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生物医学机能学实验问题与回答生物医学机能学实验问题与回答 第一节 第一节 神经肌肉神经肌肉 1. 神经干动作电位的测定神经干动作电位的测定 （1）何谓神经干动作电位？如何测量神经干动作电位？ 可兴奋组织如神经纤维在受刺激而兴奋时， 细胞膜电位将发生一系列短暂的变化。 由安 静状态下的膜外正膜内负的静息电位变为兴奋状态下的膜外负膜内正的去极化状态。因此， 在膜外兴奋区相对于未兴奋区来说电位为负。 这种电位差所产生的局部电流又引起邻近未兴 奋区的去极化， 使兴奋沿细胞膜传向整个细胞， 而原来的兴奋区的膜电位又恢复到膜外正膜 内负的静息水平。这种可传播的、短暂的膜电位变化称之为动作电位 （2）神经干动作电位为什么不是“全或无”的？ 神经干动作电位是由许多兴奋阈值、 传导速度和幅度不同的神经纤维产生的动作电位综合而 成的复合性电位变化，故称为复合动作电位。因此与单根神经纤维的动作电位不同，前者的 电位幅度在一定范围内可随刺激强度的变化而变化。 （3）.什么是双相动作电位和单相动作电位？ 如果将两引导电极置于正常完整的神经干表面， 当神经干一端兴奋之后， 兴奋波先后通 过两个引导电极，可记录到两个方向相反的电位偏转波形，称为双相动作电位。测定神经冲 动所经过的距离和耗费的时间， 即可计算神经冲动的传导速度。 如果两个引导电极之间的神 经组织有损伤或被阻滞，兴奋波只通过第一个引导电极，不能传导至第二个引导电极，则只 能记录到一个方向的电位偏转波形，称为单相动作电位。 （4）如何观察和测定单相动作电位？ 将浸有 2%普鲁卡因的滤纸片置于两对记录电极之间或用镊子将该处的神经夹伤，屏 幕上呈现单相动作电位；测出最大刺激时单相动作电位的潜伏期、幅度及时 2. 神经兴奋不应期的测定？2. 神经兴奋不应期的测定？ （1）神经纤维兴奋时兴奋性的周期性变化是什么？何谓绝对不应期？相对不应期和超 常期？ 神经在一次兴奋后，其兴奋性发生周期性的变化，而后才恢复正常。一般把这些变化分 为四个时期：绝对不应期、相对不应期、超常期和低常期。绝对不应期：兴奋后最初的一 段时间内兴奋性完全丧失， 对任何强度的剌激都不能引起该细胞再次兴奋， 其兴奋性等于零。 绝对不应期相当于整个锋电位的时期。 此时 Na+通道在全部开放后迅速处于失活状态， 不能 引起再次 Na+内流而产生动作电位；相对不应期：细胞兴奋性逐渐恢复,在一定时间内,接 受较强(大于阈值)的刺激可使细胞再次兴奋,时间上相当于负后电位的前半部分。此时 Na+ 通道只有部分从失活中恢复；超常期：相对不应期过后,有的组织细胞还出现兴奋性的轻 微变化，兴奋性轻度增高超过正常，阈下剌激即能引起细胞兴奋。时间上相当于负后电位的 后半部分，此时 Na+通道基本恢复，但膜电位离阈电位较近，故较正常时容易兴奋。 （2）如何测量神经干的绝对不应期和相对不应期？ 在“肌肉神经实验”子菜单中,选择“神经干兴奋不应期测定”实验模块，可自行设 置起始波间隔、波间隔减量及刺激时间间隔等参数（如上述参数可分别设定为 8ms，0.1ms， 1s） ，也可直接选择“程控” ，然后点击“OK” ，开始实验；在 1 通道上可见到第二个动作 电位逐渐向第一个动作电位靠近。 当两个刺激脉冲之间的波间隔减小到一定程度时， 第二个 动作电位的幅值开始减小。 记下第二个动作电位开始减少时两个刺激脉冲间的波间隔， 这一 时间值即为神经干的不应期； 使第二个动作电位继续向第一个动作电位靠近， 第二个动作 电位的幅值逐渐变小， 最后消失。 记下第二个动作电位刚消失时两个刺激之间的波间隔值即 为绝对不应期，用不应期减去绝对不应期可以得出相对不应期。 3神经冲动传导速度的测定神经冲动传导速度的测定 （1）神经冲动的传导速度测定的原理是什么？ 神经冲动的传导速度（v）是指动作电位在单位时间（t）内传导的距离（s） ，可根据神经干 上动作电位从一点传导到另一点所需要的时间来计算： 动作电位在神经干上的传导具有一定的速度，不同类型的神经纤维传导速度各不相同， 神经纤维愈粗，传导速度愈快。两栖类的坐骨神经是混合神经，包含多种粗细不等的神经纤 维，其直径约为 329m。坐骨神经中以 A 类纤维为主，传导速度约为 3540m/s。 （2）温度对神经冲动的传导速度有何影响？ 当温度降低时，神经冲动的传导速度将会明显降低。因为在低温状态下，神经组织各种 酶的活性降低，膜上离子通道蛋白、载体蛋白及离子泵的活性均降低，而使神经纤维兴奋性 降低，传导速度降低。 4. 骨骼肌的单收缩、复合收缩和强直收缩骨骼肌的单收缩、复合收缩和强直收缩 (1)何谓单收缩和强直收缩? 如何测量？ 给骨骼肌一次短暂有效的刺激，肌肉将发生一次收缩，这称为单收缩。单收缩的全过程 包括潜伏期、收缩期和舒张期。若给肌肉连续的有效刺激，使两次刺激之间的间隔时间小于 该肌肉单收缩的总过程，出现一连续的收缩，这称为复合收缩。因刺激频率不同，肌肉会出 现不同的复合收缩形式。若连续有效刺激后一刺激落在前一次刺激引起的肌肉收缩的舒张 期，则出现一次收缩舒张不完全的锯齿状的收缩波形，这称为不完全强直收缩。若再增加刺 激频率，使后一刺激落在前一次刺激引起收缩的收缩期，肌肉将出现完全的持续收缩状态， 看不出舒张期的痕迹，这称为完全强直收缩。 (2) 单收缩和强直收缩与刺激频率有何关系? 5. 负荷对骨骼肌收缩的影响负荷对骨骼肌收缩的影响 （1） 何谓前负荷？对骨骼肌收缩有何影响？ 前负荷(preload):在肌肉收缩前就加在肌肉上的负荷。 它使肌肉在收缩之前具有一定的 长度，亦即肌肉的初长度。如其他条件不变，逐渐增加前负荷，测定收缩时肌张力的变化， 在一定范围内，肌肉收缩产生的张力与收缩前肌肉的初长度成正变关系，超过一定范围，则 呈反变关系。在初长度增加的初始阶段，增加初长度能相应增加肌张力。 （2）何谓后负荷？对骨骼肌收缩有何影响？ 后负荷(after-load):是指在肌肉开始收缩时才能遇到的负荷或阻力，它不增加肌肉的初长 度，但能阻碍收缩时肌肉的缩短。在等张收缩的条件下(前负荷固定)，改变后负荷时肌肉收 缩所产生的张力和缩短时的速度变化绘成坐标曲线， 称为张力-速度曲线。 二者大致呈反比 的关系，即后负荷越大，为克服后负荷肌肉产生的张力也越大，在克服后负荷阻力后肌肉收 缩的时间也越晚, 肌肉缩短速度也越慢,缩短的长度也越小。 （3）为什么在最适前负荷时产生最佳收缩效果？ 肌肉在最适初长度(最适前负荷)时，开始收缩产生的肌张力最大，收缩速度也最快，缩短 的程度最大，因为此时粗肌丝的横桥与细肌丝的作用点结合数量最多，做功效率最高。而肌 肉处在小于或大于最适初长度时开始收缩， 由于横桥与细肌丝的作用点结合数量减少， 做功 效率都将下降。 6骨骼肌终板电位的测量6骨骼肌终板电位的测量 （1）何谓终板电位？产生机制如何？ 神经-肌肉接点的传递过程中，既有化学因素也有电学因素参与。当神经冲动（动作电位） 到达运动神经末梢时，细胞膜去极化，通透性发生变化，细胞外液中的 Ca2+进入神经末梢， 促使大量突触小泡同时向突触间隙释放乙酰胆碱， 与终膜外表面的蛋白质受体相结合， 出现 许多小终板电位（minuteendplatepotential，简写 MEPP） 。这些小终板电位综合起来， 形成了终板电位（endPlatePotential，简写 EPP） 。当终板电位达到约 40mV 时，肌膜便 产生可扩布的动作电位，最后引起肌肉收缩。 （2）如何测定终板电位？ 实验采用电生理学方法，将玻璃微电极插入终板区的肌肉纤维内，观察终板电位。但在正常 情况下，由于肌肉纤维动作电位的干扰，终板电位不易观察。如用箭毒处理肌肉标本，由于 箭毒能与乙酰胆碱争夺终膜上的受体，使乙酰胆碱失去传递兴奋的能力，从而阻滞神经-肌 肉接点处的兴奋传递作用，这就可以在没有动作电位干扰的条件下观察终板电位。 （3）终板处加入新斯的明，终板电位有何变化？机理如何？ 新斯的明时一种胆碱酯酶抑制剂，它可选择性阈改酶结合，使其失去水解乙酰胆碱的作 用，使大量的乙酰胆碱在终板膜处大量聚集，引起终板膜持续去极化，使终板电位幅度和时 程均明显增加。 7肌梭传入冲动的测量7肌梭传入冲动的测量 （1）何谓慢突触后电位? 在自主神经节和大脑皮层的神经元中可记录到慢EPSP和慢IPSP， 潜伏期为100500ms, 并可持续几秒钟，称为慢突触后电位。一般认为，慢 EPSP 是由于细胞膜对 K + 通透性降低所 引起，慢 IPSP 则是膜对 K + 通透性升高所致。在交感神经节的神经元中还发现一种迟慢的 EPSP，潜伏期有 15s,持续时间可达 1030min。对其形成机制的认识，目前倾向于膜对 K + 通透性降低所引起的，导致迟慢 EPSP 的神经递质则是一种肽，这种肽可能与下丘脑释放 的一种调节性多肽相同。 （2）何谓神经平滑肌接头后膜电反应？ 当肾上腺素能神经纤维冲动传到末梢引起递质释放时， 受支配产生兴奋的平滑肌细胞膜 上，可产生散在的轻度去极化，这种电变化非常类似于小终板电位，称为兴奋性接头电位 （excitatory junction potential,EJP） 。重复刺激支配平滑肌的神经可使 EJP 发生总和，EJP 在 受胆碱能神经支配的平滑肌膜上也能产生。 而当肾上腺素能神经纤维兴奋引起平滑肌活动抑 制时，则产生膜的超极化，这种电位改变称为抑制性接头电位(inhibitory junction potential,IJP)。EJP 和 IJP 在多种平滑肌中已记录到，但潜伏期长短不一，可能是因为传递通 过低电阻的缝隙连接或因为递质扩散距离远近不等而至。 （3）肌梭传入神经放电实验的原理如何？ 肌梭存在于骨骼肌中，是一种感受肌肉张力的感受器。当肌肉受到牵拉时，会引起肌梭 兴奋，产生神经冲动，因此，可以在传入神经上记录到冲动的发放。肌梭传入冲动的发放频 率，在一定范围内随牵拉肌肉的强度和速度而变化，并有适应现象，即当受到一定程度的牵 拉后，开始时的发放频率较高，随后逐渐降低，但最后仍能维持一定的发放频率。本实验的 目的是观察和记录肌梭传入冲动发放， 了解牵拉肌梭等本体感受器的强度和速度与传入冲动 频率的关系以及本体感受器的适应现象。 （4）蟾蜍神经缝匠肌标本制备如何制作？用的仪器与药品是什么？ 实验器材和药品为：蛙类手术器材、肌肉浴槽、铂金丝引导电极、MS302 生物信号记录分 析系统或前置放大器、双线示波器、刺激器附刺激隔离器和刺激电极、监听器、砝码、任氏 液和 3738温液体石腊。 蟾蜍神经缝匠肌标本制备步骤如下：损毁蟾蜍脑脊髓，剪除全部躯干上部和内脏，下 肢剥皮后沿耻骨联合正中垂直剪开，将两端下肢分离开来，侵入任氏液中。取一侧下肢，背 部固定于蛙板上。在近耻骨端剪下一小片耻骨，用镊子提起骨片，自上而下用玻璃分针先分 离缝匠肌外侧肌膜，再分离内侧肌膜。在分离内侧肌膜达肌肉下 1/3 处时，可见一细神经支 进入肌肉。沿此细小神经向中枢端追踪，在大直肌及大腹肌的下面其伴随血管向上行走，于 股骨头附近汇入坐骨神经。在脊椎旁结扎并剪断坐骨神经 ，自上而下沿神经剪断其周围的 分枝和结缔组织，直到缝匠肌。然后结扎并剪断缝匠肌肌健，将神经与缝匠肌标本一起游离 出来，置于任氏液中备用。 （5）该实验怎样进行仪器连接和参数设置？ 将缝匠肌的里面朝上，放在标本槽内斜的有机玻璃板上。固定其耻骨 端，并将胫骨的结扎线绕过小滑轮与一小砝码盘连接。吸除标本槽和标本周围的任氏液，加 温液体石腊油，以覆盖整个肌肉标本。将已分离的神经分支悬挂在铂金丝引导电极上。 图： 肌梭传入冲动的实验装置与线路连接示意图 BL420/PowerLab 系统：将引导电极尾端与 1B 通道相连， “信号输入”选“神经放电” ， “增益”为 1/32， “显速选择”选拔 1000 mm/s， “横向压缩比”选 1：5。待有自发放电出现 后， 轻拉肌肉， 若放电大量增加， 即可进入记录状态， 开始实验。 放大器的灵敏度 50V/cm， 高频滤波 10kHz。示波器扫描速度 20ms/cm。 （6）蟾蜍神经缝匠肌标本肌梭的自发放电的类型与特点如何？ 不加负荷时的肌梭传入冲动放电数（0.52 次/s） 。 （7）用不同负荷牵拉肌肉时，肌梭传入冲动数有何变化？为什么？ 按顺序在砝码盘中放入 1，2，3，10g 的砝码，对肌肉进行牵拉，每次负重间隔大 于 2min，分别统计每次负重后 10s 的传入冲动数。 （8）持续负重时，肌梭传入冲动数有何变化？为什么？ 持续负重时对肌梭传入冲动的影响 在砝码盘中加 5g 砝码持续牵拉肌肉。从开始负 重时起，每 10s 统计一次传入冲动数，共统计 1min，观察肌梭传入冲动对牵拉刺激的适应 现象。 （9）随负重牵拉速度的改变，肌梭传入冲动数有何变化？为什么？ 分别将 5g 砝码以快（即时） ，中（约 3min） ，慢（约 6min）三种速度施加于肌肉上， 观察肌梭传入冲动的变化。 （10）肌肉单收缩时，肌梭传入冲动数有何变化？为什么？ 将一对刺激电极触及肌肉的近耻端，通过刺激隔离器施加单个刺激（波宽 1ms）,使肌 肉发生一次单收缩，观察肌梭自发传入放电活动的变化。 （11）蟾蜍神经缝匠肌标本肌梭传入冲动实验应注意哪些事项？ 分离神经肌肉时，一定要十分小心细致，避免牵拉或夹捏，并经常滴加任氏液，保持 标本的湿润；整个实验过程中，肌肉神经标本均应侵没在液体石腊中，防止干燥；每次 牵拉刺激之后，必须有充分的间隔时间（大于 2min）方可进行第二次刺激。另外，负荷不 能过重，避免对神经肌肉造成不可逆的损伤。 第二节 第二节 血液血液 1. 红细胞渗透脆性实验红细胞渗透脆性实验 （）何谓红细胞渗透脆性和渗透抵抗力？ 红 C 在低渗盐溶液中易破裂、溶血的特性，叫做红细胞渗透脆性。红 C 在低渗盐溶液中不发 生破裂、溶血的特性，叫做红细胞渗透抵抗力。显然抵抗力与渗透脆性成反变 （）何谓红细胞最大脆性和最小脆性？ 红细胞对低渗盐溶液具有一定的抵抗力。 这种抵抗力的大小， 可以作为红细胞渗透脆性指标。 抵抗力小，表示渗透脆性大。反之，表示脆性小。同一个体的红细胞，其脆性并不完全相同。 将血液滴入不同浓度的低渗 NaCl 溶液中， 开始出现溶血现象的 NaCl 溶液浓度， 为该血液红 细胞的最小抵抗力，即最大脆性值（正常约为 0.40% 0.44%NaCl 溶液） ；出现完全溶血时 的低渗 NaCl 溶液的浓度，则为该血液红细胞的最大抵抗力，即最小脆性值（正常约为 0.32% 0.36%NaCl 溶液） 。 （）何谓等渗溶液和等张溶液？ 在临床或生理实验使用的各种溶液中， 其渗透压与血浆渗透压相等的称为等渗溶液 （如 0.85的氯化钠溶液） 。生理学上将能使悬浮于其中的红细胞保持正常体积和形状的溶液称 为等张溶液。等张溶液一定是等渗溶液，但等渗溶液（如 1.9%的尿素溶液）并不一定就是 等张溶液。 （）如何观察红细胞在低渗溶液中完全溶血、不完全溶血、完全没破裂？ 根据混合液的颜色和混浊度的不同区分为下列三种现象： 小试管内液体完全变成透明 红色， 管底无细胞， 说明红细胞全部破裂， 称为完全溶血； 小试管内液体下层为混浊红色， 表示有未破裂的红细胞，而上层出现透明红色，表示部分红细胞破裂，称为不完全溶血； 小试管内液体下层为混浊红色，上层为无色透明的液体，说明红细胞完全没有破裂。 （）测定红细胞渗透脆性时，应注意什么？ 配制不同浓度的 NaCl 溶液时应力求准确无误；抽取静脉血液速度应缓慢；向试管 滴加血液时要靠近液面， 使血滴轻轻滴入溶液中， 避免人为造成红细胞破裂而出现溶血假象； 为使各管加血量相同，加血时持针角度应一致；观察结果应在光线明亮处，必要时吸取 试管底部悬液一滴，在显微镜下观察。 2. 红细胞沉降率的测定红细胞沉降率的测定 （）何谓红细胞沉降率？ 将与抗凝剂混匀的血液置于一垂直的带有刻度的玻璃管中， 红细胞由于重力作用而逐渐 下沉。 通常以在第一小时末红细胞下降的距离来表示红细胞沉降的速度， 称为红细胞沉降率。 （）红细胞沉降率的正常标准如何？ 血液加抗凝剂后，吸入一血沉降管内，静置一小时后，观察红细胞下沉的 mm 数，称为红细 胞沉降率。它是以血浆层的高度来决定，血浆层越高，表示沉降率越快。红细胞沉降率的正 常标准， 随测定方法而异。 如成年人血液的正常沉降率， 韦 （Westergren） 氏法： 男 015mm/h、 女 020mm/h；潘（）氏法：男 510mm/h、女 612mm/h。红细胞的 沉降明显分成三个时期：形成缗钱状红细胞簇，迅速下沉及最后聚集。缗钱状是红细胞叠连 成串，红细胞的形态未引起不正常。红细胞的大小和数目影响聚集期。贫血症患者的沉降率 增加；红细胞增多症患者的沉降率减少；月经及怀孕期的沉降率比正常高。 （）测定血沉应注意些什么？ 抗凝剂应新鲜配制，用量应为血液量的 1/4；自采血时起，整个实验应在 2 小时内 完成，否则会影响结果的准确性；实验时所用的器材均应清洁、干燥；若沉降的红细胞 上端成斜坡形或尖峰形时，应选择斜坡部分的中点读数。 (5)沉降率与温度有关，在一定范围内温度愈高，红细胞沉降愈快，故应在 20 22C 室 温下进行；韦氏法测定红细胞沉降率的正常值范围，男性为 0 15mm/lh，女性为 0 20mm/lh。 （）红细胞沉降率（ESR）测定意义如何？ 红细胞沉降率增快见于各种急、慢性感染或非感染性炎症，如急性细菌性炎症；慢性 感染，如结核病，非感染性炎症，如风湿热；组织损伤及坏死，如大手术、创伤、心肌梗 死等；恶性肿瘤时因肿瘤组织坏死、贫血、继发感染等因素致血沉增快，可随手术切除、 有效化放疗而渐正常，如肿瘤 复发或转移时又可增快；其他如各种原因导致的贫血、 高球蛋白血症、高胆固醇血症等。 红细胞沉降率减慢见于红细胞数明显增多，如真性红细胞增多症；血浆纤维蛋白 原明显减低，如弥散性血管内凝血（DIC）等。 3. 出血时间、凝血时间与血块回缩时间的测定出血时间、凝血时间与血块回缩时间的测定 （）何谓出血时间？有何临床意义？ 出血时间是指从针刺使毛细血管破损后， 血液自行流出到自行停止的一段时间。 当毛细血管 和小血管受损时，受伤血管立即收缩，使局部血流减慢，有利于血小板粘着和聚集在血管的 损伤处形成血小板栓子， 继而形成凝血块而达到有效的止血。 故测定出血时间可了解血小板 的功能及毛细血管功能是否正常。正常人的出血时间为 14min，出血时间延长常见于血小 板数量减少和血小板功能异常的患者，也可见于毛细血管有缺陷的患者。 。 （）何谓凝血时间？临床意义如何？ 凝血时间是指从血液离体至完全凝固所需要的时间。血液离体后接触带负电荷的表面 （如玻璃器材）时，凝血过程始动，一系列凝血因子相继激活，最后使纤维蛋白原变为纤维 蛋白。 凝血时间只反映血液本身的凝固过程是否正常， 而与血小板的数量及毛细血管的脆性 关系较小。凝血因子缺乏时或异常时，可使凝血时间延长。正常凝血时间参考值为 25min （玻片法） 。临床意义。 （）测定出血时间应注意些什么？ 严格消毒；针刺深度为 23mm，使血自然流出为宜。如针刺深度不够，流血量太 少，不可用力挤压局部，应重新针刺；用滤纸吸血时，注意勿用滤纸接触伤口，以免影响 结果的准确性。 （）测定凝血时间应注意些什么？ 用针挑血时应沿一定方向和顺序（自血滴边缘向里）轻挑，30s 一次，切忌多方向不停 地挑动，以免破坏纤维蛋白网状结构，造成不凝的假象。 （）何谓血块回缩实验？其临床意义如何？ 血液凝固后，由于血小板的收缩作用，是其中的纤维蛋白网发生回缩而致血凝快缩小， 析出血清，这一过程叫做血块回缩实验。检查血小板的形态、功能和数目是否正常。原发性 血小板减少性紫癜凝血时间正常，血块收缩差，而血友病则相反。 （）如何判断血块回缩实验结果？其参考值是什么？ 采静脉血 3ml，不抗凝，注入内径试管中，注明抽血时间并立即送检。分别于 30 分钟、 60 分钟、24 小时观察血块回缩情况。正常值 30 - 60 分钟开始退缩，有部分血清析出，即 血块与部分管壁分离；24 小时完全收缩。 4. 血型鉴定与交叉试验血型鉴定与交叉试验 （）鉴定血型的依据是什么？ 血型分型依据是检查红细胞膜上特殊抗原（又称凝集原）的类型及有无。利用 A 型标 准血清（含抗 B 凝集素） 、B 型标准血清（含抗 A 凝集素）和 A 型B 型混合标准血清（含 抗 B 凝集素及抗 A 凝集素）分别与被试者的红细胞混合，根据是否发生红细胞凝集反应， 即可判定红细胞膜上所含的凝集原，从而鉴定其血型。 血 型 红细胞膜上所含的抗原 血清中所含的抗体 O 无 A 和 B 抗 A 和抗 B A A 抗 B B B 抗 A AB A 和 B 无抗 A 和抗 B （）如何利用标准血清鉴定 ABO 血型？ 与被检人红细胞混合后的反应 A 标准血清 B 标准血清 被检人血型 B A AB O （）何谓交叉配血试验？为何要做交叉配血试验？ 交叉配血是将受血者的红细胞与血清分别同供血者的血清与红细胞混合， 观察有无凝集 现象。输血时，一般主要考虑供血者的红细胞不要被受血者的血清所凝集；其次才考虑受血 者的红细胞不被供血者的血清所凝集。前者叫交叉配血试验的主侧（也叫直接配血） ，后者 叫交叉配血的次侧（也叫间接配血） 。只有主侧和次侧均无凝集，称为“配血相合” ，才能进 行输血；如果主侧凝集，称为“配血不合”或“配血禁忌” ，绝对不能输血；如果主侧不凝 集，而次侧凝集，可以认为“基本相合” ，但输血要特别谨慎，不宜过快过多，密切注视有 无输血反应。 （）交叉配血试验应注意什么？ 所用双凹玻片的试管实验前必须清洗干净，以免出现假凝集现象；A 及 B 标准血清 绝对不能相混， 所用滴管上贴橡皮膏标明 A 及 B、 红细胞悬液滴管头不能接触标准血清液面， 竹签一端去混匀一侧就不能去接触另一侧； 吸不同标准血清、 红细胞悬液的滴管及搅拌用 的牙签，必须严格分开，不得互相污染或混淆使用。凝集出现时间长短与红细胞膜上凝集原 多少，基因组合状况有关（如同是 A 型血，AA 型可能快于 AO 型） 。应在 15 30 分钟后判 定是否凝集。 肉眼难以辨别凝集现象时应在显微镜下观察， 并注意区别红细胞叠连现象与凝 集现象；标准血清必须有足够凝集效价，血清及红细胞悬液须保持新鲜，因污染后可产生 假凝集现象。冬季实验须保持一定室温，室温过低可产生冷凝集现象而误认为红细胞凝集。 （）如何利用玻片法进行交叉配血？ 具体方法是：碘酒、酒精棉球消毒皮肤后，用消毒的干燥注射器抽取受血者静脉血 2ml。将其中 1 2 滴加入装有 2ml 生理盐水的小试管中制成红细胞悬液；其余血液装入 另一小试管中， 待其凝固后离心析出血清备用； 以同样方法制成供血者的红细胞悬液与血 清；于玻片的两端分别注明“主” ， “次”字样。在主侧分别滴加受血者的血清及供血者的 红细胞悬液各一滴； 在次侧分别滴加受血者红细胞悬液及供血者的血清各一滴。 分别用牙签 混匀。15 分钟后观察结果，如两侧均无凝集现象表示配血相合，即可输血。 （）如何利用试管法进行交叉配血？ 取试管 2 支，分别标明“主” ， “次”字样，各管按玻片法加入相应内容物，混匀后离 心 1 分钟（1000 转/min） ，取出观察结果。此法较玻片法迅速。 红细胞比容测定红细胞比容测定 （）何谓红细胞比容？其正常值如何？ 指红细胞占全血容积的百分比。 它反映红细胞和血浆的比例。 将已加少量抗凝剂混匀的血液， 装入特制的、具刻度的比容管，以每分钟 3000 转的速度离心半小时，可见血液各成分按重 力不同而分层，上层淡黄色液体是血浆，下层不透明的暗红色血栓为红细胞，红细胞与血浆 之间的一薄层白膜是白细胞和血小板，约占 1，此时，红细胞占全血容积百分比即为红细 胞比容。因此时红细胞被压缩无隙， 又称红细胞压积。我国健康成人的红细胞比容，男 40 50，女 3738。 （）红细胞比容的临床意义是什么？ 红细胞比容可因各种情况而改变， 如严重腹泻， 血浆量减少， 则红细胞比容增高； 贫血， 红细胞数量减少，则红细胞比容降低。在一般染色涂片上只能测出红细胞的直径，对其厚度 和体积不易判断。测定红细胞比容，结合红细胞计数和血红蛋白测定，能求出平均每个红细 胞的体积及所含血红蛋白的多少，对各种贫血疾患的鉴别诊断有很大参考意义。 （）测定红细胞比容的意义是什么？ 细胞比容增高见于：严重脱水、大面积烧伤致血液浓缩，使红细胞相对增多；真性 红细胞增多症时显著增高。 细胞比容减低见于：各种贫血。因贫血的类型不同，红细胞数及体积大小也不同； 充血性心力衰竭、妊娠、输液过多所致的血液稀释。 （）红细胞比容与血液粘滞有何关系？ 血液的粘滞系数会随红细胞比容的增大而增大。血液粘度是血浆粘度，红细胞压积，红 细胞的聚集和变形、血小板及白细胞等诸多内在因素在一定测量条件下的宏观表现。 血液因素除受诸多粘滞因素影响外，采血技术、抗凝方式、测试方法以及测试仪器和相 关条件等对血液粘度也有复杂的影响。 通常的做法是在体外测定血液或血浆与水相比的相对 粘滞系数。 全血的粘滞性不随流速的变化。 但血流缓慢时， 红细胞可叠连成或聚集成其他形式的团 粒，使血液的粘滞性增大。为了与生理环境一致，测定应在水浴中进行，因为温度也对血液 粘滞性有影响。 5. 5. 凝、止血药 凝、止血药 （1）筛选止血药或抗凝血药常用哪些方法？ 1）试管内凝血法：复钙凝血时间测定法；纤溶实验法 2）出血和凝血时间测试法 3）创口局部止血法 4）药物性出血模型法 （2）测定凝血时间可用哪些方法？ 1）试管法：取一定量血液加入洁净干燥试管中，同时启动秒表计时，每隔一定时间将 装有血液的试管轻轻倾斜一次，以倾斜时血液不再流动时作为该管的凝血时间。 2）玻片法：取一滴血滴于清洁干燥的玻片上，同时启动秒表计时，每隔一段时间用干 燥针头挑动血滴一次，直至针头能挑出纤维蛋白丝时作为该玻片凝血时间。 3）毛细玻管法：持毛细玻官刺入小鼠内眦，待血液注满玻管时迅速拔出，同时启动秒 表计时，每隔一段时间折断毛细玻管 0.51cm，并轻轻向左右方向拉开，待观察到有血丝出 现时作为该毛细玻管的凝血时间。 （3）肝素、双香豆素及枸橼酸钠的凝血作用原理和特点是什么? 肝素通过加强体内抗凝血酶的抗凝活性而加速丝氨酸凝血因子如因子a、 a、 a、 a、 a 等的灭活，抗凝作用快而强，体内外均有效；双香豆素通过拮抗维生素 K 的作用而阻止 凝血因子、的活化，作用较肝素慢而弱，体内有效，体外无效；枸橼酸钠通过 与血中的钙离子络合而抑制凝血过程。 2 用复钙凝血时间测定法进行药物体外抗凝血活性测定时，测得 A、B、C 三管的如 果分别为 2min 凝；20min 不凝；20min 不凝，复钙后 1min 凝。 4请问三药分别是肝素、双香豆素、枸橼酸钠中的哪一种，为什么？ A 管为双香豆素，B 管为肝素，C 管为枸橼酸钠。因为肝素有强大的体外抗凝血活性， 其抗凝机制与钙离子无关，因此不受复钙的影响；双香豆素无体外抗凝血活性，故短时间内 发生凝血；枸橼酸钠是通过与钙离子络合而发挥抗凝作用的，所以复钙后发生凝血。 第一节 心血管心血管 1蛙心灌流蛙心灌流 （1）为何常用离体蛙心而不用离体哺乳类动物心脏做心脏灌流实验？ 蛙类的某些基本生命活动和生理功能与哺乳类动物有相似之处， 它的离体组织、 器官的 生活条件比较简单，易于控制和掌握，来源丰富且价格低廉。离体蛙心不需要恒温和特殊的 供氧设备，因此常被选作心脏灌流实验。而哺乳类心脏生活条件要求高，离体心脏灌流需要 恒温环境，恒压或恒流灌流、供氧。实验影响因素多、设备多，心脏离体后存活时间较短。 因此一般学生实验较少用哺乳类动物心脏做离体心脏灌流实验。 （2）离体蛙心为什么会有节律性的跳动？ 把离体和脱离神经支配、 体液因素影响的动物心脏保持在适宜的环境中， 在一定时间内 仍能产生节律性兴奋和收缩活动，这是由于心脏的静脉窦能自动按一定的兴奋节律产生兴 奋，并传导到心房和心室，引起整个心脏又节律的兴奋和收缩。静脉窦能产生节律性兴奋是 由于其自律细胞在复极完毕后，立即开始自动的缓慢的去极化，使膜电位逐渐减小，当达到 阈电位水平时，便爆发动作电位。 （3）用蛙心夹夹蛙心时，为什么在心室舒张期夹住心尖？ 蛙心夹夹蛙心时，应在心室舒张期夹住心尖部位。因为心室舒张时，心肌张力低，心尖 容易夹住， 且夹住得心肌组织较少， 也不易夹破心室。 蛙心本身体积较小， 收缩后体积更小， 而且心肌张力增加，心尖变圆，蛙心夹不易夹住心肌组织。一旦在心缩期夹住心尖，由于被 夹组织过多， 影响心脏得收缩， 也容易夹破心室， 造成灌流液外流而影响实验结果得准确性。 （4）蛙心插管插入心室时，是在心舒期插入还是在心缩期插入？为什么？ 蛙心插管插入心室时，应在心缩期插入。在蛙心插管时，当蛙心插管尖端到达动脉圆锥 后，可将插管稍稍向后退一下，再向左下做 90 度转弯，选择心室收缩时插入心室腔内。这 是因为主动脉开口处有半月瓣， 当心室收缩时， 半月瓣正好打开， 此时主动脉与心室腔相通， 插管容易顺势插入心室。而在心室舒张期，半月瓣处于关闭状态，对插管产生阻力，不利于 插入，强行插入易损伤心肌组织。 （5）离体蛙心制备好后，有时管内液面上下移动很不明显的原因有哪些？如何处理？ 离体蛙心制备好后， 蛙心插管内的液体应随心室得收缩和舒张活动而上下移动。 在心室 收缩时，心室容积减小室内压升高，将心室内的液体压入插管内，管内液面上升；在心室舒 张时心室容积增大，心室内压降低，将插管内液体吸入心室，管内液面下降，但有时蛙心插 管内液面波动不明显， 常见的原因有插管尖端内有凝血块阻塞， 插管内液体不能顺利进入 心室。解决的方法是：用长吸管将血凝块吸出或用细金属丝小心得将血凝块捅入心室腔内。 为防止血凝块阻塞插管开口， 档插管插入心室后， 应立即用新鲜任氏液换洗插管内液体数次， 直至蛙心颜色不变淡，插管内无血液及血凝块为止；插管进入心室腔内太深，尖端抵住心 室壁，也不表现液面上下移动，此时可以转动插管方向或将插管稍稍外提，使插管口正好处 于心室腔内，且开口正对着液体喷射得轴流方向；插管尖端不在心室腔内，而在心房或其 他部位。此时应将插管重新插入心室再结扎固定；蛙心收缩活动较弱，不足以使液面产生 上下移动。可在蛙心插管中滴加少量药物（肾上腺素）使其活动增强；也可适当加温；如 蛙心静脉窦、心房波动良好，心室波动不明显，可能是由于插管过程中房室传导已被破坏， 而导致插管内液面上下移动不明显，应另选蛙心重新再插。 （6）实验过程中，为什么必须保持蛙心插管内液面得高度恒定？液面过高或过低会产 生什么影响？ 在实验中，蛙心插管内液面的高度发生变化，心脏收缩曲线会发生相应的变化。心肌缩 短幅度和速度即受前负荷的影响，也受后负荷的制约。插管内液面高度所产生的压力，在心 室舒张末期是作用于心肌的前负荷， 这个前负荷决定了心肌在收缩之前的初长度。 因此根据 心肌 Starling 心肌定律，液面高度的变化将导致心肌收缩强度的改变。心室开始收缩时，插 管内液体产生的压力又成为心肌收缩时承受的后负荷， 后负荷改变会使心肌收缩的幅度和速 度发生变化。 液面过高，心缩曲线幅度降低。过高的液面使心室前负荷超过最适前负荷，心肌收缩强 度不在增加或下降。而过高的后负荷却使心肌缩短幅度和速度大大下降。液面过低，心室收 缩曲线幅度也会降低，前负荷过小，导致心肌收缩强减小的效应比后负荷减小的效应要强。 因此试验中选取一最适液面高度，并保持这一液面高度，以便取得较好的实验结果。 （7）蛙心灌流实验中，蛙心收缩微弱或不规则的常见原因有哪些？ 在插管操作的过程中，心肌受倒不同程度的损伤，尤其是传导组织受损，使心肌的兴 奋和收缩受到影响。 结扎动脉和腔静脉时液部分的损伤了静脉窦； 凝血块阻塞蛙心插管 管口， 使心肌负荷增加， 久之心肌收缩功能出现异常； 蛙心本身收缩力弱或呈不规则收缩； 使用陈旧任氏液或为更换任氏液；离体蛙心实验时间过长。 （8）用 0.65的 NaCl 溶液灌注蛙心，会出现什么变化？为什么？ 心肌的收缩活动是由钙离子触发的， 由于心肌细胞的肌浆网不发达， 故心肌收缩的强弱 与细胞外钙离子的浓度呈正比。用 0.65的 NaCl 灌注蛙心，由于灌注液中缺乏钙离子，以 致心肌细胞动作电位 2 期内流钙离子减少， 胞浆钙离子浓度减少， 心肌的收缩活动随之减弱， 如果长时间的用 0.65的 NaCl 灌注蛙心，心脏最终会停止收缩，但心脏仍能产生动作电位 （即产生兴奋） 。这种现象称为兴奋收缩脱耦联，是心肌细胞内缺少钙离子的表现。 （9）滴加 2的 CaCl2 溶液，蛙心活动出现什么变化，为什么？ 用高钙任氏液灌注蛙心，可见蛙心收缩力增强，但舒张不完全以致收缩曲线上移。在 Ca2浓度较高的情况下，心脏会停止在收缩状态，这种现象称为钙僵。 心肌的收缩活动与心肌肌浆网中的 Ca2浓度高低有关。 当 Ca2浓度升高至 105M 水 平时，作为钙受体的肌钙蛋白结合了足够的钙，这就引起肌钙蛋白分子构型的改变，从而触 发肌丝滑行，肌纤维收缩，当肌浆中 Ca2浓度降至 107M 时，Ca2与肌钙蛋白解离， 心肌随之舒张。用高钙任氏液灌注蛙心，使得肌浆中 Ca2浓度不断升高，Ca2与肌钙蛋 白结合数量不断增加，甚至达到只结合不解离的程度，于是心肌持续收缩，导致钙僵。 （10）用高钾任氏液灌注蛙心，心跳为什么会明显减弱？ 用高钾任氏液灌注蛙心时，心跳明显减弱，甚至出现心脏停止于舒张状态的现象。因为 细胞外钾离子浓度增高时， K 与 Ca2有竞争性拮抗作用， K 可抑制细胞膜对 Ca2的转运， 使进入细胞内的 Ca2减少，心肌的兴奋收缩耦联过程减弱，心肌收缩力降低。当细胞外 K 浓度显著升高时， 膜内外钾离子浓度梯度减小， 静息电位绝对值过度减小 （膜内达到55mv 左右时） ，Na通道失活，心肌的兴奋性完全丧失，心肌不能兴奋和收缩，停止于舒张状态。 （11）滴加肾上腺素溶液后，蛙心活动出现什么变化，为什么？ 滴加肾上腺素后，可见蛙心活动增强，心脏舒张完全，心搏曲线幅度明显增大，这是因 为肾上腺素与心肌细胞上的受体结合，提高心肌细胞和肌浆网膜 Ca2离子的通透性，导 致肌浆中 Ca2浓度增高，使心肌收缩增强。 另外，肾上腺素还有降低肌钙蛋白与 Ca2亲和力，时肌钙蛋白对 Ca2的释放速度增 加；提高肌浆网膜摄取钙离子的速度，刺激 NaCa2交换，使复极期向细胞外排出的 Ca2的作用加速，这样，将使心肌舒张速度增快，整个舒张过程明显加快。 （12）高钙任氏液与肾上腺素引起蛙心活动变化有何异同点？为什么？ 高 Ca2任氏液与滴加肾上腺素的任氏液均可使蛙心收缩有力、心率加快，但前者使心 脏舒张不全，心脏收缩基线上抬，甚至出现钙僵，后者除了促使心脏收缩有力外，还可以使 心脏舒张完全，心脏收缩基线下移，不会出现持久收缩状态。 这主要是因为高 Ca2可加强 Ca2与肌钙蛋白的结合，而不利于两者的解离，有利于 心肌收缩；而肾上腺素既可提高肌浆中 Ca2的浓度，有利于收缩，又可迅速降低肌浆中 Ca2的浓度，有利于 Ca2与肌钙蛋白的分离，促进舒张。 （13）滴加乙酰胆碱后，蛙心活动出现什么变化，为什么？ 滴加乙酰胆碱后， 可见蛙心活动减弱， 收缩曲线基线下移， 心率减慢， 最后心跳停止于 PCOK 通道的通透性，促使 K外流，将引起 1）窦房结磁暴复极时 K外流增多，最大复极电位 绝对值增大；Ik 衰减过程减弱，自动除极速度减慢。这两方面因素导致窦房结自律性降低， 心率减慢。2）复极过程中 K外流增加，动作电位 2、3 期缩短，Ca2进入细胞减少，使 心肌收缩减弱；而且乙酰胆碱可直接抑制钙通道，减少钙离子内流，使心肌收缩减弱。 2期前收缩与代偿间歇期前收缩与代偿间歇 （1）何谓期前收缩与代偿间歇 在心肌的有效不应期中（收缩期及舒张前期）给予任何强大的刺激都不会引起心肌的收缩。 在心肌舒张中期（有效不应期后）给心脏一次域上刺激，可引起一次较正常节律早的兴奋和 收缩，称为期前兴奋和期前收缩。期前收缩本身也有一个有效不应期，如果下次正常窦性兴 奋传来时，正好落在这个期前收缩的有效不应期内，就不能引起心室的兴奋和收缩。这样在 期前收缩之后，将出现一段较长时间的心室舒张期，称为代偿间歇。 3. 蛙心室细胞的动作电位和心电图的描记和分析蛙心室细胞的动作电位和心电图的描记和分析 （1）蛙心室细胞的动作电位记录常用的有几种方法？如何记录在体心室肌动作电位？ 记录心肌动作电位采用细胞内微电极技术， 常用的有在体和离体心室肌动作电位记录两种方 法。在体心室肌动作电位的记录过程为破坏蛙大脑与脊髓，仰卧固定于蛙板上；沿正中线剪 开胸骨，暴露心脏，打开心包膜，暴露心室；心电图导联的连接以针形电极插入前肢和后肢 上部皮下， 按常规方式连接心电图导联线。 动作电位的观察与记录调节微电极操纵三向坐标 粗调，使微电极尖端对准心室表面活动较为平稳的部位。注意：漂浮微电极需垂直待插部位 的心脏表面。 再用垂直粗调使微电极慢慢下移， 并借助于心脏跳动的弹力将微电极尖端刺入 心肌细胞内，此时示波器上线即出现动作电位的波形，与此同时，监听器的音响也随之发生 周期性变化。如动作电位的振幅偏低或波形不佳，可用微电极操纵器提起微电极，改变插入 部位再行刺入，直至获得较为理想的波形。待动作电位稳定后，细心观察动作电位的波形， 辩认其去极化、反极化和复极化过程。区分动作电位的 5 个相期，特别注意平台期的形态和 持续时间。观察动作电位与心电图的相应关系，特别注意 0 相期与 R 波、3 相期与 T 波的对 应关系。 （2）在体心室肌动作电位的记录应注意的问题有哪些？ 蟾蜍在体心室肌动作电位的记录，捣毁脑脊髓要彻底，固定应牢固，心脏注意保温及 保持湿润； 保持安静避免震动实验装置， 在体记录时， 心脏搏动撞击易使电极折断或脱出。 因此实验时应彻底破坏脑脊髓； 在体记录一般可以维持数分钟或数十分钟。 若出现动作电 位幅度减小或波形畸变，并且电极电阻明显减小，说明电极已折断，应予更换；标本应屏 蔽，仪器设备及动物均应良好接地，以防交流电的干扰。 4. 家兔左心室功能的测定家兔左心室功能的测定 5. 家兔血流动力学的测定及其影响因素家兔血流动力学的测定及其影响因素 6. 心血管活动的调节和病理、药物因素的影响心血管活动的调节和病理、药物因素的影响 (1)什么是减压反射？其生理学意义是什么？ 减压反射的反射弧组成为： 血压动脉管壁所受的机械牵张刺激颈动脉窦和主动脉 弓压力感受器经窦神经和减压神经传入冲动延髓腹外侧血管运动中枢(+)心迷走神 经，心交感神经和交感缩血管神经心率，血管舒张，动脉血压。反之，当血压下降时， 减压反射减弱，血压回升。因此，该反射的生理意义是维持动脉血压的相对稳定。 (2)动脉血压为什么能够维持稳定？ 在颈内、 外动脉分叉处的颈内动脉膨大称为颈动脉窦， 它和主动脉弓的感觉神经末稍非 常丰富，对牵拉刺激敏感，称为压力感受器（bororecepter） 。当动脉血压升高时，颈动脉窦 和主动脉弓感受的刺激加强， 经窦神经和主动脉神经的传入冲动增多， 使心迷走中枢的紧张 性活动加强，心迷走神经的活动加强，心肌收缩减弱，每搏量减少，心率减慢，心输出量减 少； 而心交感神经的紧张性减弱也使心脏活动减弱， 交感缩血管神经的活动减弱则使血管舒 张，外周阻力下降，上述作用均使血压下降。故该反射又称为减压反射。反之，当血压下降 时，减压反射减弱，血压回升。因此，动脉血压能够维持稳定。 (3)什么是血压？什么是收缩压、舒张压、脉压、平均动脉压？ 血压 （blood pressure） ： 指血管内的血液对于单位面积血管壁的侧压力， 单位可用 mmHg 或 kPa 表示。 收缩压（systolic pressure） ：心室收缩时，主动脉压急剧升高，在收缩期的中期达到最 高值，这时的动脉血压值称为收缩压。 舒张压（diastolic pressure） ：心室舒张时，主动脉压下降，在心舒末期动脉血压得最低 值称为舒张压。 脉压（pulse pressure） ：收缩压和舒张压的差值称为脉搏压，简称脉压。 平均动脉压（mean arterial pressure） ：一个心动周期中每一瞬间动脉血压的平均值，成 为平均动脉压。简略估算，平均动脉压大约等于舒张压加 1/3 脉压。 (4)治疗休克时，如何合理应用血管活性药？ 1 ） 扩 血 管 药 物 的 应用 ： 受 体 阻断 药 酚 妥拉 明 （ phentolamine） 、 酚 苄 明 （phenoxybenzamine）等能解除小血管和微血管的痉挛，从而改善微循环的灌流和增加回心 血量。此外，我国学者应用大剂量阿托品、东莨菪碱，山莨菪碱（6542）等扩血管药物治 疗休克，获得了较好的效果，但这些药物的作用机制尚未完全阐明。应当强调，扩血管药物 必须在充分补充血容量的先决条件下才能应用， 否则， 血管的扩张将使血压进一步降低而减 少心、脑的血液供应。 2）缩血管药物的应用：当血压过低而又不能立即补液时，可用缩血管药物暂时提高血 压以维持心、脑的血液供应，如去甲肾上腺素（norepinephrine）、甲氧胺（methoxamine） 等，但这些药物有进