体外受精和早期胚胎培养课件.ppt

3.2体外受精和早期胚胎培养,一、从试管牛说起二、体外受精三、胚胎的早期培养四、胚胎移植,3.1体内受精和早期胚胎发育,1978年7月25日世界首例试管婴儿,第一个试管婴儿于1978年7月25日在英国的奥尔德姆市医院诞生，她的名字叫路易丝.布朗。路易丝.布朗的母亲梅.布朗因输卵管阻塞而不能生育。,医生从梅.布朗（时年31岁）体内提取卵子，再取她丈夫（时年38岁）的精液，经处理在体外使卵子受精，受精卵培养成16细胞胚后重新植入梅.布朗的子宫内。9个多月后就生下了路易丝.布朗。,1988年3月10日我国首例试管婴儿诞生,著名妇产科专家张丽珠教授与中国首例试管婴儿,1992年我国首例三胞胎试管婴儿,根据资料回答下列问题：1.试管婴儿技术包括哪些操作步骤？（体外受精、胚胎的早期培养和胚胎移植）2.试管婴儿培育和母亲正常怀孕的过程有何异同？相同之处：都通过有性生殖产生;都要在母体子宫内发育形成胎儿。不同之处：受精作用在体外，并在体外发育成早期胚胎进行胚胎移植。,一、试管动物技术1、概念：通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育成早期胚胎后，再经移植产生后代的技术。2、过程：,第一步：体外受精,第二步：胚胎的早期培养,第三步：胚胎移植,首先要做的是_和_。,体外受精,胚胎的早期培养,3、意义：,解决动物生育率低的问题，实现良种家畜的大量快速繁殖。,主要包括_、_和_等几个主要步骤。,二、体外受精,卵母细胞的采集,精子的获取,受精,（一）卵母细胞的采集和培养,冲卵：M中期的次级卵母细胞,1、小型动物如小鼠、兔、猪、羊等用促性腺激素处理，使其排出更多的卵子，然后从输卵管中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。(超数排卵法)2、大型动物如牛等从屠宰场已屠宰动物或活体动物的卵巢中采集卵母细胞。在体外培养成熟后（M中期），才能与获能的精子受精。,从卵巢中采集卵母细胞，也可以借助_、或_等工具确定卵泡位置，直接从活体动物中吸取泡卵液（连同卵母细胞）取出，在体外进行人工培养，使其成熟。,超声波(B超)探测仪,内窥镜,腹腔镜,牛卵巢,B超活采仪,B超引导法：借助超声波探头和屏幕的引导，从活母畜卵巢采集卵母细胞。操作员先将带有超声波探头和采卵针的采卵器通过阴道插入子宫，同时通过将卵巢贴在探头上。根据B超屏幕所显示的卵泡位置，利用采卵针穿刺卵泡并同时抽吸卵母细胞。,检查卵母细胞,活体采集的牛卵母细胞,卵母细胞的成熟培养：CO2培养箱,培养箱,1、精子采集方法：,假阴道法手握法电刺激法,大家畜或大型动物猪、犬等体型较小，易于控制的动物,野生或经济动物,此外，啮齿类实验动物可在处死后从附睾尾收集精液。,(二)精子的采集和获能,2019/12/13,19,可编辑,(二)精子的采集和获能,2、精子获能的方法：,培养法:,化学诱导法:,如：啮齿动物、家兔和猪等,如：牛、羊等,放入人工配制的获能液中,放在一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中,获能溶液,专用受精溶液,获能的精子和培养成熟的卵子，一般情况下在_或_中共同培养一段时间才能完成受精过程。,(三)受精,精子和卵子在体外受精后，应将受精卵移入发育培养液中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力。,培养液成分：,有机盐、无机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等,三、胚胎的早期培养,四、胚胎移植,培养发育到适宜阶段时，可将其取出向受体移植或冷冻保存。,胚胎移植,采集卵母细胞,体外培养,采集精子,体外获能,体外受精,早期胚胎培养,受体牛,小结,（时期：）,1）超数排卵（试剂）2）活体取卵（仪器）3）从屠宰的卵巢取卵,方法,（方法，试剂）,（试剂）,（培养条件、目的阶段）,成熟的卵子,获能的精子,MII中期,方法,1、关于牛体外受精及胚胎的工厂化生产的叙述，正确的是A.精子和卵细胞受精形成受精卵后即可移入母牛子宫B.采集的卵母细胞应立即与精子共同放入培养液才能形成受精卵C.成熟的卵细胞与收集来的精子相遇形成受精卵，需培养到一定阶段才可移植D.体外受精胚胎的工厂化生产即胚胎发育和受精过程只需在体外进行,2、下列现代生物技术成果获得必须通过胚胎移植的是A.转基因良种鸡B.重组酵母乙肝疫苗C.单克隆抗体D.试管婴儿,C,D,巩固练习,3、采集的卵母细胞，在体外经人工培养成熟后，才能与获能的精子受精，以下原因不正确的是A.卵子从输卵管中冲出也要经历类似精子获能的过程B.动物排出的卵子成熟程度不同C.体外人工培养至减数分裂第二次分裂中期时才成熟D.冲出的卵子还需要培养一段时间由小变大,D,4、下列关于滋养层细胞的叙述，不正确的是A.囊胚滋养层细胞将来发育成胎盘和胎膜B.可以用滋养层细胞做DNA分析性别鉴定C.囊胚滋养层细胞就是将来原肠胚的外胚层D.滋养层细胞沿透明带内壁扩展和排列,C,5、下列有关胚胎工程的叙述，正确的是A.“试管动物”的生殖方式属于无性生殖B.卵裂球时期每一个细胞的体积比受精卵大C.通过胚胎移植技术可充分发挥良种母畜的繁殖潜力D.对某一胚胎的干细胞移植，产生的动物中雄性和雌性的概率各占1/2,C,6、下列关于胚胎工程的叙述，正确的是（）A.通过胚胎体外培养可直接获得新生儿B.超数排卵技术要使用一定的激素C.胚胎移植中的受体与供体必须都为优良品种D.受体母畜需要遗传性状优良的品种，供体母畜可用遗传性状一般的品种,B,7、“试管婴儿”技术是通过将不孕夫妇的精子和卵细胞取出在试管中完成受精，并在试管中培养受精卵使其发育到桑椹胚或囊胚阶段，再将胚胎移入女性子宫内发育成胎儿。它不仅使一部分不能生育的男女重新获得了生育的机会，也为人类的优生开辟了新的途径。据此回答：（1）“试管婴儿”技术在生物学上所依据的原理是A.有性生殖B.组织培养C.克隆技术D.基因工程（2）“试管婴儿”的形成用到下列哪些技术？（填序号）体外培养人工授精胚胎移植核移植,A,8、下图是培育能产生凝血因子牛的过程示意图，回答相关问题：（1）为能从良种母牛体内一次取得多枚卵子，可以采用的方法。据报道，这种技术已经被滥用于人类生育中，从而出现许多人工“多胞胎”，这种技术带来的危害之一是。（2）在过程中，当一个精子进入卵细胞后会激发卵子发生反应，如透明带反应等，其意义是。过程涉及的技术是。,注射促性腺激素,影响胎儿的健康发育、对孕妇的身体不利等,防止多精入卵,胚胎移植,1）进行小鼠胚胎工程时，首先在光控周期下饲养成年雌鼠，并注射促性腺激素，目的是。然后从雌鼠输卵管中取出卵子，在一定条件下培养成熟；并从雄鼠附睾中取出精子，在一定条件下培养一段时间，目的是。再在37，5%CO2条件下，精卵共同作用4h，冲洗后继续培养。定时在显微镜下观察胚胎的变化，第5天可以看到胚胎发生收缩，细胞间隙扩大，接着胚胎内部出现裂隙，这时胚胎已经进入_期。,促进超数排卵,使精子获能,囊胚,9.回答下列问题,2）如果体外受精后，在精原核与卵原核融合之前，用微型吸管除雄原核，再用细胞松弛素B处理（作用类似于用秋水仙素处理植物细胞），处理后的受精卵可发育成小鼠。这种方法在动物新品种选育中的显著优点是。3）如果将小鼠甲的体细胞核移入小鼠乙的去核卵细胞中，由重组细胞发育成小鼠丙，则小鼠丙的基因来源有。,容易获得纯合子并缩短育种时间,小鼠甲（体细胞）的核基因和小鼠乙（卵细胞）的细胞质基因,1999年4月23日晚9时，在广州中山医科大学第一附属医院出生一健康女婴，她是我国首例第三代试管婴儿，父母身体健康、婴儿的母亲7年前生下一男婴，孩子一岁后发病，最后死于脑出血，5年后，她第二次怀孕6个月时，到医院抽羊水及脐带血诊断，发现胎儿是男孩，而且是血友病患者，遂引产。夫妇二人最后来到中山医科大学附属医院做试管婴儿。医生培养了7个可做活体检查的胚胎，并抽取每个胚胎12个细胞进行检查后，选择了两个胚胎进行移植。最后一个移植成功。根据资料回答下列问题：,（1）试管婴儿技术作为现代生物技术和母亲正常怀孕，生产的过程相同之处是：。不同之处是：。（2）血友病的遗传方式为，如果用B、b分别表示血友病基因和正常基因，则父亲、母亲的基因型分别是和，如果该夫妇再生一男孩，患血友病的概率是。（3）医生抽取活体胚胎的1或2个细胞后，可通过观察，判断胎儿的性别，你认为医生应选用胚胎进行移植原因是，自然状态下，出现这样胚胎的概率是。该实例体现了现代科学技术应用于社会和人类生活的重要意义。,通过有性生殖产生，在母体子宫内发育形成胎儿,受精作用在体外，并在体外发育成早期胚胎进行胚胎移植,伴X染色体隐性遗传,XBY,1/2,XBXb,染色体组成,女性,男性胎儿从母亲获得b基因，患病的概率为50，女性正常,1/4,1999年4月23日晚9时，在广州中山医科大学第一附属医院出生一健康女婴，她是我国首例第三代试管婴儿，父母身体健康、婴儿的母亲7年前生下一男婴，孩子一岁后发病，最后死于脑出血，5年后，她第二次怀孕6个月时，到医院抽羊水及脐带血诊断，发现胎儿是男孩，而且是血友病患者，遂引产。夫妇二人最后来到中山医科大学附属医院做试管婴儿。医生培养了7个可做活体检查的胚胎，并抽取每个胚胎12个细胞进行检查后，选择了两个胚胎进行移植。最后一个移植成功。根据资料回答下列问题：,（1）试管婴儿技术作为现代生物技术和母亲正常怀孕，生产的过程相同之处是：。不同之处是：。（2）血友病的遗传方式为，如果用B、b分别表示血友病基因和正常基因，则父亲、母亲的基因型分别是和，如果该夫妇再生一男孩，患血友病的概率是。（3）医生抽取活体胚胎的1或2个细胞后，可通过