（应用化学专业论文）不同类型溢油污染潮间带生物修复可行性现场中试研究.pdf

不同类型溢油污染潮间带生物修复可行性 现场中试研究 学位论文完成日期： 指导教师签字： 答辩委员会成员签字： 独创声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的 研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其 他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含未获得 ! 注! 垫逡直基丝益墓挂别童塑的：奎拦卫窒2 或其他教育机构的学位或证书使 用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明 确的说明并表示谢意。 学位论文作者签名：伍己番签字日期山f 。年6 月2 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，并同意以下 事项： 1 、学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许 论文被查阅和借阅。 2 、学校可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以 采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权清华大学“中 国学术期刊( 光盘版) 电子杂志社”用于出版和编入c n k i 中国知识资源总库， 授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到中国学位论文全文数据库。 ( 保密的学位论文在解密后适用本授权书) 学位论文作者签名：跟导师签 签字日期：山卜年月孑日签字日期：少) 年6 月日 不同类型溢油污染潮间带生物修复可行性现场中试研究 捅要 随着海洋石油工业和海上石油运输业的迅速发展，溢油污染已成为海洋生态 环境潜在的重大危害。经过三十多年的发展，生物修复技术得到很大发展并已在 现场获得使用，已成为一种经济、环境效益俱佳的消除潮间带溢油污染的有效手 段。然而，溢油污染潮间带生物修复是一项涉及污染场地特性、溢油油品、微生 物生态结构及各种环境条件的复杂工程，因此在生物修复项目实施以前，必须经 过小试和现场中试对工程的可行性进行研究。 本论文主要通过现场中试试验，考察水溶性肥料、缓释肥料和石油烃降解菌 剂等措旌对不同油品不同类型潮间带溢油污染的生物修复效果的影响。以现场监 测得到各理化因子( 温度、盐度、p h 、d o 、间隙水总溶解氮、磷) 以及各生物 因子( 石油烃降解菌密度、烷烃降解菌、芳烃降解菌、微生物群落结构和多样性 等) 动态变化数据为基础，通过对影响石油烃生物降解主要因子的主成分分析， 确定生物修复技术在不同类型溢油污染潮间带生物修复过程中适用性以及控制 油污染物生物降解的关键因子。论文主要研究结果如下： ( 1 ) b x p t 中质原油污染的不同岸线土著微生物群落结构有较大差异，石 油烃自然降解率也明显不同。其中，粉砂淤泥基质中烷烃平均降解率较高，达 1 7 6 ，而粗砂一砾石基质和细砂中砂基质烷烃平均降解率接近，分别为8 5 和 7 o ，而各基质中芳烃的平均降解率比较相近。这表明不同岸线具有不同的生态 环境特征，对生物修复措施的敏感性也不同。 ( 2 ) 对于b x p t 中质原油污染的不同岸线，氮、磷含量低是限制石油烃生 物降解的主要因素，添加营养盐即生物刺激可以有效提高油污染物的生物降解 率，但添加缓释肥料和水溶性肥料的在不同基质中的作用效果不同。在6 0 天生 物修复时间内，粗砂砾石岸线和细中砂岸线中添加缓释肥料的体系优于添加水 溶性肥料的体系，烷烃平均降解率分别是对照体系的1 3 倍和2 2 倍，分别是各 自添加水溶性肥料体系的1 3 倍和1 3 倍；而粉砂淤泥岸线中添加水溶性肥料的 体系优于添加缓释的体系，烷烃平均降解率是对照体系的2 1 倍，是添加水溶性 肥料体系的1 4 倍。而不同岸线添加营养后芳烃平均降解率与对照无显著差异甚 至降低。上述结果表明，添加营养盐可以促进烷烃的降解，而芳烃的降解则受到 抑制。 ( 3 ) 同时添加营养盐和接种石油烃降解菌剂i 在b x p t 中质原油污染不同 类型岸线中的作用效果不同。对于粗砂一砾石岸线和细中砂岸线，同时添加营养 盐和接种菌剂的体系，不仅可以显著提高两种基质间隙水中氮、磷养分的含量， 有效促进接种石油烃降解菌和土著菌的快速生长繁殖，而且改善了基质中的微生 物群落结构，提高群落多样性，从而有效提高生物修复的效率。其中，烷烃平均 降解率分别为各自对照的4 8 倍和5 1 倍，芳烃平均降解率则与对照相当。而对 于粉砂淤泥基质，同时添加营养盐和接种菌剂的体系中尽管营养盐促进了土著 石油烃降解菌的生长，但外加菌剂则与土著菌之间产生竞争作用，导致石油烃生 物降解率低于只添加营养盐的体系。 ( 4 ) 对于s z 3 6 1 重质原油污染的粉砂淤泥岸线，考察了两种溢油浓度下 石油烃降解菌剂i 和菌剂i i 与缓释肥料同时对石油烃生物降解的影响，其中，菌 剂i i 是在茵剂i 中复配2 株能以石油烃为碳源而产生物标表面活性剂的菌。在高 浓度油污染条件下，同时添加缓释肥料和菌剂i 体系中烷烃和芳烃的平均降解率 分别为对照组的2 9 和1 3 倍。在低浓度油污染条件下，同时添加缓释肥料和接 种菌剂i 的处理和同时添加缓释肥料和接种菌剂i i 的处理都大大提高了修复效 率，在6 0 天的修复时间内，烷烃的降解率分别为对照的2 8 和2 9 倍，芳烃的降 解率分别为对照的1 3 和1 3 倍。进一步比较生物修复过程中微生物群落多样性 的p c r d g g e 结果，可以看出在生物修复开始阶段，同时添加缓释肥和菌剂体 系中微生物群落多样性要高于对照体系，随着修复时间的增长，添加菌剂i 与菌 剂i i 的体系中微生物群落结构逐渐趋同，相似性系数达到了7 0 以上，在修复后 期，各处理体系中微生物群落结构与对照组趋同，表明土著微生物在体系中开始 表现出很大的竞争优势。 ( 5 ) 在试验周期内，各溢油污染岸线现场生物修复试验中，各环境参数的 变化( d o 、p h 、盐度、温度) 均在石油烃降解菌生长的范围之内，各试验池 之间均没有显著性差异( p o 0 5 ) ，表明这些环境因子不是限制生物修复效果的 主要因素。 关键词：溢油潮问带生物修复现场试验石油烃微生物群落结构 t h ep i l o ts t u d yo nt h ef e a s i b i l i t yo fb i o r e m e d i a t i o no nt h e d i f f e r e n tt y p e so fo i l - s p i l l e ds h o r e l i n e a b s t r a c t w i t ht h er a p i dd e v e l o p m e n to fo f f s h o r eo i li n d u s t r y , t r a n s p o r t a t i o n , t h eo i l e x p l o r a t i o n ，a n dt h ee x p a n d i n go ft h es u b m a r i n ep i p e l i n e ，o i l s p i l lp o l l u t i o ni nt h e m a r i n ee n v i r o n m e n th a sb e c o m eas i g n i f i c a n th a z a r dp o t e n t i a l a ne f f i c i e n t ，f r i e n d l y m e t h o da b o u tt h er e m o v a lo ft h ep e t r o l e u mh y d r o c a r b o nb e c o m e st h eg r e a tc o n c e r nt o t h e i n t e r n a t i o n a lr e s e a r c hf i e l d t h eb i o r e m e d i a t i o nd e v e l o p e di nt h em i c r o b i a l d e g r a d a t i o nh a sm a n ya d v a n t a g e s l i k em o r ee f f e c t i v e ，l o wc o s ta n df r i e n d l yt o e n v i r o n m e n ti nd e a l i n gw i t he n v i r o n m e n t a lo i lp o l l u t a n t s w i t h3 0y e a r sd e v e l o p i n g ， b i o t e c h n o l o g yi so f t e na p p l i e d ，a n dw h i c hh a sa l r e a d yb e e na c c e p t e d 嬲t h ea t t r a c t i v e a n dv e r s i b l em e t h o do fc r u d eo i le l i m i n a t i o ni nt h ee n v r i o n m e n t h o w e v e r , t h e o i l s p i l l e ds h o r e l i n ei sac o m p l i c a t e dp r o j e c tt h a ti sr e l a t e dw i t ht h ec h a r a c t e r i s t i c so f c o n t a m i n a t e ds i t e s ，t h es t r u c t u r eo fm i c r o b i a le c o l o g y , a sw e l la sv a r i o u s e n v i r o n m e n t a lc o n d i t i o n s s ob e f o r et h e i m p l e m e n t a t i o n o ft h e p r o j e c t i n b i o r e m e d i a t i o n ，i tm u s th a v et h es m a l ls c a l ea n df i e l dp i l o ts t u d yo nt h ef e a s i b i l i t yo f t h ep r o j e c t w i t hd i f f e r e n tt r e a t m e n t si n c l u d i n g a d d i n gw a t e r - s o l u b l ef e r t i l i z e r , a d d i t i o no f s l o wr e l e a s ef e r t i l i z e r , s l o wr e l e a s ef e r t i l i z e rn u t r i e n t sw i t he x p e r i m e n t a lm i c r o b i a l i n o c u l u m sa n dw a t e rs o l u b l ef e r t i l i z e rw i t hp e t r o l e u m d e g r a d i n gb a c t e r i u m , t h i s p a p e rm a i n l ys t u d yo nt h ee f f e c to fb i o r e m e d i a t i o ni nd i f f e r e n tt y p e so fo i l - s p i l l e d s h o r e l i n ea b o u tb x p tc r u d eo i la n dh e a v yc r u d eo i ls z 3 6 - 1t h r o u g hf i e l dp i l o tt e s t s t r i a l so fb i o r e m e d i a t i o nw e r ec o n d u c t e di nc o a r s es a n d p e b b l es h o r e l i n e ，f i n es a n d s h o r e l i n ea n ds i l t - m u ds h o r e l i n e t h ev a r i o u so fc h e m i c a la n db i o l o g i c a lf a c t o r sa r e m e a s u r e di ns i t u ，i n c l u d i n gt e m p e r a t u r e ，s a l i n i t y , p h ，d i s s o l v e do x y g e nc o n c e n t r a t i o n ， t o t a ld i s s o l v e d n i t r o g e n a n d p h o s p h o r u s i n p o r ew a t e r , a n d t o t a l p e t r o l e u m h y d r o c a r b o n sa n dc o m p o n e n t s a sw e l la sb i o l o g i c a lf a c t o r s ，i n c l u d i n gt h et o t a l n u m b e ro f b a c t e r i a , d e n s i t yo fp e t r o l e u mh y d r o c a r b o nd e g r a d i n gb a c t e r i a , a n dd e n s i t y o fa l k a n e sd e g r a d i n gb a c t e r i a ，a n dt h ed e n s i t yo fa r o m a t i ch y d r o c a r b o nd e g r a d i n g b a c t e r i a , a sw e l la st h em i c r o b i a lc o m m u n i t y 蛐n l 纰a n dm y c o b a c t e r i u md i v e r s i t y ， e t c t od e t e r m i n et h ef e a s i b i l i t yo f t h eb i o r e m e d i a t i o nt e c h n o l o g yi nd i f f e r e n tt y p e so f o i l - s p i l l e ds h o r e l i n ea n df i n dt h ek e yf a c t o ro fa f f e c t i n gb i o d e g r a d a t i o no fo i l p o l l u t a n t s ，w ed i di np r i n c i p a lc o m p o n e n ta n a l y s i s t h em a i nr e s u l t sa lea sf o l l o w s ： ( 1 ) d i f f e r e n ts h o r e l i n ec o n t a m i n a t e di nb x p tc r u d eo i lh a sd i f f e r e n ti n d i g e n o u s m i c r o b i a lc o m m u n i t i e sa n da l s od i f f e r e n c ei nn a t u r a ld e g r a d a t i o nr a t eo fp e t r o l e u m h y d r o c a r b o n i tt u r n st h a tt h es i l t - m u dm a t r i xh a st h eh i g h e s td e g r a d a t i o nr a t e ，w h i c h i s17 6 ，a n dt h ed e g r a d a t i o no ft h ec o a r s es a n d - p e b b l es h o r e l i n ea r ec l o s et ot h e f i n es a n ds h o r e l i n e , w h i c ha r e8 5 a n d7 0 h o w e v e r , t h ea v e r a g ed e g r a d a t i o n r a t e so f a r o m a t i ch y d r o c a r b o na r es i m i l a ra m o n gt h et h r e es h o r e l i n e s t h e s es h o wt h a t d i f f e r e n ts h o r e l i n ei sd i f f e r e n ti ne n v i r o n m e n t a lc h a r a c t e r i s t i c s ，a n dt h es e n s i t i v i t yo f b i o l o g i c a lr e s t o r a t i o nm e a s u r e m e n t sa r ea l s od i f f e r e n t ( 2 ) f o rt h ed i f f e r e n ts h o r e l i n e sc o n t a m i n a t e di nb x p t c r u d eo i l ，t h el o wc o n t e n t o fn i t r o g e na n dp h o s p h o r u sa r et h em a i nf a c t o r st ol i m i t t h eb i o d e g r a d a t i o no f p e t r o l e u mh y d r o c a r b o n s ，a d d i t i o no fn u t r i e n t sc a ns i g n i f i c a n t l yi m p r o v et h en u m b e r o ft h ei n d i g e n o u sh y d r o c a r b o nd e g r a d i n gb a c t e r i ai nd i f f e r e n ts h o r e l i n e ，a n da l s o i m p r o v et h eb i o d e g r a d a t i o nr a t eo fo i lp o l l u t i o n ，b u te f f e c t sb e t w e e nt h ea d d i t i o no f s l o wr e l e a s ef e r t i l i z e ra n dw a t e r - s o l u b l ea r ed i f f e r e n t i n6 0d a y so fb i o r e m e d i a t i o n ， t h eb i o d e g r a d a t i o ns y s t e mi n o c u l a t e dw i t hs l o w - r e l e a s ef e r t i l i z e ra r eb e t t e rt h a nt h e s y s t e mi n o c u l a t e dw i t hw a t e r - s o l u b l ef e r t i l i z e ri nc o a r s es a n d - p e b b l es h o r e l i n ea n d f i n es a n ds h o r e l i n e , t h ea v e r a g er a t i oo fa l k a n e sd e g r a d a t i o na r em o r e1 3t i m e sa n d 2 2t i m e st h a nt h ec o n t r o ls y s t e m ，a n dm o r e1 3t i m e sa n d1 3t i m e st h a ne a c hs y s t e m i n o c u l a t e dw i t hw a t e r - s o l u b l e f e r t i l i z e r ；h o w e v e r t h e b i o d e g r a d a t i o ns y s t e m i n o c u l a t e dw i t hw a t e r - s o l u b l ef e r t i l i z e ra r eh i g h e rd e g r a d a t i o nr a t et h a nt h es y s t e m w i t ha d d i t i o no fs l o w - r e l e a s ef e r t i l i z e r , t h ea v e r a g er a t i oo fa l k a n e sd e g r a d a t i o nr a t e a r em o r e2 1t i m e st h a nt h ec o n t r o ls y s t e m ，a n dm o r e1 4t i m e st h a ns y s t e mt r e a t e d w i t ha d d i t i o no fw a t e r - s o l u b l ef e r t i l i z e r h o w e v e rt h e a v e r a g e o fa r o m a t i c s i l d e g r a d a t i o nr a t ei sn e a r l yo re v e nl o w e rc o m p a r e d 谢mt h ec o n t r 0 1 t h e s er e s u l t s s h o wt h a tt h ea d d i t i o no fn u t r i e n t sc a np r o m o t et h ed e g r a d a t i o no fa l k a n e s ，b u tt h e d e g r a d a t i o nr a t eo fa r o m a t i ch y d r o c a r b o ni si n h i b i t e d ( 3 ) t h ed e g r a d a t i o n r a t eo ft h e b i o d e g r a d a t i o ns y s t e m i n o c u l a t e dw i t h o i l d e g r a d i n gb a c t e r i aa g e n ti a n dn u t r i e n t sa r ed i f f e r e n ti nd i f f e r e n ts h o r e l i n e s c o n t a m i n a t e di nb x p tc r u d eo i l f o rc o a r s es a n d p e b b l es h o r e l i n e ，f i n es a n d s h o r e l i n e ，w h i l ea d d i n g n u t r i e n t sa n di n o c u l u m so ft h e s y s t e m ，n o to n l y c a n s i g n i f i c a n t l yi m p r o v ec o n t e n to fn i t r o g e na n dp h o s p h o r u si np o r ew a t e ri nt h et w o k i n d so fm a t r i x ，a n dp r o m o t et h eh y d r o c a r b o nd e g r a d i n gb a c t e r i aa n di n d i g e n o u s b a c t e r i at og r o wr a p i d l y , b u ta l s oi m p r o v et h em i c r o b i a lc o m m u n i t ys t r u c t u r ei nt h e m a t r i x ，i n c r e a s et h em y c o b a c t e r i u md i v e r s i t y , a n dt h u si m p r o v et h ee f f i c i e n c yo f b i o r e m e d i a t i o n t h ea v e r a g er a t i o so fa l k a n ed e g r a d a t i o nr a t ea r em o r e4 8t i m e sa n d 5 1t i m e st h a nt h ee a c ho w nc o n t r o ls y s t e m ，a n dt h ea v e r a g ed e g r a d a t i o nr a t eo f a r o m a t i cd e g r a d a t i o nr a t ea r ec o n s i d e r a b l ea sc o n t r o l s y s t e m b u t f o rt h e b i o d e g r a d a t i o ns y s t e mi n o c u l a t e dw i t ho i l d e g r a d i n gb a c t e r i aa g e n tia n dn u t r i e n t si n t h es i l t m u ds h o r e l i n e ，a l t h o u g ht h en u t r i e n t sc a np r o m o t eg r o w t ho ft h ei n d i g e n o u s h y d r o c a r b o nd e g r a d i n gb a c t e r i a ，b u t a d d i t i o n a l a g e n t sa r e i n c o m p e t i t i o nw i t h i n d i g e n o u sb a c t e r i a ，w h i c h l e a d st h el o w e r d e g r a d a t i o n r a t eo fp e t r o l e u m h y d r o c a r b o n st h a nt h eo n l ya d d i t i o no fn u t r i e n t ss y s t e m ( 4 ) f o rt h es i l t - m u ds h o r e l i n ec o n t a m i n a t e di nh e a v yc r u d eo i ls z 3 6 1 ，t h e b i o d e g r a d a t i o ns y s t e m i n o c u l a t e dw i t ho i l d e g r a d i n gb a c t e r i a a g e n ti o ri ia n d s l o w - r e l e a s ef e r t i l i z e rh a v ed i f f e r e n td e g r a d a t i o nr a t ei nt w oc o n c e n t r a t i o n so f p e t r o l e u mh y d r o c a r b o n s t h ea g e n ti ii si nc o m p o u n d o fa g e n tia n dt w os u r f a c t a n t b a c t e r i a i nt h eh i g hc o n c e n t r a t i o no fo i lp o l l u t i o nc o n d i t i o n s ，f o rt h es y s t e mw h i c hi s a d d e da g e n tia n ds l o w - r e l e a s ef e r t i l i z e r , t h ea v e r a g er a t i oo fa l k a n ea n da r o m a t i c d e g r a d a t i o nr a t ea r em o r e 2 9t i m e sa n d1 3t i m e st h a nt h ec o n t r o ls y s t e m i nt h el o w c o n c e n t r a t i o no fo i lp o l l u t i o nc o n d i t i o n s ，t h es y s t e m sw h i c ha r ea d d i n gs l o w - r e l e a s e f e r t i l i z e ra n da g e n tio ri ia l li n c r e a s et h ee f f i c i e n c yo fb i o r e m e d i a t i o n ，i n6 0d a y s o fb i o r e m e d i a t i o n ，t h ed e g r a d a t i o nr a t e so fa l k a n ea r e2 8a n d2 9t i m e st h a nt h e i i i c o n t r o l ，w h i l et h er a t i oo fa r o m a t i cd e g r a d a t i o nf a t eo fe a c ht r e a t m e n ta r e1 3a n d1 3 t i m e st h a nt h ec o n t r o ls y s t e m f u r t h e rc o m p a r i n gt h e r e s u l t so ft h em i c r o b i a l c o m m u n i t yd i v e r s i t yp c r d g g ed u r i n gt h ed i f f e r e n tt r e a t m e n t ss y s t e m ，i tc a nb e f o u n dt h a ti nt h eb e g i n n i n go ft h eb i o r e m e d i a t i o n ，t h em i c r o b i a lc o m m u n i t yd i v e r s i t y i nt h es y s t e ma d d e da g e n ta n dn u t r i e n t sa l eh i g h e rt h a nt h ec o n t r o l ，w i t ht h e i n c r e a s i n gi nr e p a i rt i m e s ，i ns y s t e mw h i c hi s a d d e da g e n tia n da g e n t i i ，t h e m i c r o b i a lc o m m u n i t yd i v e r s i t yi st h es a m e ，b e t w e e nt h e mt h es i m i l a r i t yc o e f f i c i e n ti s m o r et h a n7 0 ；i nt h el a s tp e r i o d ，a d v a n t a g eo fg r o w t hi na g e n tia n di id i s a p p e a r e d m i c r o b i a lc o m m u n i t ys t r u c t u r ei nt h ep r o c e s s i n gs y s t e ma l en o td i f f e r e n tf r o mt h e c o n t r o lg r o u p ，i ts h o w st h a ti n d i g e n o u sm i c r o o r g a n i s m si nt h es y s t e mb e g i nt os h o w g r e a tc o m p e t i t i v ea d v a n t a g e ( 5 ) i nt h ef i e l de x p e r i m e n to fb i o r e m e d i a t i o no fd i f f e r e n tt y p e so fo i lp o l l u t e d s h o r e l i n e s ，t h ee n v i r o n m e n t a lp a r a m e t e r s ( d i s s o l v e do x y g e na n dp h ，s a l i n i t ya n d t e m p e r a t u r e ) a r es u i t a b l ef o rt h eg r o w t ho fm i c r o o r g a n i s m si nt h ef i e l de x p e r i m e n t ， w h i c ha r en o ts i g n i f i c a n t l yd i f f e r e n t ( p o 0 5 ) b e t w e e nt h et e s tp o o l ，s om e ya r en o t t h el i m i t i n gf a c t o r sf o rb i o r e m e d i a t i o ni nd i f f e r e n tt y p e so fo i l s p i l l e ds h o r e l i n e k e y w o r d s ：o i l s p i l l e d ；s h o r e l i n e ；b i o r e m e d i a t i o n ；f i e l dt e s t ；o i l - d e g r a d i n g b a c t e r i a ；m i c r o b i a lc o m m u n i t ys t r u c t u r e w 目录 1 文献综述。1 1 1 溢油污染的来源及危害1 1 2 溢油污染的治理方法2 1 2 1 物理法2 1 2 2 化学法2 1 2 3 生物法2 1 3 生物修复技术简介2 1 3 1 生物修复技术特点和类型2 1 3 2 强化生物修复的基本措施3 1 3 2 1 生物强化4 1 3 2 2 生物刺激4 1 3 3 影响石油烃生物降解的因素4 1 3 3 1 微生物种属的影响5 1 3 3 2 营养盐6 1 3 3 3 温度6 1 ：；：；4p h 7 1 3 3 5 溶解氧7 1 3 3 6 盐度7 1 3 3 7 石油的化学组成7 1 3 3 8 不同的潮间带类型对生物修复的敏感程度8 1 3 4 生物修复项目实施的可行性研究方案和步骤8 1 4 溢油污染潮问带生物修复研究进展9 1 4 1 室内研究9 1 4 2 现场研究一10 1 5 本论文研究目、研究内容及研究方案1 l 1 5 1 研究目的12 1 5 2 研究内容1 2 1 5 3 研究技术方案12 2 溢油污染潮间带现场中试试验设计和方案1 4 2 1 实验材料和仪器14 2 1 1 试剂：14 2 1 2 主要培养基：一1 5 2 1 3 石油烃降解菌剂：1 5 2 1 4 原油样品：1 5 2 1 5 实验仪器：16 2 2 溢油污染潮问带中试试验场地的构建和运行1 7 2 3 不同类型溢油潮间带生物修复的设计1 8 2 3 1b x p t 污染生物修复中不同基质的不同处理1 8 2 3 2 重质原油s z 3 6 1 污染的粉砂淤泥基质岸线中各试验池的处理1 9 2 3 3 样品采集及监测项目和频率2 0 2 4 分析方法2 1 2 4 1 石油烃含量及组分的测定2 1 2 4 2 间隙水中总氮总磷的测定一2 2 2 4 3 不同功能微生物数量的测定2 2 2 4 4 微生物群落结构的测定( p c r d g g e ) 一2 2 3 溢油污染潮间带现场中试试验结果2 5 3 1b x p t 中质原油污染潮间带生物修复2 5 3 1 1b