（食品科学专业论文）大米蛋白制备及中试的研究.pdf

摘要 大米蛋白是一种营养价值很高的蛋白质，其必需氨基酸构成完整，且具有低 过敏性，适合做婴儿配方食品。本文对大米蛋白的提取：i = 艺进行了研究，确定了 最适工艺流程，并研究了它的中试。 大米蛋白中有8 0 以上是碱溶性谷蛋白，采厢碱法具有提取率高、成本低 的优点。本试验研究得到碱法提取大米蛋白的最佳工艺条件：n a o l l 的浓度为 0 0 9 m o l l ，提取时间为4 h ，提取温度为室温，料液比为1 ：7 。在此工艺条件下， 大米蛋白的提取率为9 0 1 0 ，纯度为8 0 1 6 。 酶法提取大米蛋白的最大优点在于降低了碱法提取时的料液比，并且其反应 条件温和，不会引起营养物质的破坏。 确定了大米蛋白的淀粉酶法最佳提取工艺为：采用n 一淀粉酶5j l g 大米量 水解淀粉，料液比为1 ：3 ，米粉细度为8 0 目，提取p i t = 7 0 ，提取蒸汽压力0 6 m p a ， 提取温度9 0 ，保温时间为3 5 分钟，糖化时f j8 小时。 在此工艺条件下，大米蛋白的提取率为7 8 9 5 ，纯度为7 5 2 6 。 对得到的大米蛋白迸一步纯化，酶法脱脂的最佳工艺条件为：过胶体磨和均质机 ( 2 0 m p a ) ：单一脂肪酶；0 2 j n 酶量；料液比1 ：3 ：反应时间8 小时。脱色最 佳工艺条件：温度5 0 ，时间1 小时，双氧水浓度6 。 通过旋流分离除砂，灰分酶低了4 5 ，采用纤维素酶和脂肪酶复合水解纤 维素和脂肪，脂肪含量降低了4 8 7 ，大米蛋白的提取率为7 0 ，纯度为8 7 5 ， 提高了1 6 2 6 。采用双氧水处理后的大米蛋白的白度提高了3 3 。 大米蛋白特别是大米分离蛋白的研究和开发，在国内属于开创性的研究课 题。目前已经完成了碱法和酶法提取大米蛋自的工艺参数的确定和优化：建立了 国内第一条中试生产线，完成了大米蛋白提取工艺的中试放大：得到了8 0 浓度 的大米浓缩蛋白和9 2 2 的大米分离蛋白产品。本研究制取的大米蛋白纯度高， 脂肪低( 1 ) ，氨基酸组成合理。通过酶法和物理法结合得到大米蛋白，其工 艺具有国际先进性。 关键词：大米蛋白碱法酶法大米浓缩蛋白大米分离蛋白 a b s t r a c t r i c ep r o t e i ni sak i n do fh i g hr m t r i t i o u sv e g e t a b l ep r o t e i n i t s e s s e n t i a la m i n oa c t dc o m p o s i t i o n sa r eb a l a n c e d t h et h e s i ss t u d i e dt h e t e c h n o l o g yo fe x t r a c t i o na n dp il o tm a n u f a c t u r i n go fr i c ep r o t e i n t h e r ei sn e a r l y8 0p e r c e n tg l u t a m i n ei nr i c ep r o t e i n ，w m c hi ss o l u b l e i na l k a l i t h er e s u l t ss h o w e dt h a tt h eo p ti m u mc o n d i t i o n so fe x t r a c t i o n w e r ea sf o l l o w s ：0 0 9 m o l ln a o h ，e x t r a c t i n gt i m ewas4 o u r s ，s e v e nt i m e s n a o hs 0 1v e n ta tr o o mt e m p e r a t u r e t h ec o n c e n t i a t i o no fr i c ep r o t e i ni n t h ep r o d u c t i o ni s8 0 1 6p e r c e n t ，w it ht h er e c o v e r yr a t e9 0 1 0p e r c e n t t h ea d v a n t a g eb ye n z y m ei sal o ws o l v e n t m a t e r i a lr a t i oa n dm o d e r a t e r e a c t i o n s ot h en u t r i t i o ni sn o td e s t r o y e d t h er e s u t ss h o w e dt h a tt h e c o n t e n to fr i c ep r o t e i nw a s7 5 2 6p e r c e n t ，w i t ht h er e c o v e r yr a t e7 8 9 5 p e r c e n t t h eo p t i m u mc o n d i t i o nw a s1 i k et h i s ：a m y l a s ee n z y m e5 u g ，p h = 7 0 a t9 0 0 6 m p af o r3 5m i n u t e s ，m a t e r i a l s o l v e n t1 ：3 ，t h e na b o u t8h o u r s a c t i o nw i t hb e t a - a m y l a s ee n z y m ea n dg l u c o s ee n z y m e w ep u r i f i e dt h er i c ep r o t e i n ( r p ) b ye n z y m em e t h o dd e f a t ，h y d r o g e n p e r o x i d ed i s c o l o r e da n dr e m o v e dw a t e rd e m a n d i n g t h eo p t i m u mc o n d i t i o n w a s1 i k et h i s ：p a s s e dt h r o u g hc o l l o i dm i l la n dh o m o g e n i z e r ( 2 0 l j i p a ) ，o n l y 1 i p a s e0 2p e r c e n t ，m a t e r i a l s o l v e n ti ：3 ，f o r8h o u r sa c t i o n ，t h e n d i s c o l o r e dw i t hh y d r o g e np e r o x i d e6p e r c e n ta t5 0 f o ro n eh o u r t h ec o n t e n to fa s hc o u l db ed e c r e a s e dt o4 5p e r c e n tb yr o w i n g i s o l a t i o n t h ec o n t e n to ff a tc o u l db ed e c r e a s e dt o4 8 7p e r c e n tb y c e l l u l o s ea n d1 i p a s e t h ec o n t e n to fp r o t e i ni nt h er i c ep r o t e i n p r o d u c t i o nw a s8 7 5p e r c e n t ，r o s e1 6 2 6p e r c e n t ，r e c o v e r yw a s7 0p e r c e n t t h ew h it e o fp r o t e i nr o s e3 3p e r c e n t t h es t u d ya n dd e v e l o p m e n to fr i c ep r o t e i n ( r p ) ，i np a r t i c u l a rr i c e p r o t e i ni s o l a t e ( r p i ) w a sf i r s ti no u rc o u n t r y w eh a ds t u d i e dt h eo p t i m u m c o n d i t i o np a r a m e t e r so ft h ee x t r a c t i o no fr i c ep r o t e i nc o n c e n t r a t e ( r p o b ya l k a l ia n db ye n z y m e w eb u i l tt h ef i r s tp i l o tp r o d u c t i o nl i n eo fr i c e p r o t e i ni no u rc o u n t r ya n dg e t8 0p e r c e n to f r p ca n d9 2 2p e r c e n to f r p i t h er p ih a dh i g hp u r i t y ，l o wf a t ( 1 6 ，适合于婴儿) 的制备工艺，其m n ，a l ，植酸含量较低( 薹5 0 m u g g p r o ， b d ，较优的工艺条件为c a ：b 。d 。，即时间4 小时，n a o h 浓度为0 0 9 m o l l ，料液 比为l ：7 ，与单因素结果基本一致，因此可确定为最佳工艺条件。根据确定的最佳工 艺条件对大米蛋白和大米淀粉进行分离，测得蛋白提取率为9 0 1 0 ，浓缩大米蛋白 纯度为8 0 1 6 9 0 。 2 4 6 大米蛋白理化指标 表2 - 3 大米蛋白理化指标 t a b l e 2 3t h ep h y s i c a la n dc h e m i c a li n d e xo f r p 2 5 本章小结 根据对大米蛋白碱法提取工艺的研究，得到以下结论： 1 时间与碱液浓度对提取率有显著影响，其次是料液比，提取温度影响不大； 2 碱法提取浓缩大米蛋白的最佳工艺条件为：n a o h 浓度0 0 9 m o l l ，提取f 寸问 为4 h ，提取温度为室温，料液比为l ：7 。 第三章大米蛋白酶法提取工艺的研究 3 1 前言 采用酶法提取蛋白质条件温和，蛋白质多肽链可水解为短肽链，提高蛋白质的 消化率，同时其反应的液固比小，不仅节省了碱和水的消耗量而且提高了提取液中 固形物的含量，从而降低了除去提取液水分的能量消耗，同时各种新型工业分离技 术应用也为工业生产创造了条件，有利于工业化生产及蛋白质的利用“”，但其成 奉较高。研究采用淀粉酶法分解大米淀粉，分离后的蛋白精制后制得大米浓缩蛋自 和分离蛋白。 3 2 材料、试剂与设备 大米和碎米( 早籼米，水分13 5 0 ，蛋白质8 18 ，淀粉7 5 6 5 ，脂肪1 2 4 ) 湖南金健米业股份有限公司提供 c e l l u l a s e ( 1 5 ，0 0 0 u g ) v i s c o z y m el ( 1 2 0f e b m 1 ) p a l a t a s e ( 1 5 a u g ) a l c a l a s e2 4 l ( 2 4 a u g ) f a v o u r z y m e ( 5 0 0 l a p u g ) n e u t r a s e ( o 5 a o g ) ， p r o t a m e x ( 1 5 u g ) 超级恒温水浴c s 5 0 1 电动搅拌机( j b 一5 0 d 型) 精密p h 计( p h s 一3 c ) l x j i i 离心沉淀机 紫外可见分光光度计( u v l l 0 0 型) 喷雾干燥器( q z r - - 5 ) h 8 3 5 - - 5 0 型氨基酸自动分析仪 胶体磨 重庆试验设备厂 上海标本模型厂 上海雷磁仪器厂 上海医用分析仪器厂 北京瑞利分析仪器公司 无锡市林洲喷雾干燥器厂 日本日立公司 上海申鹿 供 强 别 澜 础 硷 衔 珊 彬 珂 雠 啪 均质机 沸腾床二 二燥机 旋流除砂器 3 3 试验方法 3 3 1 测定方法 上海申鹿 常熟市一步干燥设备j 威海海王公司 蛋白质含量：微量凯氏定氮法，参照g b 5 0 0 9 5 - 8 5 ，米蛋白氮转换因子为5 9 5 。 总糖含量：苯酚一硫酸法。 脂肪含量：索氏抽提法。 灰分含量：高温灼烧法( 4 5 0 5 0 0 c ) 。 水分含量：恒重法( 1 0 5 ) 。 淀粉含量：按g b5 0 0 9 9 食品中淀粉含量的测定方法。 金属元素含量：按g b8 6 9 中金属元素的测定方法。 可溶性糖含量：参照g b5 0 0 9 7 食品中还原糖的测定方法。 粗纤维含量：按g b5 0 0 9 1 0 食品中粗纤维的测定方法。 大米蛋白的提取率的计算方法为：大米蛋白粗品的重量，大米中蛋白质的含量* 1 0 0 3 3 2 淀粉酶法提取大米蛋白工艺流程： 淀粉糖一酒精、味精 f 原料( 早籼米，碎米) 一清洗浸泡一磨浆一液化、糖化一分离一大米蛋白粗品 3 3 3 淀粉酶提取大米蛋白的试验方法 称取1 0 0 0 克早籼米，于不锈钢锅中加适量水电动搅拌2 小时，用胶体磨磨浆至 8 0 目，浆浓度达3 0 3 5 ，调节p h 为6 3 - 6 5 ，将5 0 0 0 u 耐高温的a 一淀粉酶液喷射至 淀粉乳中，通入压力为0 4 - 0 6 m p a 蒸汽均匀受热，粘度迅速下降，料液温度在短时 间内升至9 0 c 左右，引入后熟器保温3 0 4 0 分钟，提取时间约8 小时，至液化完全， 升温至1 0 0 - 1 0 2 ，灭酶5 分钟，离心分离得到大米蛋白。用微量凯氏定氮法测蛋白 质含量计算提取率。 3 4 结果与讨论 3 4 1p h 对淀粉酶提取大米蛋白提取率的影响 分别选取p h 为5 0 、5 5 、6 0 、6 4 、6 6 、6 8 、7 0 进行试验，结果如图3 - 1 。 1 6 】0 0 0 0 8 0 0 0 6 0 0 0 提取率4 0 0 0 2 0 0 0 0 0 0 9 6 ol234567 8 p h 图3 1p h 对淀粉酶提取大米蛋白提取率的影响 g h a r t 3 一lt h ea c t i o no fe x t r a c t i o nr a t i oo f r pw i t hp h 注：时间6 小时，蒸汽压力0 6 m p a ，料液比l ：3 试验结果表明，在p h = 7 以下淀粉酶提取大米蛋白提取率随p h 值升高而增加， p h = 5 0 时，大米蛋自提取率为4 5 5 0 ，至p h 6 ，4 时升高趋势趋于平缓，大米蛋白提 取率为7 5 11 ，p h = 6 8 时大米蛋白提取率为7 8 5 3 ，p h = 7 时，大米蛋白提取率 为7 9 3 7 。中性条件下更适合提取大米蛋白。 3 4 2 时间对淀粉酶提取大米蛋白提取率的影响 分别选择提取时间为2 h 、4 h 、6 h 、8 h 、l o h 、1 2 h 进行试验，结果如图3 - 2 。 2 h 后，大米蛋白的提取率为4 6 5 1 ，随提取时间的延长，淀粉酶提取大米蛋白的提 取率升高，8 小时后大米蛋白的提取率为7 5 0 1 ，此后渐渐平缓，1 2 h 后大米蛋白 的提取率为7 9 2 3 ，8 小时为较好的提取时问，时间久后效率低，成本高，不适于工 业化生产。 提取率 1 0 0 5 0 o 2 h4 h6 h 8 hl o h1 2 h 时间 图3 2 时间对淀粉酶提取大米蛋白提取率的影响 g h a r z 3 2 ：h ea c z i o no fe x t r a c ：i o nr a t i oc ：r p 霄i ：nt i m e 1 7 注：p h 为6 0 ，蒸汽压力0 6 m p a ，料液比1 ：3 3 4 3 压力对淀粉酶提取大米蛋白提取率的影响 分别选择提取蒸汽压力为0 2 、0 4 、0 6 、0 8 、1 0 、1 2m p a 进行试验，结 果如图3 3 。蒸汽压力为0 2 m p a 时，大米蛋白的提取率为4 7 1 9 ，0 6m p a 时，大 米蛋白的提取率为7 5 1 7 ，随压力的增大，大米蛋白的提取率提高，至0 6 m p a 时增 幅不明显，压力为1 2 m p a 时，大米蛋白的提取率为7 9 9 0 。 1 0 0 o o 8 0 o o 6 0 0 0 提取率4 0 0 0 2 0 o o 0 0 0 0 2 m p a0 4 m p a0 6 m p a0 8 m p al - o m p a1 2 m p a 压力 图3 - 3 压力对淀粉酶提取大米蛋白提取率的影响 g h a r t 3 3t h ea c t i o no fe x t r a c t i o nr a t i oo f r pw i t hp r e s s u r e 注：p h 为6 0 ，时问6 小时，料液比1 ：3 3 4 4 料液 e 对淀粉酶提取大米蛋白提取率的影响 分别选取l ：l 、1 ：2 、1 ：3 、1 ：4 、1 ：5 、l ：6 的料液比进行试验，结果如图 3 4 。 1 0 0 8 0 提取铷o 4 0 2 0 0 1 ：11 ：2l ：31 ：4 。1 ：5l ：6 料液比 图3 - 4 料液比对淀粉酶提取大米蛋白提取率的影响 g h a r t 3 4t h ea c t i o no fe x t r a c t i o i lr a t i oo fu pw i t hm a t e r i a l s o l v e n tr a t i o 注：p h 为6 0 ，时间6 小时，蒸汽压力0 6 m p a 料液比为l ：l 时，淀粉酶提取大米蛋白的提取率为4 4 0 1 9 6 ，料液比为l ：2 时， 大米蛋白的提取率为6 2 0 2 ，料液比为l ：3 时，大米蛋白的提取率为7 5 0 3 ，随料 液比增大，大米蛋白的提取率提高，料液比至1 ：3 后增长率不明显，料液比为h 6 时。大米蛋白的提取率为7 8 9 8 ，料液比为l ：3 时更适于工业化生产。 3 4 5 正交试验方案、结果和极差分析 根据以上单因素试验结果，采用b ( 3 4 ) 正交表进行正交试验，试验的条件及 结果如表3 1 所示。 表3 1 正交试验的方案、结果t 和极差分析 t a b l e3 - l t h es c h e m e ，r e s u i to fo r t h o g o n a lt e s ta n dt h ea s s a yo fm a x d i s t i n c t i o no fr p 1 9 对正交试验的结果进行极差分析，结果见表3 1 。根据极差大小决定因素分析： 对蛋白质提取率影响因素由大到小依次是：d c a b ，对大米蛋白质含量影响因 素由大到小依次是：c a d b 。相比之下，料液比对提取率影响最大，其次是压 力和p h 值，时问影响也最小；而对大米蛋白质含量影响最大的是压力，其次是p h 值和料液比，时间影响也最小。较优的工艺条件为c ，h ，d ，b 。，即蒸汽压力0 6 m p a ， 料液比为1 ：3 ，p h = 7 0 ，时间8 小时。该结果与单因素所得结论基本一致，大米蛋白 提取率最高，大米蛋白质的含量也最高，可以最大程度降低生产营运成本，满足工业 化生产的需要，因此可确定为最佳工艺条件，根据确定的最佳工艺条件对大米蛋白 和大米淀粉进行分离，测得蛋白提取率为7 8 9 5 ，浓缩大米蛋白纯度为7 5 2 6 。 3 5 酶法与碱法提取大米蛋白的比较 3 5 1 酶法与碱法提取大米蛋白工艺的比较 1 、酶法可大大降低提取时所消耗的碱和水的量； 2 、酶法提取可以降低总糖分的损失率，主要是由于酶作用专一性的特点； 3 、碱法提取物中的蛋白浓度低，但其可通过等电沉淀法回收，回收率很高，淀 粉中残余的蛋白很低，保证了淀粉的质量。酶法抽提所获得溶液中固形物含量高， 但回收处理较为困难，用等电沉淀法回收蛋白质的回收率很低，用真空浓缩又要消 耗很多的能量。有研究者采用超滤这种新型的分离技术，效果不错，但是部分小肽 将被损失，影响了回收率。综上所述，碱法与酶法各有优缺点，采用何种方法提取 蛋白要随蛋白的最终应用目的而转移。 2 0 表3 3 酶法与碱法提取大米蛋白的比较 t a b l e3 - 3t h ec o m p a r is o no f r pb ye n z y m ea n db ya l k a l i 碱法酶法 方法简单，但在极碱的条件下料液比 较高，碱水消耗大 淀粉提取率高 提取液固形物浓度低 蛋白质回收可以利用等电沉淀法( p i p ) ， 回收率高 酶反应控制复杂，但作用条件温和料液 比小 淀粉提取率低 提取液固形物浓度高 p i p 法回收蛋白收率很低，可以采用超滤 或板框压滤等方法，但仍有部分损失 3 5 2 酶法与碱法所获大米蛋白粗品的比较 表3 4 酶法与碱法所获大米蛋白粗品的比较 t a b l e3 - 4 t h ec o m p a r i s o no f r pp r o d u c t sb ye n z y m ea n db ya l k a l i 由上表可以看出，未经纯化的酶提干基租蛋白与碱提干基粗蛋白比较，后者蛋 白质含量高4 9 。白度商2 6 7 1 ，粗脂肪低4 6 3 ，灰分高3 7 6 。 3 5 3 大米蛋白商品的指标 表3 5 大米蛋白商品的成分指标 t a b l e3 - 5t h ei n g r e d i e n to f r p 注：所述指标来自h a b i ba r k a d yl i m i t e d 由以上指标可以看出，试验中获得蛋白制品指标超过大米蛋白的商品。 3 6 本章小结 本章对大米蛋白的酶法最佳提取条件进行了研究，得到以下结论： 1 、酶法提取蛋白的最大优点在于降低了碱法提取时的液固比，并且其反应条 件温和，不会引起营养物质的破坏，同时各种新型工业分离技术的应用使工业化生 产大米蛋白成为可能。 2 、确定了大米蛋白的淀粉酶法最佳提取工艺为：采用a 一淀粉酶5 l i g 大米量 水解淀粉，料液比l ：3 ，提取蒸汽压力0 6 m p a ，提取p h = 7 0 ，提取温度9 0 c ，保温 时间为3 5 分钟，提取时间为8 小时。 3 、比较了碱法和酶法提取工艺的不同，以及获得蛋白粗品的成分指标各有优缺点， 采用何种工艺要以大米蛋白的最终应用目的为转移，从蛋白制品的成分分析看，碱 法所提蛋白制品的纯度比酶法要高，试验中蛋白制品指标高于大米蛋白商品指标。 第四章大米蛋白纯化的研究 4 1 前言 酶提大米蛋白含有杂质、纤维、油脂等，纯度较低，另外颜色比较深，故需进 一步纯化。 4 2 材料、试剂与设备 酶提大米蛋白自制 淀粉酶诺维信公司 脂肪酶诺维信公司 纤维素酶 诺维信公司 双氧水市售 超级恒温水浴c s 5 0 1重庆试验设各厂 电动搅拌机( j b - 5 0 d 型)上海标本模型厂 精密p h 计( p h s 一3 c )上海雷磁仪器厂 l x j _ i i 离心沉淀机 上海医用分析仪器厂 紫外可见分光光度计( u v l l 0 0 型)北京瑞利分析仪器公司 喷雾干燥器( q z r - - 5 )无锡市林洲喷雾干燥器厂 h 8 3 5 - 5 0 型氨基酸自动分析仪日本日立公司 胶体磨上海申鹿 均质机上海申鹿 旋流除砂器威海海王公司 1 t a 2 2 1 - 4 0 - 1 2 超临界流体萃取装置 4 3 试验方法 4 3 1 大米蛋白纯化的工艺流程 酶提大米蛋白一除杂一脱色一脱脂一气流干燥一超细粉碎一大米蛋白 4 3 2 水洗除残糖、旋流除砂 用大米蛋白重量3 倍的水洗涤一次：经过一系列的调试，选定旋流器除砂的最 佳参数为4 5 6 锥角，0 1m p a 压力，2 5 咖沉砂嘴。 4 3 3 脱色方法 原料5 0 克，料液比1 ：8 ，在不同温度，不同时问，不同双氧水浓度下进行 系列脱色试验。i 0 0 0 毫升水洗涤抽滤3 次，5 0 c 烘干，过6 0 目筛，测白度。 4 ，3 4 脱脂方法 4 3 。4 1 酶法试验操作工艺流程 完成除砂的大米蛋白一加生物酶处理( 纤维素酶，脂肪分解酶) 一胶体磨、均 质机( 加入蔗糖酯或单甘酯乳化) 一碟片式分离机分离一去脂蛋白 i 油脂等液态物质 大米蛋白5 0 克，脂肪酶，加酶量：0 1 ，料液比：1 ：5 ，9 0 ，p h 7 ，时间： 2 小时 4 3 4 2 溶剂法 完成除砂的大米蛋白一加入溶剂抽提( 6 号溶剂或乙醚) 一去脂蛋白 大米蛋白：5 0 克6 号溶剂：4 0 0 毫升 测得所提取的脂肪粗重以及最终所得样品自度和蛋白质含量。 4 3 4 3 超临界萃取法 大米蛋白：5 0 克，采用c o ：超临界萃取法 4 4 结果与讨论 4 4 t 旋流除砂 大米蛋白粳品分别选取一级除砂和二二级除砂，结果见表4 一l 。由表4 1 可以看 出通过二级除砂，除砂率可达9 8 1 8 ，比一级除砂可提高12 04 ，灰分可降低 0 1 4 ，一级除砂后水分可降低4 5 9 ，经过一级除砂后蛋白质可提高14 6 4 ， 采用二级除砂效果好，大米蛋白纯度可提高14 68 。 表4 - i 除砂后大米蛋白的成分分析 t a b l e4 - 1a s s a yt h ei n g r e d i e n to f r pa f t e rr e m o v i n gw a t e rd e s a n d i n g 4 4 2 酶法脱脂 4 4 2 1 不同处理方式对脱脂效果的影响 分别采用过胶体磨、过均质机( 2 0 i p a ) + 胶体磨，过均质机( 4 0 m p a ) + 胶体 磨三种方式处理大米蛋白粗品，结果如表4 - 2 。通过胶体磨和均质机( 2 0 m p a ) 处 理后的效果好，大米蛋白质的纯度可大大提高，比不处理提高14 ，脂肪含量略 有下降，可降低0 59 0 39 。可能是由于通过胶体磨和均质机处理后颗粒 更细，分子结构排列更松散导致淀粉酶的作用面积更大，提取效果更佳。 表4 2 不同处理方式对脱脂效果的影响 t a b l e4 - 2 t h ea c t i o no fm a n n e rt od e f a t 4 4 2 2 时间对大米蛋白提取及酶解脱脂效果的影响 分别选取2 h 、4 h 、6 h 、8 h 、1 0h 、1 2h 对大米蛋白粗品进行脱脂，结果如图 4 - 1 所示。 酉分比 图4 - 1 时间对酶解脱脂效果的影响 c h a r t 4 1t h ea c t i o no fd e f a tr a t i 0o f r pw i t ht i m e 过胶体磨1 2 m i n ，加酶量 1 0 ，料液比：l ：5 ，9 0 。c ，p h = 7 从上图可以看出时间越长，蛋白质含量越高，脱脂效果越好，2 小时后大米蛋 白含量为8 1 9 1 ，脱脂肪8 4 3 6 ，6 小时后大米蛋白含量达到8 8 9 7 ，脱脂肪 9 2 5 7 ，8 小时后大米蛋白含量达到9 0 1 2 ，脱脂肪9 6 1 9 ，此后渐趋平缓，可见8 小时的脱脂时间比较合适。 4 4 2 3 不同种类的酶处理对酶解脱脂效果的影响 分别选取脂肪酶、纤维素酶+ 脂肪酶可以看出，大米蛋白粗品加脂肪酶后蛋白 质含量由原来的8 0 6 提高到8 1 4 9 6 ，脂肪含量则降低了2 7 7 ，大米蛋白粗品加纤 维索酶和脂肪酶后蛋白质含量由原来的8 0 6 提高到8 2 7 ，脂肪含量则降低了 2 7 9 ，可见加纤维索酶和脂肪酶尽管大米蛋白的纯度和脱脂量高一点，但并不经 济。加单一脂肪酶更经济合算。 表4 - 3 不同种类的酶处理对酶解脱脂效果的影响 t a b l e4 - 3t h ea c t i o no fd e f a tr a t i oo f r pw i t hs p e c i e s 过胶体磨1 2 m i n ，加酶量：1 o ，料液比：1 ：5 4 4 2 4 不同加酶量对酶解脱胎效果的影响 分别选取加酶量0 0 4 、0 0 8 、0 1 、0 2 、0 6 、1 0 对大米蛋白粗品脱脂处理， 结果如表4 4 所示。由该表可看出，月旨肪酶加酶量为0 0 4 时，大米蛋白纯度可达 到7 1 3 ，脱脂肪1 7 0 ，脂肪酶加酶量为0 2 时，大米蛋白纯度达到8 1 1 ，脱脂肪 3 3 9 ，而脂肪酶加酶量为1 o 时，火米蛋白纯度可达到8 3 9 ，脱脂肪2 7 7 ，由此 可见随加酶量的增加，大米蛋白纯度提高，脱脂量有所增加，但当脂肪酶加酶量为 0 2 后，这种效果已经开始不很明显，大米蛋白纯度差不多，脱脂量甚至于略有下 降，可见加酶量为0 2 是比较经济合算的。 表4 - 4 不同加酶量对酶解脱脂效果的影响 t a b l e4 4t h ea c t i o no fd e f a tr a t i oo f r pw i t hq u a n t i t i e so fe n z y m e 过胶体磨1 2 m i n ，脂肪酶，料液比：1 ：5 4 4 2 5 不同料液比对酶解脱脂效果的影响 分别选取料液比1 ：3 、1 ：5 、1 ：9 对大米蛋白粗品脱脂处理，结果如表4 - 5 所示。 料液比越小，大米蛋白含量越高，脂肪含量越低。料液比为1 ：3 时大米蛋白为 7 9 3 ，脂肪含量为4 0 4 ，料液比1 ：9 时大米蛋白为83 4 ，脂肪含量为2 3 8 。 但料液比越小，水耗越多，成本高，工业化生产不合算，料液比为1 ：3 时，水量 小，更适于工业化生产。 表4 5 不同料液比对酶解脱脂效果的影响 t a b l e4 - 5 t h ea c t i o no fd e f a tr a t i oo f r pw i t hm a t e r i m s o l v e n tr a t i 0 综上所述，选取最佳酶解脱脂参数为：过胶体磨和均质机( 2 0 m p a ) ：单一脂肪 酶：0 2 加酶量；料