外周血细胞形态检验PPT课件.ppt

外周血细胞形态检验,浙中大微免教研室,1,2,以红细胞系统的成熟过程为例,3,单个细胞观察顺序,细胞大小、形状胞浆量多少、颜色、颗粒细胞核形状、染色质结构（粗细、凝聚）、核仁数目、大小。核、浆比例。,4,5,外周血细胞检验程序涂片、染色与镜检；外周血细胞形态检验报告方式外周血红细胞异常形态检验大小、形态、染色与结构异常；点彩红细胞外周血白细胞异常形态检验中性粒细胞异常变化；异常淋巴细胞血小板形态与寄生虫检验血小板大小、形态、数量变化；寄生虫,6,外周血细胞检验程序,7,血涂片的制备,器材清洁、干燥、无尘、无油脂的载玻片。操作在玻片近一端1/3处，加一滴血液，握住另一张边缘光滑的推片，以3045角使血滴沿推片迅速散开，快速、平稳地推动推片至载玻片的另一端。,8,注意事项血膜呈舌状，头、体、尾分明空气中晃动，尽快干燥；37恒温箱中促干涂片的厚薄、长度与血滴大小（1020l）与血片质量1h内染色或在1h内甲醇固定正确清洁玻片抗凝血或毛细血管血涂片；EDTA能阻止PLT聚集抗凝血液4h内涂片,9,血涂片染色,原理瑞氏（Wright）染色法（经典染色法）瑞氏染色法使细胞着色既有化学亲和反应，又有物理吸附作用。瑞氏染液含美蓝和伊红两种成分：美蓝偏碱性，与细胞内酸性物质有亲和力（胞浆），染成兰色；伊红偏酸性，与细胞内碱性物质有亲和力（胞核），染成紫红色。试剂瑞氏染液瑞氏染料0.1g甲醇（AR）60ml,10,pH6.8磷酸盐缓冲液（pH6.46.8）磷酸二氢钾（KH2PO4）0.3g磷酸氢二钠（Na2HPO4）0.2g加少量蒸馏水溶解，再加至1000ml。,11,操作加瑞氏染液数滴，固定血膜约1min。滴加约等量的缓冲液与染液混合，室温下染色510min。用流水冲去染液,待干燥后镜检。,12,注意事项pH对细胞染色有影响。未干透的血膜不能染色。染色时间与染液浓度、染色时温度成反比。不能先倒掉染液，用流水冲去。血膜上有染料颗粒沉积，可加少许甲醇。,13,涂抹标本的观察方法:肉眼观察低倍镜下观察油镜下观察,血涂片镜检,14,先在低倍镜下浏览全片，了解染色好坏和细胞分布情况，观察有无异常细胞。选择涂片体尾交界处染色良好的区域，在油镜下计数100个白细胞，按其形态特征进行分类计数。求出各类细胞所占百分数。,血涂片镜检,15,16,17,18,A：染色偏酸，细胞核、颗粒结构不清楚，红细胞染色偏红。B：染色较好，细胞结构、颗粒、胞浆清晰，红细胞染粉红色。C：染色偏碱，细胞核、胞浆染色太深，细胞不易辨认，红细胞染成蓝色。,19,注意事项分类时应从血膜体尾交界处边缘向中央依次上下呈城垛状迂回移动，计数使不能重复和遗漏。白细胞数明显减少的血片，应检查多张血片。分类见有核红细胞，不计入100个白细胞内，以分类100个白细胞过程中见到多少有核红细胞报告，并注明所属阶段。,20,除慢淋外，破碎细胞或不能识别细胞不超过白细胞总数的2%。若破碎细胞仍能明确鉴别，如破碎的嗜酸性粒细胞，应包括在分类计数中。在结果报告中应对破碎细胞或不能识别细胞作适当描述。分类中应注意观察成熟红细胞、血小板的形态、染色及分布情况，注意有无寄生虫和其他异常所见。白细胞形态变化较大，遇有疑问应请示上级主管或主任进行核实，以减少错误。,21,异常红细胞形态检查,22,大小异常,正常红细胞大小较为一致，直径69um在各种贫血时，红细胞可出现大、小不一。直径10um为大红细胞，15um为巨红细胞，常见于巨幼贫、肝脏疾病等，直径6um为小红细胞，多见于缺铁性贫血等。直径相差1倍以上为大小不均右图：大红细胞（上）小红细胞（下）(中央苍白区扩大）,23,形态异常,RBC直径通常2.6um，呈小圆形，细胞中心区蛋白含量较正常多。见于遗传性球形红细胞增多症（25%以上）、自身免疫性溶贫和异常Hb病（HBS、HBC病等）。,球形红细胞,24,红细胞呈椭圆形，横短，长大，有时呈畸形。正常人可见到，3%。这是造血功能衰退或造血物质缺乏的表现。常见于巨幼细胞性贫血和使用抗代谢药物后。此外，在疾病进行期突然出现核象右移，提示预后不良。,核右移,47,毒性变化,严重感染、恶性肿瘤、各种重金属或药物中毒、大面积烧伤等，中性粒细胞可出现形态变化。具体表现为：细胞大小不均：为骨髓内幼稚粒细胞发生不规则的分裂增殖所致。中毒颗粒：细胞质中部分或全部颗粒变粗，着色深，颗粒的分布及大小等，可能为中性颗粒成熟过程中发生变性所致,48,可在细胞质或核中出现，常为多个，被认为是细胞脂肪变性后未能着色所致。,空泡,49,细胞质内出现嗜碱性多呈斑块、梨形或云雾状，可能为核浆发育不平衡所致，为细胞严重毒性变的表现,杜勒小体,50,胞核有各种形态的芽状突出，临床意义尚不明确，可能与中毒、癌转移、严重的放射损伤等有关。,核棘突,51,退行性变,表现为胞体肿大，结构模糊，边缘不清。胞核可呈固缩、肿胀、破碎、溶解等变化，退行性变是细胞衰老死亡的表现。,52,粒细胞异常：粒细胞中毒性颗粒，中性杆状细胞胞浆内充满粗大着色深染颗粒。,53,粒细胞异常：粒细胞中毒性颗粒，中性杆状核细胞内充满粗大染色深的颗粒。,54,粒细胞异常：中性粒细胞胞浆空泡变性（左上），胞浆出现Dohle小体，核棘突和退行性变(右上、左下)，核分叶过多，核右移（右下）。,55,粒细胞异常：中性粒细胞核棘突和核碎裂，核固缩。,56,粒细胞异常：中性粒细胞巨幼变，细胞分叶过多，见8叶。,57,粒细胞异常：中性粒细胞巨幼变，细胞分叶过多，呈7叶状。,58,粒细胞异常：佩尔格尔休特（Pelger-Huet)异常，细胞分叶到2叶为止，圆形或卵圆形，染色质明显浓缩。,59,粒细胞异常：佩尔格尔休特（Pelger-huet）异常，细胞分两叶，核染色质明显浓缩，如眼镜状。,60,粒细胞异常：佩尔格尔休特（Pelger-huet）异常。,61,粒细胞异常：佩尔格尔休特（Pelger-huet）异常，细胞分叶到2叶为止，核染色质固缩。,62,粒细胞异常：佩尔格尔休特（Peger-huet）异常，细胞分叶障碍，核染色质固缩。,63,粒细胞异常：佩尔格尔休特（Pelger-huet）异常，细胞分叶困难，核染色质固缩。,64,粒细胞异常：假性佩尔格尔休特（Pelger-huet）异常，细胞分两叶，核染色质较疏松。,65,粒细胞异常：异常白细胞包涵体Chediak-Higashi综合症，中性粒细胞胞浆中含有明显紫红色的巨大颗粒。,66,粒细胞异常：Chediak-Higashi综合症，中性粒细胞胞浆内含有明显紫红色巨大颗粒。,67,粒细胞异常：Chediak-Higashi综合症，中性粒细胞胞浆内含有明显紫红色巨大颗粒。,68,粒细胞异常：Chediak-Higashi综合症，中性粒细胞胞浆内含有明显紫红色巨大颗粒。,69,粒细胞异常：Chediak-Higashi综合症，中性粒细胞胞浆内含有两个紫红色巨大颗粒。,70,粒细胞异常：Chediak-Higashi综合症的淋巴细胞，淋巴细胞内也可见紫红色巨大颗粒。,71,粒细胞异常：梅-黑格林May-Hegglin异常，中性粒细胞胞浆内有淡蓝色的Dohle小体，伴有巨大血小板。,72,Alder-Reiily异常:中性粒细胞胞浆中有大量暗紫红色颗粒。,73,Alder-Reiily异常:淋巴细胞胞浆中有暗紫红色颗粒。,74,Alder-Reiily异常:单核细胞胞浆中有大量暗紫红色颗粒。,75,Alder-Reiily异常:中性粒细胞和单核细胞胞浆中有大量暗紫红色颗粒。,76,Alder-Reiily异常:中性粒细胞胞浆中有大量暗紫红色颗粒。,77,Alder-Reiily异常:中性粒细胞和单核细胞胞浆中有大量暗紫红色颗粒。,78,棒状小体（AuerBody),79,棒状小体（AuerBody),80,棒状小体（AuerBody),81,棒状小体（AuerBody),82,棒状小体（AuerBody),83,棒状小体（AuerBody),84,棒状小体（AuerBody)：原始细胞中可见数个棒状小体，排列紊乱。,85,淋巴细胞的异常变化,异形淋巴细胞：细胞大小为1025l，形态各异，呈圆形，卵圆形或不规则形。细胞核形各异，呈圆形、卵圆形、凹陷形、折叠形、裂隙形或分叶形，核染色质可为细致、中度致密或粗颗粒；副染色质无或少量，核仁无或偶见，大小和染色性各异。细胞质中等至大量；染