（环境科学专业论文）阿维菌素·毒死蜱在水稻中残留消解动态研究.pdf

4 阿维菌素毒死蜱在水稻中的最终残留量 我国规定毒死蜱在成品粮中的m r l 值= 0 1 m g k g ，但我国没有对阿维菌素作出规 定，即阿维菌素m r l 值参照欧盟标准m r l - o 0 1 m g k g 。在天津大米中，按高剂量 2 7 0a i g h m 2 施药2 次和3 次后，安全间隔期分别为7d 、1 4d 、2 1d 时，大米中的阿 维菌素的残留量为0 0 1 0 8 0 0 2 2 5m g k g ( 0 0 1m g k g ) 和0 0 1 3 8 0 0 2 4 m g k g ( 0 0 1m g k g ) 。按低剂量1 8 0a i g h m 2 施药3 次后，安全间隔期分别为7d 、1 4 d 时，大米中阿维菌素的残留量为0 0 1 7 5 、0 0 1 3 4m g k g ( 0 0 1m g k g ) ，安全间隔期为 2 1 d 时，大米中阿维菌素残留量低于0 0 1m g k g ：按低剂量1 8 0a i g h m 2 施药2 次后， 安全间隔期分别为7d 、1 4d 、2 1d 时，大米中阿维菌素的残留量均小于0 0 1m g k g 。 在天津大米中，按高剂量2 7 0a i g h m 2 和低剂量1 8 0a i g h m 2 各施药2 次和3 次，安全间隔期分别为7d 、1 4d 、2 1d 时，检测到大米中毒死蜱的残留量均低于o 1 m g k g 。 关键词：阿维菌素，毒死蜱，残留消解动态，最终残留量 i i a b s t r a c t i nt h i sp a p e r , t h et e s tm e t h o d so fa v e r m e c t i na n dc h l o r p y r i f o sr e s i d u ei nr i c e ，p a d d y s o i l ，s t r a wc r o pa n dw a t e ra r ee s t a b l i s h e d a n dt h ee s t a b l i s h i m e n to fm e t h o d sh e l p su s i n v e s t i g a t et h ed y n a m i c a n df i n a lr e s i d u ea n dp r o v i d e st h eb a s i sf o r t h es a f eu s eo ft h et w o k i n d so f p e s t i c i d e si nr i c ep a d d yf i e l d a n dt h e s em a i nf i n g d i n g sa r ea sf o l l o w s ： 1 r e s i d u ea n a l y s i sm e t h o d so fa v e r m e c t i n t h e s es a m p l e sa r et r e a t e d b ye x t r a c t i o n ，p u r i f i c a t i o n a n da r et e s t e d b yh i g l l p e r f o r m e n tl i q u i dc h r o m a t o g r a p h ya f t e rd e r i v a t i v e f l u o r e s c e n c ed e t e c t i o n b ya d d i n gt h e s t a n d a r ds o l u t i o no fo 0 1 1m g lt ou n s p i k e dr i c e ，p a d d ys o i l ，s t r a wc r o pa n dw a t e r , t h e s e r e c o v e r yr a t e so fr i c ea r e8 0 1 - - 。9 4 5 w i t hc o e f f i c i e n to fv a r i a t i o no f3 5 6 1 ； t h e s er e c o v e r yr a t e so fp a d d ys o i la r e7 5 1 10 5 9 w i t hc o e f f i c i e n to fv a r i a t i o no f 0 8 - - - - 7 6 ；t h e s er e c o v e r yo fs t r a wc r o pa r e7 7 8 - 8 2 8 w i t hc o e f f i c i e n to fv a r i a t i o n o f1 1 4 9 ；t h e s er e c o v e r yo fw a t e ra r e7 8 9 - - 。1 0 0 2 w i t hc o e f f i c i e n to fv a r i a t i o n o f 2 2 2 8 t h em i n i m u md e t e c t i o na m o u n to fa v e r m e c t i ni nr i c e ，p a d d ys o i l ，s t r a wc r o pa n d w a t e ra r e0 0 4 2n g ，0 0 3 8n g ，o 0 2 8n g ，0 0 7 4n ga n dt h em i m i n u md e t e c t i o nc o n c e n t r a t i o n a r e1 0p g k g ，1 0l 土g k g ，0 5p g k g ，o 0 3 7 5p l 2 r e s i d u ea n a l y s i sm e t h o d so fc h l o r p y r i f o s t h e s es a m p l e sa r et r e a t e di ns e r i e so ft h ee x t r a c t i o n ，p u r i f i c a t i o na n dg a s c h r o m a t o g r a p h yb ya d d i n gt h es t a n d a r ds o l u t i o no f0 1 1o 0m g g lt ou n s p i k e dr i c e ， p a d d ys o i l ，s t r a wc r o pa n dw a t e r , t h e s er e c o v e r yr a t e so fr i c ea r e8 1 4 - - - 101 2 w i 戗l c o e f f i c i e n to fv a r i a t i o no f4 1 6 5 ；t h e s er e c o v e r yr a t e so fp a d d ys o i la r e7 5 3 9 9 7 w i t hc o e f f i c i e n to fv a r i a t i o no f2 3 9 5 ；t h e s er e c o v e r yo fs t r a wc r o pa r e 8 3 5 - - 1 0 5 o w i t hc o e f f i c i e n to f v a r i a t i o no f 2 1 - - 。9 1 ；t h e s er e c o v e r yo f w a t e ra r e 7 9 1 - - 9 1 2 w i t hc o e 伍c i e n to f v a r i a t i o no f1 3 - - 3 4 t h em i n i m u md e t e c t i o na m o u n to fa v e r m e c t i ni nr i c e ，p a d d ys o i l ，s t r a wc r o pa n d w a t e ra r e0 6 5 0n g ，0 4 2 3n g ，o 3 5n g ，0 8 5n ga n dt h em i m i n u md e t e c t i o nc o n c e n t r a t i o n a r e10 0p g k g ，5 0l 上g k g ，10 0p g k g ，0 2 5p g l 3 d y n a m i cr e s i d u ed e g r a g a t i o no fa v e r m e c t i n 。c h l o r p y r i f o s t h ed e g r a g a t i o nt r e n d so f15 a v e r m e c t i na n dc h l o r p y r i f o se ca r ei nl i n ew i t l lt h e f i r s t o r d e rk i n e t i ce q u a t i o n ，b u tt h e s ed e g r a g a t i o nr a t e sv a r yf r o md i f f e r e n tp l a c e s i n t i a n j i n ，t h eh a l f - l i f e so fa v e r m e c t i ni np a d d ys o i l ，s t r a wc r o pa n dw a t e ra r e6 7 5d ，4 4 3d ， i i i 4 5 5da n dt h eh a l f - l i f e so fc h l o r p y r i f o sa r e15 4d ，4 4 9d ，6 5 8d ；i nh e f e i ，t h eh a l f - l i f e so f a v e r m e c t i ni nt h e ma r e3 8 3d ，7 2 8d ，2 5 8da n dt h eh a l f - l i f e so fc h l o r p y r i f o sa r e6 7 0d ， 5 3 6d ，1 3 4d ；i nc h o n g q i n g ，t h eh a l f - l i f e so fa v e r m e c t i ni np a d d ys o i l ，s t r a wc r o pa n d w a t e ra r e6 6 6d ，6 3 9d ，4 7 6d ，a n dt h eh a l f - l i f eo fc h l o r p y r i f o si ns t r a wc r o pi s4 8 8 d ， c h l o r p y r i f o si np a d d ys o i li sn o td e t e c t e d a n di ti nw a t e rd e g r a d e sq u i c k l yb e l o wt h el o d a f t e r7d a y s 4 f i n a lr e s i d u eo fa v e r m e c t i n c h l o r p y r i f o s p e s t i c i d er e s i d u e si nt h ef i n a lr e s u l t ss h o wt h a t ：a c c o r d i n gt ot h en u m b e ra n d c o n c e n t r a t i o no ff a c i l i t i e si ti sd i v i d e di n t os e v e r a lp a r t s ：l o wc o n c e n t r a t i o n ( 18 0a i g h r n z ) f o rt w i c ea n dt h r e et i m e sa n dh i g l lc o n c e n t r a t i o n ( 2 7 0a i g h m 2 ) f o rt w i c ea n dt h r e et i m e s w i t ht h er o u t i n ed o s a g e so f2 7 0a i g h m zf o rt w i c e ，t h e s er e s i d u e so fa v e r m e c t i ni nr i c ei n t i a n j i na r eb e t w e e n 0 010 8a n do 0 2 2 5m e g k ga f t e rt h el a s ta p p l i c a t i o n7d ，14d ，21d ；t h e y a r eb e t e e wo 0 1 3 8a n do 0 2 4m g k gu n d e rt h er o u t i n ed o s a g e so f 2 7 0a i g h m zf o r3t i m e s w i t ht h er o u t i n ed o s a g e so f18 0a i g h m zf o r3t i m e s ，t h e s er e s i d u e so fa v e r m e c t i ni nr i c e i nt i a n j i na r eb e t w e e n0 0 1 3 5a n d0 0 1 3 4m g k ga f t e rt h el a s ta p p l i c a t i o n7d ，1 4da n da r e s a f ea f t e rt h el a s ta p p l i c a t i o n21d ；u n d e rt h er o u t i n ed o s a g e so f18 0a i g h m zf o rt w i c e t h e s er e s i d u e so fa v e r m e c t i ni nr i c ei nt i a n j i na r es a f e ，t o o w i t ht h er o u t i n ed o s a g e so f2 7 0a i g h m za n d18 0a i g h m 2f o rt w i c eo r3t i m e s ， t h e s er e s i d u e so fc h l o r p y r i f o si nr i c ei nt i a n j i na r es a f e k e yw o r d s ：a b a m e c t i n ，c h l o r p y r i f o s ，r e s i d u ed y n a m i c s ，t h e f i n a lr e s i d u e i v 英文缩写 m r l l l e s p e s p m e s f e m a e 认c g p c g c h p l c u v c e a v m g a b a f p d f l d e c d n p d 附录本论文所用缩写词 英文 m a x i m u mr e s i d u el i m i t s l i q u i d l i q u i de x t r a c t i o n s o l i d p h a s ee x t r a c t i o n s o l i d p h a s em i e r o e x t r a c t i o n s u p e r c r i t i c a lf l u i de x t r a c t i o n m i c r o w a v ea s s i s t e de x t r a c t i o n i m m n u o a f f i n i t yc h r o m a t o g r a p h y g e lp e r m e a t i o nc h r o m a t o g r a p h y g a sc h r o m a t o g r a p h y h i 曲- p e r f o r m a n c el i q u i dc h r o m a t o g r a p h y u l t r a v i o l e ta b s o r p t i o nd e t e c t o r c a p i l l a r ye l e c t r o p h o r e s i s a v e r m e c t i n y - a m i n o b u t y r i e da c i d f l a m ep h o t o m e t r i cd e t e c t o r f l u o r e s c e n c ed e t e c t o r e l e c t r o nc a p t u r ed e t e c t o r n i t r o g e n p h o s p h o r u sd e t e c t o r v i i 中文 农药最高残留限量 液液萃取 固相萃取 固相微萃取 超临界流体萃取 微波辅助萃取 免疫亲和色谱 凝胶渗透色谱 气相色谱 高效液相色谱 紫外吸收检测器 毛细管电泳法 阿维菌素 y 氨基丁酸 火焰光度检测器 荧光检测器 电子捕获检测器 氮磷检测器 独创性声明 本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成 果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发 表或撰写过的研究成果，也不包含为获得安徽农业大学或其它教育机构的学位或证书 而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明 确的说明并表示了谢意。 研究生签名： 时间：年月日 关于论文使用授权的说明 本人完全了解安徽农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留 送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复 制手段保存、汇编学位论文。同意安徽农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、 传播学位论文的全部或部分内容。 ( 保密的学位论文在解密后应遵守此协议) 研究生签名： 导师签名： 时间：年月日 时间：年月 1 文献综述 1 1 研究背景 从上个世纪至今，由于农药的大量使用，农药污染问题已成为世界各国密切关注 的焦点。这些污染问题从最早出现的d d t 、六六六等有机氯农药、有机磷农药污染等 到近年来开发的某些生物农药存在难降解、高残留的危险，它们在食品中的残留污染 已经严重影响周围的生态环境和人们的健康【l 】。 卫生部专门调查表明，农药喷晒到蔬菜瓜果中，其在自然环境中，基本降解需要 1 0 0 天1 5 0 天，完全降解可能需要更长的时间，有些农药甚至无法降解。这些残留在 蔬菜和瓜果中的农药通过不断富集在人体中积累。根据世界卫生组织0 7 年公布的调查 报告显示，残留农药若长时间在人体内积累会引发慢性中毒，如帕金森病、心脑血管 病、癌症、糖尿病等疾病。世界卫生组织和世界粮农组织等相关机构甚至在0 4 年告诫 说：农药中毒已成为危害婴儿及中老年人多发性疾病的严重问题。可见，农药残留问 题已经严重影响人们的健康。 农药残留问题影响各国的贸易出口。在我国，出口的农产品中农药残留超标问题 屡见不鲜，一些产品被拒收、扣留、退货、索赔等，这不仅给国家造成经济损失，而 且严重影响了外贸声誉。我国是个农业大国，农产品种类繁多，农残问题已经对农业 的生产产生不利影响。一些国家和地区通过“提高标准、“增加检验检疫项目”、 “变化技术法规 等对我国农产品实施技术性贸易壁垒，这对我国农产品的出口产生 巨大影响。而我国不仅要科学合理使用农药，而且要提高检测农药残留的技术，才能 减少贸易壁垒带来的不利影响。 农药残留除了对人体健康、对国家经济产生影响外，还易造成环境污染。由于不 同农药的理化性质不同，迁移位置也不相同，比如，水溶性强的农药更易进入到水体 中，而脂溶性强的农药更易积累在植物蜡质层和动物脂肪内，蒸气压高的农药易挥发， 更易喷洒到空气中 2 1 。因此，喷晒到农田中的农药可能一部分进入空气中，污染空气； 一部分流入水体，影响水生生物生存；还有一些通过植物叶面等进入植物体内，通过 食物链不断富集些，最终可能会被处于食物链顶端的人类食用，给人体健康带来危害； 一些空气中的农药最后散落到土壤中，有的农药可被微生物降解，降解速度很快，有 的甚至几十年都无法降解【3 - 4 。 为了应对农药残留带来的问题，从上个世纪开始，各国纷纷制定一系列标准，不 断提高农残分析技术，包括制定不同农药在农畜产品中的最高残留量( m r l ) 、建立不 同的前处理技术，如液液萃取【5 1 ( l l e ) 、固相萃取 6 1 ( s p e ) 、固相微萃取 7 ( s p m e ) 、超 临界流体萃取8 1 ( s f e ) 、微波辅助萃取【9 1 ( m a e ) 、免疫亲和色谱1 0 1 ( i a c ) 和凝胶渗透色 谱( g p c ) 等以及农药残留检测手段，包括气相色谱法( g c ) 、液相色谱法( h p l c ) 、毛 细管电泳法( c e ) 等。 我国规定毒死蜱在成品粮中的m r i 值：o 1 m g k g t l2 1 ，但阿维菌素没有标明，试验 中阿维菌素m r l 值参照欧盟标准m r l = o 0 1 m g k g 。本文中着重介绍阿维菌素毒死 蜱乳油在水稻中的测定方法，为国家制定相关标准提供依据。 1 2 阿维菌素在环境和作物中的残留与降解研究进展 1 2 1 阿维菌素及其应用 1 2 1 1 阿维菌素 阿维菌素1 3 1 ( a v m ) 是由日本北里大学大村智等和美i 雪m e r c k 公司首先开发的一 类具有杀虫、杀螨、杀线虫活性的十六元大环内酯化合物，由链霉菌中灰色链霉菌 s t r e p t o m y c e sa v e r m i t i l i s 发酵产生。 分子式：c 4 8 h 7 2 0 1 4 ( b 1a ) c 4 7 h 7 0 0 1 4 ( 1 l b ) 分子量：( 8 7 3 0 9 ) ；( 8 5 9 0 6 ) c a s 登录号：7 1 7 5 1 4 1 2 密度：1 1 6 熔点：1 5 0 1 5 5 ，其溶于甲苯、乙酸乙酯、丙酮、三氯甲烷、乙醇等溶剂，微 溶于正己烷、石油醚 1 4 】，目前，已经鉴定出8 种成分，其结构图如下 o m c 。 i 爪。 1 9 i 2 奄a 图1 阿维菌素分子结构图 f i g 1s t r u c t u r es c h e m eo f a v c r m c c t i n 为了便于认识，通常用a 、b ；1 、2 和a 、b 的组合来表示，由此确定了a l a 、 a l b 、a 2 a 、a 2 b 、b l a 、b l b 、b 2 a 、b 2 b 等8 个同系物 1 5 】，其中b 系比a 系产量大；a 2 溪硭 大于b ，产量最高的是b l a 、b l b 。在毒力方面 16 1 ，不同目标物之间毒力也不同，b 系 对线虫的毒性显著高于a 系：对非消化道的体外线虫b 2 的活力是b 1 的2 倍。所以它的 主要杀虫成分( a v e r m e c t i nb 1 a + b 1 b ，其中b l a 不低于9 0 、b l b 不超过5 ) ，以b l a 的 含量来标定。 研究表明【1 7 】，这8 个同系物对细菌、真菌、一般没有抑制作用，但对牲畜体内的 线虫、昆虫、螨虫有较高的活性，其中，b l 活性最高，b 2 次之，但b 2 对人畜是最安全 的。试验中所用的阿维菌素是以b l 为主的多种同系物存在的混合性物质。 a v m 为生物农药，其主要活性成分为b l ，在杀虫方面，它与其他杀虫剂不同， 本身既不抑制胆碱酯酶，也不抑制虫体内蛋白质、核酸等有机物的合成 1 6 1 。a v m 活 性高的作用机制，可以解释为【l8 】：当神经冲动到达神经末梢时，作为调节运动神经系 统活性神经递质的y 氨基丁酸( g a b a ) ，被神经末梢的细胞膜释放出来，作用于次 级神经元细胞膜或效应器细胞膜，而产生抑制作用，完成神经冲动的传递过程。当 a v m 进入靶标生物体内后，它会对g a b a 产生激动作用，使大量的g a b a 被神经末梢 释放出来，此时g a b a 与次级神经元细胞膜或效细胞膜结合，这样就产生长时间、高 强度的抑制效应，从而达到麻痹、杀死寄生虫的效果。 还有一些解释【1 7 】：比如在低剂量的时候，a v m 可引起与g a b a 系统无关的c l 。1 开 放，其活性主要是a 、仆厦能发生立体选择性反应，调节谷氨酸门控c l 以通道，带负电荷 氯离子大量流入细胞内，使膜电位保持在超极化状态，膜难以极化。比如，在线虫和 节肢动物的体内存在谷氨酸的神经递质，由于a v m 能发生立体选择性反应，调节特 异性谷氨酸门控c l j 通道和g a b a 敏感的c l o 通道，细胞不能兴奋，致使神经传导受 阻，最终引起虫体麻痹死亡。 1 2 1 2 阿维菌素的应用 a v m 早期是应用到兽药方面，如今应用到农药方面的比例逐年提高。近年来， 随着人们生活水平的提高以及对绿色食品的呼唤，a v m 这类生物农药在当前的农药 市场中倍受青睐。一些权威人士甚至预测，2l 世纪将是生物农药的世纪。据报道欧洲 生物农药将从1 9 9 7 年1 亿美元的销售额上升到2 0 0 4 年1 6 9 亿美元【1 3 1 。自从1 9 9 1 年害极 灭( a b a m e c t i n ) 进入我国农药市场以后，a v e r m e c t i s 农药就广泛应用，在我国的害虫防 治体系中占有较重要地位。 目前，它是生物农药市场中最受欢迎和具激烈竞争性的新产品。由于它的作用机 制独特、安全性高，所以该类药物首先被作为一种抗寄生虫药剂应用到牲畜体内外的 寄生虫防澍1 9 】。它具有优异的驱虫活性和安全性，通过阻断虫体神经元之间及节肢动 物神经末梢和肌细胞间的神经冲动传导，使虫体麻痹而死【2 0 】。它具有与目前其他任何 杀虫杀螨剂截然不同的化学结构和作用机理，能够防治对有机磷、除虫菊酯、氨基甲 酸酯等已产生抗性的害虫，并且不会产生交互抗性；它能与其他产品混用，简化施药 3 技术【2 1 1 。 国外研究人员b l o o m 2 2 】报道，a v m 在自然环境中与土壤结合紧密，不易被冲刷 和下渗，在光照条件下或在土壤微生物作用下迅速降解成无活性的化合物，其分子碎 片最终作为碳源被植物和微生物分解利用，没有任何残留毒性。阿维菌素作为一类重 要的抗生素，已经成为一种重要的农用和兽用高效生物源杀虫剂。 1 2 2 阿维菌素在环境中的残留与降解研究进展 a v m 作为农药在农作物、园艺作物中使用广泛，作为兽药在多种家畜中广泛使 用。作为农药使用时，它会随着雨水进入水体，会进入大气，会直接被喷晒到土壤之 中；作为兽药使用时，动物粪便中的a v m 也会随着雨水进入水体，如果这些动物粪 便作为水产动物饲料或水体肥料时，粪便中的a v m 就会直接进入水体 2 3 1 。而这些含 有a v m 进入到环境中的粪便，主要表现在对以粪便为食或在粪便中繁殖的节肢动物 ( 如昆虫、甲虫) 、线虫等有益生物有很强的毒副作用。由于粪便的降解受到一些节 肢动物活动的影响，研究表明幽】，牛粪中含有一定量的a v m ，其牧场中的粪便3 4 0 天未被降解，不含a v m 的粪便中，8 0 天便已经降解完。最重要的是，当这些节肢动 物数量减少后，这条食物链中的高级生物也会受到影响，进而影响到整个生态系统。 a v m 不仅可以直接杀灭昆虫、甲虫的成虫和幼虫，还会影响昆虫、甲虫的生长、 脱皮、变态发育和繁殖，对这些昆虫、甲虫的群体生态有明显影响最终进入水体中的 阿维菌素会对部分水生生物产生明显的毒性【2 5 1 。如a v m 对水生蚤类、虾类和某些 鱼类具有很强的毒性【2 6 1 。进入水体的a v m 通过对敏感的水生蚤类、虾类的影响，可 能会对以这些生物为食的其他生物，如某些鱼类产生影响，继而可能对河流、湖泊， 甚至会对海洋生态系统产生影响。由于a v m 水溶性很低，通常它与土壤、粪便的结 合力比较耐2 7 】。因此，它对水生生物的毒性要小于陆生生物。 在医学上，a v m 作为脂溶性药物，不论以何种途径给药，均能很好地被吸收， 可以广泛的分布于全身组织，但是它在体内持续时间较长，因而消除缓慢【2 5 1 。在一些 特殊的毒性实验中，虽然a v m 素本身并未显示出任何选择性的毒理作用，最大无作 用剂量仅仅为0 2m g k g 2 8 】。但是如果按世界卫生组织五级分级标准，a 仍属于高 毒性化合物。 当a v m 进入到环境中，它会通过不同的环境作用分布到土壤、水和空气中，一 般会通过吸附、水解、光降解和微生物作用等一系列生物化学反应，进而在土壤、水 体、沉积物中重新分配【2 7 】，但不同的农药在环境中降解速率也大不相同，有的几个小 时几乎全部降解，有的甚至几十年也无法降解。由于a v m 易被土壤和沉积物等吸附， 所以在土壤中较稳定，容易造成土壤二次污染，而在水体中，由于阿维菌素本身具有 吸收光子基团的结构，会发生直接光解反应。报道研究，阿维菌素在水体中发生光降 解作用，其降解速率较快【2 9 1 。 4 鉴于阿维菌素残留在环境介质中，会对环境以及人体产生危害。因此，迫切需要 建立一种简单、快捷、准确的方法来判断阿维菌素的残留量是否符合标准，并严格控 制阿维菌素在环境中的残留量，同时也为国家制定相关的农药残留标准，提供准确的 依据。 1 2 3 阿维菌素在作物中的残留与消解动态研究进展 阿维菌素作为农药喷晒到作物上后，通过植物叶面的吸收、通过体内运输，进而 在体内积累，作为食物链顶端的人食用含有过量阿维菌素的农产品会出现各种急性并 发症。目前，a v m 对宿主的急性中毒机制仍不明确，但与药物进入中枢系统有关，中 毒时主要表现为神经症状，如共济失调、震颤、精神沉郁乃至最后死亡 2 7 】。迄今为止， a 尚无特效的解救药物，只能进行对症治疗。所以，阿维菌素在作物中的残留问题 应当引起我们的重视。 由于阿维菌素应用广泛，解决其在作物中的残留问题也成为重中之重。由于需要 从不同的作物中提取阿维菌素，需要建立不同的残留分析方法，包括不同的提取溶剂、 净化方法、检测器、检测条件等。目前，文献报道的前处理方式有所不同，如乙酸乙 酯、二氯甲烷、甲醇、丙酮等提取溶剂均可以用于提取阿维菌素。由于，阿维菌素的 分子量大，极难以净化，无法使用气相色谱仪( g a sc h r o m a t o g r a p h y ，g c ) 检测。在国 内外的报道中，阿维菌素的检测也多采用高效液相色谱法。因为阿维菌素的共轭二烯 结构在入= 2 4 0 - - 2 5 0i l m 处有强烈的紫外吸收【3 0 1 ，可建立液相色谱一紫外检测方法，国 外报道用甲醇和水混合液作为流动相，c 1 8 的反相色谱柱来检测【3 1 1 。另外，高效液相 法根据不同流动相，分为甲醇+ h 2 0 体系【3 2 】、乙腈+ h 2 0 体系【3 3 】、甲醇+ 乙腈+ n 2 0 ( 1 磷酸，1 三乙胺) 体系【3 4 j 等。 在阿维菌素液相分析方法中，h p l c - 紫外检测方法( h p l c u v ) 检测是一种常见的方 法。如张红艳、王玉红【3 5 】等人建立甲醇提取，弗罗里硅土柱净化，紫外检测黄瓜和梨 中的阿维菌素的方法。梁振益 3 6 】等人丙酮提取、液液分配、层析柱净化后，在甲醇 + h 2 0 流动相下，检测蔬菜和水果中残留的阿维菌素，为国家制定相关标准提供依据。 高国文等人【3 7 】发现按照国标方法提供的流动相检测，能够将阿维菌素a 体和b 体分得很 开，但要求1 0 0m g k g 浓度以上才能有很好的响应，不适合残留检测，通过改变流动 相比例，在紫外条件下，检测大白菜中的阿维菌素残留量，取得预期结果。但是由于 紫外检测选择性不高，易受样品杂质的影响，通常对某些样品基质进行分析时，需要 大量繁琐的前处理过程【3 踟。 除了紫外检测外，近年来发展起来的h p l c 荧光检测、法【3 9 - 4 1 ( h p l c f l d ) 越来越 多的应用到实际样品分析中来，荧光法是利用物质能够发射荧光的特性，在一定的发 射波长和吸收波长条件下，利用液谱进行分析检测的一种手段。一般来说，荧光法适 合样品量很少或者浓度很低的痕量分析。但阿维菌素本不具有共轭结构。实验中，通 常加入n 甲基咪唑和三氟乙酸酐为衍生化试剂在脱水状态下与阿维菌素反应生成能 够发射荧光的物质【4 2 】。但衍生化的时间不能太长，否则测定的阿维菌素含量就会比实 际含量低很多【4 3 1 。j a n i c eac 采用乙腈、水和环已烷混合液对苹果样品进行提取，用 c 1 8 s p e 净化【4 4 】；h d e s e r e n s 等采用乙腈为提取剂，后经c 1 8s p e 柱净化【4 5 】处理。谢显 传【4 6 】等人简化步骤，优化柱前衍生高效液相色谱法测定果蔬产品阿维菌素及其有毒代 谢物的残留量的方法。马育松】等人用乙腈、水和三乙胺混合液提取水果中的阿维菌 素；张少华【4 7 】等用乙腈提取，甲醇和水作为流动相，荧光检测阿维菌素在葱中的含量。 除上述紫外法和荧光法之外，还有液相色谱质谱检测方法( h p l c m s ) 和免疫分 析方法等。据报道h o w e l l s ；g l s a n d 4 s 】等人以大气压化学电离一质谱( a p c i m s ) 方法测 定了阿维菌素、伊维菌素、多拉菌素、阿普里诺菌素和莫西菌素的残留。g i a n e l l 掣4 9 】 以电子轰击离子化质谱( e l - m s ) 方法检测了伊维菌素残留。而免疫分析方法中的核心 试剂是抗体，如何制备抗体成为这种方法的关键和难点【5 0 】。 为了研究阿维菌素在作物中的动态消解过程。陈勇达等【5 l 】报道了在不同施药条件 下，1 5 阿维菌素乳油在黄瓜上的低残留性质；谢显传【5 2 】等人比较在露地和大棚条 件下，阿维菌素在西蓝花和甘蓝中的残留消解动态，结果表明，阿维菌素在大棚条件 下使用时，在蔬菜作物上的起始浓度( c 0 ) 均明显大于露地条件的相应值，它们比在露 天条件下更难降解，降解半衰期更长。他同时也对草莓、小青菜等代表性作物动态消 解过程进行分析，认为阿维菌素在一定剂量下是安全的，同时也对存在的问题提出解 决方案。阿维菌素在作物中的消解动态表明，该药的降解速率较快，最终残留量基本 低于作物中的最高残留量，按推荐量使用时是安全的。 1 3 毒死蜱在环境与作物中的残留与消解动态研究进展 1 3 1 毒死蜱及其危害 1 3 1 1 毒死蜱 毒死蜱是美国d o w 化学公司于1 9 6 5 年首先开发的产品，是一种高效、广谱、毒 性低的有机磷杀虫杀螨剂。2 0 多年应用证明，使用浓度没有增加，害虫对它基本无抗 药性【5 3 1 。据报道，欧盟每年使用5 0 0 0 0 吨，美国每年使用5 0 0 0 0 0 0 吨【”】。 毒死蜱( c h l o r p y r i l o s ) 又称乐斯本、氯吡硫磷，属于有机磷农药。 分子式：c 9 h l l c l 3 n 0 3 p s ，其有效成分是o ，o 二乙基o 3 ，5 ，6 一三氯2 吡啶基硫逐 磷酸酯。 分子量：3 5 0 5 。 原药为白色结晶固体，溶点4 2 5 4 3 ，2 5 时饱和蒸汽压2 4 1 0 dp a ，2 5 时水中的溶解度为2m g l ，丙醇中为6 5 0g l ，苯中为1 9 0g l ，二甲苯中为4 0 0m g l ， 甲醇中为4 5g l 。一般来说，它不溶于水，易溶于苯、乙醚等一些有机溶剂。 6 毒死蜱( c h l o r p y r i f o s ) 主要通过触杀、胃毒及熏蒸3 种作用方式控制害虫，属于中 等毒性的农药，对水稻、小麦、棉花、蔬菜等中的多种害虫有划5 5 】。它在动物体内能 够迅速降解，而对水生生物毒性较大，因而它对水生生物的毒性要超过陆生生物。 毒死蜱属于有机磷农药，而有机磷这类农药是世界上应用最广泛的杀虫剂之一， 虽然它毒性并非最强，但如果它被人体吸收后，会对机体产生很强的毒型5 6 】。它主要 分布在肝脏、脾脏、肾脏等血流量较高的器官中。经过生物代谢，大多数以原形和代 谢物形式由尿排除，少量通过粪便排泄 5 7 1 。它不仅可以抑制胆碱酯酶的活性，还可以 阻断植物的光合作用。 1 3 1 2 毒死蜱的危害 不过最近也有一系列的研究认为它还可直接影响核蛋白的复制和分离。毒死蜱和 其他有机磷农药有所不同，它在一定浓度范围内一般不会产生迟发性神经毒性，故它 具有相对安全。最近也有现象表明，它作为家庭卫生用药，对胎儿的发育和婴儿的成 长有很大的威胁。比如，美国有个别报道称 5 8 1 ，怀孕3 个月的母亲接触毒死蜱后，影 响胎儿的发育，其生长发育有滞后性。虽然毒死蜱影响胎儿性器官的分化，但大鼠、 小鼠实验均证明其无致畸性【5 9 1 。在毒死蜱对大鼠的研究实验中，实验对象的大脑与小 脑在摄入亚致死量后，十几天会出现变化，这可能与细胞增殖分化期转录因子的多重 改变有关l 6 0 j 。还有些学者认为，毒死蜱的毒力作用是通过和腺氨酸循环中的转运蛋白 交互作用胆碱能受体，并对细胞增殖和分化产生抑制作用【6 1 1 。 毒死蜱虽然作为一种高效、低毒、广谱性杀虫剂，但它停留在环境中，极易造成 对水体、大气、土壤以及动植物的危害。吴长兴、王强【6 2 】等人根据风险性等级划分标 准，研究毒死蜱对欧洲玉米螟、赤眼蜂的预蛹期为极高风险性，毒死蜱对欧洲玉米螟 赤眼蜂和玉米螟赤眼蜂的成蜂都为极高风险性。它的不合理使用可能会导致农药残留 在农畜产品中，通过富集作用，影响人们的健康和生态环境【6 3 】。 1 3 2 毒死蜱在环境与作物中的残留与消解动态研究进展 毒死蜱容易散播到庄稼和土壤中【6 4 1 ，加上生产量大、稳定性好等特点，使得在它 对环境产生潜在的危害，如通过渗透作用，进入到表层水、地下水等【6 5 】。岳永德等【6 6 】 人研究，毒死蜱进入环境中，无论是在叶面、土壤、水体还是大气，均会受到太阳辐 射，而发生光化学降解，但是它的半衰期比较长，降解速度缓慢。毒死蜱一般不会直 接作用于水体，但农药通过一系列环境介质，进入到水体中，这样就会严重影响水体 质量。在开放性的水体中，毒死蜱的浓度与持久性主要是根据剂型的不同而有所差异 【6 7 】。另外，水体中的毒死蜱降解的速率与受环境中各种因素的影响，以及初始浓度的 影响。在土壤中的颗粒物能够强烈吸附毒死蜱农药，不易水解。在土壤中，它的稳定 性好，并且在土壤中表现出适当的流动性和持久性【6 8 】。文献报道，它属于不移动至不 易移动的农药【6 9 】，李界秋【_ 7 0 】等人研究土壤中毒死蜱的迁移大小。结果表明，植物可 7 从土壤或水体中富集毒死蜱，植物富集毒死蜱就具有毒性，毒死蜱是否会对人体产生 长期效应，特别是对儿童的影响【7 1 】，目前受到普遍的关注。这些需要做长期的流行学 调查研究，才能了解毒死蜱对人体的长期影响。 由于社会对生态、环境安全性要求的提高，农药加工和使用技术的研究亦受到普 遍重视，并在提高药效、节省用药、使高毒品种低毒化、减少污染、保护环境和生态、 延长药剂的使用寿命等诸方面都提出了更高的要求m 】。为了能够更好的了解这种有机 磷农药，文献报道检测毒死蜱的不同残留分析方法。一般来说，气相色谱仪( g c ) 作为主要测定手段。常用检测器的是e c d 检测器、f p d 检测器、n p d 检测器等。张 恰、张宗山 。7 2 】等人研究毒死蜱在枸杞中的残留方法，用丙酮提取，f p d 检测枸杞中 毒死蜱的方法。陈炳坤、万莉【7 3 】等人研究毒死蜱在花生以及土壤中的残留分析方法， 用乙腈提取，丙酮定容，f p d 检测器。袁玉伟、司朝光【7 4 】等人研究毒死蜱在甘蓝中 的残留分析，用乙腈提取，正己烷定容，e c d 检测器检测。安艳萍、马明东【7 5 】分析 测定毒死蜱纯度的方法，他们以正二十四烷为内标物，三氯甲烷为溶剂来分析毒死蜱 的含量。 为了进一步研究作物中的毒死蜱在作物与环境的影响，张金虎、赵政阳【7 6 】等人研 究苹果果实、叶片中的毒死蜱残留与动态消解。叶鹏、方元伟【77 】等人对速冻蔬菜中的 毒死蜱进行了分析研究。黄素芳、朱育掣7 8 】等研究毒死蜱在蕹菜以及土壤中的分析方 法。喻龙、李光义【_ 7 9 】等人通过对5 种蔬菜中添加毒死蜱标样的回收率试验，研究蔬菜 毒死蜱监测方法中震荡提取时间、淋洗液配比、层析硅胶用量、淋洗液选择时间等关 键步骤的最佳定量组合。冯秀琼、唐庆勇【8 0 】等人用微波辅助法从果蔬中提取1 4 种有机 磷农药。动态研究表明，毒死蜱降解较慢，半衰期一般比较长。 无论是高毒有机磷农药还是中低毒农药，要想降低它对人体的危害性。就要在其 生产和使用过程中，加强安全意识，增加防护措施，对于进入到环境中的毒死蜱，要 建立高效、便捷、准确的分析检测方法，才能更好的了解这种农药在环境中的迁移、 降解等作用机理，合理施用、降低污染。 1 4 阿维菌素与毒死蜱复配农药的应用 在农业生产中，稻飞虱、