IL6水平的放免测定去除心房、大血管及右室游离壁，将左心室+室间隔准确称量作为LVW,计算LVI。将待测血清样本常温下复融，血浆样本冷水中复融，采用碘标记的放免测定法，严格按照试剂盒说明操作。1.5 统计学方法计量资料以xs表示，多组间比较采用单因素方差分析，方差齐性用SNK检验，方差不齐用t检验。所有实验结果用SPSS13.0版统计软件处理。2 结 果2.1 各组血压变化高盐组、三联药物及坎地沙坦干预组各组基础血压无明显差异（116.95.6，116.86.0，117.94.6）mmHg。治疗8 w后三联药物组及坎地沙坦组较高盐组血压明显下降(124.67.2)，(125.23.0) vs (136.43.8)mmHg(均P<0.01)，且两干预组间无明显差异（P>0.05）。见图1。2.2 各组LVW、LVI变化三联药物干预8 w后较高盐组LVM以及LVI有下降，但未达到统计学差异LVM (mg)：853.431.7 vs 830.429.6，P>0.05;LVI:2.6980.283 vs 2.8500.243,P>0.05,而坎地沙坦干预8 w后较高盐组LVM(712.425.9)mg以及LVI(2.1350.232)mg明显降低(均P<0.01)。2.3 各组IL1、IL6水平变化与高盐组相比较，三联药物干预8 w后炎症因子下降不明显IL1(pg/ml):56.345.12 vs 61.643.78(P>0.05)；IL6(pg/ml):105.679.98 vs 113.4511.03(P>0.05)，而坎地沙坦干预8 w后血浆炎症因子IL1(39.685.64)pg/ml、IL6(80.078.93)pg/ml明显降低(均P<0.01)。3 讨 论 本实验中高盐摄入导致左室肥厚，而心室结构改变在三联药物组单纯降压后并没有显著改善，说明高盐摄入导致心肌损伤并不完全依赖于血压的升高。高盐饮食可能是一个非血压依赖性的独立影响因素，即使在不改变血压的情况下仍可以产生对心肌的不良影响1。 高盐饮食导致心室肥厚的机制尚不完全清楚。微炎症是一种低强度、慢性进展非显性炎症状态，是心血管疾病发生发展的重要因素，通过对心肌细胞体内外研究发现炎症因子促进了心肌肥大的发生3，4。本研究中高盐饮食导致左室肥厚，同时也有炎症因子IL6和IL1的升高，两者之间可能存在联系。其机制可能是高盐摄入可以不同程度的激活组织或循环肾素血管紧张素系统（RAS）尤其是Ang的活性5，6；在病理状态下，Ang可增强炎症因子的表达7，8，而炎症因子如肿瘤坏死因子（TNF）则可能上调成纤维细胞等的AT1R表达，促进Ang的作用9；形成RAS与炎症因子之间的恶性循环，导致微炎症反应，继而促进左室肥厚。 研究发现AT1R拮抗剂不仅可以降压，而且还有明显的抗炎作用。本实验中坎地沙坦组较三联组同等降压，却明显抑制炎症因子的表达，而三联药物干预单纯的降压并不能有效降低炎症因子表达，可能是AT1R拮抗剂实现心肌肥厚明显降低的有效机制。Schieffer等10通过对冠心病人的研究也证实了AT1R拮抗剂类似的抗炎作用。AT1R拮抗剂对炎症因子的抑制可能与其对RAS尤其是局部组织Ang的抑制有关11，12；也可能通过调节核转录因子（NFB）等产生抗炎作用2。正是这种有效抗炎作用，AT1R拮抗剂能够独立于其降压作用之外降低心肌肥厚的发生。Varagic13对高盐喂食的自发性高血压大鼠予