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文档简介

HPLC法测定氨茶碱血药浓度,二、原理,四、内容,五、注意事项,三、器材与试药,一、目的,一、目的1掌握HPLC法测定氨茶碱血药浓度的方法2熟悉治疗药物监测(TDM)及药动学基本方法3了解血液样品采集方法,三、器械与试药1.器材：高效液相色谱仪、振荡器、离心机、氮吹仪、微量移液器。2.试药：25%乌拉坦溶液、肝素、氨茶碱注射液、咖啡因3.实验动物：家兔,（一）样品采集（二）样品处理（三）数据处理,四、实验内容,颈静脉插管,采集血液样品按50mg/kg氨茶碱颈静脉给药，于5、10、30、60、90、120、180、240min时抽取静脉血1mL,离心10min（3000r/min）,取上层血浆冷藏待用。,1样品采集,2样品处理,内标液20uL,HPLC测定,样品100uL,混合溶媒3mL,涡旋混合1min离心5min,下层有机相1.8mL,玻璃试管,50水浴氮气吹干,残渣,100L流动相,（1）绘制标准曲线：取空白血浆100L6份，分别置带盖玻璃试管中，加不同体积标准茶碱液，加内标液（咖啡因200g/mL）20L，以下同样品处理方法进行处理,3数据处理,（2）内标法计算样品浓度（3）根据血药浓度测定结果判别隔室模型（4）用3P97求算药动学参数,1、整个操作过程的平行性。2、进样器每次使用前用甲醇溶液冲洗5遍，外壁用滤纸擦干、待用。3、氮气流量不要太大，以液面被微吹动为宜。4、使用微量移液器，注意气液平衡现象，一般以第三次取液为宜。,五、注意事项,混合溶媒3mL,样品100uL,漩涡1min离心5min,移取下层有机相1.8mL,玻璃试管,50水浴氮气吹干,100L流动相溶解残渣,HPLC测定,血浆样品处理,内标液20uL,血浆样品采集,动物麻醉,插管,取空白血浆1mL,按时间点取含药血浆,取含药血浆具体操作：1.取出插管中废液2.取1mL血浆至离心管3.向插管中注入1m
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