（环境科学专业论文）气相色谱、高效液相色谱测定农药残留的研究与应用.pdf

臧利国：山东师范大学坝l 学位论史 摘要 随着农业生产的持续发展，化学农药在作物病虫害的综合防治中具有不可替 代的作用。化学农药使用后，受到阳光、微生物等的分解作用，农药逐渐降解。 但是，有一些性质较为稳定的有毒农药或者是有毒农药的代谢物通过生物富集和 食物链，在动植物体内，甚至在人体内积累，严重的甚至会危及生命，这就是人 们所提到的农药残毒问题。随着物质生活水平的提高，人们的身心健康越来越受 到重视，蔬菜、水果、肉类中农药残留量的问题越来越引起普遍关注，并对食品 中农药残留检测技术提出了更高的要求。农药残留量的分析是痕量农药分析，前 处理十分复杂，虽然准确度和精密度要求不是很高，回收率在1 0 0 2 0 之内 即可，但是要求较高的灵敏度。本论文研究工作的主要内容有：用气相色谱、气 相色谱质谱和高效液相色谱测定洋葱、银杏叶中有机磷、拟除虫菊酯类农药的 残留量。 本论文共分为六章： 第一章，介绍了气相色谱和高效液相色谱测定农药残留的研究现状，比较了 各种检测器的应用，并对农药残留分析的发展趋势和要求进行了阐述。 第二章，研究了一种简便、快速的洋葱中多种有机磷和菊酯类农药残留的提 取净化及其双柱双检测器测定方法。 第三章。采用正己烷丙酮( 7 ：1 ，v ：v ) 匀浆提取，f l o r i s i l 和活性炭柱 层析净化技术，建立了银杏叶中4 种拟除虫菊酯类农药的气相色谱电子捕获检 测器分析法。并对样品的前处理作了一定探讨。4 种拟除虫菊酯类农药在b p x 6 0 8 弹性石英毛细管柱上得到了很好的分离，且方法快速、灵敏，完全符合实际应用 需要。 第四章，研究了用g c - i s 同时测定银杏叶中4 种拟除虫菊酯类农药的残留量。 方法回收率在8 9 1 一1 0 2 之间，该方法灵敏、准确，各项技术指标均满足农残 检测的要求。 第五章，采用高速匀浆法提取、柱层析法净化技术，成功建立了气相色谱质 谱法同时测定银杏叶中5 种有机磷农药残留量的方法。结采表明，采用程序升温， 所测定的5 种有机磷农药在h p - 5 m s 柱上得到了很好的分离，且方法快速、灵敏， 臧利国：山东师范大学坝l 学位论立 完全符合实际需要。 第六章研究了用h p l c - u v 测定银杏叶中氯氰菊酯的残留量。该方法可以满 足农残检测的要求，并且进行了气相色谱和液相色谱的比较。 关键词：农药：残留量分析：气相色谱；气相色谱一质谱；液相色谱 分类号：0 6 5 7 7 l ；0 6 5 7 、7 2 a b s t r a c t w i t i lt h ed e v e l o p m e n to fa g r i c u l t u r e ，c h e m i c a lp e s t i c i d e sh a v ei m p o r t a n ta c t i o nt o p r e v e n t i o na n dc 9 1 eo fp e s t c h e m i c a lp e s t i c i d e sw i l lg r a d u a l l yd e g r a d ed u e t ot h e d e c o m p o s i t i o n r e a c t i o no f s u n l i g h ta f t e rt h e i ra p p l i c a t i o n h o w e v e r ，p e s t i c i d er e s i d u e s o rt h e i rm e t a b o l i t e ss t i l lr e m a i na n dc o n s t i t u t eah e a l t hr i s kt oa n i m a la n dp l a n te v e n h u m a nb e c a u s eo ft h e i rr e s i d u e st o x i c i t y w i t hi n c r e a s i n go fl i v i n g ，h u m a n sh e a l t hi s v e r yi m p o r t a n t ，s ot h es t u d yo f p e s t i c i d er e s i d u e s i sa l s ov e r yi m p o r t a n t i nt h ep r o c e s s o fa n a l y z i n gp e s t i c i d er e s i d u e s ，s a m p l e sp r e p a r a t i o ni sv e r yc o m p l i c a t e db e c a u s e t h e r ei sav e r ys m a l la m o u n tp e s t i c i d er e s i d u ei ns a m p l e s t h e r e f o r e ，r e q u i r e m e n to f m e t h o d sa c c u r a c ya n dp r e c i s i o na r en o tv e r yh i g h ，f o r t i f i e ds a m p l er e c o v e r i e sc a l lb e b e t w e e n8 0 a n d1 2 0 b u tt h em e t h o d ss e n s i t i v i t ym u s tb ev e r yh i 出i n o r d e rt ob e a b l et od e t e r m i n et r a c ep e s t i c i d e t h em a i nc o n t e n to ft h i sa r t i c l ei sa sf o l l o w i n g ：t h e d e t e r m i n a t i o no fo r g a n o p h o s p h o r u sp e s t i c i d e sa n dp y r e t h r o i d si no n i o na n dg i n k g o b i l o b al e a v e s b yg a sc h r o m a t o g r a p h y , h i g hp e r f o r m a n c el i q u i dc h r o m a t o g r a p h y t h e r ea r es i xc h a p t e r s ： c h a p t e r o n e ：t h e r ei sar e v i e wa b o u tt h er e s e a r c hd e v e l o p m e n to f p e s t i c i d er e s i d u a l d e t e r m i n a t i o n b yg a sc h r o m a t o g r a p h y , h i g hp e r f o r m a n c el i q u i dc h r o m a t o g r a p h y d e t e c t o r sw e r ec o m p a r e d a n dt h ed e v e l o p i n gt r e n d so f p e s t i c i d e sr e s i d u a la n a l y s i s w e r ed i s c u s s e d c h a p t e rt w o ；as i m p l ea n dr a p i dm e t h o d h a db e e nd e s c r i b e df o rt h ed e t e r m i n a t i o n o f o r g a n o p h o s p h o r u sp e s t i c i d e s a n d p y r e t h r o i d s r e s i d u e si no n i o n b yg a s c h r o m a t o g r a p h y w i t he l e c t r o n c a p t u r ed e t e c t o r ( e c d ) a n df l a m e 2 p h o t o m e t r i cd e t e c t o r 2 臧利国：山东师范大学坝l 学位论业 【f p d ) c h a p t e r t h r e e ：as i m p l ea n dr a p i dm e t h o dh a db e e nd e s c r i b e df o rt h ed e t e r m i n a t i o n o f p y r e t h r o i d si ng i n k g ob i l o b al e a v e sb yg a sc h r o m a t o g r a p h yw i t he l e c t r o n - c a p t u r e d e t e c t o r ( g c - e c d ) t h em i x t u r eo fa c e t o n ea n dh e x a n ew a su s e d t oe x t r a c tt h e s a m p l e s ，f o l l o w e db y a c l e a n u pt e c h n i q u e o i lac o l u m n p a c k e d w i t hf l o r i s i la n da c t i v e c a r b o nt oe l u t et h es a m p l e s t h i sm e t h o dw a sr a p i da n ds e n s i t i v e ，a n df u l f i l l e da c t u a l n e e d c h a p t e rf o u r ：as i m p l ea n dr a p i dm e t h o d h a db e e nd e s c r i b e df o rt h ed e t e r m i n a t i o n o fp y r e t h r o i d si n g i n k g ob i l o b al e a v e sb yg a sc h r o m a t o g r a p h y m a s ss p e c t r o m e t r y t h er e c o v e r i e s r a n g e df r o m 8 9 1 t o 1 0 2 t h em e t h o di s r a p i d s e n s i t i v e a n d s u i t a b l ef o rt h ea n a l y s i so f p e s t i c i d e s c h a p t e r f i v e ：as i m p l ea n d r a p i dm e t h o dw a su s e d t od e t e r m i n et h er e s i d u e so f5 o r g a n o p h o s p h o y u sp e s t i c i d e si ng i n k g ob i l o b al e a v e sb yg a sc h r o m a t o g r a p h y m a s s s p e c t r o m e t r y ( g c m s ) i nt h i sp a p e r , i tw a ss h o w nt h a t t h e s eo r g a n o p h o s p h o r u s p e s t i c i d e s w e r e s e p a r a t e d o u tw e l lo nah p 一5 m sc o l u m n b y t h e o p t i m i z e d t e m p e r a t u r ep r o g r a m c h a p t e rs i x ：am e t h o dh a d b e e nd e s c r i b e df o rt h ed e t e r m i n a t i o no f c y p e r m e t h r i ni n g i n k g ob i l o b al e a v e sb yh i 曲p e r f o r m a n c el i q u i dc h r o m a t o g r a p h y t h em e t h o di s s u i t a b l ef o rt h ea n a l y s i so f p e s t i c i d e s a n dg a sc h r o m a t o g r a p h yw a sc o m p a r e dw i t h h i g hp e r f o r m a n c el i q u i dc h r o m a t o g r a p b y 7 k e y w o r d s ：p e s t i c i d e ；r e s i d u a ld e t e r m i n a t i o n ；g a s c h r o m a t o g r a p h y ；g a s c h r o m a t o g r a p h y m a s ss p e c t r o m e t r y ；h i g hp e r f o r m a n c el i q u i dc h r o m a t o g r a p h y c a t e g o r yn u m b e r ：0 6 5 7 7 1 ，0 6 5 7 7 2 臧利国：山东师范大学坝l 学位论文 第一章气相色谱、高效液相色谱测定农药残留的新进展 1 引言 随着农业生产的持续发展，化学农药在作物病虫害的综合防治中具有不可代 替的作用。但是，由于农药品种的不断增加及其长期和大量地使用它们，致使一 些性质较为稳定，对人畜具积累性慢性毒害的化学农药，通过生物富集和食物链， 在动植物体内，甚至在人体内积累，严重的甚至会危机生命。随着物质生活水平 的提高，人们的身心健康越来越受到重视，蔬菜、水果、肉类中农药残留量的问 题越来越引起普遍关注，并对食品中农药残留检测技术提出了更高的要求【l j 。 早期的农药残留分析方法多是针对某一种农药开发的专一的分析方法，并且 需花费大量的人力和物力。随着科技的发展，农药的种类越来越多，除了原来的 几大类外，新开发的农药包括了各种各样的新的结构基团，且通常方法难以提取。 现在的农药残留检测技术也取得了很大的进步，农药残留分析向着高灵敏度的多 残留分析方向发展。农药多残留分析一般可分为三类：单种类型农药多残留分析、 多种类型农药多残留分析和未知样本农药多残留分析。以前的研究和国标的制定 中，常以第一种为主，现在的农药多残留分析主要是后面两种。为了适应农药多 残留分析的复杂性，气相色谱技术高效液相技术及许多高灵敏度、高选择性检 测器及其与质谱的联用技术也不断完善，农药残留分析也得到很快发展。现将近 几年来，气相色谱、高效液相色谱分析农药残留分析的现状分别加以介绍n 2 研究现状 早期的农药残留分析技术多限于化学法、比色法和生物测定法，检测方法缺 乏专一性且灵敏度不高。气相色谱( g c ) ，液相色谱( h p l c ) 自上个世纪中后期应 用于农药残留分析后推动了农药残留技术的发展，大大提高了农药残留量的检测 水平。高性能的色谱柱可将多种组分分开，高灵敏度、专一性强的检测器解决了 早期不能检出的微量农药。气相色谱的检测器有很强的选择性，有很高灵敏度， 可以检测( n g ) 级的残留化合物。但气相色谱不能直接测定热不稳定和强极性农 药及其代谢物，必须要进行衍生化处理。而h p l c 能适合测定这些物质，并且一 些新的检测器的应用，在一定程度上提高了它的灵敏度，因而应用越来越广泛1 2 j 。 4 现在g c 和h p l c 与柱前提取及m s 等系统联用对农药残留进行定性、定量分析， 取得了较好的结果。 2 1 气相色谱( g c ) 气相色谱具有操作简便、分析速度快、分离效能高、灵敏度高以及应用范围 广等特点。目前多达7 0 的农药残留量分析是使用气相色谱法来完成的“。 2 1 1 电子捕获检测器e c d 电子捕获检测器( e l e c t r o nc a p t u r ed e t e c t o r , e c d ) 是农药残留分析中对有机氯 的测定最常用的检测器。它具有高选择性和高灵敏度等特点，广泛用于样品中痕 量农药、多氯联苯等的分析。朱梦栩等d - 1 3 i 利用e c d 测定了土壤、中药、食品 等中的三氯杀螨醇、丙氯灵及其代谢物、拟除虫菊酯、硫丹等的残留量。 2 1 2 氮磷检测器n p d 氮磷检测器( n i t r o g e n p h o s p h o r u sd e t e c t o r , n p d ) 对氮磷化合物灵敏度高、专 一性好，用于有机氮和有机磷农药残留量的检测。k u m a z a w a 等 1 4 - 1 7 1 利用n p d 测定了茶叶、蜂蜜、人体体液中的有机磷、毒死蜱、杀螟松、三嗪除草剂等。 2 1 3 火焰光度检测器f p d 火焰光度检钡8 器( f l a m ep h o t o m e t r i cd e t e c t o r , f p d ) 是一种高灵敏度和高选 择性的检测器，其特点是对硫为非线性响应。主要用于含硫、磷化合物，特别是 硫化合物的痕量检测。s c h e n c k 等f 1 8 。2 叼利用f p d 测定了食品、橄榄树油、覆盆 子等中的丙溴磷、有机磷杀虫剂、三嗪除草剂等。 2 1 4 多检测器组合 多检测器组合( c o m b i n a t i o no fm u l t i p l ed e t e c t o r ) 检测法是近l o 余年来，为解 决许多复杂样品的分析而发展的新颖方法。它是气相色谱检测方法的发展方向之 一。d u b e y 等2 h 2 1 采用两步衍生法，用一根毛细管柱分离，柱后以1 ：1 分流比 并联e c d 和n p d ，测定了食品中亚乙基硫脲的残留量。 2 1 5 气相色谱一质谱联用技术( c - c m s ) 它将气相色谱仪和质谱仪串联起来，成为一个整机使用的检测技术。它具有 气相色谱高分离性能，又具有质谱准确鉴定化合物结构的特点，可达到同时定性、 定量的检测目的，大部分农药可用g c m s 进行，因而在农药多残留分析中g c m s 被广泛的应用“+ ”。 臧利国：山东师范大学坝l 学位论文 2 2 高效液相色谱( h p l c ) h p l c 是以液体作流动相的一种色谱法可以分离分子量大的离子型农药，尤 其适用于对不易气化或受热容易分解的农药检测，例如氨基甲酸酯类、取代脲类、 苯氧乙酸类农药。 2 2 1 紫外可见光光度检测器( u v ) 紫外可见光光度检测器是最广泛使用的检测器，这类检测器对许多溶质都有 很高的灵敏度，并且稳定性好，但是样品必须在可见或紫外光区有吸收。 a n n e c l a i r em a r t e l 等川用u v 检测器测定了山莓和莴苣里面的多种农药残留， 获得了较低的检测限。 2 2 2 荧光检测器( f d ) 在液相色谱中荧光检测器的应用仅次与紫外可见光光度检测器，它最吸引人 的特点是它固有的灵敏度和选择性。因为能引起荧光的化合物比较有限，所以限 制了f d 的应用。陶传江等d 2 佣高效液相色谱柱后衍生系统、荧光检测器来分析 了蔬菜中多种氨基甲酸酯类杀虫剂残留，获得好的结果。 2 2 3 示差折光检测器( r i ) 这种检测器是通用型检测器，特别是在溶质对紫外光和可见光无吸收的情况 下，一般用示差折光检测器。 2 2 4 二极管阵列检测器 此检测器可以进行全波长检测，一次进样可以检测到样品中不同吸收波长下 的所有组分，并且灵敏度高，线性范围宽，基线的噪音小，因而使用越来越普遍。 b i c c h i c a r l o 等3 3 1 用二极管阵列检测器同时测定了苹果和梨中的六种三唑类农 药，在较低的添加浓度下获得了较高的回收率。 2 2 。5 液相色谱一质谱联机技术( l c 燃) 这是一种内喷射式和粒子流式接口技术将液相色谱与质谱联结起来，用于分 析对热不稳定、分子量较大、难以用气相色谱分析的化合物的新方法。它简化了 样本净化过程，缩短了分析周期，不需要衍生化，并且具有检测灵敏度高、选择 性好、定性定量同时进行，结果可靠等优点。虽然l c m s 对分析技术和仪器的 要求高，但它是一种很有利用价值的高效率、高可靠性分析技术，现在l c m s 己成为发达国家在各种基质中微量农药的常规检测手段，将来在国内其分析应用 臧利国：山东师范大学颂l 学位论义 也将会更加普遍 3 4 - 3 5 1 。 2 3 其它联用技术 由于一些复杂样品有较宽的极性范围，单一色谱很难进行有效分离。多维色 谱利用不同极性色谱柱或者两种色谱，可以使复杂的样品得到很好的分离。多 维g c 、反相h p l c g c 、气相色谱一傅立叶红外光谱联用仪。1 等均有报道。刘长武 。”采用农药多残留快速扫描技术( m t s m ) ，用双毛细管柱、双检测器气相色谱和 h p l c 一次检出一个蔬菜和水果样品中四大类( 有机磷、有机氯、氨基甲酸酯、 拟除虫菊酯) 共2 0 0 种未知农药，只需1 5 个小时。 高效毛细管电泳( h p c e ) 是离子或者荷电粒子以电场为驱动力，在毛细管 中按淌度或者分配系数不同进行高效、快速分离的种电泳新技术。h p c e 具有 高效、快速、样品用量少、容易自动化、操作简便、溶剂消耗少等优点。毛细管 联用技术目前主要集中在c e m s 上，其它联用技术由于接口问题，很难进行有 效联用，在农药残留分析方面的应用尚少报道。 3 农药残留分析的发展趋势和要求 随着人们安全意识的增强，农药残留分析越来越受到关注，需要建立好的分 析方法。随着科学技术的不断发展，农药残留分析作为- - i 综合性很强、涉及面 广的分析学科，其技术也会不断的更新、完善和发展。分析方法会更简便、快捷、 准确、灵敏。 ( 1 ) 现场检测开始受到重视，需要快速、高效的分析方法。现有的蔬菜农药 残留快速检测仪的核心部分为活性酶，其检测范围有很大的局限性，基本只适用 有机磷及其少量组合混剂。而面前市场上微型g c 基本都采用t c d ，进样温度 不超过1 5 0 c 【3 9 1 。因此有待进一步开发新的、应用范围广的、快速的、使用简单 的、携带方便的农药残留快速分析仪。 ( 2 ) 提取和净化技术日趋先进，发展了固相微萃取( s p m e ) 、超临界流体 萃取( s f e ) 、基质固相萃取( m s p d ) 等技术。 ( 3 ) 为保证农药残留分析的灵敏度，应加强选择性检溅器、联用技术的使 用。 ( 4 ) 生物农药的检测提上日程。 ( 5 ) 样品范围越来越宽，现在有许多分析工作者在进行体液、血液、重要 臧利国：山东师范大学坝l 学位论文 等基质中的农药残留分析工作 4 0 - 4 2 j 。 ( 6 ) 绿色农药韵研究引起入们的重视。绿色农药的特点是：a ：有很高的生 物活性；b ：选择性高；c ：对农作物无药害：d ：使用后在农作物体内外、农产 品以及土壤、大气和水体中无残留或即使有微量残留也可以短期降解生成无毒天 然物质而完全融入大自然 4 3 】。这就说明，未来农药残留分析可能是对蛋白质、 核酸等生物农药的分析，要求未来的分析化学家必须掌握细胞化学、发酵化学、 免疫化学等多学科、多门类的综合知识。 ( 7 ) 气相色谱、液相色谱的运用技术更加成熟，毛细管电泳将得到更广泛 的应用。 臧刹国：山东师范大学硕l 学位论业 参考文献 1 】付颖农药2 0 0 1 ，4 0 ( 6 ) ，5 【2 f - 6 秀琼农药1 9 9 8 ，3 7 ( 2 ) ，8 3 】朱梦栩，王勇色谱2 0 0 0 ，1 8 ( 1 ) ，6 4 4 k a u s h i kn ，h a n d a s k c h r o m a t o g r 19 9 7 ，4 6 ( 3 4 ) ，2 0 9 5 p a o l im d ，b a r b i n amt ，u a m i a n ov ，e ta 1 jc h r o m a t o g r , a ，1 9 9 7 ，7 6 5 ( i ) ，1 2 7 【6 l i a ocm ，s i l v e i r am ind jc h r o m a t o g r , a 1 9 9 7 ，7 6 9 ( 2 ) ，2 7 5 7 h a j g l o v aj ，h o l a d o v 6k ，k o c o u r e a kv ，e ta 1 jc h r o m a t o g r , a 19 9 8 ，8 0 0 ( 2 ) ，2 8 3 【8 f o n tj ，m a r s a la jc h r o m a t o g r , ，a 1 9 9 8 ，8 1 l ( i 一2 ) ，2 5 6 9 w a n g j h ，q i a n gx ，k u i j jc h r o m a t o g r , a 1 9 9 8 ，8 1 8 ( 1 ) ，1 3 8 1 0 j i m 4 n e zj j ，b e m a ljl ，n o z a lm jd ，e ta 1 jc h r o m a t o g r , a 1 9 9 8 ，8 2 3 ( 1 - 2 ) ，3 8 1 1 1 j i m 6 n e z jj ，b e m a ljl ，n 0 z a lm jd ，e ta 1 jc h r o m a t o g r , a 1 9 9 8 ，8 2 9 ( 1 2 ) ，2 6 9 1 2 o l v aj ，n a v a r r os ，b a r b aa ，e ta 1 jc h r o m a t o g r , a 1 9 9 9 ，8 3 3 ( 1 ) ，4 3 1 3 l e n t z a - r i z o sc h ，a v a r a m i d e s e j jc h r o m a t o g r , a 1 9 9 9 ，8 5 8 ( 1 ) ，1 2 3 1 4 k u m a z a w at ，l e exp ，k o n d ok ，e ta 1 c h r o m a t o g r , 2 0 0 0 ，5 2 ，( 3 - 4 ) ，1 9 5 【1 5 】张莹，黄克强，李拥军色谱，2 0 0 1 ，1 9 ( 3 ) ，2 7 3 16 s a l ac ，b u s t o0 ，g u a s c hj c h r o m a t o g r 19 9 7 ，4 4 ( 5 6 ) ，3 2 0 1 7 s a n z - a s e n s i oj ，m a r t i n e z - p r a d oap ，p l a z a - m e d i n am ，e ta l ，c h r o m a t o g r 1 9 9 9 4 9 ( 3 4 ) ，1 5 5 1 8 s c h e n c kfj ，l e h o t a ysj j c h r o m a t o g r a j ，2 0 0 0 ，8 6 8 ( 1 ) ，5 1 1 9 】陈雁君，卢英华，张娟等色谱 j 】2 0 0 1 ，1 9 ( 3 ) ，2 8 3 2 0 n o r m a nk nt ，p a n t o nshwjc h r o m a t o g r , a ，2 0 0 1 ，9 0 7 ( 1 2 ) ，2 4 7 【2 1 d u b e yj k ，h e b e r e r t ，s t a n h j j ，c h r o m a t o g r a 【j 】1 9 9 7 ，7 6 5 ( 1 ) ，3 1 2 2 aa m i r a q v , h o n g w u j i n g j c h r o m a t o g r a j 1 9 9 8 ，8 1 4 ( 1 ) ，1 3 3 5 0 2 3 a n aa g f i e r a ，l u i sp i e d r a ，m a r i ad o l o r e sh e m a n d oe t a 1 a n a l y s t 2 0 0 0 ，12 5 ， 1 3 9 7 2 4 p a u l m o g a d a t i j u d i mb l o u i s ，j o s e p hd r o s e n j o u r n a lo f a o a ci n t e r n a t i o n a l 19 9 9 ，8 2 ( 3 ) ，7 0 5 2 5 e m a f i ak r i s t e n s o n ，e s t h e rg j h a v e r k a t e ，c e e sj s l o o t e ne ta 1 j o u r n a lo f 9 臧利国：山东师范大学坝l 学位论文 c h r o m a t o g r a p h ya 2 0 0 1 ，9 1 7 ，2 7 7 【7 6 j r s e r r a n o ，f j l 6 p e z ，f ，g e r n d n d e z j o u r n a lo f c h r o m a t o g r a p h ya 1 9 9 9 8 5 5 6 3 3 【2 7 g n i e s s n e r ，w , b u c h b e r g e r ，r e c k e r s t o r f e r j o u r n a lo fc h r o m a t o g r a p h y a 19 9 9 ， 8 4 6 ，3 4 i 2 8 p m a n i r a k i z a ，a c o v a c i ，e s c h e p e n s c h r o m a t o g r a p h l a 2 0 0 0 ，5 2 ，7 8 7 2 9 g e o r g ej , s o l e a s ，j o ey a h ，k i r b yh o m e ta 1 j o u r n a to f c h r o m a t o g r a p h y a 2 0 0 0 ，8 8 2 ，2 0 5 c 3 0 p a ts a n d r a ，b a r tt i e n p o n t ，j o e n v e r c a m m e ne ta t j o u m a to f c h r o m a t o g r a p h y a 2 0 0 1 ，9 2 8 ，1 1 7 【3 1 a r m e c l a i r em a r t e l ，m a u r i c ep o r t h a u l t j ，o f l i q u i dc h r o m a t o g r a p h y r e l a t e d t e c h n o l o g i e s 2 0 0 0 ，2 3 ( 1 9 ) ，3 0 4 3 3 2 陶传江，朱光艳农药科学与管理2 0 0 1 ，2 2 ( 4 ) ，1 8 3 3 b i c c h i ，c a r l o ；c o r d e r o ，c h i a r a ；r u b i o l o ，p a t r i z i a ；o c c e l l i ，a l e s s a n d r o j a o a c i n t 2 0 0 1 ，8 4 ( 5 ) ，1 5 4 3 【3 4 a z e v e d o ，d a 。；l a c o r t e ，s ；v i a n a ，e ；b a r c e l o ，d 。c h r o m a t o g r a p h i a 2 0 0 1 ，5 3 ( 3 1 4 ) ，1 1 3 【3 5 c u r i n i ，r ；g e n t i l i ，a ；m a r c h e s e ，s e ta 1 c h r o m a t o g r a p h i a 2 0 0 1 ，5 3 ( 5 6 ) ，2 4 4 【3 6 】杨晓玲，张宏军，周志强，刘丰茂p r o c e e d i n g s ( h a t e m a t i o n a l w o r k s h o p o n a n a l y s i so f p e s t i c i d er e s i d u e s i nf o o dp r o d u c t i o n ) o c t o b e r2 8 - 3 1 ，2 0 0 2 ，h e f e i ， 4 6 3 7 】汪正范色谱定性与定量 m 北京：化学工业出版社，2 0 0 1 ，2 7 3 8 高天兵，张曙明，田金改分析测试学报，1 9 9 9 ，1 8 ( 5 ) ，1 5 3 9 刘虎威气相色谱方法及应用 m 】一e 京：化学工业出版社，2 0 0 l ，2 5 1 4 0 f - 马翠玲，周永新，吴鹤松等分析测试学报，2 0 0 1 ，2 0 ( 6 ) ，8 0 4 1 1 梁祈祷，魏雪芳分析测试学报，2 0 0 0 ，1 9 孙，2 5 4 2 梁祈，颜庆娥分析测试学报，1 9 9 9 ，18 ( 2 ) ，6 6 【4 3 】梁文平，郑斐能，王仪等农药，1 9 9 9 ，3 8 ( 9 ) ，l o 第二章洋葱中多种农药残留的双柱双检测器气相色谱分析法 摘要：报道了一种简便、快速的洋葱中多种有机磷和菊酯类农药残留的提取 净化及其双柱双检测器测定方法。采用乙腈提取洋葱中的农药，二氯甲烷乙酸 乙酯( 2 0 ：1 ，v ：v ) 为淋洗剂，经过f l o r i s i l 和活性炭净化后，用气相色谱一 火焰光度检测器和气相色谱2 电子捕获检测器分别直接测定各种农药残留含量。 结果表明，采用程序升温，所测定的有机磷和菊酯类农药在d b 一1 7 0 1 和b p x 6 0 8 弹性石英毛细管柱上得到了很好的分离，且方法快速、灵敏，完全符合实际应用 需要。各种农药的加标回收率范围为8 6 3 1 0 3 ，变异系数范围为0 6 7 4 6 ， 最低检测浓度范围为0 0 0 1 0 0 0 5 m g k g 。 关键词：洋葱有机磷农药菊酯类农药气相色谱一火焰光度检测器气相色 谱一电子捕获检测器 1 前言 洋葱中含有许多对人类有用的成分包括：水分、蛋白、脂肪、膳食纤维、碳 水化合物、胡萝p 素、视黄醇、硫胺素、核黄素、抗坏血酸、维生素总e 、k 、 n a 、c a 、m g 、f e 、m n 、z n 等【l 】。近来的许多研究表明，洋葱具有消炎抑菌， 预防心血管疾病、糖尿病等生物活性【2 】。由于洋葱的医疗价值和保健作用，洋葱 现在已经成为人们喜爱的蔬菜，受到人们的重视，尤其在欧美，洋葱被称为“蔬 菜皇后”。目前，国内外对洋葱的研究越来越多，但是主要集中在研究它的生物 活性和成分上【2 培】。由于洋葱中含有油类物质，因此给农药残留分析带来许多困 难。至今，对洋葱中的农药残留分析还未有成熟的方法。 目前，用气相色谱分析多组分农药残留的报道已经有了很多1 9 6 1 ，关于用双 检测器分析多组分农药残留的研究，己越来越引起研究人员的关注【2 烈。 j a t i e n d e rk u m a rd u b e y 等7 j 用g c n p 0 和g c e c o 检测了食品中乙烯基硫脲的含 量。j j j i m 6 n e z 等【l 引利用g c n p d 和g c e c d 分析了蜂蜜中的农药残留。但是用 g c f p d 和g c e c d 分析洋葱中的农药残留还未见报道。 本研究采用已腈提取、f l o r i s i l 和活性炭柱层析技术净化、二氯甲烷一乙酸 乙酯作淋洗剂，利用g c f p d 和g c e c d 进行分析，成功地分离、检测了洋葱中有 臧利国：山东师范大学坝l 学位论立 机磷和拟除虫菊酯类农药的残留量，此方法简便、快速、可行，具有重要的应用 价值。 2 实验部分 2 1 仪器与试剂 仪器：g c 一1 4 a 型气相色谱仪( 日本岛津公司) ，火焰光度检测器( f p d ) ，n 2 0 0 0 色谱工作站( 浙江大学智达信息工程有限公司) ；h p 4 8 9 0 d 型气相色谱仪( 美国 惠普公司) 带e c d ”n i 检测器：h p 3 3 9 8 a g cc h e m s t a t i o n ；x a l 无油空气泵、x h 一1 高纯氢发生器( 北京信和诚科技发展有限公司) ；高速匀浆机( 德国i k a 公司) ： n - i n w 型旋转蒸发仪( 日本东京理化公司) ；h y - 4 调速多用振荡器( 江苏金城国 胜实验仪器厂) ；t 5 0 0 电子天平( 常熟双杰测试仪器厂) ；r 2 0 0 d 精密电子天平( 德 国沙多利斯公司) 。 试剂：己腈色谱纯( 天津市科密欧化学试剂开发中心) ；二氯甲烷、正己烷 a r 重蒸( 山东莱阳经济技术开发区精细化工厂) ；乙酸乙酯a r 重蒸( 莱阳化 工实验厂) ； n a c la r ( 青岛江山化学试剂有限公司) ；无水硫酸钠a r 4 0 0 灼烧l o h ( 山东莱阳经济技术开发区精细化工厂) ；弗罗里硅土( f l o r i s i l ) 6 5 0 灼烧4 h ( 用前1 4 0 烘烤2 h ) ( f l u k a 进口分装6 0 8 0 目上海化学试剂采购 供应站分装厂) ；活性炭为化学纯，经浓盐酸处理。 有机磷和菊酯类农药标准品来源及其浓度：丙线磷( 9 6 5 ，) 4 2 0 0 “g m l 、 甲拌磷( 9 8 o ，) 3 8 0 0 ug m l 、二嗪磷( 9 7 5 ，) 4 1 0 0ug m l 、毒死蜱 ( 9 9 8 ，) 5 0 0 0t j g m l 、甲基对硫磷( 9 8 5 ，) 2 9 0 0pg m 1 、倍硫磷( 9 9 0 ) 4 8 0 0 ug m l 、杀螟松( 9 6 7 ，) 3 8 0 0ug m l 、氰戊菊酯( 9 8 5 ，) 2 0 0 0u g m l ( 以上农药来自国家农药质检中心) 、甲氰菊酯( 9 2 2 ，s u m i t o m o c h e m i c a l c o ，l t d o s a k aj a p a n ) 2 0 0 0l ig m l 、三氟氯氰菊酯( 9 8 o ，英国) 2 0 0 0u g m l 、氯氰菊酯( 9 4 8 ，d o w a g r o s c i e n c e s ，i n d i a n a p o l i s ，i n 4 6 2 6 8 ，u s a ) 2 0 0 0 i ig m l 。 2 2 样品的提取和净化 提取：称取1 0 0 0 0 0 9 粉碎的鲜洋葱于广口瓶中，加8 0 m l 的已腈，匀浆提取 3 分钟。在磨1 3 具塞量筒中加入8 0 9 的n a c i ，匀浆液经含有无水硫酸钠的普通 臧利国：山东师范大学坝l 学位论立 漏斗过滤于磨口具塞量筒中，震荡5 分钟，然后静置3 0 分钟，移取上层液4 0 m l 于三角瓶中，旋转蒸发至近干。 净化：在3 0 c m 2 c m ( i d ) 玻璃层析柱中，于底部加少量脱脂棉，依次加 入l c m 高的无水硫酸钠、8 o gf l o r i s i l 和0 3 2 9 活性炭( 混合) 和l c m 高的无 水硫酸钠。先以5 0 m l 的二氯甲烷预淋柱子，再将浓缩的样品液移入柱内，以7 0 m l 的二氯甲烷乙酸乙酯( 2 0 ：l ，v v ) 洗脱，收集全部洗脱液，于4 0 水浴旋转 蒸发浓缩至干，加入少许正己烷，再旋转蒸发至干( 此过程重复两次) ，最后用 正己烷定容至5 o o m l ，分别用g c e c d 和g c f p d 分析。 2 3 色谱条件 2 3 1e c d 的色谱条件： 色谱柱：b p x 6 0 8 ，2 5 m x 0 3 3 m m ( i d ) x 0 4 u m ( f i l mt h i c k n e s s ) 弹性石 英毛细管色谱柱：载气：高纯氮气( 纯度9 9 9 9 9