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文档简介

如何写好基金申请书,杨培增重庆市眼科研究所眼科学重庆市市级重点实验室重庆医科大学附属第一医院眼科,1,一、基金的种类,国家级层面的基金,国家自然科学基金国家科技部计划项目,教育部项目卫生部项目重庆市项目,省部级项目,2,重大项目创新群体基金重点项目面上项目国际合作项目青年基金项目地区科学基金国家杰出青年基金,国家自然科学基金,973:着重于基础研究863:着重于技术研究国家科技支撑计划重大专项基金,国家科技部计划基金,基金种类,3,科技支撑计划(卫生部组织实施)临床重点项目(1次/3年)行业专项基金项目,部级基金项目,卫生部:,教育部:,博士点基金项目新世纪优秀人才基金,基金种类,4,基金是个人成长过程的铺路石基金是个人成功大厦的基石基金是个人成功的里程碑,二、基金的重要性,三块石头,衡量个人学术水平的指标衡量所领导团队能力的指标晋升职称的重要指标,三个指标,5,1.吃透基金资助方向、领域和内容2.提出合适的有意义的科学假设3.确定适当研究内容4.描述详尽的技术路线和方法5.提供适当的工作基础,三、如何写好基金申请标书,6,国家自然科学基金:主要基础研究863计划:主要是技术方面的研究重庆市科委攻关项目自然科学基金重大专项,吃透基金资助方向、领域,(1)了解基金资助领域和方向知己知彼,百战不殆,7,(2)了解基金资助的范围,如重大传染病的发病机制及防治肝脏疾病的发病机制及防治代谢疾病的发病机制及防治,吃透基金资助方向、领域,自已知识背景实验条件、平台个人或团队的工作基础和实力,(3)了解自己可以做什么,能做什么,8,临床问题:葡萄膜炎患者对A药物的反应不同科学问题:药物效果可能与不同个体酶的活性有关申请题目:从酶变异探讨A药物治疗葡萄膜炎效果的异质性,提出适当的科学假设,(1)要提出“有意义”的科学问题,要善于将临床问题凝炼成科学问题,9,提出的科学问题是否有人研究目前研究到何种程度有无回答的问题,问题是新的问题研究思路是新的问题研究技术是新的创新应合乎科学原理、合乎逻辑,(2)要了解国内外研究现状,(3)研究课题要有创新性,提出适当的科学假设,10,一个好的研究计划应包括以下三个方面1.表达水平研究(mRNA,蛋白)2.功能研究3.机制研究,确定适当的研究内容,一个科学假设需要合适研究计划才能验证,11,确定适当的研究内容,根据内容需要选择技术和方法描述详尽的技术路线和方法路线方法显示研究的可行性可信性把握性,12,如何写摘要,简要介绍研究背景占10-20%主要研究内容占60-80%主要回答科学问题及意义占10-20%,摘要是基金的精华浓缩部分,13,病是疾病,目前研究发现,但有关尚不清楚。本研究以为对象,以为切入点,以为模型,以为研究方法,探讨本项研究将可能回答(阐明)科学问题将为疾病预防和治疗提供新的研究靶点,摘要,例1,14,病是疾病,其发病与相关,但尚不清楚。本研究以诱导动物模型(或在组织上),以RT-PCR(荧光定量PCR)、免疫组织化学染色。探讨的表达,以实验评价分子在疾病发生中的机制,以期阐明(揭示,回答)机制(科学问题),此将为研究开辟新的途径。,摘要,例2,15,立项依据1.研究疾病的重要性2.疾病中哪些方面重要但尚不清楚3.指出此方面的国内外研究现状4.找出研究的切入点5.提出研究的假设和线路框架,16,本课题要干什么,首先介绍整个疾病的概况,疾病研究中的某一个方面,研究现状及问题,找出切入点,17,感染,葡萄膜炎一类疾病的危害性及重要性,VKH、Behcet病是我国最常见和最重要的两种类型,自身免疫反应,感染事件,自免反应,TLR,?,研究假设,举例,18,研究内容反映研究者整个研究思路框架和内容是研究涉及的主要方面描述主要干什么事通过研究,确定(阐明、揭示、评价)表达(机制、差异等)不能写成具体的实验方法,19,举例1.探讨Behcet病、Vogt-小柳原田综合征和急性特发性前葡萄膜炎患者单核细胞中TLR和NODmRNA和蛋白表达的差异,以期确定出与不同葡萄膜炎相关的模式识别受体(1)探讨Behcet病、Vogt-小柳原田综合征和急性特发性前葡萄膜炎患者单核细胞中TLR和NODmRNA的表达(2)探讨三种葡萄膜炎患者外周血单核细胞中TLR和NOD的蛋白表达2.探讨Behcet病、Vogt-小柳原田综合征和急性特发性前葡萄膜炎患者外周血单核细胞在不同TLR和NOD配体刺激下分化为DC的能力、相关细胞因子分泌和对Th1、Th17分化诱导的差异,旨在从模式识别受体与配体相互作用角度阐明三种葡萄膜炎患者和正常人对病原微生物成分的反应及差异,以期揭示这些感染因素引起葡萄膜炎的分子基础(1)体外观察三种葡萄膜炎患者外周血单核细胞在不同模式识别受体配体刺激下分化为DC的能力(2)体外评价三种葡萄膜炎患者的单核细胞经不同模式识别受体的配体刺激后细胞因子产生的能力及其差异(3)体外评价不同模式识别受体的配体对naveT细胞分化为Th1、Th17细胞的诱导能力及其差异,表达,功能,20,3.在动物模型上探讨与葡萄膜炎相关的模式识别受体的配体对葡萄膜炎发生及严重程度的影响及其对Th1、Th17细胞分化和细胞因子产生的影响,进一步验证模式识别受体及其配体在葡萄膜炎发生中的作用及其可能的机制(1)探讨相关模式识别受体配体对EAU严重程度的影响(2)探讨模式识别受体的配体在EAU模型中对小鼠Th1、Th17细胞及细胞因子产生的影响4.探讨TLR和NOD基因多态与Behcet病和Vogt-小柳原田综合征的相关性,以期阐明两类模式识别受体在基因易感性方面对两种葡萄膜炎发生的影响,举例,机制,机制,21,罗列研究的具体方法的免疫组化研究PCR的检测质粒的构建诱导模型纯化蛋白细胞的分离及培养收集标本检测的表达Tunnel检测凋亡率体外实验体内实验统计学分析,研究内容部分易出现的问题,22,例1分离和培养细胞,以microRNA干扰A合成鉴定与A相互作用的精子蛋白质成分确定A及其相互作用蛋白质的信号传导通路揭示A缺失引起疾病的分子机制,23,例2A与B信号通路分子表达变化的相关关系构建A哺乳动物表达质粒构建A特异性ShRNA表达质粒例3运用DNAstar、Antheprot等生物信息学软件分析A结构、特性及抗原表位应用PCR扩增技术,获得A抗原表位基因和B基因通过PCR法将两个基因融合扩增获得A-B融合基因构建C菌重组D、E疫苗并鉴定重组质粒F、G在表达重组D、E疫苗免疫小鼠,24,例4A酶抑制肽的同源分子模建A酶抑制肽酶活性的鉴定A酶抑制肽的基因克隆及表达重组A酶抑制肽的纯化及活性测定,25,例5A融合蛋白竞争性结合B受体干扰B信号传递的可行性研究A融合蛋白对人B细胞生物学影响及可能机制C裸鼠模型的构建及鉴定A融合蛋白对C裸鼠模型作用的实验研究,26,通过研究,以期阐明(揭示,确定)旨在,研究目标,拟解决的关键问题,不能太多不能只提出问题在理论上阐明在关键技术上破解难题建立起模型,27,心肌细胞、心房肌组织,窦房结组织心室壁移植是否导致宿主心律失常?为什么?窦房结组织心室壁移植是否能完成生物起博任务?修改为什么?通过研究,将会回答及阐明心肌细胞移植后是否能够引起心律失常这一科学问题及其机制。通过研究,将确定和揭示心肌细胞移植后是否能完成起博任务,及其可能的生物学机制,举例,28,例1A人工材料中Ag+体内外缓释性能研究A人工材料中的Ag+缓释机制研究A人工材料的体内抗菌性能检测A人工材料的生物安全性能研究A人工材料的治疗疾病的动物模型,29,例2运用生物信息学软件预测分析A蛋白的特性和抗原表位获得并鉴定A抗原基因和B基因获得A-B融合基因,构建重组Bb-A和Bb-B疫苗对重组Bb-A和Bb-B疫苗鉴定,观察其对模型小鼠的免疫保护效应,30,例3确定出不同类型葡萄膜炎患者两类模式识别受体在mRNA及其蛋白的表达水平及其差异,以期解决和阐明为什么不同类型葡萄膜炎与不同感染因素有关这一临床问题。确定模式识别受体的不同配体对不同类型葡萄膜炎患者单核细胞分化为DC、对细胞因子产生和Th1、Th17分化影响,以期回答和阐明感染因素是怎样引起免疫反应和葡萄膜炎发生这一重要科学问题。确定相关模式识别受体和配体对自身免疫性葡萄膜炎模型及Th1、Th17细胞及细胞因子的影响,以期回答模式识别受体及其配体在葡萄膜炎发生中作用能否在动物模型上得到重复和验证这一问题。确定模式识别受体基因多态与Behcet病和Vogt-小柳原田综合征的相关性,以期解决和回答模式识别受体可否在基因易感性层面对葡萄膜炎发生产生影响这一科学问题。,31,研究方案既体现研究内容,但又不同于研究内容研究对象及分组研究的具体实验方法确定(阐明、揭示)不要只列出一个框架图,拟采取的研究方案,32,可行性分析,理论上可行技术方面可行实验平台患者来源(标本)动物模型以往基础,33,我们的标书项目组成员熟练掌握分子生物学、免疫学及遗传学技术,为本项目研究提供了良好的实验技术支持。项目负责人长期从事葡萄膜炎基础和临床的研究,已发现和证实了,这些方面的研究为进行此课题奠定了重要的基础。我们已建立起人单核细胞诱导分化为DC和人naveT细胞分化为Th1、Th17细胞的体系,这些实验和工作为我们实施此项研究奠定了良好的基础。我们的临床葡萄膜炎患者具数量大、疾病种类多、依从性好等特点,为我们进行相关研究从病原上提供了保障。我们已收集到Behcet病患者、Vogt小柳原田综合征患者、急性前葡萄膜炎患者、正常人血标本例。另我们在研究基因多态与葡萄膜炎相关性积累了一定的经验。这些研究为进行本项研究提供了标本和技术保障。,可行性分析,举例,34,项目创新特色,1.研究的是新的科学问题2.科研思路上创新3.研究方法上创新4.创新性要突出重点、要适当,各项指标联合起来,尚未见研究报道用Western方法研究,尚未见研究报道,5.创新性不宜太多,35,预期研究结果,1.实验将可能发现,建立起为模型,在理论上,在技术上2.实验的意义3.发表文章,36,研究基础与工作条件,1.已做初步实验最好有图

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