（生物化学与分子生物学专业论文）驱蚊草不同部位抗氧化系统的研究.pdf

摘要 驱蚊草不同部位抗氧化系统的研究 硕士研究生：吴丽莉 ，专业：生物化学与分子生物学 指导教师：李关荣教授 摘要 驱蚊香草( 心肠，暮i d ，l f “小o f ，- 册p z 缸) ，又名蚊净香草( m o s q u i t 0a b j e c t i o nv a i l i l l a ) ，是荷 兰植物学家迪克通过植物细胞分离、细胞基因重组融合生物转基因技术将中国牧草香茅草的 基因转入香叶天竺葵 肠穆伽m mg 阳 ，印正蹦s ) 内，培育出来的一种多年生草本芳香植物，驱蚊香 草属丁栊牛儿苗科( g p ，口刀缸c 即) 、天竺葵属( g r 口n f 姗1 ) 。驱蚊香草生命周期为8 年。不但驱蚊， 净化空气。其叶片婆娑，四季长绿，具有美丽的外型，姿态优稚。置于室中，也是非常好的 观赏植物。经济价值相当可观。以前的很多研究都集中在驱蚊香草的栽培、繁殖、有效成分 香茅醛以及驱蚊效果方面。很少有墟理：生化方面的研究。本文系统地研究了驱蚊草不同节 位( 幼叶、成熟叶、老叶、幼茎、成茎、老茎以及根) 抗氧化系统的差异。主要研究了不同 部何侮的生理生化指标( 可溶性蛋白、可溶性糖、丙：二醛含簧) 、活性氧含晕和产生能力( 超 氧阴离子自由基、羟自由基、过氧化氢) 、抗氧化酶类( 超氧化物歧化酶、过氧化物酶、过 氧化氢酶、抗坏血酸过氧化物酶、谷胱甘肽还原酶) 的活性以及超氧化物歧化酶、过氧化物 酶、过氧化氢酶的同工酶谱，以及抗氧化非酶物质( 抗坏血酸、谷胱甘肽、生育酚) 等的差 异，填补当前对驱蚊草的生理生化特别是抗氧化系统研究的空广1 ，为驱蚊草物抗氧化剂资源 的开发利用和研究提供理论依据。主要研究结果如下： 1 驱蚊草不同部位丙二醛、可溶性蛋白和可溶性糖含量的差异 驱蚊草各节位m d a 含量都表现出：幼叶( 幼茎) 老叶( 老茎) 的整体下降趋势；且叶中各部位的可溶性糖含量整 体高于茎中可溶性糖含量；驱蚊草各节位可溶性蛋白差异不显著。 2 驱蚊草不同部位抗氧化酶活性差异 驱蚊草叶中各部位超氧化物歧化酶( s o d ) 活性整体高丁：茎中各部位超氧化物歧化酶的 活性。在叶s o d 活性表现出：幼叶 成叶 老叶，呈逐渐下降趋势；在茎中表现出：成熟茎段 幼茎 已木质化的老茎；叶中p o d 活性：幼叶 幼叶( 幼华) ，且笨中各部位中的过氧化氢酶( c a t ) 活性高于叶中各部位c a t 活性。根中c a t 活性与老叶和幼茎中c a t 活性接近；老苇中抗坏 血酸过氧化物酶( a p x ) 活性最高，为1 3 3 9 3 0u g r i l i n 。而根中抗坏血酸过氧化物酶( a p x ) 活性最低为3 2 9 0 3u 昏1 r n i n _ 1 ，各部位a p x 活性高低依次为老羊 幼茎 成熟叶 成熟茎 老叶 幼叶 根；谷胱甘肽还原酶( g r ) 的活性表现为：老茎 老叶( 茎) 。 综合看来，在幼叶( 茎) 和根中超氧化物歧化酶( s o d ) 为关键酶，在幼叶抗氧化系统 中起主要作用，成熟叶( 茎) 中过氧化氢酶( c a t ) 活性所一吁比例较高，在老叶( 茎) 中p o d 、 a p x 活性相对高于其他部位，g r 在驱蚊草抗氧化系统中活性甚微，相对在成熟叶中含量较高。 因此在驱蚊草抗氧化酶系统中起的作用可能较小。 3 驱蚊草不同部位产生活性氧的能力分析 超氧阴离子( o ：) 产生速率表现出：老叶 幼攀 成熟叶 幼叶 成熟茎 老茎 根。超氧 阴离子自由基含量表现出：叶 茎 根。羟自由基的产生速率：老叶 成熟叶 成熟茎 幼茎 老荜 幼叶 茎 根。叶中过氧化氢产生速率整体高丁华中过氧化氢产生速率，而在叶中过氧化 氢产生速率旱现：幼叶 成熟叶 老茎 幼叶 幼茎 根。 4 驱蚊草各部位小分子抗氧化剂含量变化 抗坏血酸住驱蚊草成熟叶中含量最高，成熟n | t 中v e 含量极显著高丁驱蚊草其它部位中 v e 含量，驱蚊草各部位中v e 含量差异与驱蚊草各部位抗坏血酸含量差异趋于一致。 总体看来，总抗氧化能力叶 茎 根。在叶中，总抗氧化能力老叶 成熟叶 幼叶；在茎中 总抗氧化能力成熟萃 幼萃、老茎，根中总抗氧化能力较低，水平基本与老茎相当，此变化趋 势与活性氧产生速率成止相关。 5 驱蚊草各部位抗氧化酶同工酶电泳分析 驱蚊草植株不同部位的s o d 同工酶电泳总共显示5 条酶带( a 1 a 5 ) ；其中，活性较强 的带有三条( a 2 ，a 3 和a 5 ) ；在叶中，幼叶和成熟叶中均有4 条( a 2 a 5 ) ，都缺少a 1 带； 老叶中有5 条带( a l a 5 ) 。说明随着叶片的衰老，出现了a 1 带，从酶谱还可以看出，s o d 酶活性：幼叶 成熟叶 老叶，这与之前各部位活性测定结果基本一致；在茎和根中，s o d 均 表现为三条强带( a 2 ，a 3 ，a 5 ) ，未见特异谱带，从酶谱还可以看出几个部位活性基本相当， 成熟茎和老茎略强丁幼茎，此结果与之前活性测定基本一致。 驱蚊草植株不同部位的p o d 同工酶电泳图谱表明，总共出现约7 条酶带( a 1 a 7 ) ；其 中，活性强的带有4 条( a 2 ，a 3 ，a 6 和a 7 ) ；在叶中，幼叶可看到4 条带( a l ，a 2 ，a 6 ， a 7 ) ，其中只有条强带( a 6 ) ，其余谱带极弱。成熟叶和老叶中谱带带数相同，共7 条( a l a 7 ) ， 活性基本相当，但都人人强于幼叶，萃中均有7 条谱带( a 1 一a 7 ) 其活性基本相当，根中也出 l i 摘要 现7 条谱带，但a 7 活性较弱。 关键词：驱蚊草生理生化指标活性氧产生速率抗氧化酶抗氧化非酶物质部位 差异 i l l a b s t r a ( 了t s t u d i e so nt h ea n t i o x i d a t i v es v s t e mo fd i f 亿r e n tp a r t so f m o s q u i t oa b j e c t i o nv a n i u a ，j 忱，苫d 咒f 玎，牡c 砀组硼p 刀口 m a s t e r sd e g r e ec a n d i d a t e ：w ul i l i s u p e r v i s o r ：p r o “g u a n r o n g a b s t r a c t n l ep l 枷m o s q u i t oa b j e c t i o nv a i l i l l a ( 心肠厂g d 玎伽朋a f 聊p 池) w 雒ap e r e n i l i a l a r o m a t i c 黟a s s ，c r e a t e db yah o l l a i l db o t a i l i s tt l l r o u g hc e u 如s i o no ft h ec h i i l e s e l e m o n 伊a s sh e r bw i t hr 妇厂g 绷m 聊g ，口啪，纠s nb e l o n g s t 0t l 圮f 撕l yo fg p m 刀胁c 阳，a n dt om e g e 肌so fg e 阳刀f “胁i t si i f ec y c l ei sa b o u t8y e a 璐t h ep l 锄tn o to i l l yr e p e l l sm o s q u i t o e s 锄d 饥s h e s t l l ea i r ，i t sl e a v e sa l s o1 0 0 l 【st e n d e r ra n de v e r g r e e i l a n d 吐l u sb e a u t i f h li ns h a p e 1 1 圮y 撒 e x c e l l e n t0 m 锄e n t a lp l 锄t si n d o o r sa n dl m r ec o 璐i d e r a b l ee c o i i l i cv a l u e u pt om ep r e 9 e m ，r n a n ys t u d i e sh a v eb e 饥c o n c e i l 仃a t e d0 nt h ec u l t i v a t i o n ，p r 0 1 ) a g 撕o no fn l e n 伽m 【a l l yi n f e n i l ep l a i l t s ，姐da l s om em o s q u i t o 陀p e l l i i l ge 位c t a i l tc i 仃d n e l l a 锄di t se 脏c t s v e 巧 l i n l er e p o r t sh a v eb e e i ls e e ns o 细i ni t sp h ) ，s i o l o 酉c a l 拍d b i o c h e m i c a la s l ) e c t s i i lt t l i sp 印e r ，s e v e r a li i i l p o n a n tp h y s i o l o g i c a la n db i o c h e i i l i c a lc o n s t i t u e n t s ( s o l u b l ep r o t e i i la n d s u g 盯，m l o n y ld i a l d e h y d e ) ，n l ec o n t e n to f 陀a c t i v eo x y g e ns l 圮c i e s ( s u p e r o x i d em d i c a l ，b 掀y l m d i c a l 锄dh y d r o g e np e m x i d e ) 孤di t s g e 眦m 血ga b i l i t i e s ，a m i o x i d a me n z ) ，m e ( s u p e f o x i d e d i s m u t a s e p e r o x j d a s e ， c a t a l a s e a s c o r b a t ep e r o x i d a ， 酉u t a 伽o n er e d u c t a s e ) a c t i v i t i e s柚d z y i l l o g 捌：i l so fs o d ，p o da n dc a t ，勰w e l l 硒s e v e m l 锄t i o x i d 她tn o n e n z y m es u b s t 龃c e s ( 筋c o 小i c 孔i d ，g l u t a t i l i o n e 锄dv e ) ，o fd i f 五b r e n tp l a n tp a n s u n g ，舢m 鹏锄da g e i i l gl e a v e s ，s t e m s ，姐d 如1 0 t s ) ，w e 陀s y s t e m a t i c a l l yr n e 舔u 北da n da m l y 弱d ，i i lah 叩et 0f i l lm eb l 孤墩，孤l dt 0p r 0 讥d em e b 越i sf o r 几r t h e r 陀s e a r c ha n dd e v e l o p i n e n to fm i se c o n 伽【l i c a l l yi m p o n 孤to m 锄e n t a lp l 锄t s r e s u l t sa r e 笛i l lt l l ef o l l o w i n g 1t h ed i f 蕾e r e n c eo f t h ec o n t e n to fm 工a ，s o l u b l ep r o t e i na n ds u g a ri nd i f 五e i e n tp l a n tp a i t so f p e t 口r g o n i h mx c “r e n e l l 口 t h em d ac o m e n t si i ld i 丘邑咒n tp l a mp a n ss h o wt h e 臼e n d ：y o u n gl e a v e s ( s t e n 峪胁m 托l e a v e s ( s t e m s ) m a t u r el e a v e s ( s t e 腓) a g e i n gl e a v e s ( s t e 腿) a n ds o l u b l es u g a rc o m e i ni i lt l l el e a v e sw 弱 h i g h e rm a nt h a ti nt l l es t e m s 越aw h o l e a sf o r l ec 伽i t e n to fs o l u b l ep r o t e i ni nd i 丘e r e n tp a r t so f p l a i l tp a n s ，n oc l e a rd i 丘舐m c eh a sb e e n0 b s e n ，e d t h u si tc 柚b es e e nm a tm d a c o n t e r l t 锄ds o l u b l e s u g a rc o n t e n ti ny o u n gl e a v e s ( s t e m s ) ，m a t i l 陀l e a v e s ( s t e m s ) ，a g e i n gl e a v e s ( s t e m s ) a r ei n v e r l y c o n e l a t e d v 两南人学硕十学何论文 2t h ed i “e r e n c ei nt h ea c t i v i t i e so f a n t i o x i d a t i v ee n z y m e si nd i f f e r e n tp l a n t p a r t so f p e t 口r g o n i h mxc “r e n e n n s o d a c t i v i t yh a sat r e n do fy o u n gl e a v e s ( s t e i i l s ) m a m r el e a v e s ( s t e n l s ) a g i n gl e a v e s ( s t e l i l s ) ， w i lah i g h e ra c t i v i t yi nl e a v e st l l a ni nt i l es t e n 塔舔ag e n e m lm l e ；i ta l s oc a nb e e nm a ts o d a c t i v i t yi ns t e m sd e c r e 笛e s 谢吐lt h ed e g r e e0 fl i g i l i f i c a t i o n p o da c t i v i t ya l s oh 嬲at r e n do fy o 吼gl e a v e s y o u n gl e a v e s ( s t e m s ) ， w i t hc a ta c t i v i t yi ns t e n 塔g e n e r a l l yh i 曲e rt h a n 1 0 s ei i l 廿l el e a v e s c a l a c t i v i t yi nr o o t s ，a g e i n g l e a v e sa n dy o u n gs t e m sa r ec o n s i d e r a b l e a p xa c t i v i t yi sh i g h e s t ( 1 3 3 9 3 0u 岔1 m i n 1 ) i na g e i n gs t e m s ，w h i l ei nt l l er o o t st h el o w e s t ( 3 2 9 0 3u 9 1 r n i n 1 ) c a ra c t i v i 够h a sa 臼e n do fa g e i n gs t e m y o u n gs t e m s m a t u r el e a v e s n m t i l s t e i l l s a g e i n gl e a v e s y o u l l gl e a v e s r o o t s g r a c t i v i t yc a ra c t i v i t yh a s 吮n d so fi i l a m r el e a v e s ： r o o t s a g e i n gs t e m s ，蛐d 咖l e a v e s ( s t e m s ) y o u n gl e a v e s ( s t e m s ) a g e i n gl e a v e s ( s t e n l s ) f r o mt h ea b o v e ，i tc 锄b es e e nt l l a ts o di st l l ek e ya n t i - 0 x i d a t i v ee n z y m ei i ly o u i l gl e a v e s ( s t e n l s ) a n dr o o t s 1 1 1m a m r el e a v e sa n ds t e n 塔c a tp l a y sar e l a t i v e l yi m p o n a i l tr o l e ，w h i l ei i lt l l e a g e i n g l i g i l i f i c a t i o nt l l e 孔t i v i t yo fp o d 锄da p xi s 代l a t i v e l yi l i 曲e rt h 锄i no t h e rp l a mp a n s g r k l sav e r yl o wa c t i v i 哆i i li n o s q u i t oa b j e c t i o nv 枷l l a 3t h ed i f 亿他n c eo fg e n e r a t i n g 他a c t i v eo x y g e ns p 佻i 髓o fd i f f e 他n tp l a n tp a r t so fj k 胁，暑r 口，l 觑肼 xc n r e n e t t 口 t h er a t e so fs u p e r o x i d er a d i c a lg e n e r a t i o ns h o wt l l a ta g e i n gl e a v e s y o u n gs t e m s m a t u r el e a v e s y o u n gl e a v e s 1 1 1 a t l l r es t e 瑚【 a g e i n gs t e m s 1 o t s 。t h ec 供l t e n t so f 辄p e r o x i d er a d i c a ls h o wa 仃e n do f l e a v e s s t e m s r o o t s t h er a t e so fh y d r o x y lr a d i c a lg e n e m t i o ns h o w 帆a g e i i l gl e a v e s m a t u r el e a v e s 删l n 鹏 s t e n l s y o u n gs t e n l s a g e i n gs t e m s y o u n gl e a v e s r o o t s t h em t e so fh y d r o g e np e r o x i d eg e m m t i o ns h o wm a ta g e i n gl e a v e m a t i l r es t e m s 倒l n i r e l e a v e s a g e i n gs t e r i l s y 0 眦gl e a v e s y o u n g s t e 删s r 0 0 t s t h e s es h o wt h a tg e n e r a l l yt i l em t eo f h y d r o g e np e r o x i d eg e n e r a t i o ni n c r e a s e sw i n l l en l a t i l r i n g 锄da g e i i l go ft i s s u e s 4t h ed i f f b r e n c eo ft h ec o n t e n t so fa n t i o x i d a n tn o n e n z y m es u b s t a n c e si nd i f 蕾e i e n tp l a n tp a r t s o tp e l 口r g o n i h mxc n r e n e t t n t h ec o n t e n t so fa s c o r b i ca c i d 孤dv ew e r eb o t l lt l l eh i 曲e s ti nm a t u r el e a v e s ，v e r ys i g n i f i c 柚t l y l l i g h e rt l l a ni no m e rp a n s t o t a la n t i o x i d 孤ta b i l i t y 锄a l y s e ss h o wm a tl e a v e s s t e i i l s 瑚t s ；a 1 1 di i ll e a v e s ，a g e i l l g l e a v e s m a t u r el e a v e s y o u n gl e a v e s ； i i ls t e t 璐，m a t i l r es t e m s y o u n gs t e m ，a g e i n gs t e m s ；吐l et o t a l 狮t i o x i d a n ta _ b i l i t ) ，i nr o o tw a sl o w c o n s i d e r a b l ew i t l lm a to fa g e i n gs t e m st h i s 仃e n di si i lg o o d c o n f o n n a n c ew i t ht h ed i f f e r e n c eo ft h er a t e so fr e a c t i v eo x y g e ns p e c i e sg e n e r a t i o n v i a b s i r a ( 1 1 5a n t i o x i d a t i v ez y m o g r a ma n a i y s e so fd i f f e r e n tp l a n tp a r t so f 剐口，g 口以讥册鳓旭丹以砌 p o l y a c r y l 锄i d eg e le l e c 仃o p h o r e s i sa n da c t i v i t ys t a i n i n gs h o w e dt h a tt 1 1 e r ea r ea l l t o g e t h e r5b 锄d s ( a l a 5 ) o fs o di na l lm ep l 雒tp a n s ，锄o n gw h i c ht h r e eb a i l d s ( a 2 ，a 3 锄da 5 ) a r es 仃0 n g l y s t a i 鹏d ，觚dt o g e m e rw i t l lt i 圮r e l a t i v e l yw e a l 【- s t a i n e da 4 ，c o l l s t i t u t e sm e4c o m m o nb 狮d so fs o di i l a l lp l a n tp a r t s h ly o u n ga n dm a t u r el e a v e s l e r ea r e4b a n d s ( a 2 ，a 5 ) ，l a c k i i l gt i l ea1b a r l d ，w l l i c h c h a m c t e i i s t i c a l l ya p p e a r e di i l l ea g e i n gl e a v e s j u d 百n g 疗0 mt i l ez ) r n l o 野l i 】吼i tc 锄b es e 饥t l l a t r o u 曲l ys o d t i 、，i t y ：y o u i 玛l e a v e s i 瑚t u r el e “e s a g e i n gl e a v e s ，i nc o n f o r m 锄c ew i mm e f o r e 9 0 i 1 1 9a c t i v 时m e a s u 五n gr e s u l t s h ls t e l 瑙锄dr o o t s ，n 0c 1 1 a r a c t e i j s t i cb a n d si l a v eb e e l ls e e l l n o e v i i l 饥td i 丘e r n c ei i la c t i v i t y 、ad b s e n ，e di i lt l l ed i n e r e n ts t e n 塔a n d “) o t s t h e p o d 掣n 0 孕锄s h o w s t h a tm e r ea r ea l l t o g e t h e r 7 b a n d s ( a l a 7 ) ，锄0 n g w h i c h 4 b 柚d s ( a 2 ，a 3 ，a 6 锄da 7 ) 撇s 廿0 n g l ys t a i l l e d ；i i ll e a v e s ，y o u n gl e a v 骼h a v e4b 锨l s ( a l ，a 2 ，a 6 孤l d a 7 ) ，o i l l y o n es 仃0 n g b 锄d ( a 6 ) ，l e o 龇r sv e r ) ，w e a l 【；t h e n u i n b e r o f b 姐d s i i l 肌咖r e 锄d a g e i n g l e a v e s 獬i d e n t i c a l ，7b 锄d s ( a l a 7 ) ，谢n lc o l l s i d e r a b l ea c t i v 时w i mo m 锄o m e rb u tl 硼c h s 臼0 n g e fn 1 _ 姐n l o i ny o u n gl e a v e s ；7b 锄d sw 勰o b s e n ，e di i lr o o t s ，w i n la 2 ，a 3a r l da 6b e i n gt l l e s 仃0 n gb 锄d s 孤dt 1 1 eo m e r s ，w e a kb 锄d s k e yw o r d s ：m o s q u i t oa b j e c t i 啪i l l a 懒悟伽j “朋 a 舰w p 删；p h y s i 0 1 0 百c a la n d b i o c h e m i c a li n d e x e s ；c o n t e mo fr e a c t i v eo x y g e ns p e c i e s ；锄t i o x i d a t i v e e l l z y m e s ； 觚t i o x i d a t i v e1 1 0 n e n z y i i l es u b s t a n c e s ；d i f r e r e n c e si nd i f ! e e r e n tp a r t s v a p x a s a a p c a t d h a d t t e d t a f w g r g p x g s h g s s g h 2 0 2 m d a n b t p a g e p o d p v p r o s s o d t - a o c t e m e d t 1 i s 缩略词表 ! ! ! ! ! ! 曼! 曼苎曼! 曼 缩略词表 抗坏血酸过氧化物酶 抗坏血酸 过硫酸胺 过氧化氢酶 脱氢抗坏血酸 二硫苏糖醇 乙二胺四乙酸 鲜重 谷胱甘肽还原酶 谷胱甘肽过氧化物酶 还原型谷胱甘肽 氧化型谷胱甘肽 过氧化氢 丙二醛 氮蓝四唑 聚丙烯酰胺凝胶电泳 过氧化物酶 聚乙烯吡咯烷酮 活性氧 超氧化物歧化酶 总抗氧化能力 四甲基乙二胺 三羟甲基氨基乙烷 5 l 独创性声明 学位论文题目：塑蚊堇丕回部焦抗氢焦丕统鲍珏究 本人提交的学位论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的 研究成果。论文中引用他人已经发表或出版过的研究成果，文中已加 了标注。 学位论文作者签字日期：加驴年多月厂，日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解两南大学有关保留、使用学位论文的规 定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允 许论文被查阅和借阅。本人授权西南大学研究生部可以将学位论文的 全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫 描等复制手段保存、汇编学位论文。 ( 保密的学位论文在解密后适用本授权书，本论文：拆保密， 口保密期限至年月止) 。 学位论文作者签名： 签字日期渺莎年 锄张如 签字日期：加8 年6 月f f 日 第一幸文献综述 第一章文献综述 1 1 驱蚊草概述 驱蚊香草( 心肠r g 鲫m mxa 舰霄p 砌) ，义名蚊净香草，栊牛儿苗科( g p m ，l 缸c p ) ，天竺葵 属( g e r 口厕z 肌) ，是澳大利哑植物学家迪克用1 3 年时间，通过植物细胞分离、细胞基因重组融 合生物转基因技术，将中国牧草内的香茅醛转入澳洲香叶天竺葵( p e 缸r g d ，l f 删g ，口啪砌5 ) 内， 培育出来的一种多年生草本转木本植物。全株有特殊气味，茎稍柔嫩，驱蚊香草的外形、香 气略似香叶天竺葵，但其叶形、叶厚、茎的粗细、基部木质化，全身被有绒毛，叶互生心脏 形，边缘有波形的顿锯齿；伞形花序，颜色各异，其花不育故不能自然繁殖。驱蚊草平时常 被作为绿化观赏植物，其散发出的淡淡柠檬香味精油可以净化居室空气同时其有效成分香茅 醛有驱杀蚊虫的效果，故而得名驱蚊草。 1 1 1 驱蚊草市场价值及快繁技术 作为一种新型的具有驱蚊功能的常绿环保花卉，我国最早由昆明植物所引入，在昆明、 玉溪、石屏、宾川等地栽培成功【l 】。现国内现有很多省市栽培并建立了种植基地，大量投入市 场销售，并取得了较好的经济效益。居室放一盆驱蚊草成株温度超过1 5 时，便自然散发出 香茅醛气体，具有清新、淡雅的柠檬香味，芳香宜人，而且是蚊虫的克星；尤其在炎热的夏 季，温度越高，散发的香味儿越浓，驱蚊效果就越好。一盆茎高3 0 c m 左右、具4 0 片叶以上， 的驱蚊香草，其有效驱蚊面积可达1 5 m 2 左右。其枝叶晒干粉碎成末，放在瓦片上点燃，散发 出的浓厚芳香烟雾具有杀菌消毒作川。每1 0 9 粉朱所产生的烟雾驱蚊效果等于l o 株鲜驱蚊 香草效果，功效提高l o 倍，是制作薰蚊香的天然原料。除了驱杀蚊虫外，由于它的主茎比较 柔软，可以塑造各种盆景以供观赏；可全株入药，味辛性温，主要用于治疗风湿、疝气、阴 囊湿疹、疥癣，具有抗癌、抑菌、消炎等作用【2 1 ：另外，其香油主要成分可广泛应用于香水、 香皂、化妆品和食品香精中的母体调配香料【3 1 。 由于驱蚊草成种率低且不育，因此不能用传统的播种繁殖方式进行大面积培育，人们常采 用扦插繁殖或组培快繁技术。即扦插苗应选枝叶茂盛、无木质化、色绿、清秀、无病虫枝，苗 长1 7 2 4 咖，剪口斜形靠近叶节，留生长点以下3 片叶，其余叶剪除，扦插前用“a b t 2 号 生根粉配成l o o om l 溶液蘸根处理，对早生根、早成活有显著的效果，扦插深度为6 7 锄。 驱蚊草喜温光、怕涝、耐早、根系发达，生长量大，要选向阳、高亢、地下水位低、土层深厚、 有机质含量高的中性和微酸性的鸡粪土、沙壤十及红壤土田或水浇地种植，适宜栽种期是秋末 初冬( 1 0 1 1 月) 【4 1 。另外，山东任秋萍等【5 1 对驱蚊香草的育苗技术、土肥水管理、病虫害及其防 治、以及适应性和抗逆性等方面作了详细的报道。组培快繁相比扦插快繁造价高但是成苗快、 繁殖系数高，陈桂芳、娄利华【6 l 首天竺葵的无菌种子在m s 培养基上获得无菌苗，分化培养基 依次是m s + 6 一b ao 1 5 m g l ；m s + 6 一b a0 1 5 m g l _ 卜n a a o 1 m g l ；m s + 6 b a1 0 m g l ；m s + 6 - b a 阿南人学硕十学位论文 1 0 i i l l + n a a o 1 m g l 。壮苗培养基：m s + 6 b a o 1 5 m g l + g a l o m g l 。 生根培养 基：1 ，2 m s + i b a l o m g l ；l 2 m s + i b a0 1 5 m g l + n a a o 1 m g l ；l 2 m s + i b a0 1 2 5 m g l 。张存旭，宋 敏等【7 1 以香叶天竺葵l a 生茎段为外植体建立无菌笛，用无菌嫩茎、嫩叶在m s 基本培养基附加 低浓度的细胞分裂素和生长素上诱导愈伤组织，经过分化和增殖培养获得无根苗，在含有较低 无机盐浓度和生长素水平的生根培养基上使其生根，生根率高达1 0 0 。试管苗移栽到河沙与腐 殖质混合的基质中，成活率达9 5 以上。香叶茎段、无菌嫩茎和嫩叶作为外植体，均可诱生愈 伤组织，但以嫩叶较易诱导出愈伤组织，最适宜的生长素与细胞分裂素组合为n a a0 1 m g ，l + b a 2 0 m g l ，其诱导的愈伤组织质鼙较佳，茎芽分化和增殖的最佳组合为b a o 2 5 m l + i b a 0 1 m l 。吴红枝，金寿林嘲以柠檬香的皱波天竺葵( p e l a r g o n i u c r i s p u m ) 的叶片和茎段为外植体进 行试管培养，结果叶片和茎段可诱导形成愈伤组织。经试验筛选结果为：培养基m s + b a o 7 5 m g l 悄a a 0 1 2m l 最适于愈伤组织诱导，也适于不定芽分化和丛生芽的分化增殖；培养 基l 2 m s + n a a o 1 3 n l + 队a o 1 lm l 为根系诱导及生长的最佳配方，生根率达l o o 。最 新报道，广西梁贵秋等【9 】以驱蚊香草的幼嫩叶片为外植体进行了离体培养和快速繁殖研究，试 验表明：以m s + 6 b a o 1 5 m l + n a a o 1 5 m l 作为芽诱导培养基最适宜，并在 m s 十6 b a l 1 0 _ 3 1 0 + n a a o 1 0 2 0 1 2 中继代增殖较好，在l 2 m s + n 从o 1 5m g l 中生苗、壮 苗很快。四川农大的倪苏等【l o 】用驱蚊香草的茎段及嫩叶在m s + 6 b a 2 1 0m g l + n a a o 1 2n 剥l 上诱导愈伤组织和丛芽较好，在m s + 6 b a l 1 0 m l + n a a 0 1 1m g l 上进行丛芽增殖，在1 2 m s + m a o 1 5 埘g i 肿呵八a j d 1 l m g l 上生根率达1 0 0 。 1 1 2 驱蚊草研究现状 随着对香叶天竺葵的香料与药用价值的进一步了解，在日本、印度等国家的药用与芳香 植物研究所已把香叶的组织快繁技术纳入重点项目【1 。国内在技术资料方面现报道得不多， 主要是商业告及信息。 早期石若夫等【1 2 1 将国外的微波萃取技术引入国内，采用微波萃取法在6 4 8 w 下分别用乙 醇和正己烷萃取香叶天竺葵的挥发精油，产率为0 7 0 。云南化工研究院和承尧、寸守铣【l 引 用气相色谱一质谱联用技术对滇产驱蚊草香油成分进行分析，并和香叶天竺葵香油成分进行 比较，发现二者成分差异明显，其中滇产驱蚊草的香油中含有香叶醇、芳樟醇、香茅醇、异 薄荷酮、肛古芸烯、桉醇、1 l 木罗烯、异己酸香叶酯、丙酸香叶酯等主要成分，其中香叶醇 占芳香油成分总含量的4 1 1 4 4 。对已鉴定出的5 9 个成分按化合物进行归类分析，驱蚊香草 芳香油含量从高到低次序为：醇( 1 0 个) 占6 9 0 1 、烯烃( 2 6 个) 占1 3 1 4 、酮( 2 个) 占9 1 3 5 、酯( 1 8 个) 5 1 9 1 、杂环( 1 个) 占0 l1 2 醚( 2 5 个) 占1 0 9 。发现驱蚊香草中酯类、醚 类的含量与香叶天竺葵中含量差异很大，酯类含量达总含量的5 1 1 9 ；而香茅酯的含量仅占 总含量的13 6 ；醚类的含量较少， 总含量的1 0 9 。日本学者叶通过分析驱蚊草和其亲 本香叶天竺葵、香茅草的香油成分差别推测驱蚊草的驱避蚊虫机理。我国对此也有深入研究， 2 第一章文献综述 吴刚1 1 4 j 等人用生物试验法分析了驱蚊草主要成分之一的香茅醛含量对淡色库蚊的击杀能力的 相关性，从而证明驱蚊草对蚊虫的驱避能力。 1 1 3 药用价值研究进展 l - 1 3 1 对肿瘤细胞的抑止作用 近年来发现香叶油对多种动物肿瘤有稳定的中等疗效，对体外瘤细胞有明显的杀伤作用： 香叶醇等单萜类化合物具有抗癌活性，是一种新的抗癌新药【1 5 】。周仲良等【16 1 曾报道了香茅醇 对治疗宫颈癌有较好的近期疗效；方洪钜等研究表明：香叶醇对白血病细胞株h l 6 0 有轻 度诱导分化作用、腹腔注射香叶醇、香茅醇、乙酸香茅酯等能延长患s 1 8 0 腹水型的动物寿命， 同时对其他癌谱( w 2 5 6 和p 3 8 8 ) 也有一定的抗癌作用；s h o f j f 等【1 8 1 用香叶醇对鼠性白血病的研 究表明有明显的抗癌效应，患病鼠的存活期随着香叶醇量的增加而增长：y u 【1 9 1 对小鼠的肝癌 和黑素瘤研究发现，香叶醇抑制肝肿瘤细胞和黑素瘤细胞的增生作用是通过香叶醇能抑制3 羟基3 甲基戊二酸单酰辅酶a 的还原酶活性，这个酶是甲羟戊酸合成的关键酶，从而抑制了 细胞内甲羟戊酸的生物合成，导致细胞内甲羟戊酸数量的减少，限制了蛋白质的异戊烯化， 研究表明：过多的异戊烯化蛋白质起到调节细胞生长或转化的作用；b u d ( e 【2 川发现香叶醇也能 抑制胰腺肿瘤细胞的生长：s c a m e s e c c i l i 【2 1 1 用人的结肠癌细胞株作为研究对象，发现香叶醇能 抑制7 0 结肠肿瘤细胞的生长，使细胞积累在细胞生长的周期的s 期，伴随抑制d n a 合成酶 的作用，也没发现细胞的溶解。结果还表明；香叶醇降低了细胞内5 0 的鸟氨酸脱羧酶的活 性，鸟氨酸脱羧酶是细胞内多胺生物合成的关键酶，导致丁二胺在细胞内数量减少了4 0 ( 多 胺能加强肿瘤细胞的生长) ；研究还表明：香叶醇激活了细胞内多胺的乙酰化，加快了多胺的 分解作用。香叶醇没有细胞毒性，主要是细胞抑制效应。 1 1 3 1 对细菌和真菌生长的抑制作用 m v c b a l l d r a v a d a n a 【2 2 1 j j 香茅醇、香叶醇等对柑桔、术瓜、芒果等水果炭痛病的 c o l l e t 嘶c h u m9 1 0 e s p o r o i d e s 真菌进行了实验，结果发现，在2 5 0 m g l 浓度下，香叶醇和香茅 醇能1 0 0 抑制真菌生长；另外根据d o m 锄在2 0 0 0 年的实验发现香叶醇对2 3 种细菌有抑制 用，乙酸香叶酯能抑制2 4 种，且乙酰化后抑菌活性明显增强。 1 1 3 3 对头皮给药的促进作用 为改善药物穿透皮肤角质层的能力，让透皮给药能在临床上更广泛地方应用，寻找更好 的促进剂是近年来国内外医学工作者研究的热点课题之一。哈尼夫、莫芬珠【2 3 1 等在离体大鼠 批上用香叶醇和其它衍生物考察了对5 氟尿嘧啶的透皮促进作用，结果发现促渗作用与分子 的极性有关，极性越小，其促渗作用也越小，香叶醇增加了药物的分配系数，也增加了药物 的扩散系数，使用香叶醇后，透皮给药能力比对照提高了4 8 倍左右。这一结论增加了香叶醇 等成为天然的、相对安全的透皮促进剂的可能性。 3 两南人学硕十学付论文 1 2自由基及抗氧化物质研究进展 自由基( f r e er a d i c a l ) 又称游离基。是指独立存在的含有1 个或多个未成对电子的原子或原 子团【2 4 1 。对自由基的研究，已有较长时间的历史。由丁朱成对电子总是有成对的趋向，因此 自由基极易失去或得到电子、化学性质活泼，半衰期很短，在机体内有很