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文档简介
小吞噬实验,第6小组,1,实验目的,掌握吞噬作用的原理和方法掌握显微镜油镜的使用方法掌握瑞氏染色的方法,2,实验原理,血液中的多形核白细胞是一种小吞噬细胞,其细胞浆内含有多种酶类,对侵入体内的细菌具有强大的吞噬和消化功能,是机体非特异性免疫的重要组成部分。意义:在某些情况下,小吞噬细胞也参与某些超敏反应和自身免疫疾病的组织损伤和炎症过程,因此,测定小吞噬细胞的功能可在一定程度上反映机体的免疫状态,也可作为判定疗效的一种指标。,3,大吞噬细胞(单核巨噬细胞),吞噬细胞分类,小吞噬细胞(中性粒细胞),4,小吞噬细胞,来源:中性粒细胞存在部位:血液、炎症部位(全身)功能基础:溶酶体,过氧化物酶及杀菌物质。功能:主要吞噬化脓菌反应时间及寿命:反应时间快,数分钟到几小时,寿命短.平均数小时,5,吞噬示意图,6,吞噬过程,7,实验材料,小白鼠无菌肉汤金黄色葡萄球菌1824h肉汤培养物注射器及针头瑞氏染液解剖器材(解剖板、剪刀、镊子)玻片、显微镜碘酒、酒精,8,实验方法,1.诱导:实验前1小时给小白鼠腹腔注射无菌肉汤2ml,诱导浆液渗出,轻揉腹部2.注射:实验时给小白鼠腹腔内注射金葡菌0.5ml,轻揉腹部3.取样:注射后30min至45min后处死小白鼠,用毛细吸管抽取腹腔液涂片,9,实验方法,4.瑞氏染色:标本干燥后用瑞氏染液染色。滴加34滴瑞氏染液于标本上,以完全盖住标本为宜。30秒后滴两倍体积的缓冲液,吹吸均匀。3分钟后甩去玻片上的染液,吸水纸吸干。5.油镜镜检:观察并记录实验结果,10,结果记录及计算,观察100个嗜中性粒细胞,计数吞噬细菌的白细胞数与所吞噬的细菌总数。求吞噬百分率以及吞噬指数。吞噬百分率=(吞噬有细菌的嗜中性粒细胞/100)100吞噬指数=(100个吞噬细胞吞噬的细菌总数/100)100%,11,油镜下见中性粒细胞胞浆呈淡蓝色,核分叶、紫红深染,金黄色葡菌球菌呈蓝色。可见中性粒细胞胞浆内吞噬有很多金黄色葡菌球菌。,实验结果,12,注射菌液时不要注射到皮下或腹腔脏器内,注射后轻揉腹部,
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