拟除虫菊酯类农药研究现状论文.doc

贵阳学院毕业论文1 前言1.1 研究概况1.1.1 拟除虫菊酯类农药研究现状有些拟除虫菊酯类的品种有致癌、致畸、致突变等作用，给生态环境、农产品的质量以及人身体健康带来严重的威胁。拟除虫菊酯类、有机磷类、氨基甲酸酯类是并驾齐驱的三大农药，具有选择性强、用量低、防效高等特点，被广泛应用在农业生产及卫生害虫方面的控制。随着有些高毒有机磷农药被禁应用后，拟除虫菊酯类农药被作为有机磷农药的主要替代品之一，由于拟除虫菊酯类农药的使用量和施用频率的逐渐加大，导致拟除虫菊酯类农药成为污染水体质量、食品安全及环境的重要因素。拟除虫菊酯类杀虫剂具有稳定的性质，不容易被光分解，没有特殊臭味以及安全系数比较高，使用浓度低，触杀能力较强，灭害害虫的速度快，残效时间长等优点。但是拟除虫菊酯类杀虫剂被广泛使用后，也带来了环境污染及食品安全等方面的问题。拟除虫菊酯类农药的使用在粮食、蔬菜和果树等农作物中的残留，对我国农产品的出口率和国际竞争力具有严重的影响。1.1.2 甲氰菊酯农药研究现状甲氰菊酯农药作为一种广谱、高效的拟除虫菊酯类杀虫剂、杀螨剂，一直以来被认为是一种安全有效的农业虫害的防治药剂，从20世纪80年代以来，由于甲氰菊酯农药具有高效、低毒，在土壤中不易移动、难以挥发等特点，所以常被广泛用于防治粮食、蔬菜、甘蓝、苹果、柑橘、茶叶、棉花等多种作物的害虫，是一种应用最广泛的拟除虫菊酯类农药。但是甲氰菊酯农药的残留会造成环境与食品的污染，特别是对家蚕以及鱼类等生物具有高毒，并可以在鱼体中储存和积累，从而影响农产品的质量及人的身体健康，所以引起人类的大量关注。甲氰菊酯农药化学名称-氰基-3-苯氧基苄基-2,2,3,3-四甲基环丙烷酸酯，又叫灭扫利。对鳞翅目、同翅目、半翅目、双翅目、鞘翅目等多种害虫防治有效，并且对多种害螨的成螨、若螨和螨卵具有一定防治的效果，可用于防治虫、螨。甲氰菊酯农药对一些农作物具有促进生长、产量的增加、品质的改善、触杀及驱避的作用。但是各类田间药效实验结果表明，使用甲氰菊酯农药后，只有5%左右的农药被利用去杀死害虫，而95%的农药残留在水体、土壤和农业生态系统中，残留在生态系统中的农药会通过食物链的富集化，最终进入生物体中，那么对人类的生活以及人类的身体健康具有十分严重的影响。1.2 国内外研究进展1.2.1 菌株的研究国外报道的菌株有芽孢杆菌属(bacillus)、假单胞菌属(pseudomonas )和沙雷氏菌属(se rratia)等，然而国内则只在产碱菌属的一些菌株有报道。洪源范等从农药厂废水处理池的活性污泥中分离得到鞘氨醇单胞菌属（sphingomonassp.），并且该菌株能以甲氰菊酯为唯一碳源生长的细菌。张松柏等从长期使用氯氰菊酯的土壤中分离得到kurthia sp.，并且是对氯氰菊酯降解潜力最高的菌株。张松柏等从农药厂污泥中分离到一株能降解甲氰菊酯的沼泽红假单孢菌（rhodopseudomonas palustris），该菌以共代谢方式降解甲氰菊酯农药，张松柏等已曾对沼泽红假单孢菌（rhodopseudomonas palustris）报道过。罗源华等从某农药厂污泥中筛选分离出一株高效降解甲氰菊酯的光合细菌，通过对该菌株细胞形态结构、活细胞光吸收特征、生理生化特征及其16srdna序列同源性进行鉴定，最终判断该psb07-14属红假单胞菌属(rhodopseudomonas sp.)，张松柏等已曾对红假单胞菌属(rhodopseud omonas sp.)报道过。1.2.2 清除农药残留的主要方法利用微生物的降解作用是为了使拟除虫菊酯类农药从土壤中清除的主要因素，并且以微生物为主的生物修复技术是一种环境友好且成本底的治污方法。以生物修复作为理论基础来降解农药残留菌的技术有望降低农产品和农业生产环境中农药的残留物。该技术具有高效、安全、没有二次污染等特点，而且经济较实用，操作简便，目前已经成为清除农药残留污染的一种重要方法。国内对有关农药残留微生物降解研究的报道很多，拟除虫菊酯类农药的微生物降解在降解菌的分离以及生理生化特征方面的报道比较多，但是对拟除虫菊酯类农药降解菌的报道相对较少。国内有少量对有机溶剂耐受菌的报道，但对拟除虫菊酯类农药耐受菌的研究未见报道。1.3 分离菌株的方法笔者采用富集分离的方法从某化工厂废水中分离出能够耐受甲氰菊酯农药的微生物菌株，研究该微生物菌株的降解特性，采用分光光度计测定该微生物菌株对甲氰菊酯农药的降解能力。张松柏等曾报道过用富集分离法从农药厂污泥中分离到一株能降解甲氰菊酯的光合细菌新菌株psb07-15，并通过对该菌株形态特征、生理生化特征以及对16srdna序列进行了同源比较、鉴定，最终表明该菌株为沼泽红假单孢菌（rhodopseudomonaspalu stris）。1.4 研究的目的及意义笔者是从某化工厂排污口的废水中分离出能够耐受甲氰菊酯农药的微生物菌株，并且通过降解性能来对其耐受性能进行初步的研究，目的是在为拟除虫菊酯类杀虫剂对土壤残留的治理提供一定的依据。 梯度稀释富集培养1.5 研究方案及设计路线采取样品(某化工厂排污口的废水)查阅资料，写实验方案及文献综述菌种培养后划线纯化得到纯培养物用722型分光光度计测量甲氰菊酯农药的降解效果数据处理及计算查阅大量资料写论文初稿，修改论文以及定稿2 实验材料2.1 实验菌株 微生物菌株的样品采自某化工厂排污口。2.2 实验试剂20甲氰菊酯乳油，ar分析纯，大连瑞泽农药股份有限公司生产；nacl，ar分析纯，重庆川江化学试剂厂；nh4no3，ar分析纯，重庆茂业化学试剂厂；k2hpo4，ar分析纯，广东.汕头市西陇化工厂；kh2po4，ar分析纯，汕头市陇化工厂有限公司；mgso47h2o，ar分析纯，化工西陇股份有限公司；蛋白胨，上海盛思生化科技有限公司；琼脂，石狮市狮头琼脂有限公司。2.3 实验主要仪器 表1 仪器的名称、型号或批号和生厂家 table 1 the name of the instrument, model or batch number and born factory 仪器名称 型号或批号 生厂家全温摇瓶柜 hyg-a 常州澳华仪器有限公司全自动立式电热 上海博迅实业有限公司灭菌器 yxq-ls-s 医压力蒸汽疗设备厂电热恒温培养箱 303a-2 上海科析试验仪器厂架盘天平 jpt-2 慈溪市华徐衡器实业有限公司培养皿 1177 上海五一玻璃仪器厂厨房冰箱 bcd-196tmzl 青岛海尔股份有限公司离心沉降机 80-1 姜堰市新康医疗器械有限公司洁净工作台 sw-cj-1g 苏州净化设备有限公司分光光度计 722型 天津市普瑞斯仪器有限公司2.4 培养基基础盐培养基（g/l）：nacl0.5g，nh4no3 1.0g，k2hpo4 1.50g，kh2po4 0.5g，mgso47h2o 0.04g；氮源基础盐培养基（g/l）：在基础盐培养基的基础上加入5.0g蛋白胨；氮源基础盐固体培养基（g/l）：在氮源基础盐培养基的基础上加入15g/l琼脂。3 实验方法3.1 微生物菌株的富集取一定量某化工厂和化工厂排废水口的污水分别加入到100ml含甲氰菊酯农药为57.5mg/l的液体基础盐培养基中（每样品3瓶），放入到30 、98r/min全温摇瓶柜中培养5天，取5%（体积分数）的培养物和培养物转接到100ml含甲氰菊酯农药为57.5mg/l的液体基础盐培养基中，再放入到30、98r/min全温摇瓶柜中培养5天后，即得到富集液。3.2 微生物菌株的分离 取富集液和富集液分别1ml加入到9ml无菌水的试管中，混合均匀后得的稀释液，再取的稀释液1ml加入到9ml无菌水的试管中，得到的稀释液，重复以上的步骤，依次可得、的稀释液。取上述经过梯度稀释的、各1ml分别涂布在相对应的加有57.5mg/l的甲氰菊酯农药的固体基础盐培养基平板上，放入到30的电热恒温培养箱中培养4天后，挑取菌落接种在加有57.5mg/l的甲氰菊酯农药的氮源固体基础盐培养基平板上，用无菌玻璃凃棒在培养基的表面轻轻涂布使之均匀，然后再放入到30的电热恒温培养箱中培养4天后，在长出菌落的平板上进行划线使菌落纯化，然后再放入到30的电热恒温培养箱中培养3天后得到纯化的菌落，然后挑取划线纯化的菌落接种在加有57.5mg/l的甲氰菊酯农药氮源的基础盐培养基中，放入到30 、98r/min的全温摇瓶柜中培养7天后，然后测定该微生物菌株对57.5mg/l甲氰菊酯农药的降解效果。3.3 甲氰菊酯农药降解率的测定先用离心沉降机以1500r/min的速度离心氮源基础盐培养基中的培养物10min，然后取上清液置于722型分光光度计中，在波长为600nm处进行测定其吸光值，通过吸光值计算出降解率，并做好记录。甲氰菊酯降解率的计算公式为：甲氰菊酯农药降解率=（1-x1/x0）100%式中：x1为加有微生物菌株的培养基培养7天后甲氰菊酯农药残留的质量浓度，mg/l；x0为空白对照培养7天后甲氰菊酯农药残留的质量浓度，mg/l。4 结果与讨论4.1 微生物菌株对甲氰菊酯农药的降解在50ml液体氮源基础盐培养基中分别加入2ml样和样的菌液（每个样设3个培养基），然后加入质量浓度为57.5mg/l的甲氰菊酯农药于培养基中，然后放入到30 、98rmin的全温摇瓶柜中，培养7天后测定甲氰菊酯农药残留的质量浓度。同时，以甲氰菊酯农药质量浓度为57.5mg/l的氮源基础盐培养基（不接种微生物菌株）在相同条件下进行培养，作为空白对照。表2 菌株对甲氰菊酯的降解效果table 2 degradation effect of fenpropathrin treaded by strains 处理 对照品 菌株 菌株甲氰菊酯起 始质量浓度 57.5 57.5 57.5/（mg/l）7天后甲氰菊酯残留质量浓度 57.18 34.04 28.40 /（mg/l）降解率/% - 40.47% 50.34%由表2可得，在接种微生物菌株的培养基中，样和样对甲氰菊酯农药的降解率分别为40.47%、50.34%，说明微生物菌株对甲氰菊酯农药具有降解的能力。4.2 微生物菌株对甲氰菊酯的降解特性4.2.1 不同质量浓度对菌株降解甲氰菊酯农药的影响在50ml液体氮源基础盐培养基中分别加入2ml样和样的菌液（每个样设3个培养基），然后再加入质量浓度为23mg/l、57.5mg/l、115mg/l、172mg/l、207mg/l、230mg/l的甲氰菊酯农药于相对应的氮源基础盐培养基中，然后放入到30 、98r/min全温摇瓶柜中，培养7天后测定甲氰菊酯农药的质量浓度。同时，以不同质量浓度的甲氰菊酯农药液体氮源基础盐培养基（不接种微生物菌株）在相同条件下进行培养，作为空白对照。 表3 不同质量浓度对菌株降解甲氰菊酯的影响 table 3 effects of different mass concentration on the fenpropahrin degradation by strains 质量浓度/（mg/l） 菌株的降解率% 菌株的降解率%23 mg/l 61.10% 60.99% 57.5 mg/l 40.47% 50.34% 115 mg/l 34.59% 21.16% 172 mg/l 33.38% 28.44% 207 mg/l 29.39% 55.98% 230 mg/l 60.69% 75.06%4.2.2 不同装液量对菌株降解甲氰菊酯农药的影响取2ml样和样的微生物菌液分别加入到20ml、50ml、80ml、110ml、140ml的液体氮源基础盐培养基中（每个样品设3个培养基），然后分别加入1ml的质量浓度为57.5mg/l的甲氰菊酯农药于培养基中，然后放入到30 、98r/min全温摇瓶柜中，培养7天后测定甲氰菊酯农药残留的质量浓度。同时，在20ml、50ml、80ml、110ml、140ml的液体氮源基础盐培养基（不接种微生物菌株）中分别加入1ml质量浓度为57.5mg/l的甲氰菊酯农药，在相同条件下进行培养，作为空白对照。表4 装液量对菌株降解甲氰菊酯的影响table 4 effects of installed capacity on the fenpropahrin degradation by strains装液量ml 菌株的降解率% 菌株的降解率% 20 70.01% 69.56% 50 29.40% 43.53%80 74.09% 76.01% 110 66.47% 66.37% 140 6.239% 3.558% 5 讨论 采用富集分离法分离得到能够耐受甲氰菊酯农药的微生物菌株，微生物菌株的最大测量浓度为230mg/l。微生物菌株在甲氰菊酯农药质量浓度为57.5mg/l的液体氮源基础盐培养基中培养7天后，测得菌株对甲氰菊酯农药的降解率分别为40.47%、50.34%。参考文献 张松柏,张德咏,刘勇,等. 光合细菌psb07-15对水培黄瓜体系中甲氰菊酯污染的生物修复j.农业环境科学学报2009, 28(10):2198-2203. 余磊,阚建全,黄荣茂. 20%甲氰菊酯乳油在大白菜上的残留试验j.贵州农业科学, 2008, 36(4):113-114. 黄文文,刘晶晶,叶美玲,等. 甲氰菊酯降解菌zh-3的分离鉴定及降解特性j.西北农林科技大学学报（自然科学版）,2010, 38(10):104-114. 梅立永,赵智杰,孙卫玲,等. 拟除虫菊酯类农药环境行为实验研究j.第二届全国农业环境科学学术研讨会论文集,2007, 307-312. 张战泓,张松柏,刘勇,等. 甲氰菊酯对蔬菜土中微生物数量的影响j.中国农学通报,2010, 26(12):287-289. 洪源范,洪青,沈雨佳,等. 甲氰菊酯降解菌sphingomonas sp. jql4-5对污染土壤的生物修复j.环境科学,2007, 28(5):1121-1125. malony s e, maule a, smit h a r w. purification and preliminary characterization of permethrinase from a pyre-throid transforming strain of bacillus cereusj. appl. enviro n. microbiol ., 1993, 59(7): 2007-2013. grant r j, daneill t j , be tt s w b, et al. isolation an didentification of synthetic pyrethr oid-degrading bacteriaj. j .appl. microb., 2002, 92:534-540. 洪源范,洪 青,武 俊,等. 甲氰菊酯降解菌jql4-5 的分离鉴定及降解特性研究j. 环境科学, 2006, 27(10):2100-2104. 张松柏,张德咏,罗香文,等. 一株高效降解氯氰菊酯细菌的分离鉴定及降解特性j. 中国农学通报, 2009, 25(3):265-270. 张松柏,张德咏,罗香文,等. 降解甲氰菊酯光合细菌的分离鉴定及其降解特性研究j.农业环境科学学报,2009, 28(1):140-144. 张松柏,张德咏,罗香文,等. 甲氰菊酯降解菌鉴定及其降解特性j.环境污染与防治,2008, 30(7):9-11. 罗源华,张战泓,刘勇,等. 一株降解甲氰菊酯的光合细菌的分离鉴定及其降解酶初步分析j.天津农业科学,2009, 15(2):1-5. 张松柏,张德咏,刘勇,等. 一株菊酯类农药降解菌的分离鉴定及其降解酶基因的克隆j.微生物学报,2009, 49(11):1520-1526. 任路路,胡艳芳,颜冬云,等. 土壤中拟除虫菊酯微生物降解研究j.土 壤,2010, 42(3): 358-363. 张战泓,罗源华,刘勇,等. 一株光合细菌分离鉴定及其降解甲氰菊酯特性j. 湖南农业大学学报(自然科学版),2009, 35(4):417-419. 林淦,吴传兵,阎华. 混合微生物对甲氰菊酯的降解作用j.安徽农业科学, 2006, 34(4) : 704-705. 戴建平,程菊娥,刘勇,等. 光合细菌psb07-15对辣椒及土壤中甲氰菊酯残留的生物修复j.生态环境学报, 2010, 19(10): 2441-2444. zuo x zh, qiu z x. syntheses of 4-methoxymethylbenzyl permithrinates containing fluorine and their insecticidal activityj. j fluorine chem, 2002, 116:173-179. u jihara k, m ori t , iwasaki t, et al . metofluthrin:a potent new synthetic pyrethroid high vapor activity against mosquitoesj.biosci biotechnol biochem, 2004,68(1):170-174.致谢 本论文是在导师武思齐的熟悉指导下完成的。导师的耐心指导、宽以待人、平易近人的态度对我影响深远。不仅使我掌握了基本的研究方法，还使我明白了许多道理。本论文从选题到完成论文，每一步都是在导师的指导下完成的，在此，向导师表示崇高的敬意和衷心的感谢！感谢学校及系上提供我做实验的器材和药品，感谢在整个毕业论文设计期间和我密切合作的同学，感谢曾经在各个方面帮助过我的同学及老师。 在此，我再一次向帮助过的老师和同学表示真诚的感谢！袁节膅薂羄肅蒃薁蚃芀荿薀螆肃芅蕿袈芈膁蚈羀肁蒀蚇蚀袄莆蚇螂肀莂蚆羅袂芈蚅蚄膈膄蚄螇羁蒂蚃衿膆莈蚂羁罿芄螁蚁膄膀螁螃羇葿螀袅膃蒅蝿肈羆莁螈螇芁芇莄袀肄膃莄羂艿蒂莃蚂肂莈蒂螄芈芄蒁袆肀膀蒀罿袃薈葿螈聿蒄葿袁羁莀蒈羃膇芆蒇蚃羀膂蒆螅膅蒁薅袇羈莇薄罿膄芃薃虿羆艿薃袁节膅薂羄肅蒃薁蚃芀荿薀螆肃芅蕿袈芈膁蚈羀肁蒀蚇蚀袄莆蚇螂肀莂蚆羅袂芈蚅蚄膈膄蚄螇羁蒂蚃衿膆莈蚂羁罿芄螁蚁膄膀螁螃羇葿螀袅膃蒅蝿肈羆莁螈螇芁芇莄袀肄膃莄羂艿蒂莃蚂肂莈蒂螄芈芄蒁袆肀膀蒀罿袃薈葿螈聿蒄葿袁羁莀蒈羃膇芆蒇蚃羀膂蒆螅膅蒁薅袇羈莇袄芈蒇袇螀芇蕿蚀聿芆艿蒃肅芅蒁螈羁芄薃薁袆芃芃螆螂芃莅蕿肁节蒈螅羇莁薀薈袃莀艿螃蝿荿莂薆膈莈薄袁肄莇蚆蚄羀莇莆袀袆羃蒈蚂螂羂薁袈肀肁芀蚁羆肁莃袆袂肀薅虿袈聿蚇蒂膇肈莇螇肃肇葿薀罿肆薂螆袅肅芁薈螁膅莃螄聿膄蒆薇羅膃蚈螂羁膂莈蚅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节衿羈腿莄蚂袄芈蒇袇螀芇蕿蚀聿芆艿蒃肅芅蒁螈羁芄薃薁袆芃芃螆螂芃莅蕿肁节蒈螅羇莁薀薈袃莀艿螃蝿荿莂薆膈莈薄袁肄莇蚆蚄羀莇莆袀袆羃蒈蚂螂羂薁袈肀肁芀蚁羆肁莃袆袂肀薅虿袈聿蚇蒂膇肈莇螇肃肇葿薀罿肆薂螆袅肅芁薈螁膅莃螄聿膄蒆薇羅膃蚈螂羁膂莈蚅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节衿羈腿莄蚂袄芈蒇袇螀芇蕿蚀聿芆艿蒃肅芅蒁螈羁芄薃薁袆芃芃螆螂芃莅蕿肁节蒈螅羇莁薀薈袃莀艿螃蝿荿莂薆膈莈薄袁肄莇蚆蚄羀莇莆袀袆羃蒈蚂螂羂薁袈肀肁芀蚁羆肁莃袆袂肀薅虿袈聿蚇蒂膇肈莇螇肃肇葿薀罿肆薂螆袅肅芁薈螁膅莃螄聿膄蒆薇羅膃蚈螂羁膂莈蚅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节衿羈腿莄蚂袄芈蒇袇螀芇蕿蚀聿芆艿蒃肅芅蒁螈羁芄薃薁袆芃芃螆螂芃莅蕿肁节蒈螅羇莁薀薈袃莀艿螃蝿荿莂薆膈莈薄袁肄莇蚆蚄羀莇莆袀袆羃蒈蚂螂羂薁袈肀肁芀蚁羆肁莃袆袂肀薅虿袈聿蚇蒂膇肈莇螇肃肇葿薀罿肆薂螆袅肅芁薈螁膅莃螄聿膄蒆薇羅膃蚈螂羁膂莈蚅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节衿羈腿莄蚂袄芈蒇袇螀芇蕿蚀聿芆艿蒃肅芅蒁螈羁芄薃薁袆芃芃螆螂芃莅蕿肁节蒈螅羇莁薀薈袃莀艿螃蝿荿莂薆膈莈薄袁肄莇蚆蚄羀莇莆袀袆羃蒈蚂螂羂薁袈肀肁芀蚁羆肁莃袆袂肀薅虿袈聿蚇蒂膇肈莇螇肃肇葿薀罿肆薂螆袅肅芁薈螁膅莃螄聿膄蒆薇羅膃蚈螂羁膂莈蚅袇膁蒀袀螃膀薂蚃肂腿节衿羈腿莄蚂袄芈蒇袇螀芇蕿蚀聿芆艿蒃肅芅蒁螈羁芄薃薁袆芃芃螆螂芃莅蕿肁节蒈螅羇莁薀薈袃莀艿螃蝿荿莂薆膈莈薄袁肄莇蚆蚄羀莇莆袀袆羃蒈蚂螂羂薁袈肀肁芀蚁羆肁莃袆袂肀薅虿袈聿蚇蒂膇肈莇螇肃肇葿薀罿肆薂螆袅肅芁薈螁膅莃螄聿膄蒆薇袁节膅薂羄肅蒃薁蚃芀荿薀螆肃芅蕿袈芈膁蚈羀肁蒀蚇蚀袄莆蚇螂肀莂蚆羅袂芈蚅蚄膈膄蚄螇羁蒂蚃衿膆莈蚂羁罿芄螁蚁膄膀螁螃羇葿螀袅膃蒅蝿肈羆莁螈螇芁芇莄袀肄膃莄羂艿蒂莃蚂肂莈蒂螄芈芄蒁袆肀膀蒀罿袃薈葿螈聿蒄葿袁羁莀蒈羃膇芆蒇蚃羀膂蒆螅膅蒁薅袇羈莇薄罿膄芃薃虿羆艿薃袁节膅薂羄肅蒃薁蚃芀荿薀螆肃芅蕿袈芈膁蚈羀肁蒀蚇蚀袄莆蚇螂肀莂蚆羅袂芈蚅蚄膈膄蚄螇羁蒂蚃衿膆莈蚂羁罿芄螁蚁膄膀螁螃羇葿螀袅膃蒅蝿肈羆莁螈螇芁芇莄袀肄膃莄羂艿蒂莃蚂肂莈蒂螄芈芄蒁袆肀膀蒀罿袃薈葿螈聿蒄葿袁羁莀蒈羃膇芆蒇蚃羀膂蒆螅膅蒁薅袇羈莇薄罿膄芃薃虿羆艿薃袁节膅薂羄肅蒃薁蚃芀荿薀螆肃芅蕿袈芈膁蚈羀肁蒀蚇蚀袄莆蚇螂肀莂蚆羅袂芈蚅蚄膈膄蚄螇羁蒂蚃衿膆莈蚂羁罿芄螁蚁膄膀螁螃羇葿螀袅膃蒅蝿肈羆莁螈螇芁芇莄袀肄膃莄羂艿蒂莃蚂肂莈蒂螄芈芄蒁袆肀膀蒀罿袃薈葿螈聿蒄葿袁羁莀蒈羃膇芆蒇蚃羀膂蒆螅膅蒁薅袇羈莇薄罿膄芃薃虿羆艿薃袁节膅薂羄肅蒃薁蚃芀荿薀螆肃芅蕿袈芈膁蚈羀肁蒀蚇蚀袄莆蚇螂肀莂蚆羅袂芈蚅蚄膈膄蚄螇羁蒂蚃衿膆莈蚂羁罿芄螁蚁膄膀螁螃羇葿螀袅膃蒅蝿肈羆莁螈螇芁芇莄袀肄膃莄羂艿蒂莃蚂肂莈蒂螄芈芄蒁袆肀膀蒀罿袃薈葿螈聿蒄葿袁羁莀蒈羃膇芆蒇蚃羀膂蒆螅膅蒁薅袇羈莇薄罿膄芃薃虿羆艿薃袁节膅薂羄肅蒃薁蚃芀荿薀螆肃芅蕿袈芈膁蚈羀肁蒀蚇蚀袄莆蚇螂肀莂蚆羅袂芈蚅蚄膈膄蚄螇羁蒂蚃衿膆莈蚂羁罿芄螁蚁膄膀螁螃羇葿螀袅膃蒅蝿肈羆莁螈螇芁芇莄袀肄膃莄羂艿蒂莃蚂肂莈蒂螄芈芄蒁袆肀膀蒀罿袃薈葿螈聿蒄葿袁羁莀蒈羃膇芆蒇蚃羀膂蒆螅膅蒁薅袇羈莇薄罿膄芃薃虿羆艿薃袁节膅薂羄肅蒃薁蚃芀荿薀螆肃芅