（应用化学专业论文）硫普罗宁钠的合成及质量研究.pdf

摘要 肝炎( h e p a t 珧) 熄肝脏受到损密，出现肝功能异常的肝脏炎症性疾病的统称。 蕊普罗宁镳( n 矗溷，g ) 筵瓣已有菸秘蕊薯罗宁( 氧臻g ) 豹残黧浚造。巯普爹宁俸劳改 善肝功能药物应用于临床，该药能全面有效改善病毒性肝炎、酒精性肝损伤的功能指 标及有关瘢状，也作为放疗、化疗的保护剂和重企属及某些药物的解毒剂。将其改造 成镳麓敬嚣，药瑾、毒瑾、药效学磷究结栗表鞠：渡造嚣匏酸菠箩宇镶与蘸罄罗宁稳 比，稳定性好，毒性降低，疗效也得别提高。 本文对护肝药物硫凿罗宁钠的合成与分析进行了研究。文献报道了硫黹罗宁钠水 台耱静甓舔方法，霞2 乙基云醇镳与虢普罗宁在菇丁簿中爱度，麓零橇密产貔。本文 在大量试验的基础上，用氢氧化钠与硫普罗宁反威，探索出了条制备无水硫普罗宁 钠的新方法，与原来工艺比较，产率黼，产品纯度好，生产成本低，操作简便，易于 工盈仡生产。 该产品经过理化常数测定、运用元素分析、红外光谱、紫外光谱、核磁旗振氢谱 ( 1 h n m r ) 、核磁共振碳谱( 1 3 c _ n m r ) 、质谱( m s ) 、粉求x 。射线衍射( x r d ) 等努轿手段，对该鑫逡行了结聿每确诞。 本文对该品理化性质( 溶解度、比旋度、酸度、紫外吸收铸) ，纯度检焱( 水分、 重金属、砷、有机：杂质检查、有机溶剂残留量) ，含量测定等进行了研究。间时对其 稳定性避行了考察。 结合举品工艺及质量研究结果，制订了本品的质量标准。 按圜窳药品监督篱理局对四类掰蕊的研究要求，完成了各项研究资料，已申报国 家新药 歪书。 关键词：硫普罗宁硫营罗宁钠合成结构表征 a b s t r a c t h e p a t i t i si s ak i n do fl i v e ri n n a m m a t i o nd i s e a s ew i t ht 1 1 es y m p t o mo fi n j u r e dl i v e r 柚dh 印a t i c d y s f u n c t i o n s o d i u mt i o p m n i n ( n a m p g ) i san e wd f u gm a tw a sm o d m e df i d m 廿叩r o n j n ( m p g ) m p g h a sb e e nw i d e l yu s e di nc l i n i ca st h em e d i c i n ef o ri m p r o v i n gl i v e rf h n c t i o n ，l tc a i lc o m p r e h e n s i v e l ya n d e f 艳c t i v e l yi t n p r o v et h ef u n c t i o ni n d e xm a r ka n dc u r et h es y m p t o mo f v i r u a la n da l c o h o l i ch e p a t i t i s ，b e t a l ( e na sp m t e c t i n ga g e n t so f t h er a d i o t h e m p ya n dt h ec h e m o t l l e r a p ya t l db eu s e da st h ea n t i d o t eo f h e a v y m e n t a io rs o m ed r u 擎a r e ri tw a sm o d i n e dt os o d i u ms a l t ，t h ep h a n l l a c o l o g y t o x i c o l o g ya n d p h a r m a c o d y n a m i cn n d i n g si n d i c a t e dm 砒n a m p g ，c o m p a r i n gt om p g ，h a sb e t c e rs t a b i i i t y ，l o w e rt o x i c i t y a n de n h a n c e dt h e r a p eu l j ce f 艳c t i v e n e s s t h es y n t h e s i sa n da n a l y s i so fn 心d p ga r ei n v e s t i g a t e di nt h i sd i s s e n a t i o n t h e r ei s0 n er e p o r t o r i a l m e t h o dr e l a t e ds y n t h e s i so fn a m p g h 2 0i nu sp a t e n tt h m u g hr e a c t i n gs o d i u m2 e t h y l h e x a n o a t ew i t h m p g 柚da d d i n gi nn e a r l ys t o i c h i o m e t r i ca m o u mw a t e rw n hr e s p e c tt om p g c o n s i d e r i n gt h es o u r c ea n d p r i c eo f t h er a wb a s em a t e r i a l s ，w ea d o p tn a o h a st h eb a s er e a c t i n gw i mm p g a f t e ral o to f e x p e r i m e n t s ， w ef i n dan e wp r o c e s sf o rp r c p a r i n ga n h y d r o u sn a m p g ，w h j c hh a st h eb e t t e rp m d u c t s ，h i g h e ry i e l d s ， s i m p l e ro p e r a t i o na 1 1 dc a nb es i m p l yp u ti n t oo p e r a t i o ni n d u s t r i a l l y t h r o u 曲t h ed e t e r m j n a t i o no f i t sp h y s i c a l 柚dc h e m i c a lc o n s t a n t s ，o 唱a n i c 锄a l y s i s ，i n f r a r e d s p e c t r u m ( i r ) ，u l t mv i o l e ts p e c t r u m ( u v ) ，1 h n m r1 3 c - n m rm a s ss p e c t m m ( m s ) p o w d e rx - r a yd i f f h c 廿o n ( x r d ) ，e ta 1 ，t h es t m c t u r eo f n a m p gi sv e r i f i e d t h ep h y s i c a ia n dc h e m i c a lc h a r a c t e r i s t i c so fn a 口gs u c ha ss o l u b i i i t y ，s p e c m cr o t a t i o n ，a c i d i t y u va b s o r p t i o n ，e ta 1 ，t h ep 删t ye x 锄i n a t i o ns u c ha sw a t e rc o n t c n 匕r e s i d u eo ni g n i t i o n ，h e a v ym e t a l s ， a r s e n j c ，o 唁a n i ci m p u r i c ye x a m i n a t i o n ，r e s i d u eo nt h eo r g a i l i cr e g e a l l t s ，a s s a y i n ge ta 1 h a v eb e e nt e s t e di n t h i sd i s s e r t a t i o n i nt h em e a n 吐m ew em a k eas t u d yo f t h es 协b i l i t yo f n a g c o m b i n i n gt h es y n t h e s i sp m c e s sa | l dt h er e s u n so fq u a l 时r e s e a r c h ，w ec o n s t i t u t et h eq u a l n y c r i t c r i o n0 f n a m p g i nt h e1 i 曲to fr e q u e s to fc h i n e s em e d i c n ei n t e n d a l l c em a n a g e ra i l dt l l ef o u r t hk i n dn e wm e d i c i n e ， w eh a v ea c c o m p l i s h e da 1 1k i n d so fr e s e a r c hd a 诅，w eh a v eb e e na pp 1 e d 廿l ec h i n e s en e wm e d i c i n e c e n l n c a t eo f n a m p g 1 ( e yw o r d s ：t i o p r o n i n ，s o d i u mt i o p r o n i n ，s y n t h e s i s ，s t m c t u r a lc h a r a c t e r i z a t i o n i i 第1 章前言 第1 章前言 肝炎是我国最突出的公共卫生问题之一。如今病毒性肝炎已成为和艾滋病、肺结 核、血吸虫病并列的危害最严重的四大传染病。粗略估算，我国每年用于肝炎对症治 疗的直接医疗费用超过1 0 0 0 亿元人民币。近年来，政府部门重视了对病毒性肝炎的防 治，加强了对各种类型肝炎治疗药物的研究。 1 1 什么是肝炎 肝炎是肝脏受到损害，出现肝功能异常的肝脏炎症性疾病的统称。肝脏疾病可由 病毒感染引起，如由甲型肝炎病毒( h a v ) 1 引、乙型肝炎病毒( h b v ) “们、丙型肝 炎病毒( h c v ) 7 引、丁型肝炎病毒( h d v ) 【9 1 1 1 和戊型肝炎病毒( h e v ) 【1 2 1 5 等世 界公认的五型肝炎病毒引起的肝病外，还有由g b 因子( g ba g e m ) 17 1 、己型肝炎病毒 ( h f v ) 1 8 也0 1 、庚型肝炎病毒( h g v ) 弘矧、辛型肝炎病毒( h g v ) 【2 4 。26 1 、e b 病毒( e b v ) 【2 7 五9 】和巨细胞病毒( c m v ) 【3 0 _ 3 1 1 等肝炎病毒引起的肝病；另外也有由于滥用酒精吲、 使用药物或摄入了环境中毒物眇34 1 、自身免疫【3 5 】和代谢障碍【3 6 。7 】等原因引起的肝脏疾 病。 1 2 临床表现口”3 9 3 及治疗 常见的肝炎症状有食欲下降、乏力、低烧、肌肉或关节痛、恶心、呕吐和腹痛等。 常见的体征有：1 、肝脏轻度肿大，触及质地较软或中等硬度的肝脏，或有压痛、叩击 痛：2 、出现肝病面容，表现为面色黯黑、黄褐无华、粗糙、唇色暗紫等；还可引起颜 面毛细血管扩张，蜘蛛痣及肝掌等；3 、巩膜或皮肤黄染，比消化道症状出现晚。 肝炎治疗根据不同肝炎病因类型，可用抗病毒药物、降酶药物或护肝药物等去预 防和治疗4 引。 1 3 护肝药物硫普罗宁 硫普罗宁( t i o p r o n i n ，m p g ) 是一种含游离巯基的甘氨酸衍生物，化学名称为 n 一( 2 一巯基丙酰基) 甘氨酸，英文名称为n 一( 2 一m e r c 印t o p m p i o n y l ) 9 1 y c i n e ，其分子式为 c 5 h 9 n 0 3 s ，分子量为1 6 3 2 0 ，结构式为c h 3 c h s h c o n h c h 2 c o o h 。硫普罗宁由日本 参天药厂研制，1 9 6 4 年在日本首次上市，而后在西德、意大利、美国和瑞士等国家相 继作为改善肝功能药物上市并应用于临床m 圳】。硫普罗宁是一种含巯基化合物， 第1 章前言 具有降低肝细胞线粒体a t p 酶的活性，提高细胞内a t p 含量，恢复电子传 递功能，改善肝细胞结构和功能；抑制肝细胞线粒体过氧化脂质体形成，保 护肝细胞膜，促进肝细胞的修复和再生【4 7 】；参与肝细胞蛋白质、糖代谢，维 持肝细胞内谷胱甘肽含量【48 1 ，加速乙醇在体内的排泄、防止甘油三酯在体内 积聚【4 9 】等多方面的药理学作用。国外长期临床使用证实：该药能全面、明显改善 病毒性肝炎、酒精性肝损伤的功能指标及有关症状5 0 4 】；可作为放疗、化疗的保护 剂5 5 。5 6 】，重金属或某些药物的解毒剂5 7 瑚】；可预防和治疗胱氨酸结石症 【5 9 州】、早期老年性白内障等6 2 。6 5 】，具有疗效确切、安全可靠之特点。我国在9 0 年代初开始了硫普罗宁的研制工作，目前河南新谊药业股份有限公司研制开发的冻干 粉针剂硫普罗宁，已在临床有多年应用【6 6 6 7 1 。 1 3 1 药物作用机理 硫普罗宁的化学结构是c h 3 c h s h c o n h c h 2 c o o h ，含有巯基，与谷胱苷肽 ( g s h ) 有类似的结构，是一个很好的抗氧化剂6 8 删。硫普罗宁的抗氧化作用主要是 通过以下四个途径来完成：清除有害自由基：补充体内谷胱苷肽平衡；螫合金属离子； 调节体内抗氧化酶体系。 1 3 1 1 硫普罗宁对有害自由基的清除作用 自由基和人类的健康密切相关，一些疾病的发生和各种自由基的产生都有很直接 的关系m 7 3 1 。研究发现硫普罗宁可以清除巨噬细胞呼吸爆发产生的化学发光【7 4 1 。巨噬 细胞在吞噬过程和受刺激产生呼吸爆发的生化基础是细胞膜上的n a d p h 氧化酶的活 化，它催化氧气被电子还原为超氧阴离子自由基，大部分超氧阴离子自由基通过歧化 和被s o d 催化产生过氧化氢盼7 7 1 。过氧化氢和超氧阴离子自由基经f e ( i i ) 催化，通过 h a b e r - w e i s s 反t 直【4 7 8 产生羟基自由基。h 2 0 2 在过氧化氢酶催化下生成水和氧气，或在 谷胱苷肽存在时被谷胱苷肽过氧化酶催化生成水。巨噬细胞在吞噬过程中或受刺激时 不仅产生氧自由基，而且也产生n o 自由基。n 0 和0 2 又可以反应形成o n o o ，这在 免疫和预防以及杀伤外来入侵微生物和癌细胞方面具有重要的生理意义。0 n o o 。在 p h = 7 4 时的半寿命大约为1 s 左右，这就使得它在生理条件下有足够的稳定，从它生 成的位置扩散到反应的靶分子，如脂膜和蛋白的巯基。一旦酸化，立即转化成氧化性 很强振动激发态的过氧亚硝酸并产生n 0 2 和类0 h 物质，这是一个比氧自由基杀伤力 更强的物质。巨噬细胞呼吸爆发产生的这些物质均可以产生化学发光，硫普罗宁可以 清除巨噬细胞呼吸爆发产生的化学发光就意味着可能清除巨噬细胞呼吸爆发产生的各 2 第l 章羲蠢 种有密基和过氧亚硝基。 1 3 1 2 硫普罗宁对体内谷胱瞽肽平衡的维持作用 豁麓瞢获普遍存在予掰舂动穗物鲴照中，参与很多生命代谢雩# 爱 7 蛐轴。氧位还藩 反应，氮基酸和蛋囱质的构成，前列腺素合成和解毒，谷胱苷肽是细胞中重要的抗氧 化剂，在保护细胞绒他损伤方面趣着重要作用。在健康人赢液中谷胱营肽保持在一定 承乎，老年入和镘饿疾瘸患者蛊液中谷虢营救疆显降低。降低簧一定求平，就要对缁 胞成分乃至生命体造成损伤。研究表明，谷胱瞥肽的耗尽就会导致细胞中活性氧自由 基的舞离积积累，绷胞膜蛉腊矮过氧化，线粒体功能改变和细胞的死亡。谷胱昔默降 低与各种疾病有关，如自内障、j i 予炎、糖尿瘸等8 w 舅。研究发现硫普罗宁可班补充巍 液中谷胱苷肽的消耗，帮助维持肌液谷胱苷肽的平衡。这样硫普罗宁就可以预防和治 疗与务赋萤肽缺乏蠢关的疾病。 1 ，3 1 。3 螯台金耩鬻子 很多金属离子和铁离子本身就具有未成对电子，可以参与同氧气分子的电子转移 反应朔。f e ( i i ) + 0 2 一廷、e ( 1 1 ) 0 2 一i f e ( 1 珏) 0 2 】- - - 】跨( 1 珏 + 0 2 ，超氧阴藤予自由基w | 三i 歧优生成过氧纯氯，接着可以发生f e n t o n 反应捧缸嘲生成羟萋自由基。f i i ) 迸一步 可以狸细胞膜发生月旨质过氧化的镳式反应。用e s r 技术在邋一体系中检测到了羟基自 由基，露且过氧健缀酶可以搀每l 羟基叁由基瓣黛成。铁离子褒l 塞质过氧化过程中娓耋 要作掰还表现在铁漓子或铁离子簸合物可以大大加速目旨质逡氧化物的分解速率，铁离 子与脂过氧化氢反威类似同过氧化氢反应，使得0 o 键断裂，产生脂飘自由基l 0 。 这将大大热速细臆黢的l 警厦过氧像蒡造成纲戆援侉。硫普罗宁可以螯合金属离子，鸯 可能避免由此引起瀚脂质过氧化损伤外，还可以加速这些熬金属从体内的排除，防止 其引越其它毒害9 3 1 。 ，3 。 毒磙普罗字辩钵走撬氧传薅麓调节馋用 研究发现，很多抗氧仡剂都对体内抗氧化酶具有调节作用，增强机体抗氧化能力 【舛拼】。硫普罗宁可以使烧伤病人肌浆s o d 活性明显升高，月旨质过氧化明最降低；硫普 罗宁霹骇明显减少籁魅夕 揍蠹应激鳇溃瘗窝急投坏死胰濂炎霉l 起静鼹襞避氧诧陋9 强。 1 3 2 硫普罗宁药理、药效学研究 1 3 2 1 对肝脏组耋 l 、细胞的保护作用 鼹多秘类鍪器摸经麓对撬终麓邺瓣l 动物实验中，c c l 4 、乙硫氨敬( e 黼o n c i n e ) 、毒粉( a n c 锄t e p h a l l o i d e sp o w d e r ) 第l 章前言 均可引起肝组织损伤，一般表现为s g p t 、甘油三脂、胆固醇水平升高、肝糖原量、 肝非蛋白巯基量和p 4 5 0 酶水平降低。m p g 能够逆转上述变化，并可预防阻断c c l 4 致肝组织坏死。 扑热息痛( a c e t a r n i l l o p h e n ) 可引起肝细胞损伤，肝细胞内乳酸脱氢酶逸出，谷胱 苷肽含量降低，肝细胞内空泡形成。m p g 也能阻断上述变化。 m p g 可加快乙醇和乙醛的降解排泄，防止肝甘油三脂的堆积，对酒精性肝损伤有 显著对抗作用。 对某些化学致癌物质和b 、y 射线引起的肝细胞d n a 、线粒体损伤，m p g 也有对 抗作用。 保护肝细胞肝线粒体结构，改善其功能作用1 0 2 】 m p g 可使肝细胞线粒体中的a t p a s e 活性降低，a t p 含量升高，电子传递功能恢 复正常，从而改善肝细胞功能，对抗各类肝损伤负效应。m p g 对线粒体的作用可能在 于保护线粒体某些特异巯基功能，亦有人认为通过增加线粒体膜小分子多肽而起作用。 m p g 对线粒体的作用可能是其对抗多种肝损伤，保护肝组织、细胞的主要作用机制。 促进肝脏细胞再生作用】 小鼠给予某些化学物质或将其肝脏切除后，m p g 可促进肝细胞再生，表现为乳酸 脱氢酶活性、苹果酸酶活性、d n a 含量及肝总蛋白含量均增高。 活性氧清除作用 m p g 可清除羟自由基、超氧自由基和过氧化氢( h 2 0 2 ) 等活性氧，其机理认为 m p g 可以激活酶，此作用也被认为是m p g 对抗肝损伤的机制之一【1 叫。 1 3 2 2 预防和治疗泌尿系统胱氨酸结石作用 有报告表明m p g 口服1 1 9 3 m g d a y ，胱氨酸尿病人尿中胱氨酸水平维持在饱和量 以下，其中6 3 7 1 的病人不发展为胱氨酸结石。大剂量m p g 冲洗疗法，可有效溶 解胱氨酸结石，使病人免于手术。m p g 现作为胱氨酸结石症内科保守治疗的首选药物 5 9 6 1 1 。 1 3 2 3 化疗、放疗保护作用 m p g 通过代谢解毒和组织细胞保护作用可减轻化疗药物的毒副作用。m p g 对放 射线损伤有显著保护作用，可降低骨髓染色体畸变率和皮肤溃疡的发生，并可预防放 疗所致二次肿瘤的发生【5 5 。5 6 】。 1 3 2 4 重金属和药物解毒作用 4 第1 章前言 动物实验表明，m p g 可促进重金属h g 、p b 等从胆汁、尿、粪中排出，降低其肝、 肾蓄积量，保护肝功能和多种物质的代谢酶。大鼠空腔注射3 0 0 m g m g m p g ，可加快催 眠时间，并可预防地对抗h g c l 2 、亚砷酸钠、铜盐和氯化钾引起的致死【5 7 。5 8 l 。 1 3 2 5 其他作用 m p g 可抑制造成白内障的生化学的应激反应；减少自由基诱发的心脏损伤作用； 并可显著降低血压；m p g 抑制血小板活性，具有抗血栓形成的可能性；m p g 抑制硒 一谷胱苷肽过氧化物酶活性，具有减少类风湿关节炎发病的作用；m p g 还具有明显抗 过敏抗光化学，抑制精子活动等其他作用6 2 巧5 1 。 1 3 3 毒理、药代研究5 。”6 1 1 3 3 1 毒理学研究 急性毒性：小鼠静脉注射m p gl d 5 0 为2 2 1 9 瓜g 。 长期毒性：大鼠腹腔注射m p g5 0 0 m g k g d a y ，连续一个月，可抑制动物体重增加， 改为2 5 0 m k d a y ，连续1 3 周，可激活骨髓外造血功能，抑制含铁血黄素在肝和肾上 腺皮质的沉着。未发现m p g 对肝等主要脏器的影响。 特殊毒性：m p g 无任何特殊毒性作用。 1 3 3 2 药代动力学研究“”1 大鼠口服m p g 尿排泄量较低( 0 0 1 5 ) ，表明该药在体内有显著代谢，静脉用药后 含量明显提高( 2 2 3 5 ) ，表明口服对肝脏有首过效应( f i r s tp a s s ) ，经脉用药后血 浆水平高且至3 0 均可检出，口服后6 07 血浆水平达高峰，直至1 2 0 均可检出。 在人体、口服和肌注后总尿排泄量相近，( 肌注后1 0 2 0 ，口服后1 5 4 7 ) ， 但肌注后排泄时间延长，需8 2 4 小时，血浆水平也较口服高。 1 3 4 临床适应症“”2 1 ( 1 ) 硫普罗宁对肝脏组织、细胞有保护作用，用于治疗和改善各种肝炎患者的肝 功能和临床症状； ( 2 ) 可作为放疗、化疗的保护剂，降低放疗、化疗的毒副作用，升高白细胞并加 速细胞的恢复； ( 3 ) 对重金属和药物中毒有解毒作用，可促进重金属汞、铅及药物从胆汁、尿和 粪便中排出，减少毒素在肝、肾的蓄积量，保护肝脏； ( 4 ) 对老年性早期白内障和玻璃体混浊有较好的治疗作用。 第l 章前言 。4 睡陈应用 1 。4 1 对急、慢性肝炎疗效”9 1 急性瘸毒性j j 千炎患者使用大剂量m p g ( 1 2 9 d a y ) ，1 3 周，症状、休症和实验 爨检查摆标均恢笈正常，特别是s g p t 鞠v g t 恢复迅遽，疗效与野炎缌织学类型无 关。对慢性持续和慢性活动性肝炎，使用m p g ( o 6 2 5 9 ，d a y ) 疗效为3 1 2 周，症 状及舞动缝生诧器标也滚复正鬻。 1 4 2 代谒t 解毒弃4 “2 ” 临床广泛用于重金属h g 、p b 等及菜些药物、化学物质如苯巴比妥g i 起的中毒的 解毒，效果良好。 1 4 3 化疗、放疗保护剂眦“1 患者敬疗、纯疗豹霹懿或提懿痤焉醚p g 可爨藩降 蓑毒副终鲻，魏体羹减轻，鑫绥 胞减少，廷力和胃肠道反应等，并可预防因放疗、化疗所致二次肿瘤的发生。 4 4 对胱氨酸结石的疗效 m p g 使用一定剂量( o 。6 1 2 鲋a y ) ，一定疗程( 一般超过4 周) ，可显著减少 胱氨酸尿患者发擞泌尿系统胱氨酸结石的比率；用大剂量m p g ( 2 ，5 次) 冲洗，可溶 瓣耱爨、鹭贱氨羧结石，蘩代手术取石f 1 瑚。 1 4 5 其它治疗作用 m p g 对类风滠关节炎、皮炎和老年髓自内障也有一定疗效【圳矧。m p g 使鬻超过 4 周，偶霄患者出现发热，皮疹等症状，一旦停药即可消退。机体对m p g 有极好的耐 受性。 。5 项目立题的目的与依据 硫酱罗宁作为一种代谢改善解毒剂，蕊主要用于慢性肝病的肝功能改 善。该产菇豹嗣鼹割粼、冻予耪锌帮承赞溶精裁蟊蓊已经上市。 蠡予硫蒋罗 宁呈强酸性( p h 约1 6 ) ，现有的制剂多是将其辅配为中性应用于临床。如目前临床 上使用的冻干粉针即为每i 西杯瓶中装入o 1 9 或o 2 5 9 的硫普罗宁，并配带专用的碳 酸氢钠水溶液，l 嗡床时用专用的碳酸氢钠水溶波将硫普罗宁溶辫米使用，这样生产、 包装和使媚均较顺琐。此外我们研究发现硫普罗宁在水栩中由酸性被碱中和到中性的 过程中缀努分鼹产生副产甥，使产品纯发下降，这无疑会影响该产鑫躲安全性寒有效 第1 章前言 使用。另外亦有文献1 1 3 0 】显示硫普罗宁在水中遇碱性物质不稳定易分解。因此目前临床 上直接用的硫普罗宁制剂均潜在有在中和为中性的过程中不稳定而分解的问题，很多 文献报道【”1 。h 8 】| 笛床上使用硫普罗宁后产生较大的毒副作用，产生恶心、胸闷、过敏、 唾液腺肿大、腮腺肿胀、呼吸困难、肾病综合征并急性肾衰等不良反应，甚至有严重 过敏产生休克的现象。这些不良反应的发生很可能与硫普罗宁在水中不稳定的问题有 关。 因此设想将硫普罗宁在体外有机溶剂中进行成盐反应，制备成硫普罗宁钠，避免 分解物进入体内或在体内产生分解物进而引起毒副反应。从结构上看，硫普罗宁含有 巯基，很不稳定，如不采取一定措施，很难在水相或有机相中合成出较纯的符合药用 的产物来。国外也有研究者尝试制备硫普罗宁的钠盐1 4 9 1 ，因其方法限制，最终产物为 硫普罗宁钠的水合物。该专利明确显示，很难用常规方法合成出硫普罗宁钠盐，用 n a o h ，n a h c 0 3 ，n a 2 c 0 3 等无机碱与硫普罗宁在水或醇中中和后，要么没有钠盐的 生成，要么得到的产物量很少；用普通的醇钠( 如甲醇钠、乙醇钠等) 产物的量很低 且难以精制。正是由于用常规方法难以合成出无水硫普罗宁钠盐，所以虽然已知硫普 罗宁直接使用有很多缺点，但是现在却仍然在使用硫普罗宁。该专利使用了2 一乙基己 醇钠作为碱，以异丁醇为溶剂，与硫普罗宁反应，反应结束后加水析出硫普罗宁钠一 水合物( c h 3 c h s h c 0 n h c h 2 c 0 0 n a h 2 0 ) 。该工艺复杂，所使用的有机溶剂不易 得且造成残留。我们重复了该专利实验，发现其产率低，产品纯度不高，并且产物在 8 5 时受热失去结晶水，呈半熔融状态，难以用普通方法( 如高温灭菌) 制备无菌粉 针；h p l c 检测显示其纯度降至9 0 以下，不符合药用标准；再者，由于产物含有结 晶水，长期放置还是有分解的可能( 见稳定性考察高湿试验结果) 。 我们经过反复研究，发现在常用有机溶剂中将硫普罗宁与氢氧化钠作用，便可制 备出高收率、高纯度、符合药用的无水硫普罗宁钠，不仅可以解决上述缺陷，而且因 得到的产品具有很高的熔点( 1 5 0 ) ，可采用一般的高温消毒方法来制备无菌粉针。 另外，我国为病毒性肝炎高发地区，仅乙型病毒性肝炎发病率就为总人口的1 0 。 最近报告，丙型病毒性肝炎发病率也呈快速上升趋势。估计，病毒性肝炎发病人群约 2 2 5 亿。我国又是酒类生产、消费大国，每年生产各类酒产品近2 0 0 0 万吨，嗜酒人 群广大，进入人体的酒精9 8 在肝脏第一循环代谢。慢性酒精中毒主要引起脂肪肝、 酒精性肝炎、酒精性肝硬化等病理改变，从而促发和加重肝脏病毒性感染，后者可加 重酒精中毒之肝损伤，呈恶性连锁反应。酒精中毒与病毒感染已成为我国人民肝脏损 7 第l 章前言 穆主要病戳。我国每年患瑟毪耱瘸瘸久淤露万诗，荚中大部分应麓伍学药物帮敖瓣线 治疗，但化疗、放疗的各种毒副作用强烈，硫普罗宁为辅助治疗，可显著降低化疗、 敖疗的各种毒副律厢，并可预防困放疗所零i 发的二次3 狰瘤，硫普罗宁为广大化疗、放 疗患者所遗切需求的药物。 硫普罗宁适应症广泛，仅按我国o 2 5 慢性肝炎患蠢服用此药计算，每天翻服 6 0 0 挂控，1 2 周一个疗程，年霉要量终4 5 吨，实际年需要量约l o 1 5 吨，原料产篷 约5 0 0 0 万元人民币，制剂销售额奠大，逐步扩大适应症，其生产规模和产值还将有所 增长，萁季主会效盏及经济效益菲攀可鼹。i 嚣磅割静雯薪换代产品酸善罗宁镳与蘸蛰罗 宁相比毒性低而疗效高，更具市场竞争力，研究成功后将会产生颤大的经济效益，对 我函广大黔病患者无疑也怒个福音。 无水硫普罗宁钠的药理、毒理实验结聚显示：硫普罗宁钠及冀制剂与市售硫普罗 宁及其制剂相比，纛性降低近2 0 倍，疗效也有所键高。尤其二者的溶血性试验，肖着 本质差别：我们磺铡的硫簧罗宁镳服料药稠粉针露刻的生理盐水溶液，在辨设浓度下 均朱见溶觑，硫普罗宁钠淀射粉针对红细胞也无溶皿和凝聚作用，溶血性试验符合要 求；瑟枣鬟楚凌警罗宁原精菸移垮于羚铮誊l 裁懿5 n 攫c 0 3 溶滚在4 0 融g 蕊l 以下浓 度时，出现全部或部分溶赢。这充分说明我们的产品是安全和有效的，同时也证明我们 立题的正确往。 第2 章硫普罗宁钠原料药合成工艺的研究 第2 章硫普罗宁钠原料药合成工艺的研究 硫普罗宁钠( s o d i u mt i o p r o t l i n ，n a m p g ) 的化学名称为n ( 2 巯基丙酰基) 甘氨酸 钠。其结构式、分子式和分子量为： c h 3 c h c o n h c h 2 c 0 0 n a i s h c 5 h 8 n n a 0 3 s 1 8 5 2 0 纯品为白色或类白色结晶眭粉末。以干品计算，c 5 h 8 n n a o s 含量不低于9 8 5 。 2 1 合成路线的设计 2 1 1 文献的合成路线 将硫普罗宁改造为钠盐，已有文献【”0 1 报道关于硫普罗宁钠一水合物的合成。其合 成工艺路线路线如下所述： c 瞰c h 2 一f h _ c h 2 0 h + n a c h 3 ( c h 2 ) 3 弋。h h 2 一o n a + h 2f c 2 h 5 6 ，h ； c 飓一早h c o 一蜘壬一c 碣一c o o h + 8 h c h 3 ( c h 2 ) 3 一早 卜c h 2 一。n a 昱工擎c h 3 ( c h 2 ) 3 一早 王_ c h 2 0 n a 堑上墨； c 鸿 c h 3 一尸一c o n 珏一c h 2 一c 。n a+ c 磁c h 2 ) 3 一f h _ c h 2 0 h s c 2 马 2 1 12 一乙基己醇钠的合成 在干燥的2 5 0 “圆底烧瓶巾加入1 0 9 金属钠和5 0 m 1 二甲苯，装上【纠流冷凝管， 放在垫有石棉网的电炉上加热。待钠熔融后，立即拆去冷凝管，用磨口塞塞紧圆底烧 瓶，用力振荡( 注意中问适当放空) ，得细粒钠珠。稍经放置待钠珠沉于瓶底后，将 二甲苯倾倒出，然后迅速向烧瓶中加入7 5 i i l l2 乙基己醇，装上冷凝管并向圆底烧瓶中 充氮气进行反应。反应最初较剧烈，当反应速度放慢，反应液出现固化时用油浴加热， 油浴温度不超过2 0 0 ，直至烧瓶中的钠完全反应，将反应液迅速转移到搪瓷容器中， 油浴温度不超过2 0 0 ，直至烧瓶中的钠完全反应，将反应液迅速转移到搪瓷容器中， 0 第2 章硫蒋罗宇铺原料药合成工艺的研究 置予干燥器中僚存。反应波冷却瑟瑟藏自惫鳝装露体，帮失2 乙鏊已酵镳( 含3 0 豫魄 2 一乙基己醇) 。取上述制得的2 一乙基己醇钠1 0 3 9 ( 0 0 4 7 m 0 1 ) ，溶于4 3 m l 异丁醇中， 鬻溶液a 。 2 1 1 2 硫普罗宁钠一水食物的合成 称取硫普罗宁( m p g ) l o o o g ( o 0 6 1 m 0 1 ) ，在温度为2 0 2 5 时加入6 2 5 m l 异 丁醇中，拦拌得懋浊液b ；将溶液a 缓幔舰入浊液b 中，加毕，搅拌3 0 分钟。将温 度降低至1 0 1 5 冷却3 小时，加入1 m l 去离子水，搅拌l o 分钟，抽滤，得白色结 藩睦粉末，猿次鼹器丁酵秘嚣醺各洗涤谚次，于爨褥酸善罗宁镳一零台耪l o 。4 9 ，8 2 8 8 失去结晶水，1 5 5 1 6 0 全融。 2 1 ，2 耨合成工艺路线的探索 已有工艺路线是关于硫普罗宁钠一水合物的台成，我们重复了其合成路线，发现 产率不高，且反成产物在烘干时容易胶联流态化，因此我们摸索光水硫普罗宁钠的合 成工艺。 2 1 ，2 1 殷应溶剂的选择 参照文簸摄遒塔n ，按孛蜜药典2 0 鹋年舨“冠髑”孛蠢关溶簿凌錾鬟定逶牙试验， 硫普罗宁强不同溶剂中的溶解度情况见表2 1 ： 表2 一l 硫藩爹宁豹溶舞度 品名溶剂比例溶解时问现象结论 ：教 l ：1 51 5 溶解易溶 硫 甲醇 l ：2 o1 5 溶麟易溶 普 乙醇 1 ：6 o2 0 溶解 易溶 罗 癸丁醇 l ：5 0 03 0溶勰徽溶 宁 乙酸乙酯 l ：2 5 03 0 溶解微溶 z ；醚 l ：3 3 0 03 0溶解 辍锾溶 氯仿 1 ：4 5 0 03 0溶解极微溶 话i 酮 l ：3 o 1 5 溶解易溶 鄢邑烷 l ：l o o o o3 0 溶缎不溶 为了茨应时後磕善罗宁残蟓鞠漆渡，避免囊予生成懿镄盐板爨造或产；襞包夹吸鞋 第2 章硫普罗宁钠原料药合成工艺的研究 硫普罗宁，根据上述试验结果，选用水、甲醇、乙醇和丙酮做溶剂进行试验。同时设 计正交试验，与硫普罗宁反应的碱从2 一乙基己醇钠、异丁醇钠、乙醇钠、氢氧化钠、 碳酸氢钠和碳酸钠中选择。正交试验结果见表2 2 ： 表2 2 正交试验结果 2 乙基己异丁醇钠乙醇钠氢氧化钠碳酸氢钠碳酸钠 醇钠 水 甲醇 nn 乙醇 +nn 丙酮 斗+nn 符号说明： 一代表发生反应，但反应体系无产品析出 + 代表发生反应，且反应体系有产品析出 n 代表不发生反应 其中2 一乙基己醇钠、异丁醇钠、乙醇钠均为参照文献1 5 2 书4 1 自制。 溶剂的选择：从实验上来看，用丙酮作溶剂的缺点是由于强碱的加入，容易有副 反应的发生；用乙醇作溶剂，反应体系虽然有产品析出，但其发生瞬时析出，产生暴 聚，且产量不高，产率仅仅5 0 左右( 以硫普罗宁计) ；对于水作溶剂，由于我们要 制备无水硫普罗宁钠，所以也不适合作溶剂，因此最终选定甲醇作反应的溶剂。 碱的选择：由于碳酸氢钠和碳酸钠在甲醇中不溶，且不与硫普罗宁反应，故排除。 对于醇钠和氢氧化钠，从反应上来讲均可以作为反应的碱，但一经比较就可以知道选 择氢氧化钠是最佳选择。因为氢氧化钠廉价易得，选择氢氧化钠不仅可以简化工艺， 而且可以避免用醇钠反应产生相应长链醇造成溶剂残留的麻烦。 所以我们选用甲醇作溶剂，以氢氧化钠为碱与硫普罗宁反应制备无水硫普罗宁钠。 但由于反应后无产品析出，且反应过程中有等分子的反应水生成，故需最后向反应液 中加入沉淀剂c 以析出产品，同时要在反应初期加入除水剂b ，以及时除去生成的反 应水。另外，在实际的合成当中，由于巯基的不稳定，我们在反应前加入巯基保护剂 a 来保护硫普罗宁的巯基，避免巯基发生胶链。 第2 章硫普罗宁钠原料药合成工艺的研究 2 1 2 2 反应温度的选择 由于酸碱中和反应放热量大，反应初期反应温度高，产品胶链的可能性增加，所 以反应初期温度要低。经反复试验，中和反应温度应在o 5 ，消除产生的中和热导 致反应温度的上升。中和反应进行到一定程度，放热减少，这时为了提高反应的速度 和转化率，提高温度至2 0 2 5 ，同时也不可过高，以免引起巯基胶链。 2 1 2 3 反应物比例的选择 各种反应比例下产物性状、p h 、产率的比较( r 代表氢氧化钠与硫普罗宁的摩尔 比) 见表2 3 ： 表2 3 氢氧化钠与硫普罗宁不同反应比例结果 r 产品性状产品p h产率( ) 2 o ： 1 胶链 1 1 6 9 1 5 ： 1 胶链 8 58 0 1 1 ：1白色结晶 6 59 1 1 o ：1白色结晶 6 28 9 0 9 ：1白色结晶 5 56 0 o 5 ：1白色结晶 4 o5 0 从上述结果可以看出，氢氧化钠的用量不可过大，否则容易产生胶链，影响产率， 并且产物吸附氢氧化钠，使产品的p h 升高；氢氧化钠的量也不可小，若小则影响产 率，且产品吸附溶液中未反应的硫普罗宁，使产品p h 降低。经不断试验，反复摸索， 氢氧化钠与硫普罗宁的最佳摩尔反应比应控制在1 0 5 1 1 0 。 2 2 生产工艺 2 2 1 新合成工艺路线 c h 3 h c o 卟旺卜c h 2 一c o o h+ n a o h 趔盟b i 擎l l s h c h 厂p c o - n h c h r o o n a+ h 2 0 女h 本合成路线有如下创新之处： 1 、合成的原料之一氢氧化钠，廉价易得，与专利的工艺路线相比，工艺简单，可 操作性强，易于工业化生产。所使用的溶剂甲醇，溶解硫普罗宁使反应成均相反应， 蓥2 章巯蛰罗。镑愿瓣药合成工艺静磅究 产品纯度好，不易产生包夹； 2 、合成中使用了巯基保护刹a ，稳定了硫蛰罗宁的巯基，生成的产物不发生胶链， 产鑫杂簇含量乡； 3 、反应前加入除水剂b ，去除反应生成的水，提供了种制备无水硫游罗宁纳的 新方法，由于无水硫鼹罗宁钠熔点高( 1 5 0 左右) ，便于高温灭菌，适宜制各成各种 裁鏊，p | 为6 左右，可藏冻干耱铮矗接注辩戮入俸两； 4 、反应结束加入沉淀剂c ，产品产量高，总收率达9 0 。 2 2 2 原料 硫磬罗宁河南薪谊医药集团公司新多联谊锈驽厂，符合质量舔准 2 一乙撼己醇c p中国医药集团上海化学试剂公司 2 一乙貉己醇钠露制 异丁醇c p中国医药集闰上海让学试赉j 公司 异丁醇钠自制 乙酵钠螽越 氢氧化钠a r北京纯工厂 碳酸钠a r洛阳市化学试剂厂 碳酸鬣镳a r洛阳市化学试剂厂 甲簿ar北京化工厂 无水乙醇a r_ b 京化工厂 二甲苯a rl e 京伲工厂 2 2 3 禽成步骤 综合两条合成路线，由于氢氧化钠原料廉价易得，以氢氯化钠为原料的工艺简单， 操作方便，嚣且该：【= 艺产品产率惑，纯度鲟，逡室工业化生产。故选用氢甄毽镶终碱 与硫普罗宁反应成赫的合成路线。工艺路线国如下： 第2 章硫普罗宁钠原料药合成工艺的研究 具体操作步骤如下： 1 、称取m p g 4 t ) 8 9 ( o 3 0 5 m 0 1 ) ，置于放有1 3 5 m 1 分析纯甲醇的2 5 0 m l 三口烧瓶中， 加入巯基保护剂a ，o 5 水浴搅拌1 5 m i n 。 2 、称取n a o h 【4 1 9 8 9 ，分6 次加入甲醇液中( 每次加入2 3 6 6 9 ) ，每次间隔l h 。 3 、第6 次加入n a o h 后，继续在o 5 水浴中，中速搅拌下反应l h 。然后，将 反应瓶移入2 0 2 5 水浴中，中速搅拌1 h 。抽滤，滤除不溶物，滤液加入4 0 0 i n l 沉淀 剂c 中，振摇，室温放置过夜。 4 、过夜的反应：掖中出现大量白色沉淀，抽滤，于6 0 鼓风干燥2 h ，升温到8 0 ， 继续干燥8 h 。取出后置于干燥器中冷至室温，称重( 5 1 5 9 ，产率9 1 ) ，装瓶。 2 2 4 精制方法 称取1 克粗品硫普罗宁钠，加入甲醇1 0 m l ，溶解后，如果有色加入活性炭脱色， 然后加入3 0 m l 沉淀剂c ，静置析出，过滤，8 0 鼓风干燥，得白色结晶性粉末。 2 2 5 三废情况 工艺中所用溶剂均很容易通过蒸馏法回收，可以重复使用，对环境污染小。 籀3 章巯簧罗j 。铺麓纯学结构确诞 第3 耄硫普罗宁钠的化学结构确证 莼麓名称：硫普箩宁镳 英文国际非专利名：s o d i u mt i o p r o n i n 鳐鞫式： c h 3 e h c o n h c h 2 c o o n a s 王 分子式：c 5 h 8 n n a 0 3 s 分子量：i 8 5 2 0 化学名：中文名：n 一( 2 巯基丙酰藻) 甘氮酸键 藏文名：8 0 d i u mn ( 2 一m e r c 印t o p r o p i o n y l ) g l y c i n c 3 。 供练构确试用样品豹缝度及精裁方法 精制方法：同制备工艺，用甲醇溶解，加沉淀剂c 结晶析出，得白色或类白色结 晶或结晶褴粉末。 纯度：9 9 6 1 ( 碘液漓定法) 。 3 2 理化性质 本品为鸯琶或类自爸结鑫毪耪寒；碴蠢蒜奚昧。在承审易潼，在乙醇中徽溶，在 稀舳酸和氯氧化钠试液中易溶。 熔点：1 5 2 一1 5 6 3 ，3 硫普罗宁钠的结构表征方法 通过元素分静千、红外吸收光谱( i r ) 、紫外吸收光谱( u v ) 、核磁共振氮谱 ( 鞋- n m 装) 、核磁共振碳港( b e 攥m r ) 、溪谤( m s ) 、热重( 玎0 ) 、蓑示扫攒量 热( d s c ) 及x 射线衍射等，确定了无水硫普罗宁钠的结构。 3 3 元素分耩 ( 1 ) 碳、氢、氮的测定 仪器裂号：p e 2 4 0 0 激元素分析仪 测试肇位：溺南爆蕊大学 ( 2 ) 测试结果：本品