血细胞分析在临床中的应用ppt课件.ppt

血细胞分析在临床中的应用,1,血细胞分析的发展,近年来,随着科学技术的飞速发展及计算机在血液分析仪中的广泛应用,各种先进的血液分析仪逐渐普及.,2,1953年，第一台血细胞计数仪问世，标志着这一项目抛弃了作坊式手段；,1913-1998,ModelA,Highspeedautomaticbloodcellcountandcellsizeanalyzer,3,原理,血液分析仪主要是利用阻抗原理进行细胞计数的.不同体积的血细胞,因其电阻大小不同,而产生相应大小的脉冲,分别进入到仪器设置的不同通道,4,5,CBC(全血细胞计数)+DIFF(WBC分类)模式下WBC计数分类,WBC/DIFF通道对WBC计数和分类时,使用的两个信号:细胞经半导体激光激发产生侧向荧光强度侧向散射光强度信号,6,使用的两种试剂:溶血素(4DL):将RBC完全溶解,同时在WBC膜表面打孔荧光染料(4DS,聚次甲基荧光染料)通过小孔进入WBC内,对胞浆和胞核中的核酸物质进行染色,7,测定,经过核酸荧光染色后的WBC在633nm激光的照射下,产生侧向荧光信号和侧向散射光信号。侧向荧光强度与WBC的核酸(DNA/RNA)含量成正比,侧向散射光强度反映了细胞内容物的复杂程度(核的分叶,胞浆颗粒的大小,数量,分布均匀程度)。,8,1,2,3,4,5,9,鞘流技术激光计数原理示意图,1流通池2梭头3样本头4鞘流头5透镜6吸收光7低角度散射光检测8高角度散射光检测9光源,9,10,11,SideScatter(Internalstructure),淋巴细胞,单核细胞,嗜中性细胞,嗜酸细胞,Fluorescence(RNA,DNA),RBCghost,嗜碱细胞,12,RBC和PLT检测原理,全血标本稀释后分配到RBC/PLT计数池,鞘流技术产生的层流使这个电阻信号转化为脉冲信号记录下来,脉冲的高度反映了细胞的大小,每个脉冲信号代表一个细胞,收集信号得到RBC和PLT的直方图。,13,14,15,SLS血红蛋白检测方法,检测使用的主要成份为十二烷基磺酸钠表面活性剂先将RBC溶解，释放出Hb分子Hb分子中的Fe2+被氧化为Fe3+，与SLS结合形成SLS-Hb有色基团，在535nm有最大吸收峰。,16,SLS血红蛋白检测方法特点,不含氰化物，无毒具有环保性SLS是一种脂溶性试剂，可减少脂血和高WBC总数造成的浊度对血红蛋白检测的影响,17,数据异常信息,18,中性粒细胞增多,感染（急性细菌感染）组织损伤（心肌梗塞.手术）恶性血液病药物使用(肾上腺素.类固醇)生理性增高,19,淋巴细胞增多,恶性血液病感染(百日咳.传单.病毒性风疹)应激状态(急性心衰.心脏梗塞.过敏反应)自身免疫性疾病.肿瘤.吸烟,20,单核细胞增多,感染(细胞性.败血症)胶原病妊娠性WBC增多霍奇金氏病恶性肿瘤,21,嗜酸性细胞增多,过敏反应(药物.寻麻疹)寄生虫病皮肤病纤维瘤内分泌病感染(结核病),22,中性粒细胞减少,严重的细菌感染白血病.肿瘤骨髓转移药物血液恶液质过敏性休克.酒精中毒,23,淋巴细胞减少,流行性感冒.败血病药物(抗肿瘤药物.肾上腺皮质激素)肿瘤晚期.霍奇金氏病胶原性疾病(系统性红斑狼疮.类风湿性关节炎),24,干扰因素造成假性增高(降低),25,WBC假性增高,PLT聚集冷凝集有核红细胞难溶红细胞冷球蛋白,26,PLT假性增高,红细胞碎片小红细胞冷白蛋白,27,PLT假性降低,血小板聚集巨大血小板,28,RBC假性增高,白细胞增多巨大血小板,29,RBC假性降低,红细胞碎片冷凝集小红细胞,30,急性粒细胞白血病,Auer小体,31,出现原始粒细胞,DIFF散点图显示:淋巴细胞.单核细胞和原始细胞区域出现大量散点且连成一片,大部分原始细胞由于异常增殖含有过多的DNA/RNA,32,出现异常淋巴细胞,散点图显示:有大量的异常淋巴细胞,荧光强度较弱而侧向散射光强度稍强,33,RBC双峰分布,表示出现大小不同的两群红细胞,34,缺铁性贫血诊断与铁剂治疗后直方图动态变化-疗效观察,铁剂治疗2周后,铁剂治疗4周后,35,特发性PLT减少性紫癫(ITP),PLT直方图分布上,在40fl附近出现一个高峰,提示有大型PLT,因此反映细胞大小的直方图无法将PLT准确检测出来,许多大的PLT被计数成RBC,36,需要镜检的情况,37,、国际血液学复检专家组推荐的41条自动CBC和DC复检规则：1.新生儿：（1）复检条件：首次检测标本；（2）复检要求：涂片镜检。2.WBC、RBC、Hb、PLT、网织红细胞（Ret）：（1）复检条件：超出线性范围；（2）复检要求：稀释标本后重新测定。3.WBC、PLT：（1）复检条件：低于实验室确认的仪器线性范围；（2）复检要求：按实验室标准操作规程（SOP）进行。,38,4.WBC、RBC、Hb、PLT：（1）复检条件：无结果；（2）复检要求：检查标本是否有凝块，重测标本，如果维持不变，用替代方法计数。5.WBC：（1）复检条件：首次结果30.0 x10e9/L；（2）复检要求：涂片镜检。6.WBC：（1）复检条件：3天内Delta值超限，并30.0 x10e9/L；（2）复检要求：涂片镜检。,39,7.PLT：（1）复检条件：首次结果1000.0 x10e9/L；（2）复检要求：涂片镜检。8.PLT：（1）复检条件：Delta值超限的任何结果；（2）复检要求：涂片镜检。9.Hb：（1）复检条件：首次结果其年龄和性别参考范围上限20g/L；（2）复检要求：涂片镜检，确认标本是否符合要求。10.平均红细胞体积（MCV）：（1）复检条件：24h内标本的首次结果105fl（成人）；（2）复检要求：涂片镜检。,40,11.MCV：（1）复检条件：24小时以上的成人标本105fl；（2）复检要求：涂片镜检观察大红细胞相关变化，如无大红细胞相关变化，要求重送新鲜血标本，如无新鲜血标本，报告中注明。12.MCV：（1）复检条件：24h内标本的Delta值超限的任何结果；（2）复检要求：确认标本是否符合要求。13.平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC）：（1）复检条件：参考范围上限20g/L；（2）复检要求：检查标本是否有脂血、溶血、RBC凝集及球形红细胞。,41,1622条为白细胞分类的复检规则：16.无白细胞分类计数（DC）结果或DC结果不全：（1）复检条件：无条件复检；（2）复检要求：人工分类和涂片镜检。17.中性粒细胞绝对计数（Neut）：（1）复检条件：首次结果20.0 x10e9/L；（2）复检要求：涂片镜检。18.淋巴细胞绝对计数（Lym）：（1）复检条件：首次结果5.0 x10e9/L（成人）或7.0 x10e9/L（1.5x10e9/L（成人）或3.0 x10e9/L（2.0 x10e9/L；（2）复检要求：涂片镜检。21.嗜碱粒细胞绝对计数（Baso）：（1）复检条件：首次结果0.5x10e9/L；（2）复检要求：涂片镜检。,43,22.有核红细胞绝对计数（NRBC）：（1）复检条件：首次出现任何结果；（2）复检要求：涂片镜检。23条为网织红细胞的复检规则：23.网织红细胞绝对计数（Ret）：（1）复检条件：首次结果0.10 x10e9/L；（2）复检要求：涂片镜检。,44,2441条为可以提示的复检规则：24.怀疑性报警不成熟粒细胞(IG)/杆状核中性粒细胞（Band）报警提示除外：（1）复检条件：首次成人结果出现阳性报警；（2）复检要求：涂片镜检。25.怀疑性报警：（1）复检条件：首次儿童结果出现阳性报警；（2）复检要求：涂片镜检。26.WBC结果不可靠报警：（1）复检条件：阳性报警；（2）复检要求：确认标本是否符合要求并重测标本，如出现同样报警提示，检查仪器，如需要，进行人工分类。27.RBC碎片：（1）复检条件：阳性报警；（2）复检要求：涂片镜检。28.双形RBC：（1）复检条件：首次结果出现阳性报警；（2）复检要求：涂片镜检。,45,注意事项,仪器为筛选试验,不能从测定结果直接诊断疾病遇到异常提示时及时镜检仪器定期保养,保证日常工作正常进行,46,47,48,（二）血细胞形态变化的一般规律1.细胞大小及形态大小：由大到小。2个例外：巨核细胞及早幼粒细胞。形态：红细胞始终圆形，粒细胞圆形或椭圆形，单核细胞由圆形、椭圆形变为不规则形，巨核细胞由圆形变为不规则形。2.细胞核大小：由大到小。巨核细胞除外。核形：各系细胞有不同表现。核位置：红系核居中，粒、单系核偏位，淋巴细胞核一侧着边，仅一侧有胞浆。,49,核染色质：颜色由浅到深，染色质由细致疏松到粗糙密集，最后紧缩成块。核膜：不明显到明显。核仁：清晰、模糊、消失。3.细胞浆量：由少到多。颜色：粒、红、巨核由深蓝或浅蓝到浅红；淋巴、单核保持浅蓝或灰蓝色；浆细胞由灰蓝变为深蓝。颗粒：从无到有，由非特异性到特异性。,50,51,、血细胞的正常形态学特征,1、红细胞系统原红（normoblast）早幼红（basophilicnormoblast）中幼红（polychromaticnormoblast）晚幼红（orthochromaticnormoblast）,原红细胞：,早幼红细胞：,中幼红细胞,52,2、粒细胞系统原粒（myeloblast）早幼粒（promyelocyte）中幼粒（myelocyte）：中性、嗜酸、嗜碱晚幼粒（metamyelocyte）杆状核粒（stabgranulocyte,bandgranulocyte）分叶核（Segmenteelgranulocyte）,原粒细胞,早幼粒细胞,中性中幼粒细胞,晚幼粒细胞,杆状核粒细胞,53,嗜酸粒细胞（中幼、晚幼、杆状核、分叶核,54,嗜碱粒细胞（早幼、中幼、晚幼、杆状核、分叶核）,55,3、淋巴细胞系统原淋（Lymphoblast）幼淋（prolymphocyte）淋巴（lymphocyte）大淋巴细胞小淋巴细胞,原淋巴细胞,幼淋巴细胞：,大淋巴细胞,小淋巴细胞,56,4、浆细胞系统原浆（plasmablast）幼浆（proplasmacyte）浆细胞（plasmacyte）,原浆细胞,幼浆细胞,浆细胞,57,5、单核细胞系统A.原单（monoblast）B.幼单（promonocyte）C.单核（monocyte）D.吞噬（maerophage）,A,B,C,原单核细胞,幼单核细胞,单核细胞,58,6、巨核细胞系统原巨（megakaryoblast）幼巨（promegakaryocyte）颗粒巨（granularmegakaryocyte）产板巨（thrombacytogenousmegakaryocyte）裸核（nakednucleous）,原巨核细胞,幼巨核细胞,颗粒型巨核细胞,产血小板型巨核细胞,59,推片,推片、染片的质量,60,正常骨髓象（油镜）,61,缺铁性贫血骨髓象,62,溶血性贫血骨髓象,63,巨幼细胞性贫血骨髓象,64,地中海贫血,65,慢性ITP骨髓象（高倍镜）,66,幼红细胞形态异常,67,核间桥（细胞内）,68,69,核间桥（细胞外）,70,71,核出芽,72,不对称双核,73,三核幼红,74,多核幼红、点彩,75,不对称核分裂象,76,核碎裂,77,幼红细胞多伪足,78,核畸形,79,巨大成熟红细胞,80,原粒I型：核圆形平坦，染色质疏松核仁明显胞浆中无颗粒.,81,原粒II型：在I型基础上胞