（环境工程专业论文）复合硫杆菌与mt基因工程菌对污泥重金属的联合生物淋滤.pdf

太原理一i ：人学博士研究生学位论文 复合硫杆菌与m t 基因工程菌对污泥重金属的联合生物淋滤 摘要 f m ii l i li l h i m h i y 2 15 6 0 0 9 污泥是由污水处理过程或水体运动过程所产生的固体沉淀物质。本课 题的污泥主要是指污水处理厂的浓缩污泥。此类污泥是重要的环境污染 物，其性质复杂、体积大、毒害性持久，污泥中的重金属处理更是环境污 染控制领域的重要课题。尤其对于我国环境安全问题日益严重的今天，污 泥重金属处理技术的研究是有生命力的课题。 污泥农用是污泥资源化利用的重要方向，但污泥重金属的环境风险是 制约污泥农用的瓶颈。传统的污泥消化、浓缩、脱水工艺不能有效去除其 中的重金属。近年来新开发的针对重金属去除的技术存在着成本较高、操 作困难、去除率有限、伴生二次毒性物、存在安全隐患等问题。生物法一 直是备受环境工程领域关注的优选方法。用于污泥重金属处理的生物法包 括生物淋滤以及植物提取等技术方法。其中的生物淋滤法具有适用面广、 去除率较高、操作条件简单、添加基质廉价易得、反应温和、耗酸量少等 优点。更主要的是，生物淋滤工艺可与污水厂原有的污泥消化工艺同步实 施，并可以替代一部分污泥消化的功能，可利用污水厂原有构筑物，基建 费小，冈此是很有发展潜力的方法。近年来，对污泥生物淋滤技术的研究 虽然较多，但对有些重金属元素的去除率并不理想，而且淋滤耗时过长， 启动速率受反应体系的初始p h 值以及水溶性有机物( d o m ) 等因素制约， 这导致淋滤效率较低，运行成本过大。从机理研究角度而言，对污泥生物 淋滤机理的研究成果较少尤其是对c d 、n i 、c r 、p b 淋滤机理的研究很少。 从微生物种类而言，研究者对淋滤的研究大多集中于单独接种某一种硫杆 菌上，而对多种化能自养菌复合淋滤的研究不多，对异养菌与化能自养菌 t 太原理一人学博士研究生学位论文 联合淋滤的研究很少。 本文在研究复合硫杆菌对污泥生物淋滤的基础上，采取异养菌与化能 自养菌联合淋滤的思路，借助耐酸型金属硫蛋白基因工程菌( 简称为m t 基因工程菌) ，对氧化硫硫杆菌( t t ) 与氧化亚铁硫杆菌( t f ) 的生物淋滤 发挥促进作用，提高污泥生物淋滤的效率。另一方面，对重金属负荷率对 淋滤的影响、m t 基因工程菌联合淋滤中重金属形态转化的机理进行了深 入研究，对深化污泥生物淋滤机理作出了有益的探索。主要的研究内容和 结论包括： ( 1 ) 分别采用氧化硫硫杆菌( t t ) 、氧化亚铁硫杆菌( t f ) 、m t 基 因工程菌为主体菌种对污泥进行了单独菌种接种生物淋滤试验。结果显 示，氧化硫硫杆菌( t t ) 与氧化亚铁硫杆菌( t f ) 均对污泥重金属表现 出了较好的淋滤效果，但两种菌液在污泥重金属生物淋滤中具有较明显的 差异。t f 比t t 淋滤效果好的元素是：n i 、c d 、c r 、p b 。其余元素采用 t t 比t f 的淋滤效果好。这与不同重金属元素在原始污泥中的化学形态有 关，也与各种重金属的淋滤机理不同有关；菌种的接种量主要是影响到污 泥淋滤体系的酸化速率、酸化程度以及o r p 的变化趋势。m t 基因工程菌 单独接种淋滤试验结果表明，m t 基因工程菌对重金属具有少量去除能力。 m t 基因工程菌对6 种重金属的亲和力顺序为c d z n c r c u p b n i 。 ( 2 ) 通过对复合硫杆菌对污泥重金属的去除效果进行研究，发现在 底物充足的前提下，t t 与t f 菌实现了相互促进，表现出了比分别单独接 种时相对较好的淋滤效果。具体而言，复合硫杆菌比单独接种t t 或t f 菌时的淋滤初期迟滞段缩短了，淋滤高效段提前到来，达到最高去除率所 需的时间缩短了，总去除率提高有所提高。在不同的底物配比情况下，硫 浓度越高，达到最低p h 值时所消耗的时间也越短，但硫浓度超过4 9 m 后， 对p h 值下降速率的贡献并未显著提高。实验证明f e 2 + 可以作为s 的促进 太原理二f ：大学博士研究生学位论文 型底物，或者说f e 2 + 的增加可以弥补s 底物的不足。硫与f e 2 + 这两种底物 对氧化硫硫杆菌( t t ) 与氧化亚铁硫杆菌( t f ) 的意义是有差异的，但这 两种底物的配合使用能起到相互促进作用，发挥出单独使用任何底物难于 实现的意义。不同底物配比条件对污泥淋滤体系的o r p 值影响较大。 ( 3 ) 在复合硫杆菌采用固定体积比的前提下，对m t 基因工程菌采 用不同的添加比例进行淋滤试验。试验显示可选取“复合硫杆菌+ 6 m lm t 菌 作为本试验条件下的最佳接种量。在最佳底物、最佳接种量的前提下， m t 菌一复合硫杆菌联合淋滤对不同的重金属元素生物淋滤的提高是有差 异的。总体而言，大多数元素的淋滤去除率有提高，淋滤后期更加平稳， 波动现象减弱，表明在m t 菌的参与下，t t 菌与t f 菌更加稳定地发挥出 了其淋滤功能。另一方面，t t 菌与t f 菌的酸化效应又反过来促进了m t 菌的活性及其对重金属的络合效果。 ( 4 ) 在m t 基因工程菌参与淋滤的前提下，通过对不同底物单质硫 与f e s 0 4 7 h 2 0 的配比条件下各种重金属的去除效果进行研究，发现硫与 f e 2 + 配比适当时，能够有效提高淋滤效果。有效促进了难淋滤重金属的浸 出，实现了硫底物的节约。通过底物配比对s 0 4 2 - 的影响规律研究，发现 当底物配比中s o 占优势时，可促进s 0 4 2 的生成，但m s 转化成s 0 4 2 的速 率受限制。在t i t 和t f 混合菌液采用固定体积比的前提下，对每种重金属 受m t 菌接种量的影响情况进行了研究。发现m t 菌对重金属淋滤的促进 作用主要体现在淋滤的初期与中期，尤其是c u 、n i 、c r 、p b 在初期提高 效果明显。对于z n 、c d ，5 接种组较好。 ( 5 ) 本文提出以“重金属负荷率 作为衡量单位质量硫杆菌以及复 合菌、联合菌所承受的重金属离子负荷情况的新指标。试验表明，适宜的 负荷率条件下生物淋滤不会受影响，试验所获得的去除率比未接种m t 菌 时同等负荷率时的去除率有显著提高。若以实现达标，而且淋滤时间不超 太原理j ：人学 尊士研究生学位论文 过4 d 为衡量依据，c u 、n i 、z n 、c d 、c r 、p b 满足要求的重金属负荷率 最大为：0 2 2 1 、o 0 51 、0 4 0 7 、0 0 1 0 、0 12 8 、0 1 2 7 m g m g 。负荷率过高， 淋滤会受抑制，主要表现为迟滞期变长。 ( 6 ) 通过对m t 基因工程菌形成的大分子e p s ( m t ) 与f e ”结合成的e p s - - f e 3 + 络合体对生物淋滤的促进作用进行研究。结果表明，大分子e p s ( m t ) 与f e 3 + 结合能力较强。添加e p s ( m t l - f e 3 + 络合体后，f e 3 + 发挥出了促进氧化 的能力，c r 、p b 的去除率分别提高了1 4 8 、1 2 5 倍。而且这种促进作用 是持久的，可以长时问促进f e 3 + 维持可溶状态。 ( 7 ) 通过对c u 、n i 、z n 、c d 在e p s 及细胞内外的分布特征进行研 究，提出了针对重金属离子在细胞内外分布特征的简易判定标准。通过对 m t 基因工程菌代谢水溶性有机碳( d o c ) 的研究，表明m t 菌可以利用 污泥中原有的营养进行增殖，降解d o c ，消除了部分硫杆菌生长的抑制 因素。 ( 8 ) 通过对m t 基因工程菌联合淋滤中重金属形态转化的机理进行 研究。提出了依据污泥化学形态对原始污泥的分类方法。对c u 、c d 、n i 、 z n 、c r 、p b 六种重金属元素的生物淋滤机制进行了区别归类。研究表明 c u 、n i 、c d 的生物淋滤过程是以直接机制为主的，z n 的生物淋滤过程是 以间接机制为主的，c r 、p b 的生物淋滤过程属于混合机制。在机理分析 中，初步明确了淋滤机制与原始污泥类型、淋滤中的主导菌群的对应关系， 扩展了混合淋滤机制的内涵。 关键词：污泥，重金属，生物淋滤，基因工程菌，复合硫杆菌 i v 太原理j ：人学博士研究生学位论文 t h ej o i n t b i o l e a c h i n gb yc o m p o u n d t h i o b a c i l l ia n dm tg e n e t i cb a c t e i u ao fh e a 、厂y m e t a l si ns l u d g e a b s t r a c t s l u d g e a r et h es o l i dc o n t e n tw h i c hs e t t l e d d u r i n g t h ew a s t e w a t e r t r e a t m e n tp r o c e s s ，o rt h ew a t e rm o v e m e n tp r o c e s s i nt h i sp a p e r , t h es l u d g e m a i n l yr e f e r st ot h es l u d g ew i t hc o n c e n t r a t i n ga n dd e w a t e r i n gi nt h es e w a g e t r e a t m e n tp l a n t t h i sk i n do fs l u d g ei st h ei m p o r t a n te n v i r o n m e n t a lp o l l u t a n t s ， i th a st h ec o m p l e xp r o p e r t i e s ，l a r g ev o l u m e ，a n di t st o x i c i t yi sp r o l o n g e d t h et r e a t m e n to fh e a v ym e t a l si ns l u d g ei st h ei m p o r t a n ts u b j e c to ft h e e n v i r o n m e n t a lp o l l u t i o nc o n t r a lf i e l d s e s p e c i a l l yf o rt h ei n c r e a s i n g l ys e r i o u s e n v i r o n m e n t a ls a f e t yp r o b l e m so fc h i n a t h et e c h n o l o g i e so ft h et r e a t m e n tf o r h e a v ym e t a l si ns l u d g ei san i c et o p i cw h i c hh a ss t r o n gv i t a l i t y t h ea g r i c u l t u r a ld i s p o s a lo fs l u d g ei sa ni m p o r t a n tr o u t ef o rt h er e s o u r c e u t i l i z a t i o no fs l u d g ei no u ra g r i c u l t u r a lc o u n t r y b u t ，t h ee n v i r o n m e n t a lr i s ko f h e a v ym e t a l si ns l u d g ei st h eb o t t l e n e c ko ft h ea g r i c u l t u r a ld i s p o s a l t h eh e a v y m e t a l sc a nn o tb ee f f i c i e n t l ye l i m i n a t e df r o m s l u d g eb y t h et r a d i t i o n a l e c h n o l o g i e ss u c ha st h ed i g e s t i o n ，c o n c e n t r a t i o n ，d e w a t e r i n gf o rs e w a g es l u d g e i nr e c e n ty e a r s ，t h en e w p r o c e s se x p l o i t e df o rh e a v ym e t a l sa r eb e s e tb ym a n y s e r i o u sp r o b l e ms u c ha s h i g hc o s t ，s e v e r ec o n d i t i o n s ，l o wr e m o v a lr a t e s ， a s s o c i a t e ds e c o n d a r yt o x i c a n t ，p o t e n t i a ls a f e t yh a z a r d t h eb i o l o g i c a lp r o c e s sh a sr e c e i v e dc o n s i d e r a b l ea t t e n t i o na so n eo ft h e m o s tp o t e n t i a la d v a n c e dt e c h n o l o g i e sf o re n v i r o n m e n t a le n g i n e e r i n gf i e l d t h e v 塑! ! 叁堂壁婴壅竺堂垡笙窒 a p p l i c a t i o no fb i o l o g i c a lp r o c e s si nh e a v ym e t a lp r o c e s s i n gm a i n l vi n c l u d e b l o i e a c h i n g ，p l a n t e x t r a c t p r o c e s se t c a m o n gt h e s e b i o l o g i c a lp r o c e s s b l o l e a c h i n gh a sm a n ye x c e l l e n tf e a t u r e ss u c ha se x t e n s i v ea d a p t a b i l i t y , h i g h r e m o v a lr a t e s ，s i m p l eo p e r m i o nc o n d i t i o n s ，l o wc o s t b i o a d d i t i v e ，a n dt h e 陀a c t l o nc o n d i t i o n sa r e m i l d ，l o wa c i dc o n s u m p t i o n a b o v e a l l ，b i o l o g i c a l p r o c e s sc a nb es y n c h r o n i z a t i o na c t u a l i z ew i t ht h eo r i g i n a ld i g e s t i o n p r o c e s si n t h e8 e w a g et r e a t m e n tp l a n t o nt h eo t h e r h a n d ，w h i c hc a nr e p l a c ep a r to ft h e f u n c t i o n so ft h ed i g e s t i o np r o c e s s f u r t h e r , i tc a nu s et h ep r i m a r y b u i l d i n g so r s t r u c t u r e so ft h es e w a g et r e a t m e n t p l a n t ，w h i c hr e s u l ti ns m a l l e rc o n s t 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i a l l yi nt h eb i o l e a c h i n g m e c h a n i s mo fc d 、n i 、c r 、p b i nt e r m so f t h em i c r o o r g a n i s m c o m m u n i t ys o r t ， m a i n l yc o n c e n t r a t eo nas i n g l et h i o b a c i l l i ，t h e yh a dn o td o n em u c hw o r ko n c o m p o u n d - b i o l e a c h i n go fm u l t i c h e m o a u t o t r o p h f u r t h e r m o r e ，t h er e s e a r c h a b o u tt h ej o i n t b i o l e a c h i n gb yh e t e r o t r o p h i cb a c t e r i aa n dc h e m o a u t o t r o p ha r e v e r yf e w b a s e do r lt h es t u d ya b o u tt h es l u d g e b i o l e a c h i n gb yd i n to fc o m p o u n dt h i o b a c i l l i b a c t e r i a ，t h i sp a p e rt o o kan e wi d e ao fj o i n t b i o l e a c h i n gb yh e t e r o t r o p h i cb a c t e r i aa n d c h e m o a u t o t r o p h i nv i r t u eo fa c i d - p r o o fm e t a l l o t h i o n e i ng e n e t i ce n g i n e e r i n gb a c t e r i a ( m t g e n e t i ce n g i n e e r i n gb a c t e r i a ) ，p r o m o 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