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文档简介
实验诊断,实验诊断(laboratorydiagnosis)是指运用物理学、化学和生物学等实验技术,对患者的血液、体液、分泌物、排泄物及组织细胞等进行检验,以获得病原体、病理变化及脏器功能状态等资料,从而协助临床诊断、观察病情、制定防治措施和判断预后的诊断方法。,1,学习目的,1.正确选择实验项目2.正确评价实验结果,2,血液一般检验,3,血液组成及与机体组织的关系,血液=血细胞+血浆血细胞=RBC+WBC+Plt血浆=水分+固体成分(蛋白、无机盐、激素、维生素、代谢产物)占体重的7%-9%,60-80ml/kg体重,成人约5LPh7.35-7.45,比密1.050-1.060,相对粘度45,血浆渗透压为290310mOsm/kgH2O。,4,第一节红细胞检查,5,红细胞的生成除主要受Epo调节外,也直接或间接地受睾丸激素及其他神经体液因素的调节,6,7,8,一、红细胞计数(RBC),【参考值】成男:(4.05.5)1012/L成女:(3.55.0)1012/L新生儿:(6.07.0)1012/L,9,【临床意义】、生理性变化年龄与性别的差异:精神因素:剧烈体力运动和劳动:气压降低:妊娠中、后期,6个月2岁的婴幼儿,老年人。,10,、病理性变化(1)RBC和HGB减少:即贫血。临床上根据血红蛋白减低的程度将贫血分为4级:轻度,血红蛋白低于参考值低限但90g/L;中度,6090g/L;重度,3060g/L;极重度,30g/L。贫血按病因分为RBC生成障碍、过度破坏、造血原料不足和丢失4大类。a.急性、慢性RBC丢失过多b.RBC寿命缩短:溶血c.造血原料不足:缺铁、维生素B12、叶酸,继发于其他疾病的不足,药物原因引起的不足。d.BM造血功减退:药物、物理因素、某些疾病导致体内有毒物质潴留、原因不明。,11,E.生理性减少:孕妇、婴幼儿、部分老年人均可有红细胞及血红蛋白减少,称为生理性贫血。,12,(2)、RBC增多a.原发性RBC增多症:b.继发性RBC增多症:机体缺氧红细胞生成素代偿性增加所致:心血管病、肺疾病、红细胞生成素非代偿性增加:见于某些肿瘤如肝细胞癌、卵巢癌、肾癌、肾胚胎瘤等。c.相对性RBC增多症:体内水分丢失。,13,二、血红蛋白测定血红蛋白(Hemoglobin,Hb或HGB),14,Hb的代谢RBC衰老破坏后释放出的Hb分子被单核-吞噬细胞系统细胞降解为铁、珠蛋白和胆色素。铁进入铁代谢池供机体重新利用;珠蛋白被分解为氨基酸参与氨基酸循环;胆色素经肝脏代谢后随粪便和尿液排出体外。,15,【参考值】成年男性:120160g/L成年女性:110150g/L新生儿:170200g/L,16,【临床意义】:基本同RBC计数。但对贫血程度的判断上优于红细胞计数。以下两种情况值得注意:在某些病理情况下,Hb和RBC的浓度不一定能正确反映全身红细胞总容量的多少。大量失血(主要是血容量的缩小,血浓度变化很少,从Hb等数值上很难反映出贫血的存在)、水潴留(血浆容量大,红细胞容量正常,但红细胞浓度低,表面看有贫血)、失水(血浆容量小,浓度偏高,即使有贫血也看不出)大细胞贫血或小细胞低色素性贫血,二者浓度不成比例。,17,三、RBC形态检查各种病因可作用于RBC生理进程的不同阶段,从而引起RBC相应的病理变化,导致某些类型贫血的RBC产生特殊的形态变化。此种形态学改变包括RBC大小、形态、染色和内涵物的异常。RBC形态检查与Hb、RBC计数结果相结合可粗略地推断贫血原因,对贫血的诊断和鉴别诊断有很重要的临床价值。,18,【参考值】瑞氏染色:双凹圆盘形,细胞大小相似,平均直径7.5m(直径范围69m);淡红色,中央1/3为生理性淡染区;胞质内无异常结构。,19,【临床意义】RBC形态变化表现在以下四方面:1、RBC大小不一:小RBC、大RBC、巨RBC、RBC大小不均。2、RBC内血红蛋白含量改变:正常色素性、低色素性、高色素性、多色性、细胞着色不一。3、RBC形态改变:球形、椭圆形、靶形、口形、镰形、棘形、新月形、泪滴形、缗钱状、裂RBC、RBC形态不整、有核RBC。4、胞内出现异常结构:嗜碱性点彩、豪焦小体、卡波环、寄生虫。,20,小RBC:10m,染多色性或含有嗜碱性点彩,巨幼贫,溶贫,恶性贫血。,22,巨RBC:15m,缺乏叶酸及维生素B12巨幼贫,23,RBC大小不均:相差一倍以上,严重的增生性贫血,尤为巨幼贫为最明显。,24,25,正常色素性:淡红色圆盘状,中央有生理性浅染区。正常人,急性失血、再障、白血病。,26,低色素性:淡、扩大;缺铁、珠蛋白、铁粒幼。,27,高色素性:深、消失;巨幼贫。,28,多色性:未成熟、灰红或淡灰;溶贫、失血性贫血。,29,30,31,32,33,34,35,36,37,有核RBC只存在于正常成人骨髓中,见于外周血涂片上即为病理现象。多见于溶贫、急、慢性白血病及红白血病、骨纤、脾切除术后。,38,简称点彩红细胞,指在瑞氏染色条件下,成熟红细胞或幼红细胞的胞质内出现形态不一的蓝色点状物,即核糖核酸(RNA),属于未完全成熟红细胞,其颗粒大小不一、多少不等。多见于重金属中毒,常作为铅中毒诊断筛选指标。,39,40,41,四、血细胞比容测定(Hct)概念:以前称红细胞压积(PCV),是指在一定条件下经离心沉淀压紧的红细胞在全血标本中所占体积的比值。,42,【参考值】Wintrobe法:男性0.400.50;女性0.370.47。【临床应用】主要用于RBC平均指数的计算,有利于贫血诊断和分类;可以评估血浆容量有无增减或稀释浓缩程度,有助于某些疾病治疗中补液量的控制,以及了解体液平衡情况。血细胞比容增加见于真性红细胞增多症和各种原因所致血液浓缩(如脱水、大面积烧伤)。测定血细胞比容可了解血液浓缩程度,作为计算补液量的参考。血细胞比容减少见于贫血和稀血症。,43,五、RBC平均指数,44,【参考值】手工法:MCV8092fl;MCH2731pg;MCHC320360g/L;血液分析仪法:MCV80100fl;MCH2734pg;MCHC320360g/L。【临床意义】作为贫血形态学分类的依据。红细胞3个平均值只是表示红细胞总体的平均值,正常细胞性贫血并不意味着患者的红细胞形态就无改变。它的使用有一定的局限性,必须进行血涂片红细胞形态观察才能得出较为准确的诊断。,45,贫血形态学分类,46,六、网织红细胞计数概念:Ret,是晚幼红细胞脱核后到完全成熟红细胞间的过渡细胞,其胞质中残存嗜碱性物质核糖核酸(RNA),经煌焦油蓝等活体染色后,嗜碱性物质凝聚成蓝色颗粒,颗粒与颗粒连缀成线,线连接成网,故而得名。【检测原理】1、普通光学显微镜法:活体染色后推片镜检2、网织细胞计数仪法:荧光染色后用流式细胞术计数,47,【参考值】成人:0.0050.015,新生儿:0.020.06。,48,【临床意义】网织红细胞计数是反映骨髓造血功能的重要指标。1、判断骨髓红细胞造血情况:溶贫(可增至68%,急性20%左右,严重者可达50%)、急性失血;:再障。2、观察贫血疗效缺铁贫、巨幼贫治疗中,如则有效;不增高,无效或需进一步检查。3、骨髓移植后监测骨髓造血恢复,49,七、红细胞沉降率测定红细胞沉降率(ESR):简称血沉,是指离体抗凝血静置后,红细胞在单位时间内沉降的速度。体内红细胞能保持悬浮稳定性,离体后由于红细胞比重较血浆大,能自然下沉。,50,【影响因素】1、血浆中各种蛋白的比例:Fbg、球蛋白、球蛋白、胆固醇、甘油三脂;:白蛋白、卵磷脂。2、红细胞数量和形状数量:红细胞少血沉快,太少反而减慢,红细胞多血沉减慢;红细胞直径和形状:直径愈大血沉愈快,球形细胞、镰形细胞不易聚集,因而血沉减慢。3、血沉管与管沉架血沉管立于血沉架上必须完全垂直。另外,血标本、温度、标本放置时间等均可影响血沉测定。,51,【参考值】魏氏法:男性015mm/h,女性020mm/h,52,【临床意义】ESR是较为常用而缺乏特异性的试验,但对判断机体有无感染、组织损伤、坏死或某些疾病有无活动、进展、恶化及肿瘤浸润、播散、转移等都的一定的价值。常作为疾病是否活动的监测指标。1、血沉增快生理性:常见于妇女经期、妊娠3个月以上、老年人等。病理性:各种炎症、损伤及坏死、恶性肿瘤、高球蛋白血症、贫血、高胆固醇血症。2、血沉减慢意义不大,53,第二节白细胞检查,54,中性粒细胞(neutrophil,N)粒细胞嗜酸性粒细胞(eosinophil,E)(granulocyte,GRAN)嗜碱性粒细胞(basophil,B)白细胞(whitebloodcell,淋巴细胞WBC)(lymphocyte,L)单核细胞(monocyte,M),55,白细胞计数:是测定单位体积血液中各种白细胞的总数。有显微镜法和血液分析仪法两种方法。,一白细胞计数,56,【参考值】成人:(410)109/L,新生儿:(1520)109/L,6月2岁:(1112)109/L【临床意义】与中性粒细胞变化有相关性,意义差不多。,57,二、白细胞分类计数(differentialcount,DC),58,概述:将血液制成涂片,经染色后在油镜下进行分类,求得各种类型白细胞的比值(百分率)。方法有两种:传统显微镜分类法、血液分析仪分类计数法。,59,【参考值】成人%中性杆状核粒细胞(Nst)15中性分叶核粒细胞(Nsg)5070嗜酸性粒细胞(E)0.55嗜碱性粒细胞(B)01淋巴细胞(L)2040单核细胞(M)38,60,【临床意义】(一)中性粒细胞,61,中性粒细胞动力学,62,分裂池(mitoticpool):原粒、早幼粒、中幼粒,可合成DNA,能分裂成熟池(maturationpool):晚幼粒、杆状核贮备池(storagepool):部分杆状核、分叶核,成熟后在贮备池中停留35d,其数量约为外周血的520倍。在机体受到感染和其他应激反应时,可释放入循环血液,正常只释放杆状和分叶核,病情严重时,少量晚幼粒也能入血。循环池(circulatingpool):一半随血液而循环边缘池(marginatingpool):半数粘附于微静脉血管壁,边缘池与循环池处于动态平衡,可随时互换,在多种因素作用下均能由一方进入另一方。,63,1、N增多中性分叶核粒细胞70%,绝对值7109/L(1)、生理性增多年龄:新生儿WBC较高,N占绝对优势,到69天N与L大致相等,以后L上升,婴儿期L较高,可达70%。23岁后L下降,N上升,45岁N与L基本相等,形成N与L的两次交叉,青春期与成人基本相同。日间变化:安静、休息低;活动、进食高;晨低下午高。运动、疼痛、情绪:均可增高妊娠与分娩:增高,64,(2)病理性增多a反应性增多机体对各种病因刺激的应激反应,动员骨髓贮备池中的粒细胞释放或边缘池粒细胞进入血循环。增多的粒细胞大多为成熟的分叶核粒细胞或较成熟的杆状核粒细胞。急性感染或炎症:最常见原因,化脓性球菌最明显,杆菌(大肠b、绿脓b)真菌、放线菌、病毒(流行性出血热、流行性乙型脑炎、狂犬病)、立克次体(斑疹伤寒)、螺旋体(钩体、梅毒)、寄生虫(肺吸虫)。增高程度与病原体种类、感染部位和程度以及机体的反应性等有关。局限轻度感染,WBC,N轻度;中等程度,WBC(1020)109/L,N,核左移;严重全身,WBC(2030)109/L,N明显,明显核左移及中毒改变;感染中毒性休克,WBC不高反低,很明显的核左移。,65,广泛组织损伤或坏死:严重外伤、手术创伤、大面积烧伤、冻伤以及血管栓塞(心肌梗死、肺梗死)所致局部缺血性坏死等使组织严重损伤者,在1236h内WBC增高,以Nsg增多为主。急性溶血:缺氧、分解产物刺激BM贮备池粒细胞释放急性失血:大出血,WBC12h内迅速上升,达(1020)109/L,主要是Nsg增多。内出血(消化道大出血、脾破裂、输卵管妊娠破裂)更显著。急性中毒:外源性(化学物质、药物如汞、铅、安眠药;生物毒素如昆虫毒、蛇毒;植物毒素如毒蕈中毒)、内源性(尿毒症、糖尿病酮症酸中毒、子痫、内分泌疾病危象),以Nsg为主。恶性肿瘤:非造血系恶性肿瘤(刺激释放、产生促粒细胞生成因子、破坏释放调控),WBC持续增高,以Nsg增多为主。其他:RF、自免溶贫、痛风、严重缺氧;应用皮质激素、肾上腺素、氯化锂等。,66,b异常增生性增多造血干细胞克隆性疾病,造血组织中粒细胞大量增生,见于粒细胞白血病和骨髓增殖性疾病;主要是病理性粒细胞(如白血病细胞)的原始或幼稚细胞大量增生,释放至外周血。白血病:急性白血病以幼稚白细胞增多为主,增高的幅度不是很大,甚至有可能减低;慢性白血病以成熟的白血病细胞增高为主,增高幅度大。骨髓增殖性疾病:真红、原发性血小板增多症、骨纤。除了一种血细胞成分的增多外,常伴有其他一种或两种血细胞的增生。,67,2、中性粒细胞减少N10%,少数晚幼及中毒性改变,严重感染;重度左移WBC明显,N明显,Nst25%,出现更幼稚的粒细胞,常见于粒白或N型类白。退行性左移:核左移+WBC,再障、粒减骨髓造血功能减低,粒细胞生成和成熟受阻;严重感染(伤寒、败血症)机体反应低下,骨髓释放粒细胞的功能受阻。(2)、核右移:N分叶5叶以上者超过3%称之。常伴有WBC减低。缺乏造血物质、DNA减低或BM造血功能减退。见于营养性巨幼细胞性贫血、恶生贫血,应用抗代谢药物治疗,炎症恢复期。疾病进行期突然出现核右移,表示预后不良。,70,(1)、核左移:外周血中Nst增多或(和)出现晚幼粒、中幼粒、早幼粒等细胞时称为核左移。,71,72,73,(二)淋巴细胞1、淋巴细胞增多外周血L绝对值成人4109/L、4岁以上儿童7.2109/L、4岁以下儿童9109/L的一种征象。(1)生理性增多儿童期(2)病理性增多病毒、细菌所致的急性传染病,如风疹、流行性腮腺炎、传淋、传单(EB病毒)、百日咳;慢性感染,如TB;肾移植术后;白血病,如淋巴细胞性白血病、白血性淋巴瘤。2、淋巴细胞减低接触放射线、应用肾上腺皮质激素或促肾上腺皮质激素、严重化脓性感染(相对下降),74,(三)嗜酸性粒细胞计数嗜酸性粒细胞的生理功能:抑制嗜碱性粒细胞和肥大细胞合成与释放活性物质,吞噬其释出颗粒,并分泌组胺酶以破坏组胺,从而起到限制过敏反应的作用。【参考值】成人(0.050.5)109/L,75,【临床意义】1、E增多成人外周血E0.5109/L(1)寄生虫病血吸虫、华支睾吸虫、肺吸虫、丝虫、包虫、钩虫感染。(2)变态反应性疾病支气管哮喘、坏死性血管炎、药物过敏、荨麻疹、血管神经性水肿、血清病、异体蛋白过敏、枯草热。(3)皮肤病湿疹、剥脱性皮炎、天疱疮、银屑病。(4)血液病慢粒、真红、多发性骨髓瘤、嗜酸性粒细胞白血病(5)某些恶性肿瘤肺癌(6)某些传染病猩红热(7)其他风湿性疾病等,76,2.嗜酸性粒细胞减少(eosinopenia):见于伤寒、副伤寒、应激状态(如严重烧伤、急性传染病的极期)、休克、库欣综合征等。,77,嗜碱性粒细胞(basophil,B)嗜碱性粒细胞增多(basophilia)可见于慢性粒细胞白血病、嗜碱性粒细胞白血病、转移癌、骨髓纤维化、过敏性疾病等。其减少一般无临床意义。,(四)嗜碱性粒细胞,78,(五)单核细胞,单核细胞增多(monocytosis)见于:生理性:2周内婴儿可达0.15或更多;儿童平均为0.09。某些感染:如感染性心内膜炎、活动性结核病、疟疾及急性感染的恢复期。某些血液病:如单核细胞白血病、粒细胞缺乏症恢复期、多发性骨髓瘤和淋巴瘤等。,79,四、白细胞形态检查【临床意义】1、正常血细胞形态(教材、实验课、工作中掌握)2、异常白细胞形态主要是指N和L的异常改变。遗传性、感染、中毒、放射性或造血系统恶性病变等因素是白细胞形态改变的常见原因。(1)N包括毒性变化、巨多分叶核、棒状小体以及其他的异常形态。a、毒性变化:严重传染病、化脓性感染、中毒、恶性肿瘤、大面积烧伤,包括细胞大小不等、中毒颗粒、空泡、球形包涵体、退行性变。,80,81,大小不等:病程较长的化脓性炎症,N大小悬殊,内毒素作用下骨髓前期细胞发生顿挫不规则分裂所致。,82,中毒颗粒:比正常中性颗粒粗大,大小不等,分布不均
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