（物理化学专业论文）span+80peg+400h2o囊泡制备、性质及其应用.pdf

华伟：s p a n8 0 p e g4 0 0 h 。0 囊泡制备、性质及其应用 中文摘要 1 高稳定性非离子s p a n8 0 p e g4 0 0 h 2 0 囊泡的制备与。性质研 究 通过振荡、超声的方法，成功地在s p a n8 0 p e g4 0 0 水三组分体系中制得了无 毒且具有高稳定性的非离子囊泡s p a n8 0 p e g4 0 0 h 2 0 ，并通过冷冻蚀刻电子显微 镜、负染电镜、动态光散射、示差扫描量热等方法研究了此囊泡的性质。实验结果 表明s p a n8 0 p e g4 0 0 i - 1 2 0 非离子囊泡的稳定时间可以超过一年。囊泡的直径大约 在1 0 0 1 8 0 纳米之间。制备体系的组成对囊泡的制备和性质有很大的影响。随着p e g 4 0 0 含量的增加，囊泡的稳定性和半径都减小。当水含量很少时( 小于1 0 0 ) ， 在s p a n8 0 p e g4 0 0 h 2 0 体系中没有囊泡形成。随着水含量的逐渐增加，囊泡在s p a n 8 0 p e g4 0 0 h 2 0 体系中形成，并且数量逐渐增多。当水含量达到大约5 0 0 ( w ) 时， 囊泡的稳定性比较好。对于亲水性药物( r i b a v i r i n ) 和憎水性药物( i b u p r o f e n ) 此囊 泡溶液都有显著的助溶作用。而温度以及p h 值的变化对囊泡半径的影响不明显。 另外文中还讨论了此非离子囊泡的形成机理。 2 s p a n8 0 p e g4 0 0 h 2 0 囊泡与牛血红蛋白性质的相互影响 通过紫外可见吸收光谱、荧光光谱、圆二色谱以及负染电镜和冷冻蚀刻电镜 等实验方法详细研究了牛血红蛋白h b 在s p a n 8 0 p e g4 0 0 h 2 0 囊泡体系中的结构特 性。得出的实验结果表明：血红蛋白能够通过亲水作用和氢键作用吸附在囊泡膜表 面，并且蛋白肽链在囊泡膜表面发生伸展。血红蛋白在h b 囊泡体系的紫外吸收峰 强度要明显小于其在h b 水体系的紫外吸收峰强度。血红蛋白在h b 囊泡体系的荧光 发射峰强度要明显大于其在h b 水体系的荧光发射峰强度。在h b 囊泡体系中，部分 血红蛋白由于能够通过氢键作用与囊泡膜结合，结合后血红蛋白自身的结构会更加 稳定。随着囊泡体系中p e g 4 0 0 含量的增加，血红蛋白的二级结构a 螺旋结构增加， b 折叠结构减少，p 一转角结构减少，无规卷曲基本保持不变。 2 扬州人学硕士学位论文 3 h b 和维生素c 在非离子囊泡体系中的性质 用囊泡模拟细胞膜，通过紫外可见吸收光谱、荧光光谱、圆二色谱、负染电 镜等实验方法，研究了在模拟生物体内环境中，维生素c 与血红蛋白的结合情况， 得出了维生素c 浓度的变化对h b 光紫外、荧光光谱的影响情况、v c h b h 2 0 和 v c h b n i o s o m e 体系中v c 与h b 的结合常数、血红蛋白在v c h b n i o s o m e 体系中的 稳定情况、以及血红蛋白的二级结构和形貌。实验结果表明囊泡体系对维生素c 的 荧光性质有很大影响，维生素c 的加入对v c h b 水和v c h b 囊泡体系血红蛋白的 荧光光谱都有猝灭作用；维生素c 的加入改变了v c h b 水和v “h b 囊泡体系的微 观结构，v e 浓度的增加能够增强v c 、蛋白以及囊泡间的亲水作用和氢键作用，从 而增加血红蛋白和囊泡的聚集程度，改变血红蛋白的二级结构。 华伟：s p a n8 0 p e g4 0 0 h z 0 囊泡制备、性质及其应用 3 a b s t r a c t 1 p r e p a r a t i o na n dp r o p e r t i e so fh i g h l ys t a b l ei n n o c u o u sn i o s o m e i ns p a n8 0 p e g4 0 0 h 2 0s y s t e m t h eh i g h l ys t a b l ei n n o c u o u sn i o s o m ec o m p o s e do fo n l yt h r e ec o m p o n e n t si s s u c c e s s f u l l yp r e p a r e di ns p a n8 0 p e g4 0 0 h 2 0s y s t e mb ys o n i c a t i n g t h en i o s o m e p r o p e r t i e sa r es t u d i e db ys o m em e a n so ff r e e z ef r a c t u r er e p l i c a t i o n - t r a n s m i s s i o ne l e c t r o n m i c r o s c o p y ，n e g a t i v es t a i n i n g t r a n s m i s s i o n e l e c t r o n m i c r o s c o p y ，d y n a m i cl i g h t s e a t t e r i n ga n dd i f f e r e n t i a ls c a n n i n gc a l o r i m e t r y t h eo b t a i n e dr e s u l t si n d i c a t et h a tt h e s p a n8 0 p e g4 0 0 h 2 0n i o s o m ec a nb es t a b l ef u ro v e ro n ey e a r t h en i o s o m ed i a m e t e ri s a b o u t1 0 0 1 8 01 1 1 1 1 t h ec o m p o s i t i o n so f t h es y s t e ma f f e c tt h ep r e p a r a t i o na n dp r o p e r t i e s o ft h en i o s o m e w i t ht h ei n c r e a s eo fp e g4 0 0c o n t e n ta tt h em a s sr a t i oo fs p a n 8 0 h 2 0 = 0 0 0 3 0 9 9 0 ，t h es t a b i l i t ya n dt h ed i a m e t e ro ft h en i o s o m ed e c r e a s e w h e nh 2 0 c o n t e n ti si n s u f f i c i e n t ( 9 9 ，湖北潜江制药股份有限公司) ，阿昔洛韦( a c y ， 9 9 ， 湖北潜江制药股份有限公司) ，配制溶液用水为二次水。 所用试剂的分子结构示意图如下： 0 h h 2 0 0 c c l 7 h 3 3 ( s p a n8 0 ) h ( o c h 2 c h 2 ) n o h ( p e g 4 0 0 ，n = 8 1 0 ) ( a c y c l o v i r ) 誊h b c h - - c h 2 心l 。h ( i b u p r o f e n ) 2 2 2 囊泡的制备 将s p a n8 0 ，p e g4 0 0 和水按一定比例混合振荡后超声1 0 1 5 分钟制得囊泡。 ( c q x 2 5 0 6 超声仪，上海有限公司s h a n g h a ib i l i e n gs o n i c m o rc o l t d ) 通过影像分 析仪( c o m p u t e r i z e dm i c r o g r a p h si m a g ea n a l y z i n gm e t e r ，s k 一8 8 2 ，s a n k oc o ，j a p a n ) 观察形成的囊泡大小和分布情况的变化来判断囊泡的稳定时间。 ci叶吒of(|)ic h o h h 华伟：s p a n8 0 p e g4 0 0 h z 0 囊泡制备、性质及其应用 2 3 2 2 - 3 囊泡的冷冻蚀刻电镜 冷冻蚀刻电镜技术( f f t z m ) 也能用来检测囊泡的大小，形貌和粒径分布1 5 】。 冷冻蚀刻电镜样品的制备严格按照冷冻蚀刻的要求，制样过程中使用高真空冷冻蚀 刻仪( b a l z e r sb a f 一4 0 0 d ) 所制得的样品通过透射电镜观察( t e m ，t e c n a i r ，p h i l i p a p p a r a t u sc o ) 样品分散度小于0 0 3 ，表明样品分布是均匀的。 2 2 4 囊泡的负染电镜 囊泡的大小，形貌还可以通过负染透射电镜技术来观察( n s t e m ) 【1 2 1 。将含有 囊泡的样品滴在2 0 0 目具有f o r m v a r ( p o l y v i n y lf o r m a l ) 膜的载网上。样品在f o r m v a r 膜 上吸附1 5 分钟后，滴加染液磷钨酸( p t a ，染色液) 。2 分钟后，用滤纸吸取多余的染 液，用台灯烘干。囊泡的大小和形貌可以清楚的通过透射电镜t e c n a i l 透射电镜 ( p h i l i p a p p a r a t u sc o ，u s a ) 观察，囊泡的粒径分布和稳定性同样可以观察和检验。 2 2 5 动态光散射的测量 动态光散射的测量( d l s ) 由一台标准设计的分光光度计( a l v 一5 0 0 0 e w i n m u l t i p l et a nd i g i t a lc o r r e l a t o r ) 和一台激光仪( s p e c t r a - p h y s i c s2 0 1 72 0 0m w a r ，波长 5 1 4 5n m ) 囊泡的半径以及粒径分布由仪器附带的软件分析得出。在分析强度自相关 函数时采用连续积分的方法，散射角为9 0 0 。实验开始前，将样品溶液以1 2 0 0 0 转 分钟的速度离，t j , 3 0 分钟，除去灰尘。 2 2 6 相转变温度的测量 相转变温度的测量使用示差扫描量热仪( n e t z s c hd s c2 0 4 f 1 ，德国) 一定质量 的按比例配制的s p a n8 0 p e g4 0 0 i - 1 2 0 囊泡溶液被装入铝制的小测试容器中，盖上 铝制的盖子，密封好。测量时升温速率为l o * c m i n ，升温范围为4 0 1 4 0 c 从d s c 曲 线，可以得到囊泡的相转变温度( t 。) 。 2 2 7p h 值的测量 p h 测量使用p h s 2 5 型p h 计测量( 上海英格仪器有限公司) 。 2 2 8 层状液晶的观察 使用偏振光显微镜( 5 9 x ，s h a n g h a ip h o t o l o g ya p p a r a t u sc o ) 和小角x 超速衍射 计( b u r u k ed 8 ，b u r u k ec o g e r m a n ) 观测层状液晶。 2 4 扬州大学硕十学位论文 上述所有实验都是在2 5 0 + 0 1 条件下进行，所有实验样品在每次实验前都平 衡2 d 时。 2 3 结果与讨论 2 3 1s p a n8 0 p e g4 0 0 h 2 0 囊泡的形貌 按照一定的质量比例，将s p a n8 0 、p e g4 0 0 和水混合振荡、超声制得s p a n8 0 p e g 4 0 0 , h 2 0 囊泡。囊泡的大小和形态由冷冻蚀刻电镜、负染电镜以及电子显微镜观察 得出( 图2 1 , a - c ) 。囊泡的大小几乎是统一的。在不同比例的s p a n8 0 p e g4 0 0 h 2 0 体 系中，囊跑半径范围大致为1 0 0 1 8 0 n m ，r h 为7 2 ：1 ：6a m ，r h 与体系成分含量有关。从 囊泡的大小及形貌的观察发现，s p a n8 0 p e g4 0 0 h 2 0 囊泡的稳定时问超过一年。这 表明s p a n8 0 p e g4 0 0 h 2 0 体系能够制得具有高稳定性的三组分非离子囊泡。 华伟：s p a n8 0 p e g4 0 0 h z 0 囊泡制备、性质及其应用 ( c ) 圈2 1s p a n8 0 p e g4 0 0 1 - 1 2 0 体系中囊泡的照片 ( a ) 冷冻蚀刻- 电镜照片( ”负染- 电镜照片( c ) 影像分析照片( 1 ：2 0 0 0 ) s p a n8 0 p e g4 0 0 h 2 0 质量比：0 0 0 3 0 1 0 9 9 0 s c a l eb a r ：( a ) 2 5 0n m ；( b ) 1 0 0n m 2 3 2p e g4 0 0 对囊泡性质的影响 2 3 2 1p e g4 0 0 对囊泡形成的影响 s p a n8 0 p e g4 0 0 i - 1 2 0 囊泡的性质与它自身组分的含量密切相关。按s p a n 8 0 h 2 0 质量比0 0 0 3 0 9 9 。0 ，随着p e g4 0 0 含量的增加，囊泡的稳定性和半径都减 小( 图2 3 、2 4 ) 。当p e g4 0 0 含量大约在7 0 ( ) 时( 图2 2 0 ，囊泡的稳定时间小 于1 5 天。当p e g4 0 0 含量大于1 0 o ( 、v l ) 时( 图2 2 9 ) ，囊泡是不稳定的，其稳定 时间小于2 天。 ( b ) 扬州大学硕士学付论文 图2 2 囊泡体系的负染电镜照片 w p e g 1 0 0 ( ) ：( a ) 1 o ，( b ) 2 o ，( c ) 3 o ，( d ) 4 0 ，( e ) 5 o ，( t ) 7 o ，( g ) 】o o ( h ) 是囊泡( o 放置1 5 天后。 s p a n8 0 h 2 0 质量比：o 0 0 3 0 9 9 0 s c a l eb a r ：1 0 0n m 根据图2 3 ，随着p e g4 0 0 浓度的增加，囊泡的稳定时间稍有降低，但当p e g 4 0 0 浓度大于3 时，囊泡的稳定时间随p e g 4 0 0 的增加急剧下降，这表明p e g 4 0 0 低浓 华伟：s p a n8 0 p e g4 0 0 h 。0 囊泡制各、性质及其应用 度时其浓度变化对囊泡稳定性影响较小，而当p e g 4 0 0 浓度较大时，囊泡的稳定性 急剧降低。 w p e g4 0 0 ( w t ) 图2 3 囊泡稳定时间随p e g4 0 0 含量变化图 同样，囊泡的粒径大与稳定时间有着相似的变化规律。随着p e g 4 0 0 浓度的增 加，囊泡的大小先缓缓下降，当p e g 4 0 0 浓度高于3 时再急剧下降，这表明p e g 4 0 0 低浓度时其浓度变化对囊泡粒径影响较小，而当p e g 4 0 0 浓度较大时，囊泡粒径明 显变小。 扬州大学硕士学位论文 图2 4 囊泡粒径大小随p e g4 0 0 含量变化图 因为非离子表面活性齐t j s p a n8 0 具有很强的憎水性，因此在水中很难形成分子有 序组合体囊泡。具有较大亲水性的p e g4 0 0 的加入有助于调节系统的亲水性。当s p a n 8 0 i - 1 2 0 质量比为0 ，0 0 3 0 i 0 、p e g4 0 0 含量为5 0 8 0 ( ) 时，s p a n8 0 p e g4 0 0 i - 1 2 0 体系能够形成囊泡。但是随着p e g4 0 0 含量的迸一步增大，形成的囊泡数量减少( 图 2 5 ) 。当p e g4 0 0 含量大于8 0 ( 州) ，s p a n8 0 p e g4 0 0 i t 2 0 体系中没有囊泡生成，只 有有微球形成( 图2 5e 0 。一般情况下，要制备囊泡，其体系必须保持亲水憎水的 平衡。因此，在s p a n8 0 h 2 0 质量比为0 0 0 3 0 1 o 条件下，要形成囊泡，p e g4 0 0 含量 应该小于5 0 ( 州) 。 在p e g4 0 0 含量较低的条件下，几乎所有的p e g4 0 0 分子都通过这键和亲水作 用与s p a n8 0 分子相作用，从而形成囊泡的两亲分子双层。因此，在低浓度条件下， p e g4 0 0 含量的增加会增强囊泡膜的作用和刚性。但是，随着越来越多亲水性的p e g 4 0 0 分子与囊泡膜作用，会导致囊泡膜的刚性和稳定性的降低，直到有序结构破裂。 p e g 4 0 0 含量大于7 0 ( 州) 的囊泡被放置1 5 天后，在溶液中会观察到明显的絮状物 ( 图2 2h ) 。这些实验结果表明p e g4 0 0 含量较高的囊泡溶液是热力学不稳定体系， 很可能会发生聚集而形成絮状物。另一方面，当p e g4 0 0 含量很大时，大量的p e g4 0 0 华伟：s p a n8 0 p e g4 0 0 h 。0 囊泡制备、性质及其应用 分子会进入囊泡膜，这会引起有序的膜结构的改变，最终导致膜的破裂。 ( c ) ( e )( d 图2 5s p a n8 0 p e g4 0 0 h 2 0 体系的负染一电镜照片 s p a n8 0 h 2 0 质量l t ：o 0 0 3 0 1 0 ，w p m 4 0 0 ( ) ：( a ) 5 0 0 ，( b ) 6 6 6 ，( c ) 7 5 0 ，( d ) 8 0 0 ，( e ) 8 3 4 ，( f ) 9 0 0 s c a l eb a r ：1 0 0n m ， 3 0 扬州人学硕十学位论文 2 - 3 2 2p e g 4 0 0 含量对囊泡热稳定性的影响 d s c 可以用来检测囊泡聚集和相转变过程中的热效应。当体系温度升高到一定 值时，囊泡双分子膜中有序排列分子的碳氢链会由较刚性的( 全反式) 凝胶态向较 柔顺的( 歪扭构象) 液晶态转变，并拌有热效_ 直【2 6 】。一般说来，相变温度( t c ) 反 映有序排列的两亲分子之问的相互作用情况。t c 越高反映成膜分子间相互作用越 强，双分子膜结构越稳定。在s p a n8 0 p e g4 0 0 h 2 0 体系中，p e g4 0 0 含量对囊泡相 转变温度t c 的影响( 如图2 6 ) 。根据图2 6 ，t o 随着p e g4 0 0 含量的增加而增加。 图中第一个点对应的是水的蒸发( t r o 1 根据凝固点降低公式= k ，m 。) 。 其余的点对应的都是囊泡的相转变点。p e g4 0 0 的增加使得构成囊泡膜分子间的作 用加强，囊泡的热稳定性增加。当p e g4 0 0 含量大于7 0 ( 叭) 时，体系中出现絮 状物。当体系逐渐加热到1 1 2 。c ，从实验上可以用偏振光显微镜观察到体系有明显 的偏振光，这表明囊泡转变成为了液晶。 u h w p e g 4 0 0 图2 6 囊泡的相转变温度变化图 w p e 0 4 0 0 ( ) ：( a ) 1 0 ，( b ) 3 0 ，( c ) 4 0 ，( d ) 5 0 ，( e ) 7 0 ，( f ) 1 0 0 质量比s p a n8 0 h z o ：0 0 0 3 0 9 9 0 华伟：s p a n8 0 p 阱4 0 0 h ：0 囊泡制备、性质及其应用 3 2 4 水含量对囊泡形成的影响作用 同样水含量对囊泡的形成也非常重要。当水含量很少时( 小于1 0 0 、v t ) ，在 s p a n8 0 p e g4 0 0 h 2 0 体系中没有囊泡形成。随着水含量的逐渐增加，囊泡开始在 s p a n8 0 p e g 4 0 0 h 2 0 体系中形成，并且数量逐渐增多( 如图2 7 ) 。当水含量达到 大约5 0 o ( 叭) 时，囊泡的稳定性比较好( 图2 7b - d ) 。当水含量较少时，s p a n8 0 分 子与p e g4 0 0 分子问的碰撞几率以及分子有序组合体之间的相互作用都比较大，形 成的囊泡也会因为囊泡膜相互的重叠作用而导致其不稳定，这些都会阻碍囊泡的的 形成。随着水含量的增加，体系中各分子问的距离将因为稀释作用而增大，同时也 会为囊泡的形成提供足够的空间和适合的亲水条件。因此，在一定比例的s p a n 8 0 p e g4 0 0 h 2 0 体系中，囊泡能够形成并且保持稳定。 ( a ) ( c )( d ) 图2 7s p a n8 0 p e g 4 0 0 h 2 0 体系中囊泡的负染- 电镜照片 质量比s p a n 8 0 p e g4 0 0 ：0 0 0 3 0 0 9 9 7 0 w h 2 0 ( ) ：( a ) 扬州大学硕七学位论文 图4 1 4v c h b t k 体系的负染电镜照片 c v c x l 0 4 ( m o l l 。1 ) ，a ，g ：0 ，0 3 ，0 5 ，o 7 ，0 9 ，1 ，3 ，5 ； 而在h b 囊泡体系中加入v c 以后，维生素c 与血红蛋白、囊泡膜都能通过氢 键发生结合作用。因此可以从负染一电镜照片看到( 图4 1 5 ) ，h b 的囊泡溶液在加 入v e 以后，血红蛋白的聚集程度也是增加的，并且随着v e 浓度的增加，囊泡的聚 华伟：s p a n8 0 p e g4 0 0 h z o 囊泡制各、性质及其应用 7 l 集程度也增大。 ( a ) ( c ) ( e ) 扬州大学硕士学位论文 ( 曲 图4 1 5v c h b n i o s o m e 体系的负染电镜照片 c v c x l 0 4 ( m o l l 1 ) ，a - g ：0 ，0 3 ，0 5 ，o 7 ，0 9 ，1 ，3 ，5 ； 4 3 4v c h b 囊泡体系中h b 的二级结构 h b 的水溶液加入v c 以后，h b 各种二级结构a 一螺旋结构，p 一折叠、p 一为角( t u r n ) 结构，以及无规卷曲结构都发生了一定变化( 图4 1 6 ) 。 随着v c 浓度的增加，一螺旋结构逐渐降低，p 一折叠、p 一为角( t u r n ) 结构逐渐上 升，而无规卷曲结构基本保持不变。这主要是因为维生素c 分子结构中含中羟基， 它能通过氢键作用与血红蛋白发生作用，从而一定程度上改变了血红蛋白的二级结 构。 图1 9 水溶液中蛋白h b 二级结构随维生素c 浓度增加的变化情况 c v c x l 0 4 ( m o i l 一1 ) ，0 7 ：0 ，o 3 ，o 5 ，0 7 ，0 , 9 ，l ，3 ，5 ； 华伟：s p a n8 0 p e g4 0 0 h ：0 囊泡制备、性质及其应用 而在v c h b 囊泡体系中，随着v c 的加入，血红蛋白二级结构的变化稍有不同 ( 图4 1 7 ) 。主要是因为加入v c 之前，部分血红蛋白已经吸附于囊泡膜表面，加入 v c 后，维生素c 又能通过氢键作用吸附于囊泡表面，同时也能与已吸附于囊泡表面 的血红蛋白分子作用，这样血红蛋白的二级结构也会发生变化。 霎 善 l 圈4 1 7 囊泡溶液中蛋白h b 二级结构随维生素c 浓度增加的变化情况 v c 1 0 4 ( m o l l 。1 ) t0 - 7 ：0 ，0 3 ，0 5 ，0 7 ，0 9 ，l ，3 ，5 ； 4 3 。5 结论 1 维生素c 的加入对v c h b 水和v c h b 囊泡体系的荧光光谱都有猝灭作用。 但是囊泡体系对血红蛋白的荧光猝灭程度较小，血红蛋白在囊泡体系中的稳定性大 约是水体系中的两倍，囊泡体系对血红蛋白有稳定作用。 2 维生素c 的加入对v c h b 水和v c h b 囊泡体系的微观结构有影响，v c 能够 通过氢键作用增加血红蛋白和囊泡的聚集程度。 3 维生素c 的加入对v c h b 水和v c h b 囊泡体系中血红蛋白的二级结构有一 定的影响。随着维生素c 浓度的增加，仪螺旋结构逐渐降低，p 折叠、b 转角( t u r n ) 结构逐渐上升，而无规卷曲结构基本保持不变。 7 4 扬州大学硕十学位论文 参考文献： 1 h e n r i kt eh e e s e n a n n am e l i s s as c h l i r e ra n dj l i r g e ns c h l i t t e r , j o u r n a lo fm o l e c u l a r g r a p h i c sa n dm o d e l l i n g ，2 0 0 7 ，2 5 ( 5 ) ：6 7 1 6 7 9 2 h h o w a r dx u l i l i a nr e a la n dm e l i s s aw ub m l e y ，b i o c h e m i c a la n db i o p h y s i c a l r e s e a r c hc o m m u n i c a t i o n s ，2 0 0 6 ，3 4 9 ( 4 ) ：1 2 5 0 1 2 5 7 3 k a r i mb e d j e g u e l a l ，h u g u e sb i e n a y m 6 ，a n t o i n ed u m o u l i n ，s t 6 p h a n ep o i g n y , p h i l i p p es c h m i ua n de r i ct a m ，b i o o r g a n i e & m e d i c i n a lc h e m i s t r yl e t m r s ，2 0 0 6 ， 1 6 ( 1 5 ) ：3 9 9 8 4 0 0 1 4 c o n s t a n t i n o sk z a c h a r i s ，g e o r g i o sa t h e o d o r i d i s ，a l e sp o d g o m i ka n da n a s t a s i o s n v o u l g a r o p o u l o s ，j o u r n a lo f c h r o m a t o g r a p h y a ，2 0 0 6 ，1 1 2 1 ( 1 ) ：4 6 - 5 4 5 d a n i e lj p a r k s ，l o u i sv _ l a f r a n c e ，r a u lr c a l v o ，k a r e nl m i l k i e w i c z ，j u a nj o s 6 m a r u g h n ，p i e r r er a b o i s s o n ，c a r s t e ns c h u b e r t ，h o l l yk k o b l i s h ，s h u y u a nz h a o ， c a r o lef r a n k s ，e ta t ，b i o o r g a n i e & m e d i c i n a lc h e m i s t r yl e t t e r s ，2 0 0 6 ，1 6 ( 1 2 ) ：3 3 1 0 3 3 1 4 6 s o n us u n d ds i n g ha n dj i t e n d r am e h t a ，j o u r n a lo fc h r o m a t o g r a p h yb ，2 0 0 6 ，8 3 4 n 一2 ) ：1 0 8 1 1 6 7 x i a o x i ay a n g ，z e p i n gh u ，s u iy u n gc h a na n ds h u - f e n gz h o u ，c l i n i c ac h i m i c a a c t a , 2 0 0 6 ，3 6 5 ( 1 2 ) ：9 2 9 8 t a t j a n at r t i d p e t r o v i da n dj a na k ej 6 n s s o n ，j o u r n a lo fc h r o m a t o g r a p h yb ，2 0 0 5 ， 8 1 4 ( 2 ) ：3 7 5 3 8 4 9 y i n gc h e n g ，e l e n ah o ，b a b us u b r a m a n y a ma n dj i h l i et s e n g ，j o u r n a l o f c h r o m a t o g r a p h yb ，2 0 0 4 ，8 0 9 ( 1 ) ：6 7 - 7 3 1 0 n i e o l ea k r a t o c h w i l ，w a l t e rh u b e r ，f r a n c i sm f i l l e r , m a n f r e dk a n s ya n dp a u lr g e r b e r , b i o c h e m i c a lp h a r m a c o l o g y ，2 0 0 2 ，6 4 ( 9 ) ：1 3 5 5 1 3 7 4 11 赵华，董银卯，何聪芬，兰社益，维生素c 脂质体的制备与研究，香料香精化 妆品，2 0 0 6 ，3 ：1 7 2 0 1 2 d i m i t r i o sgf a t o u r o s ，b j o i t ib e r g e n s t a h la n d a n e t t em u u e r t z ，e u r o p e a nj o u r n a lo f p h a r m a c e u t i c a ls c i e n c e s ，2 0 0 7 ，31 ( 2 ) ：8 5 9 4 1 3 g o r i le i d ef l a t e n ，h e i k eb u n j e s ，k r i s t i n al u t h m a na n dm a r t i nb r a n d le u r o p e a n j o u r n a lo fp h a r m a c e u t i c a ls c i e n c e s ，2 0 0 6 ，2 8 ( 4 ) ：3 3 6 3 4 3 华伟：s p a n8 0 p e g4 0 0 h 。0 囊泡制各、性质及其应用 7 5 1 4 c v e r m e h r e n s f r o k j a e r , t a u r s t a da n dj h a n s e n , i n t e r n a t i o n a lj o u r n a lo f p h a r m a c e u t i c s ，2 0 0 6 ，3 0 7 ( 1 3 ) 8 9 9 2 1 5 r a f i la m a r i n e l l i ，p a m e l as t i e t za n dn i c h o l a sel a r u s s o ，j o u r n a lo f h e p a t o l o g y ，2 0 0 5 ，4 2 ( 4 ) ：5 9 2 6 0 3 1 6 李秋菊，王亚红，刘秀萍，维生素c 的测定方法，太原师范学院学报( 自然科学 版) ，2 0 0 5 ，4 ( 1 ) ：8 9 9 1 1 7 陆茜，陈风群，万昆，紫外分光光度法测定维生素c 含量，江汉大学学报( 自然 科学版) ，2 0 0 5 ，3 3 ( 2 ) ：6 8 6 9 1 8 金锋，认识维生素c ，中国食物与营养，2 0 0 6 ，1 ：4 7 4 8 1 9 曹愫，肖细梅，少年儿童与维生素c ，株洲师范高等专科学校学报2 0 0 5 ，1 0 ：2 2 0 邓奋刚，维生素c 治疗眼酸性化学伤，中国使用眼科杂志，1 9 9 6 ，1 4 ( 8 ) ：4 9 7 4 9 8 2 1 d a id ez a i ，c h e ns h i h o n g ，f e n g y u ，c h i njn a tm e d ，2 0 0 4 ，2 ( 4 ) ：2 2 3 2 3 2 2 2 李任强，有效维生素c 的稳定性研究，广西农业大学学报，1 9 9 4 ，1 3 ( 3 ) ：2 4 1 2 4 6 2 3 马永喜，张宏福，维生素c 的稳定性及其对策，中国饲料，1 9 9 9 ，1 6 2 4 陈国珍，黄贤智，许金钩，荧光分析法，北京：科学出版社，1 9 9 0 ，2 0 1 2 1 2 2 5 l a k o w i c s zj r p r i n c i p l e so ff l u o r e s c e n c es p e c t r o s c o p y n e wy o r k ：p l e n u mp r e s s ， 1 9 8 3 ，p 2 5 7 2 6 游毅，郑欧，邱羽，郑叶鸿，赵剑曦，阳离子表面活性剂的合成及其胶束生成，物理 化学学报，2 0 0 1 ，1 7 ( 1 ) ：7 4 7 8 2 7 魏晓芳，刘会洲，t t i t o n x 一1 0 0 与牛血清百蛋白的相互作用，分析化学研究简报， 2 0 0 0 ，2 8 ：6 9 9 7 0 1 2 8 李振中，蒋治良，陈媛媛，孙双娇，周苏梅，蛋白质与阳离子表面活性剂缔合微 粒体系的光谱特性及分析应用，应用化学，2 0 0 5 ，1 2 ( 2 2 ) ：1 3 0 4 1 3 0 7 2 9 夏咏梅，方云，刘雪锋，蔡琨，阴离子表面活性剂与非离子水溶性大分子二元体 系的临界类胶束聚集数，高等学校化学学报，2 0 0 2 ，2 3 ( 1 0 ) ：1 9 11 - 1 9 1 4 扬州i 大学硕十学位论文 第五章结论 1 利用s p a n8 0 、p e g4 0 0 以及水可以制得一种具有较高稳定性的简单三组分非 离子囊泡。s p a n8 0 p e g4 0 0 1 4 2 0 非离子囊泡的制备比较简单、易于控制，制备成 本低。在s p a n8 0 p e g4 0 0 h 2 0 体系中，组分含量对囊泡的制备有较大的影响，随着 p e g4 0 0 含量的增加，囊泡的稳定性和半径都减小。当水含量很少时( 小于1 0 0 w ) ，在s p a n8 0 p e g4 0 0 h 2 0 体系中没有囊泡形成。随着水含量的逐渐增加，囊 泡开始在s p a n8 0 p e g4 0 0 h 2 0 体系中形成，并且数量逐渐增多。当水含量达到大 约5 0 o ( m ) 时，囊泡的稳定性比较好。 2 s p a n8 0 p e g4 0 0 h 2 0 非离子囊泡的制备受温度以及p h 变化的影响较小，所 得囊泡的性质没有明显的变化，便于进行大规模的工业生产。 3 在囊泡体系中，h b 能够通过亲水作用和氢键作用，吸附于囊泡膜表面，使得 蛋白的肽链在囊泡膜表面逐渐伸展，肽链打开，蛋白质二级结构因而发生一定的变 化。并且随着p e g 4 0 0 含量的增加，囊泡与蛋白间相互作用逐渐增强，蛋白在囊泡 膜表面聚集增多。而当蛋白浓度逐渐增加时，越来越多的囊泡通过蛋白而相互聚集。 由于在囊泡体系中，蛋白能够吸附在囊泡膜的表面，蛋白质肽链在膜表面伸展，其 蛋白质结构会因此比较稳定，因而蛋白在囊