低取代羟丙纤维素羟丙氧基含量气相色谱测定方法的研究论文.pdf

中国药品标准 2 0 1 4 年第 1 5卷第 4期 2 8 9 辅 料 与 包 装 低取代羟丙纤维素羟丙氧基含量气相色谱测定方法的研究 肖英 ， 秦立 ， 乔敏。 ( 1 山东省食品药品检验所， 济南2 5 0 1 0 1 ； 2 云南省食品药品检验所， 昆明6 5 0 0 1 1 ； 3 济南市中医医院， 济南 2 5 0 0 1 2) 摘要目的： 修订 2 0 0 5年版中国药典 中辅料羟丙纤维素羟丙氧基含量测定方法。方法： 采用气相色谱方法对低取代羟丙 纤维素羟 丙氧基含量进行 测定 ， 并进行 了方法 学验证 。结果 ： 平 均 回收 率为 9 8 0 9 ， 同一 实验 室三 次测 定 结果 的 r s d为 0 6 0 ， 三批样品在三个不同实验室测定结果的平均 r s d为 7 2 ， 供试品溶液在5 d内七次测定结果的 r s d为 1 2 3 。结 论： 方法准确、 简便， 为中国药典) 2 o l o年版药用辅料低取代羟丙纤维素羟丙氧基含量测定方法的修订提供 了依据。 关键词： 低取代羟丙纤维素； 羟丙氧基； 气相 色谱法； 含量测定 中图分类号： r 9 2 1 2 文献标识码： a 文章编号： 1 0 0 9 3 6 5 6 ( 2 0 1 4 )一 4 2 8 9 4 hy dr o x y p r o p o x y gr o up de t e r mi na t i o n o f lo w s ub s tit ut e d hy d r o x y pr o p y l ce l l u l o s e b y gc x i a o y i n g ， q i n l i ， q i a o mi n ( 1 _ s h 帆 d d i n s t i t t e f o r 。 d 口 d n c o 眦 r 0 z ， j n 口 n 2 5 0 1 0 1 ； 2 胁肌i n s t i t u t 8 f o r 。 d 。 n d d 凡 曙c o n t r o l ， k u n m i n g 6 5 0 0 1 1 ； 3 j i n a n h o s p i t a l o f t r a d i t io n a l c h i n e s e me d i c i n e ， j i n a n 2 5 0 0 1 2 ) ab s t r a c t 0b j e c t i v e ： t o r e v i s e t h e a s s a y m e t h o d h y d r o x y p r o p o x y g r o u p o f h y d r o x y p r o p y l c e l l u l o s e i n c h i n e s e p h a r m a c o p o e i a 2 0 0 5 e d i t i o n m e t ho d s ：gc wa s p e r f o rm e d a n d t h e r e s e a r c h e s we r e v e r i fi e d re s u l t s：t h e a v e r a g e r e c o v e r y r a t e w a s 9 8 0 9 t h e rs d i n s a me l a b o r a t o ry o f t h r e e d e t e r mi n a t i o n s w a s 0 6 0 t h e a v e r a g e r s d o f t h r e e b a t c h o f s a mp l e s b y t h r e e d i f f e r e n t l a b o r a t o r i e s wa s 7 2 a nd t h e rs d o f s e v e n de t e r mi n a t i o n s o f t h e s a me s a mp l e s o l u t i o n i n 5 d a y s wa s 1 2 3 co nc l us i o n：the me t h o d i s p r o v e d t o be a c c u r a t e a n d c o n v e n i e n t ke y wo r ds ： l o w s u b s t i t u t e d h y d r o x y p r o p y l c e ll u l o s e；h y d r o x y p r o p o x y g r o u p ；g c；a s s a y 羟丙纤维素是一种多用途的非离子型纤维素衍 生物 ， 根据羟丙氧基含量 的高低分为低 取代羟丙基 纤维素( 以下 简称 l h p c ) 和高取代羟丙基纤维素 ( h h p c) 。l h p c结构中含有大量的亲水基 团， 结 晶粒子的表面 凹凸不平 ， 具有 明显 的风化石岩状结 构 ， 这种粗糙的表面结构具有较大的表面积 ， 使其与 药物 、 其他辅料一起被压成片剂时 ， 片芯内形成 了众 多的孔隙和毛细管 ， 使片芯提高吸湿速度和吸水量 增加膨胀度 ， 利于药物的崩解 ， 崩解后的颗粒也较细 小 ， 利于药物的溶 出， 显著提高片剂、 胶囊剂的生物 利用度 。其较强 的亲水性 、 吸水性 、 膨胀性 ， 吸水速 度快 的特性 ， 使其成为速释固体制剂最主要的辅料 之一 ， 是 口腔崩解片理想的崩解剂 。l h p c粗糙的 结构使其与药物 、 颗粒之间有较大的镶嵌作用 ， 增加 了黏结度 ， 受压成型性能好 ， 被压成片剂后更显硬度 和光泽度 ， 提高湿法制粒和用粉末直接压片 的片剂 的外观质量。对于可压性差 、 黏冲、 易松片、 易揭盖、 易裂片的固体制剂 ， 加入 l h p c后易成型 ， 硬度适 宜 ， 外观美 观。分散 片加 入 l h p c后 ， 外观 、 脆 碎 度、 分散均匀性有很大的改善 ， 防止 出现缺角 、 烂边 。 h h p c具有 良好 的热塑性 、 黏结性和成膜性 ， 所成 的膜坚硬 、 光泽度好 、 弹性充分 ， 主要被用作成膜材 料和包衣材料等 l 2 j 。 低取代 羟丙基纤维 素 美 国药典( u s p 3 1 n f 2 6 ) 及 e l 本 药局方( j p x v) 有 收载 ， 目前 中国药典) 2 0 0 5年版二部收载的羟丙纤维素为低 取代羟丙基醚纤维素 ， 即低取代羟丙纤维素。根据 国家药典委员会 “ 关于落实 中国药典) 2 0 1 0年版 药用辅料增修订任务 的通知” ( 国药典综发 2 0 0 8 5 9号) 的精神， 山东省食 品药 品检验所承担药用辅 料羟丙纤维素标准的修订任务。为此 ， 我们向生产 厂家进行 了调研 ， 山东赫达 、 泰安瑞泰 、 安徽山河 、 浙 江 中维、 湖州展望 、 聊城 阿华均给以积极 的反馈 ， 反 映原标准问题在于性状 的描述、 命名 、 酸碱度检查溶 作者简介 ： 肖英 ， 副主任药师 ； 研 究方 向： 药物分析 。t e l ： 1 8 6 6 8 9 0 6 3 0 7 ； e - m a i l ： w d x 0 9 1 8 1 6 3 c o rn 2 0 1 4年 第 1 5卷 第 4期2 9 0 液 的配制方面不够完善， 特别是容量法含量测定方 法非常繁琐 ， 精确度也很不 理想 ， 亟待修订完善标 准。本文重点介绍对原标准 含量测定 项 的修订 完善工作， 改进方法准确、 简便， 为 中国药典) 2 0 1 0 年版药用辅料低取代羟丙纤维素羟丙氧基含量测定 方法的修订 提供 了科学依据。标 准 中其他 内容 的修订 现亦被 中国药 典 2 0 1 0年版第 二增 补 本 收载 。 1 仪器与试药 g c 2 0 1 0气 相 色谱 仪 (日本 s h i ma d z u ， 配 置 a o c 2 0 i 自动进样器和氢火焰离子化检测器) ； 德 国 n e o l a b d u r a n红盖反应瓶 ( 配置 p b t螺纹 口瓶 盖 ， p t f e衬垫 ) ； d g g 9 0 7 0 b型 电热恒温鼓 风干燥 箱( 中国森信实验仪器有限公 司) ； 瑞士 me t t l e r a e 1 6 3电子天平 。 2 碘丙 烷 对 照 品 ( 美 国 a c r o s o r g a n i c ，批 号 a 0 2 4 7 6 2 4， 标示含量 9 8 0 ， 经气相面积归一化 法验证纯度为 9 9 7 2 ) ； 低取代羟丙纤维素 泰安 瑞泰纤维素有限公司、 浙江中维药业有限公 司、 山东 聊城阿华药业股份有 限公司 、 湖州展望药业有 限公 司、 安徽 山河药用辅料有限公 司各 3批 ， 共 1 5批样 品) ； 正 辛烷 ( 国药集 团化 学试 剂有 限公 司， 批 号 s c r c 8 0 0 9 5 5 2 8 w， a r ) ； 氢碘酸 ( 美 国 a c r o s o r g a n - i c ， 批号 a 0 2 4 9 5 7 3 ， 油浴蒸馏纯化后使 用 ) ； 己二酸 ( 国药 集 团化 学 试剂 有 限公 司 ， 批 号 t 2 0 0 7 0 2 1 3 ， a r， 9 9 5 1 0 0 2 ) 等。 2方法与结果 2 1 色谱条件及系统适用性试验 a g i l e n t d b - 6 2 4毛细管色谱柱 ( 3 0 m 0 5 3 m m 3 0 m) ； 氢火焰离子化检测器 ； 程序升温 ， 1 0 0 o c 保持 1 0 m i n ， 以 5 0 o c m i n 升至 2 3 0保持 2 mi n ； 进样 口温度 2 0 0； 检测器温度 2 5 0 o c； 载气为氮气 ； 柱流量 3 0 ml mi n ， 分流比 1 0 ： 1 ； 进样量 1 0 i l l 。 理论板数按正辛烷峰计算应不低于 1 5 0 0 ( 填充 柱) 或 1 0 0 0 0 ( 毛细管柱) ， 2 碘丙烷和内标物质峰 的 分离度应符合要求。取对照品溶液先后进样 5次 ， 相对标准偏差应不大于 3 o 。 2 2溶 液 的制备 2 2 1 内标溶液称取正辛烷约 0 5 g ， 精密称定 ， 置 1 0 0 m l量瓶 中， 加邻二 甲苯溶解并稀释至刻度 ， 摇匀 ， 即得 。 dmg s t a n d a r d s o f c h i n a 2 0 1 4 v0 l 1 5 n o 4 进样瓶 ) 中加入 己二酸 6 01 0 0 m g ， 分别精密加入 内标溶液 和 5 7 0 g l 氢碘 酸溶 液各2 ml ， 密封 ， 精密称定 ； 注射器穿刺加入 2 - 碘丙烷对 照品约 6 8 l ， 精密称定 ， 两次称定结果 相减 即为对照 品加 入 量。振摇约 3 0 s ， 静置 ， 取上层溶液即得 。 2 2 3 供试 品溶液取供试 品约 6 5 m g ， 精密 称 定 ， 置已称重的反应瓶中 ， 加己二酸 6 01 0 0 m g ， 分 别精密加入 内标溶液 和 5 7 0 gl 氢 碘酸溶 液各 2 m l， 密封 ， 称重 ， 1 3 01 5 0 o c震荡 6 0 mi n ， 或 1 3 0 1 5 0 o c加热 3 0 rai n ， 剧烈振摇 5 mi n ， 继续 在 1 3 0 1 5 0 o c加热 3 0 ra i n ， 冷却至室温 ， 称重若失重少于反 应瓶 中内容物的 0 5 0 ， 且无渗漏 ， 取混合液的上 层溶液作为供试 品溶液 ； 若失重大于反应瓶 中内容 物 的0 5 0 ， 则应重新制备供试品溶液 。 2 3专属性试验 分别取 2 - 碘 丙烷 对照 品试 剂原 液 、 对 照 品溶 液、 供试品溶液各 1 0 i l l ， 注入气相色谱仪， 记录色 谱 图。见图 1 3 。 噬 删 o 1 2 3 4 5 6 7 ，m l n 图 1 2 - 碘 丙烷定位 g c色谱 图( 进样 溶液 为 2 一 碘 丙烷对 照 品试剂原液 ) 毒 嘿 脚 。1 内# m 一 0 1 2 3 4 5 6 7 ， m i n 图 2 对照品溶液 g c色谱 图 2 2 2 对照品溶液 反应瓶 ( 可取 1 0 ml的顶空 图3 供试品溶液( c 公司2 0 0 8 0 2 1 3 批号样品) g c色谱图 5 = = = = l= 一 5 2 dr ug st an d a r d s o f chi na 2 01 4 vo 1 1 5 no 4 上述结果表 明回收率 良好 。 2 4 精密度试验 2 4 1 重复l生 考察( 同一实验室测定) b公司生产 的样品 1 批( 批号 2 0 0 8 0 3 0 6 ) ， 依法测定三次， 其含量结 表1 重现性考察结果( 含量 ) 中国药品标准2 0 1 4年第 1 5 卷第 4 期 2 9 1 果分别为 7 8 1 、 7 8 3 及 7 9 0 ， 其 r s d为 0 6 0 。 2 4 2 重现性考察 ( 不 同实验室测定 ) a公司生 产的样品 3批( 批号 0 6 0 8 0 3 ， 0 7 1 2 0 1 ， 0 8 0 1 1 3 ) ， 分别 由三个不同实验室测定含量 ， 结果见表 1 。 2 5 稳定性试验 a公 司生产 的样 品 1批 ( 批号 0 8 0 1 1 3 ) 制备的 供试品溶液分别在 0， 6， 1 1 ， 3 5， 5 3 ， 1 0 7， 1 3 1 h进样 表 2稳定性试验结果 测定 ， 结果见表 2 。数据显示 ， 只要选 用具有 良好 密封性的进 样瓶 ， 在 5 d内测定 结果 稳 定 r s d 2 0 。 2 6 加样 回收率试验 取批号为 0 8 0 4 0 1 的样品约 3 2 5 ( 即样品 6 5 m g 减半取样) 共 9份， 精密称定 ， 置已称重的反应瓶中， 分 别加入己二酸 8 0 n 1 g ， 分别精密加人内标溶液和 5 7 0 g l - 1 氢碘酸溶液各2 m l ， 密封， 称重 ， 依次加入2 一 碘丙 表 3加样回收率试验结果 ( 毛 细管柱) 烷 2 ， 4 ， 6 ( 每个浓度 3份) ， 精密称定 ， 1 5 0加热 3 0 m i n ， 剧烈振摇 5 m i n ， 继续在 1 5 0 c c 加热 3 0 m i n ， 冷却至 室温， 精密称定， 若减失重量少于反应瓶 中内容物 的 0 5 0 ， 且无证据表明有渗漏 ， 取混合液的上层溶液作 为供试品溶液。依法测定， 结果见表3 。 2 7 样 品测定 取 1 5批样 品， 依法测定 ， 结果见表 4 。同时表 中给出了复核单位测定结果 以及各厂家按 2 0 0 5年 版药典方法的测定结果 。 3 讨论 3 1 中国药典) 2 0 0 5年版二部采用容量法测定低 取代羟丙纤维素( 原名 ： 羟丙纤维素 ) 羟丙氧基 的含 量 ， 而 u s p 3 1 n f 2 6及 j p x v均采用气 相色谱法 测定 ， 用填充柱气相色谱法测定本 品和氢碘酸共 同 加热反 应 产生 的挥发 性 2 一 碘 丙 烷 ， 内标 法计 算。 中国药典) 2 0 1 0年版二部附录增订了气相色谱法 ( 毛细管色谱柱和填充色谱柱) ， 测定羟丙基醚纤维 素类物 质 与氢 碘 酸共 同加 热反 应产 生 的挥 发性 2 0 1 4年第 1 5卷第 4 期 2 9 2 表 4样品羟丙氧基 含量测定结果( ) 批 号 气 法 气 磊 警 。 2 9 4 4 7 9 5 3 6 8 o 5 8 ol 7 8 3 8 1 6 6 9 5 7 9 7 7 5 8 7 5 3 7 5 8 8 5 9 8 4 6 8 5 9 2 一 碘丙烷 ， 计算羟丙氧基含量( 浙江省药品检验所起 草方法 ) ， 我所采用该方法草案 ， 检测 了 l 5批样 品的羟丙氧基含量 ， 并验证 了方法的加样 回收率 、 实 验结果 的重复性和供试液的稳定性 ， 结果令人满意。 2 0 1 0年版 中国药典 药用辅料低取代羟丙 纤维素 ( 原名 ： 羟丙纤维素) 含量测定 项下采纳了我所增 订气相色谱法的建议 。 3 2 表 2结果显示 ： 重复性 ( 同一 实验 室测定 ) 良 好 ， 重现 i生( 不同实验室测定 ) 稍差 ， 分析原 因可能 由于随机选用的样品取代基本身含量很低 ， 取代基 含量越低 ， 结果 的 r s d值就越大 ， 当取代基 含量 提 高至 5 5 时， 可见 r s d值 已经 降至 2 8 。尽 管 如此 ， 这种实验室间的重现性结果 ， 也已经远远优于 焦 糖 中相 关 杂质 的测 定研 究 d mg s t a n d a r d s o f ch i n a 2 o 1 4 v 0 l _ 1 5 no 4 容量 法 。 3 3 从三个不 同实验室测量 以及复核所 ( 江苏省 食品药品检验所 ) 的反馈数据结果来 看 ， 本来 羟丙 氧基 的含量在 3 左右的样 品， 厂家用 2 0 0 5年版容 量法测定 ， 竞能得 出9 的结果 ， 可见用容量法测定 易得出非常不准确的结果。气相色谱法测定低取代 羟丙纤维素中羟丙氧基的含量 ， 方法 回收率高， 操作 简便、 快捷 ， 仪器的 自动化程度高 ， 结果的重复性 、 供 试液的稳定性均很好 。 3 4 实验应注意样 品预处理时使用的反应瓶 的密 封性能非常重要 ， 对耐压 、 耐热 以及防腐蚀性能要求 较高。为此 ， 我们从德 国 n e o l a b公 司进 口了厚壁 反应瓶 ， 取得了较为满意的结果。 3 5 中国药典 本品规定含量限度与上述国外药 典有 差 异 ， 前 者 规 定 含 羟 丙 氧 基 应 为 7 0 1 6 0 ， 后者为 5 0 一1 6 0 。拟建议 我 国药典 与国外药典保持一致 ， 利于较低取代度产品的开发 生产 ， 因此对限度有必要做相应的修订。 参考文献 1 罗 明生 ， 高天惠 ， 宋 民宪中国药用辅料 m 北京 ： 化学工业 出版社 ， 2 0 0 6， 7 1 5 - 7 1 6 2 rc 罗 ， p j 舍斯基 ， p j 韦勒药用辅料 手册 m 郑 俊 民主译北京 ： 化学 工业 出版社 ， 2 0 0 5 ， 3 4 0 3 4 2