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文档简介
检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质,1.实验原理,斐林试剂,苏丹,橘黄色,红色,砖红色沉淀,紫色,苏丹,双缩脲试剂,鉴定物质,试剂,实验现象,还原性糖,脂肪,蛋白质,淀粉,碘,蓝色,必修1第1819页,生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,实验原理,斐林试剂与双缩脲试剂的配制及使用,新配制的Cu(OH)2溶液,在碱性环境下的Cu2+,NaOH浓度为0.1g/mLCuS04浓度为0.05g/mL,NaOH浓度为0.1g/mLCuS04浓度为0.01g/mL,先把NaOH溶液和CuSO4溶液等量混合,现用现配。,先加入Na0H1mL,然后再加CuS044滴,摇匀。(不能过量),水浴加热,不需要,方法步骤:1实验材料、仪器和试剂的选择2设计记录表格,记录预测结果3检测的方法步骤(1)还原糖的检测和观察;(2)脂肪的检测和观察;(3)蛋白质的检测和观察;,实验的材料的选择和处理有什么要求?,材料的选择,材料的处理,还原性糖的鉴定,脂肪的鉴定,含糖高,颜色为白色的植物组织,如苹果和梨,富含脂肪的种子,如花生,浸泡34小时,/,蛋白质的鉴定,富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清,黄豆需浸泡1-2天,鸡蛋清要先稀释,淀粉的鉴定,马铃薯,/,选材:含糖量较高的白色或近于白色的植物组织(排除色素对显色的干扰),苹果、梨最好。,实验流程(步骤),1.可溶性还原糖,制备组织样液:,制浆:去皮、切块、研磨,,过滤:(用单层纱布),取液:(mL),显色反应,mL组织样液,刚配制的斐林试剂mL,现象:,呈现蓝色,变成砖红色,(用前混匀),5065.C水浴加热2min,还原糖的检测和观察:,还原糖的检测结果,2.脂肪的鉴定,取材:花生种子(浸泡h),去皮,将子叶削成薄片,制片:,选取最薄的薄片移至载玻片中央,在薄片上滴加苏丹(或苏丹)染液23滴,染色min,滴加体积分数为50%的酒精溶液12滴,洗去浮色(多余的苏丹),吸去余液,滴1-2滴蒸馏水,盖上盖玻片,制成临时装片,显微观察:,先在低倍镜下找到已着色的薄片,后用高倍镜观察,现象:,有被染成橘黄色(或红色)的脂肪微粒,脂肪的检测结果,3.蛋白质的鉴定,选材与制备组织样液:,黄豆组织样液(或鸡蛋蛋清稀释液),黄豆浸泡去皮切片研磨过滤滤液,显色反应,mL组织样液,双缩脲试剂mL,现象:,无色,双缩脲试剂滴,紫色或紫红色,(创设碱性条件),(提供Cu2+),蛋白质的检测结果,2019/12/14,14,可编辑,4.淀粉的鉴定,取材:马铃薯匀浆,检测:,mL组织样液,碘液2滴,现象:,摇匀后变成蓝色,其中适合于鉴定可溶性还原糖的是,理由是梨的组织细胞,你打算用什么试剂鉴定?。小麦种子不如花生种子更适合用来鉴定脂肪,这是因为,你打算用什么试剂鉴定?.,例做生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验时,需要根据实验需要选择不同的实验材料。请根据下表所列各种材料回答问题:,梨,颜色为白色,并且糖含量较高,斐林试剂,脂肪含量不如花生高,也不容易做切片,用苏丹或苏丹试剂,小麦种子中糖类化合物含量很高,却不适合用来鉴定_,这是因为_。,适合于鉴定蛋白质的是,理由是,鉴定所用的试剂是。,蛋白质含量高,黄豆和蛋清,双缩脲试剂,淀粉,可溶性还原糖,淀粉是非还原糖且不溶于水,1、青苹果汁遇碘液显蓝色,熟苹果汁能与斐林试剂作用产生砖红色沉淀,下列结论中最合理的是()A青苹果汁中有淀粉,不含还原糖B熟苹果汁中含还原糖,没有淀粉C苹果转熟时,大量淀粉水解成还原糖D苹果转熟时单糖聚合成淀粉,C,例题,、安徽阜阳劣质奶粉事件震惊全国,引起世人注目。鉴定脱脂淡奶粉是否为伪劣产品,肯定不需要用到的化学试剂是()A.斐林试剂B.红墨水C.双缩脲试剂D.苏丹染液,B,例题,3(2005.广东)生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质三种有机物的鉴定实验中,以下操作错误的是()A、可溶性还原糖的鉴定,可用酒精灯直接加热产生砖红色沉淀B、只有脂肪的鉴定需要使用显微镜C、用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热D、使用斐林试剂和双缩脲试剂最好是现配现用,A,1.怎样配制斐林试剂?,用浓度为0.1g/mlNaOH(甲液)与等量的0.05g/mlCuSO4(乙液)混合均匀而成。,问题思考,2.为什么斐林试剂可检验还原糖的存在?,斐林试剂的本质是Cu(OH)2的悬浊液,还原糖把Cu(OH)2还原成Cu2O沉淀。,3.为什么要用新配制的试剂?,因为斐林试剂稳定性较差,要现配现用。,4.怎样使用双缩脲试剂?试比较斐林试剂和双缩脲试剂的异同。,向试管内注入组织样液,先注入双缩脲试剂A液1mL,再注入双缩脲试剂B液4滴。,知识结构,第二章组成细胞的分子网络构建,蛋白质的结构和功能,核酸的结构和功能,糖类的种类和作用,脂质的种类和作用,水和无
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