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文档简介

,1,2,实验一、红细胞计数,临床检验诊断学教研室,3,一、目的掌握显微镜红细胞计数的原理及操作方法。二、原理用等渗稀释液将血液稀释一定倍数，充入计数池后，在显微镜下计数一定体积内的红细胞数量，经换算求出每升血液中的红细胞数。,4,5,1.0mm,6,三、器材试管、试管架、加样枪、微量吸管、胶吸头、干脱脂棉、改良计数板、血盖片、显微镜四、试剂生理盐水五、标本EDTA盐抗凝血,7,微量吸管的使用,1.准备吸管及试管：将乳胶吸头套在微量吸管上，注意两者连接处不应不漏气。2.加稀释液：取试管一支，加2ml的生理盐水。3.持管吸血：右手拇指和中指夹住吸管与吸头交接处，示指盖住吸头小孔。三指轻微用力，排除适量的气体使管内形成负压。将管尖插入抗凝血，三指慢慢松开，吸取抗凝血达到所需血量。4.拭净余血：用纱布沿管口方向拭净余血，并检查血量是否达到刻度线。5.释放血液：将吸管插入含生理盐水的试管底部，慢慢排除吸管内的血液，再用上清液冲洗管内余血3次，最后将管内残余液体完全排净。,8,普通光学显微镜的使用,（1）打开电源开关，旋转光源调节旋钮使光强适中；（2）打开夹片器，放好标本（计数板）；（3）将低倍镜头至于标本上方，从侧面观察，旋转显微镜的粗调，使样品尽可能接近物镜；（4）通过右目镜观察标本，慢慢旋转粗调使载物台下降，粗调聚焦后再用微调做精细调焦，调节光瞳间距调节把手，双目可以观察到一个单一的像；（5）握住物镜转换器转动，选用所需放大倍数的物镜10倍或40倍。（6）观察并记录。,9,六、操作,1.准备计数板：采用推压法从计数板下缘向前平推血盖片，将其盖在计数池上。2.加稀释液:取小试管1支，加稀释液2.0ml。3.加血：用微量吸管吸取抗凝血10l，擦去管外余血，轻轻加至红细胞稀释液底再轻吸上清液清洗吸管23次，混匀。,10,六、操作,4.充池：用微量吸管将红细胞悬液充入计数池，室温下平放35分钟后于显微镜下计数。5.计数：用高倍镜依次计数中央大方格内4角和正中5个中方格内的红细胞数。,11,12,13,计数原则黑色点为计数点，白色点为不计数点,13,六、操作,6.计算：RBC/L=N/52510201106N1010=N/10010127.报告方式：X.XX1012/L。,14,七、注意事项,1.清洁干燥：保证计数板和血盖片清洁干燥。2.准确：稀释液和血液加样量要准确。3.混匀：加血前和充池前要充分混匀。4.充池：一次性完成充池，不能产生满溢、气泡或充池不足的现象，否则应重新充池。,15,七、注意事项,5.计数：红细胞在计数池中若分布不均，每个中方格之间相差超过20个以上时要重新充池计数。正常参考区间范围内，2次红细胞计数相差不得超过5%。6.计数原则：压线细胞应按照数上不数下、数左不数右的原则，避免漏数或重复计数。,16,保证红细胞计数准确的关键环节是什么？,八、
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