鸭大肠杆菌病病原分离与药敏实验.ppt

鸭大肠杆菌病病原分离鉴定与药敏试验,1,论文的结构和主要内容,第一部分实验背景第二部分实验方法第三部分实验结果第四部分结论,2,一、实验背景,近几年随着养殖业迅速发展和集约化程度的大大提高，大肠杆菌病流行势头愈加迅速。大肠杆菌病是在世界范围内影响养殖业发展的主要细菌病之一，常招致巨大的经济损失，有效防治大肠杆菌病一直是养殖业的一项重要课题。2013年10月泰州市海陵区某养殖户所饲养的肉鸭开始发病，用药治疗几天不见效果，户主立即携带病死鸭至xxxx动物医院进行诊疗，门诊初步诊断结果为鸭大肠杆菌病，还要通过实验室进一步确诊。,3,二、实验方法,2.1病料采集采集送检病死鸭，无菌取心脏和肝脏。2.2分离培养以无菌操作的方法，将采取的病料，分别接种在普通琼脂平板、麦康凯琼脂、伊红美兰琼脂培养基中37恒温箱培养。2.3镜检挑取光滑、砖红色的单个菌落涂片，革兰氏染色镜检，观察记录菌体形态和染色特征。2.4生化实验将各株细菌分别接种到用于鉴定的生化反应管中,4,二、实验方法,2.5致病性实验动物试验将分离菌接种于营养肉汤，于37恒温培养箱中培养24h。取健康小白鼠6只，分为A、B两组，A组3只，腹腔接种营养肉汤菌液，每只0.2mL；B组3只，腹腔接种等量的灭菌生理盐水作对照组，分别隔离饲养观察。2.6药物敏感试验将培养16-24h营养琼脂上的菌落接种于普通营养琼脂培养基表面涂布均匀，将接种的平板置室温下干燥3-5min后用无菌镊子取含各种药物的药纸片紧贴于琼脂表面，置35恒温箱内16-18h后，观察结果。,5,三、实验结果,麦康凯培养基菌落边缘整齐或波状，稍凸起，表面润滑直径1.5-2.0mm,呈粉红色或深红色。如图：伊红美蓝培养基菌落圆形，呈蓝紫色，中心为紫黑色，带金属光泽。如图：肉汤培养基菌落大，直径1.5-2.0mm，形成凸起光滑湿润，灰白色，半透明，边缘整齐并常有特殊的粪样臭味,3.1细菌的分离培养,6,三.实验结果,3.2形态学观察经镜检可见到革兰氏阴性菌，两端钝圆，有长约1.53.O微米的短小杆菌，偶有23个菌体相连，无芽孢。见图：,7,三.实验结果,3.3生化鉴定将分离到的菌株，经生化试验鉴定，分解葡萄糖、麦芽糖、甘露醇产酸产气不分解蔗糖,MR试验呈阳性，VP试验为阴性，吲哚试验阳性，硝酸盐试验阳性，枸橼酸盐试验阴性，硫化氰试验阴性。此结果符合大肠杆菌的特征，见表1：,8,三、实验结果,3.4致病性实验小白鼠试验结果：接种36h内A组小白鼠全部死亡，剖检可见肝肿大、表现出点状出血和灰白色坏死灶，脾脏瘀血，肺脏出血等明显病理变化，从死亡小白鼠的心、肝、脾等病料中均能回收到接种菌；B组小白鼠饲养1周后全部存活，剖检无病理变化。动物试验结果表明：此次分离出的细菌对小白鼠有较强的致病性,9,三.实验结果3.5药物敏感试验,10,四.结论,本试验从可疑病鸭分离到可疑菌经形态学及培养条件观察、生理生化实验分析鉴定，鉴定为鸭大肠杆菌的感染，经动物试验表明该分离菌株有较强的致病性。大肠杆菌病是一种常发病，但是却难于控制，这不仅因为其血清型多，各血清型间无交叉保护性，而且不同血清型对药物的敏感性不一致。不同地区的大肠杆菌对药物敏感性也各不一致。本次药敏试验结果表明分离菌对舒巴坦、阿奇霉素、头孢曲松、卡那霉素高度敏感，而对头孢吡肟、阿莫西林-棒酸、头孢氨苄、环丙沙星中度敏感，而对氧氟沙星、复方新诺明、链霉素、庆大霉素、氨苄西林、克林霉素、诺氟沙星、等药物表现为耐药性，对万古霉素，青霉素，四环素，红霉素，