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文档简介
豚鼠过敏试验Theguineapigallergictest,病原生物学与免疫学教研室sqjcbwmTel:03733831083,1,掌握豚鼠过敏实验的原理;,一、实验目的,熟悉超敏反应的分类。,2,二、原理,3,速发型超敏反应,细胞毒型超敏反应,免疫复合物型超敏反应,迟发型超敏反应,4,型超敏反应又称为速发型超敏反应,是由特异性的IgE抗体介导的,其主要特征为:出现快,消退也快;出现功能紊乱性疾病,不出现严重组织细胞损伤;有明显个体差异和遗传背景。,5,6,静息肥大细胞,激活后5分钟,激活后60分钟,7,荨麻疹,哮喘病发作患儿,8,先给豚鼠注射小量异种蛋白,经过一定的潜伏期,动物处于致敏状态。当第二次用较大剂量相同抗原注射豚鼠时,抗原激发豚鼠体内的肥大细胞或嗜碱性粒细胞,致使这些细胞释放多种生物活性介质,豚鼠迅速产生严重的过敏反应及至过敏性休克或死亡。,9,1.豚鼠:体重200g左右的幼小豚鼠;2.变应原:马血清、鸡蛋清;3.其他:生理盐水、无菌注射器、针头、碘酒、酒精、棉球等。,三、主要实验材料,10,四、实验步骤,1.取豚鼠三只,编号标记;抓取方法:先用右手掌轻轻扣住豚鼠背部,抓住其肩胛下方,以拇指和食指抓住颈部将其轻轻提起。,11,2.致敏:按1:10分别稀释马血清,按照下表操作腹腔注射0.1ml。,第一次注射,1,2,3,马血清,生理盐水,马血清,12,13,3.发敏:按1:10分别稀释马血清,鸡蛋清,按照下表,心内注射2ml。,2-3周后第二次注射,1,2,3,鸡蛋清,马血清,马血清,14,15,豚鼠1在注射马血清1-5分钟会出现不安、抓鼻、喷嚏、呼吸困难、竖毛、大小便失禁、痉挛性跳跃,症状严重者在数分钟内死亡。而豚鼠2、3无任何症状。,五、结果判断,12/17/2019,16,17,将死亡豚鼠解剖,可见肺脏极度水肿,胀满整个胸腔。,18,1、心脏注射时,首先要固定好动物,然后于心跳最明显之处进针,感觉有搏动、注射器内有回血时再注射过敏原;2、由于动物个体反应性不同,有的反应较轻,可幸免死亡。如果再注射马血清也不出现反应,此称为脱敏状态。但脱敏状态是暂时的,大约2周
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