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一 选择题(从备选答案中选出一个正确的答案,把答案代码填在答题纸上,每小题1.5分,共30分)1反转录酶除了有以RNA为模板生成RNA-DNA杂交分子的功能外,还有下列活性( )A DNA聚合酶和RNase AB DNA聚合酶和S1核酸酶C DNA聚合酶和RNase HD S1核酸酶和RNaseH2羧肽酶含有的金属离子是( )A 镁B 锌C 铜D 铁5、在pH10时的谷氨酸溶液中,下列哪一种结构形式占优势?A 羧基氨基都解离;B 羧基氨基都不解离;C 只羧基解离;D 只羧基解离;E 羧基羧基都解离。18.A型DNA和B型DNA产生差别的原因是: A.A型DNA是双链,B型DNA是单链 B. A型DNA是右旋,B型DNA是左旋 C. A型DNA与B型DNA碱基组成不同 D. 两者的结晶状态不同磷酸甘油的来源有两个,一是甘油磷酸化,二是由磷酸二羟丙酮还原产生2008-17如果DNA沿35合成,那它则需以5三磷酸或3脱氧核苷三磷酸为末端的链作为前体。(Y)18. 转录因子具有独立的DNA结合和转录激活结构域。(Y)20. 已知某一内切核酸酶在一环状DNA上有3个切点,因此,用此酶切割该环状DNA,可得到三个片断。(Y)21. 根据某一感兴趣蛋白质的序列、抗原性以及配基结合性质制备探针,可从DNA文库筛选到相应的基因。(Y)3一个酶有多种底物,判断其底物专一性强弱应依据参数 ( )A KcatB KmC Kcat/KmD 其它4胸腺嘧啶除了是DNA的主要组份外,它还经常出现在有些RNA分子中,它是:( )A snRNAB tRNAC mRNAD 5S rRNA5 嘌吟霉素的作用是 ( )A 抑制DNA合成B 抑制RNA合成C 抑制蛋白质合成的延伸D 抑制蛋白质合成的终止6 DNA分子上被依赖于DNA的RNA聚合酶特异识别的顺式元件是( )A 弱化子B 操纵子C 启动子D 终止子7 组蛋白的修饰可引起核小体的解离,这种修饰是( )A 甲基化B 腺苷化C 磷酸化D 糖基化8蛋白质形成三级结构的驱动力是:( )A 范德华力 B 疏水作用 C 氢键 D 离子键9 利用羟基磷灰石分离提纯蛋白质是属于 ( )A 离子交换层析B 吸附层析C 亲和层析D分子筛层析。10下述哪种方法不适合用来测定核酸分子的大小及其分子量( )A 电镜测量法B 沉降分析法C 粘度法D 吸咐层析法。11 今有A,B,C,D四种蛋白质,其分子体积由大到小的顺序是ABCD,在凝胶过滤柱层析过程中,最先洗脱出来的蛋白质一般应该是 ( )A A,B B,C C,D D12生物体内甲基的直接供体是( )A S-腺苷蛋氨酸B 半胱氨酸 C 蛋氨酸 D 牛磺酸13 如果要测定一个小肽的氨基酸顺序,下列试剂中选择一个你认为最合适的( )A 茚三酮B CNBr C 胰蛋白酶 D 异硫氰酸苯酯14 有个天然肽的氨基酸顺序为:Pro-Ala-Phe-Arg-Ser,你要证实N端第二位Ala的存在,最好的试剂是 ( )A FDNBB PTTCC 无水肼D 羧肽酶15 在天然蛋白质组成中常见的一个氨基酸,它的侧链在pH7.2和pH13都带电荷,这个氨基酸是( )A 谷氨酸B 组氨酸C 酪氨酸D 精氨酸16 某蛋白质pI为7.5,在pH6.0的缓冲液中进行自由界面电泳,其泳动方向为( )A 原点不动B 向正极泳动C 向负极泳动17 在接近中性的pH的条件下,下列哪种基团既可以为H的受体,也可为H的供体 ( )A His-咪唑基B Lys-氨基C Arg-胍基D Cys-巯基18 测定蛋白质在DNA上的结合部位常用( )方法A Western印迹B PCRC 限制性图谱分析D DNaseI保护足印分析19 人细胞DNA含2.9109碱基对,其双螺旋的总长度约为 ( )A 990mm B 580mm C 290mm D 950mm20 DNA拓扑异构酶I型(转轴酶)和II型(旋转酶)的主要差别在于( )A I型使DNA的一条链发生断裂和再连接,而II型使DNA的两条链同时发生断裂和再连接B I型使DNA的两条链同时发生断裂和再连接,而II型使DNA的一条链发生断裂和再连接C I型和II型都是使DNA的一条链发生断裂和再连接,但前者催化反应不需ATP,后者需要ATP提供能量D I型和II型都是使DNA的两条链同时发生断裂和再连接,但前者催化反应不需ATP,后者需要ATP提供能量二、填空(共分,把答案填在答题纸上。)1将丙氨酸溶液400ml调节到pH8.0,然后向该溶液中加入过量的甲醛。当所得溶液用碱反滴定至pH8.0时,消耗0.2ml/L NaOH溶液250ml,那么起始溶液中丙氨酸的含量为( )克(丙氨酸分子量:89.06) (2分)2 将含有Asp(pI=2.98), Gly(pI=5.97), Thr(pI=6.53), Leu(pI=5.98)和Lys(pI=9.74)的pH3.0柠檬酸缓冲液,加到预先用同样缓冲液平衡过的Dowex-50阳离子交换树脂中,随后用该缓冲液洗脱此柱,并分部的收集洗出液,这5种氨基酸将按( )次序洗脱下来。 (2.5分)3 一个有效的自杀性抑制剂必须具备:(1)( ),(2)( ),(3)( )。(1.5分)4 用AgNO3对在10ml含有1.0mg/ml蛋白质的纯酶溶液进行全抑制,需用0.342微摩尔AgNO3,该酶的最低分子量为( )。(2分)5 当底物浓度等于0.25Km时,反应初速度与最大反应速度的比为( ) (2分)6 丙糖磷酸异构酶被认为是完善进化的酶,它的催化机制是Glu-165作为广义碱和His-95作为广义酸进行催化反应,它的动力学常数的特点是( )和( )。(2分)7 在动物组织中蛋白激酶就其底物磷酸化的残基种类,可分为三类,它们是( ),( )及( )蛋白激酶,而在微生物中还发现磷酸化( )残基的蛋白激酶。(2分)8 DNA变性后,紫外光吸收能力( ),沉降速度( 增加),粘度( )。(2分)9 一条单链()DNA的碱基组成为:A 21,G 29, C 29,T 21,用DNA聚合酶复制出互补的()链,然后用得到的双链DNA作模板,由RNA聚合酶转录其中的(),产物的碱基组成是( )。(2分)10 型DNA双螺旋的螺距为34,其中有( 10 )对碱基,每对碱基间的转角是( 36 )。(2分)11 cccDNA是指( 闭合共价环状DNA )。(2分)12 用于基因克隆载体的质粒都具有(复制起点 ),(多克隆位点 )和(选择性标记 )三种必需条件。(1.5分)13 真核生物tRNA的加工、成熟过程包括:( 切除5端附加序列 ),(切除3端附加序列 ),( 片段拼接 ),(核苷修饰)和(3末端加上CCA )。(2.5分)14 大肠杆菌色氨酸操纵子的转录受( )和( )两种机制的控制,前者通过( )控制转录的起始,后者通过( )控制转录起始后是否进行下去。(2分)15 Tm是DNA具有的一个重要特性,其定义为( )。(2分)三是非题(每小题1.5分,共30分;把答案填写在答题纸上,正确的填“”,错误的填“”)1密码的偏爱性是指不同种属的生物对简并密码具有不同的使用频率。(Y ).2 在完整偶联线粒体中NADH氧化时生成ATP,反过来如果外加ATP,也能使线粒体内NAD+还原.(Y )2所谓引物就是同DNA 互补的一小段RNA 分子。X3 细菌细胞壁中的肽聚糖是一类线性多聚糖链通过小肽的广泛交联而成的巨大分子,其中氨基酸组成既有L型也有D型. (Y )4 肝和骨骼肌一般储存糖原,当动用糖原功能时,在磷酸存在下,经磷酸化酶的作用,首先形成葡萄糖-6-磷酸. (X )2. Z型DNA与B型DNA可以相互转变。Y:5溴乙锭(EB)与双链DNA和某些有双链螺旋区RNA特异结合后,产生很强的荧光,是由于EB能插入到核酸碱基对之间。(Y )6 DNA复制时,岗崎片段的合成需要RNA引物。 (Y )7 一人工模板CAUGGGGGG.,在较高Mg2浓度情况下,无细胞翻译系统中可合成一多肽Met-Gly-Gly.。(Y )8 DNA复制与DNA修复合成一样,都是由5-3方向进行的。(Y )9 基因中核苷酸序列的变化不一定在基因产物,即蛋白质的氨基酸序列中反应出来。(Y )10 从生物体内分离获得的蛋白质和让该蛋白质基因用遗传工程技术在细菌中表达的产物,它们的化学结构是完全相同的。(X )11 类病毒是一类不含蛋白质的RNA病原体 (Y )12 用定位点突变方法得到缺失某一个氨基酸残基突变体,这个突变的酶蛋白不再具有催化活性,因此可以认为该缺失残基一定是酶结合底物的必需基团。(X )13 有的tRNA反密码子由4个核苷酸残基组成,从而能校正某些mRNA插入突变而产生不良作用。(Y )14 凡有锌指结构的蛋白质均有与DNA结合的功能。(X )15 DNA的复制方式有多种,通常是双向进行的,但滚动式复制却是单向的。(Y )16 血红蛋白与肌红蛋白结构相似,均含有一条肽链的铁卟啉结合蛋白,所以功能上都有与氧结合的能力,血红蛋白与氧的亲和力较肌红蛋白更强。(X )17 生物膜上的糖蛋白,其含糖部分是与肽链中的-羧基或-氨基以共价键形式相连,并往往埋没于磷脂双分子层中。(X )18 免疫球蛋白由两条轻链和两条重链所组成,抗体与抗原的结合只涉及轻链,因为它有可变区域,重链的序列基本上都是恒定的,只起维持结构稳定的作用。( X )19 用羧肽酶A水解一个肽,发现从量上看释放最快的是Leu,其次是Gly,据此可断定,此肽的C端序列是:Gly-Leu. ( X)20 人体需要的烟酰胺可以由色氨酸来合成,因此在营养上色氨酸可以替代烟酰胺。(Y )四分析与计算(每小题5分,共15分)1 已知一个九肽的氨基酸顺序是:Ala-Pro-Lys-Arg-Val-Tyr-Glu-Pro-Gly,在实验室只有氨基酸分析仪,而没有氨基酸顺序测定仪的情况下,如何使用(1)羧肽酶A或B,(2)氨肽酶,(3)2,4-二硝基氟苯(FDNB),(4)胰蛋白酶,(5)胰凝乳蛋白酶,来验证上述肽段的氨基酸顺序?答案:用两种羧肽酶和氨肽酶作用此九肽,都不能释放出氨基酸,证明了第2位和第八位的残基均为脯氨酸;用FDNB可以测得该肽的N末端为Ala,用胰蛋白酶作用可得到Ala,Pro,Lys组成的三肽,这表明了第三位的残基为Lys;同时得到一段五肽和游离的Arg,这提示了Arg是第四位的残基。用胰凝乳蛋白酶作用后,可得到一段六肽和一段三肽,同时也确认了第六位残基是带芳香性侧链的Tyr。由六肽的氨基酸组成测得,确定其中含有Val,很自然的可认定这残基应是第五位的残基。用FDNB证明了酶解后所得三肽的N末端,即九肽的第七位残基,是Glu后,九肽的C末端也肯定是Gly。2 提纯醇脱氢酶,用55饱和度的硫酸铵沉淀。沉淀溶解于水中,其蛋白质浓度为1.5g/L,500倍稀释后,取10微升酶溶液测定活性(总体积为3.0ml的pH9.2的缓冲液中,用过量的乙醇和NAD,测定在340nm光吸收变化),初速度为0.11OD单位/min。硫酸铵沉淀后上清液的蛋白质浓度为2.0g/L,1000倍稀释后也取10微升溶液按上述方法测活,初速度为0.08 OD单位/min。计算二个组分的比活性。(340(NADH-NAD)6.2103/mol.L)。请你对该提纯步骤做出评价。上述的试验是否有不足之处?如果有,请指出。(酶的活力=初速度测活力时的体积比/340)3 已知一蛋白质有-Trp-Met-Asp-Trp-Gly-序列。为了合成一个12核苷酸长度的探针,用于检测该蛋白质的基因,由上述序列推测:(1)该蛋白质的mRNA序列(2)该蛋白质的负链DNA序列(3)该蛋白质的正链DNA序列(4)12核苷酸长度的探针序列五问答(共45分)1 真核生物基因转录调控因子有些什么重要的功能域?(5分 )2从高等生物基因组中克隆的完整基因为什么在大肠杆菌中不能正确表达?如果想让人的胰岛素基因在细菌中表达生产人胰岛素,你认为至少应当满足哪些条件?(5分 )1.真核基因启动子不能被原核RNA聚合酶识别转录不能正确起始;真核基因组克隆的基因含有内含子,大肠杆菌没有转录后剪接系统。 2.A.需有适当运载体将人胰岛素基因置入细菌 B.需有适当的酶对运载体与人胰岛素基因进行切割与黏合 C.重组后的运载体DNA,须在细菌体内转录、翻译成人胰岛素3 一般培养基的碳源中有葡萄糖时,大肠杆菌是不利用乳糖的,只给乳糖时,则产生出大量的半乳糖苷酶,并利用乳糖。然而,用葡萄糖替换乳糖时,就几乎不产生半乳糖苷酶。回答下列问题: (7分 )(1)与产生半乳糖苷酶有关的四个基因是什么?(2)能够利用乳糖,是由于乳糖和什么相结合?(3)发现没有乳糖也大量产生半乳糖苷酶的变异株。这种变异株的产生是由于(a)的突变,因而不能生成(b),或者由于(c)的突变,(d)不能和(e)结合,所以没有乳糖时(f)也可活动,它的遗传信息传递给(g),最后在(h)上合成了半乳糖苷酶。4 写出六种已知的蛋白质肽链生物合成后的共价修饰方式并简述其生物学意义。(14分 )5 试述RNA生物合成的一般步骤及真核mRNA的成熟加工过程。(14分 )物05年 有1克淀粉酶制剂,用水溶解成1000毫升,从中取出1毫升测定淀粉酶活力,测知每5分钟分解0.25克淀粉。计算每克酶制剂所含的淀粉酶活力单位数。(淀粉酶活力单位的定义:在最适条件下每小时分解1克淀粉的酶量称为1个活力单位)提示:已知:lml酶制剂相当于1mg酶制剂,根据酶活力单位定义: 每小时分解1克淀粉的酶量为1个活力单位,则lmg酶制剂每小时分解淀粉的酶的活力单位=025g5分钟601=3活力单位 每克酶制剂所含活力单位=3个活力单位1000=3000活力单位 所以,近年来,蛋白质间相互作用以及蛋白质/ 核酸相互作用的研究逐渐得到重视。对于蛋白质和核酸的相互作用,李英贤和贺福初1、吕鉴泉和庞代文2对经典生物化学和物理化学的研究方法进行了综述。本文重点介绍一些新的研究蛋白质/ 核酸相互作用的方法和技术,主要从核酸适体技术、生物信息学方法、蛋白质芯片技术以及纳米技术等方面进行综述。1.简述血红蛋白的结构?其结构与功能有什么关系?血红蛋白和氧的结合受那些因素的影响.血红蛋白含有2个亚基和2个亚基,每个亚基均有一个血红素。每个血红素都可以和一个氧分子结合。但是4个亚基和氧分子的结合能力有所不同。每一个亚基和氧分子结合后,这个亚基发生构象改变,使得其他亚基和氧分子结合更容易,呈现亚基间的协同效应。除了亚基间的协同效应可影响亚基和氧的结合,氢离子和二氧化碳可以促进和血红蛋白结合的氧分子的释放,即所谓波尔效应。2,3-二羟基甘油磷酸和亚基结合后也可以抑制血红蛋白和氧的结合。1、除了化学合成多肽外,还可以用酶催化进行酶促合成,所有酶类是()(1)蛋白水解酶 (2)蛋白激酶 (3)氨基转移酶 (4)连接酶考查点 : 酶的应用、酶工程答 案: (1)蛋白水解酶题 目:5基因剔除(knock out)的方法主要是用来阐明()(1)基因的结构 (2)基因的调控 (3)基因的表达 (4)基因的功能考查点 : 基因剔除的概念。答 案: (4)基因的功能题 目:11线粒体内膜 ATP合成酶合成 ATP的过程中,有一步是需要能量的,它是()(1)酶与Pi结合 (2)酶与ADP结合 (3)Pi与ADP在酶上生成ATP (4)生成的ATP从酶上释放考查点 : 氧化磷酸化答 案: (4)生成的ATP从酶上释放题 目:13甲状腺素是一种含碘的()(1)氨基酸 (2)多肽 (3)蛋白质 (4)寡糖题 目:17嘌吟霉素的作用是()(1)抑制DNA合成 (2)抑制RNA合成 (3)抑制蛋白质合成的延伸 (4)抑制蛋白质合成的终止考查点 : 抗生素的作用机制。课本内容: 嘌呤霉素(puromycin)对蛋白质生物合成有独特的作用,它与50S亚基A部位结合,抑制氨酰-tRNA的进入,从而引起肽链合成的过早终止。答 案: (4)抑制蛋白质合成的终止题 目:23、组蛋白的修饰可引起核小体的解离,这种修饰是()(1)甲基化 (2)腺苷化 (3)磷酸化 (4)糖基化考查点 : 组蛋白的修饰课本内容: ADP核糖基转移酶(ADPRT)在DNA断裂作用的刺激下迅速从NAD+上将核糖基转移到许多核蛋白上,包括组蛋白,松解了染色质。经核糖基化的蛋白促进DNA的修复。答 案: (4)糖基化题 目:24、氨基酸掺入肽链前必须活化,氨基酸的活化部位是( ) (1)内质网的核糖体 (2)线粒体 (3) 高尔基体 (4)可溶的细胞质考查点 : 氨基酸活化课本内容: 氨基酸在掺入肽链之前必须活化以获得额外的能量,在氨酰-tRNA合酶的催化下进行。活化了的氨基酸与tRNA形成氨酰-tRNA。这一反应是在可溶性的细胞质内完成的。答 案: (4)可溶的细胞质题 目:2、免疫球蛋白G在用 处理时,产生Fab片段;而用 处理时,产生Fab2片段。答 案: 木瓜蛋白酶、胃木瓜蛋白酶题 目: 3、细胞色素氧化酶除含 辅基外,还含 ,它也参与氧化还原。答 案: 血红素、2个铜原子题 目: 4、一个酶的分类编号为EC3.4.2.1,它属于 类。 答 案: 水解酶类相关内容: 酶的国际分类方法:1、氧化还原酶类;2、移换酶类;3、水解酶类;4、裂合酶类;5、异构酶类;6、合成酶类。题 目: 5、糖酵解中最关键的调节酶是 。答 案: 磷酸果糖激酶题 目: 6、磷酸化酶激酶是一种依赖 的蛋白激酶。答 案: 钙离子题 目: 8、低密度脂蛋白(LDL)受体的作用是 。答 案: 转运内源胆固醇。题 目: 9、线粒体内膜胞浆侧的膜电位比基质侧为 。答 案: 高题 目: 1、简述蛋白质在翻译后,多肽链形成具有生物活性的构象所需的几种加工过程。考查点 : 新生肽链的修饰。参考答案: 按照蛋白合成后修饰的过程,可以分为信号肽及其切除、内质网修饰、高尔基体修饰等几个阶段。信号肽及其切除 信号肽长为13-26氨基酸,N-末至少有一个带正电荷的氨基酸残基,中部一段有10-15残基由高度疏水性的氨基酸组成,如丙氨酸、亮氨酸、缬氨酸、异两氨酸和苯丙氨酸。不一定都位于新生肽的N-末。新生肽合成不久,有信号肽的蛋白的核糖体,受N-端信号肽所控制,进入内质网进一步合成蛋白质,使得原来表面光滑的内质网(ER)变成有局部突起的粗糙内质网。与内质网相结合的核糖体可合成三类蛋白质:溶酶体蛋白、分泌到胞外的蛋白、构成膜骨架的蛋白。内质网修饰 多肽移位后,在内质网的小腔中被修饰,它包括N-端信号肽的切除、二硫键的形成使多肽呈现一定的空间结构、糖基化作用。糖基化作用使许多肽键变成糖蛋白(膜本体蛋白、抗原蛋白)。糖苷键有:与Asn侧链氨基相连的N-糖苷键,与Ser、Thr侧链-OH相连的O-糖苷键。通常是五聚糖(3甘露糖、2N-乙酰氨基葡萄糖)。高尔基体修饰及多肽分选 高尔基体对糖蛋白上的寡聚糖核作进一步的修饰调整,也借助于M6P等信息将多肽链分类,送往溶酶体、分泌粒及质膜等进行归位。通过上述三个阶段的修饰,既形成了有生物活性的构象,分别参与相应的过程中去。题 目: 5、真核细胞中有几种RNA聚合酶?它们的主要功能是什么?考查点 : 转录的酶学。参考答案: 真核生物的RNA聚合酶,按照对-鹅膏蕈碱的敏感性不同进行分类:RNA聚合酶基本不受-鹅膏蕈碱的抑制,在大于10-3M/L时才有轻微的抑制。RNA聚合酶对-鹅膏蕈碱最为敏感,在10-8M/L 以下就会被抑制。RNA聚合酶对-鹅膏蕈碱的敏感性介于聚合酶和聚合酶之间,在10-5M/L到10-4M/L才会有抑制现象。RNA聚合酶存在于核仁中,其功能是合成5.8S rRNA、18 S rRNA和28 S rRNA。RNA聚合酶存在于核质中,其功能是合成mRNA、snRNA。RNA聚合酶也存在于核质中,其功能是合成tRNA和5 S rRNA及转录Alu序列。相关内容: 原核生物的DNA聚合酶及功能,真核生物的DNA聚合酶及功能,转录调控,复制的调控。题 目:11氧化磷酸化也是可逆的(Y)题 目:14转录不需要引物,而反转录必需有引物(Y)题 目:18基因转录的终止信号应位于被转录的序列以外的下游区(X)终止信号应位于已经转录的序列中。题 目:20DNA复制是在起始阶段进行控制的,一旦复制开始,它即进行下去,直到整个复制子完成复制(Y)题 目:2生物体内氨的转运主要通过:() (1)尿素循环 (2)谷氨酰胺 (3)尿酸题 目:3识别信号肽的是一种信号识别颗粒,它是:() (1)糖蛋白 (2)信号肽酶 (3)脂蛋白 (4)核蛋白(4) MWC模型不能解释负协同性,而KNF模型能题 目:8琥珀酸脱氢酶所需的辅酶(基)是:() (1)CoA (2)FAD (3)NAD+ (4)NADP+题 目:11NO的生成主要来自:() (1)组氨酸 (2)赖氨酸 (3)精氨酸 (4)谷氨酸胺题 目:12哺乳动物细胞质膜的标志酶是:() (1)钠钾ATP酶 (2)细胞色素氧化酶 (3)H+一ATP酶 (4)谷氨酸胺题 目:14典型哺乳动物细胞内外的Na+,K+离子浓度:()(1)细胞内Na+,K+均比细胞外高 (2)细胞内Na+,K+均比细胞外低 (3)细胞内K+比细胞外高,Na+比细胞外低 (4)细胞内Na+比胞外高,K+比细胞外低题 目:19与核酸中嘌吟环和嘧啶环上的原子来源都有关的氨基酸是:()(1)丙氨酸(2)天冬氨酸 (3)亮氨酸 (4)甲硫氨酸题 目:22遍在蛋白(ubiquitin)广泛分布于各类细胞,它与蛋白质结合后,造成:() (1)蛋白质更加稳定 (2)蛋白质有效转运 (3)蛋白质迅速降解 (4)蛋白质固定在细胞膜上题 目:24噬菌体侵人寄主细胞后,决定它进人裂解循环的基因产物是:() (1)N (2)Q (3)Cro (4)CI 题 目:4TPCK是通过对()残基的烷化而专一地对()酶进行亲和标记答 案: 组氨酸、胰凝乳蛋白酶题 目:6磷酸化酶激酶是一种依赖()的蛋白激酶答 案: 钙离子题 目:11参与DNA损伤切除修复的酶主要有()、()、()和()答 案: 特异的核酸内切酶、外切酶、聚合酶、连接酶。题 目:10在反密码子与密码子的相互作用中,反密码子IGA可识别的密码子有()。()和() 答 案: TCA、TCU、TCC题 目:12转录调控因子的结合DNA功能域的结构有锌指,(),(),()等答 案:螺旋-转角-螺旋、螺旋-环-螺旋、亮氨酸拉链四、问答题:5题,每题6分,共30分。题 目:1一个蛋白质的氨基酸序列显示,其内部不同序列位置存在两个甲硫氨酸残基, 试问: (1)用什么试剂,可把此蛋白质裂解成片段? (2)如果裂解的片段分子量均在10000以上,且差距较大,可用何种方法分离? (3)用什么简单方法,可以测定这些片段的分子量? (4)如何证明它们都是从一个蛋白质分子裂解下来的片段? (5)如何证明它们在该蛋白质内的排列次序?考查点 : 蛋白质的性质、蛋白质分析。题中的肽段降解得三段肽段。答 案: 溴化氰(cyanogen bromide)。它只断裂Met残基的羧端肽键。也可以选用糜蛋白酶或嗜热菌蛋白酶,但其专一性不如溴化氰。可以用沉降速度法、凝胶过滤法、SDS-PAGE等将它们分开。用沉降速度法、凝胶过滤法加一个分子两标准,就可以测定片段的分子量。将酶切

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