实验三 差速离心法提取线粒体及线粒体的活体染色.ppt_第1页
实验三 差速离心法提取线粒体及线粒体的活体染色.ppt_第2页
实验三 差速离心法提取线粒体及线粒体的活体染色.ppt_第3页
实验三 差速离心法提取线粒体及线粒体的活体染色.ppt_第4页
实验三 差速离心法提取线粒体及线粒体的活体染色.ppt_第5页
已阅读5页，还剩3页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

实验二差速离心法提取线粒体及线粒体的活体染色 一 实验目的 学会差速离心方法及活体染色一般方法 二 实验原理 离心力rcf 1 119 10 5r n2线粒体内的细胞色素氧化酶能使詹纳斯绿染料始终保持在氧化状态而呈现蓝色 而在周围的细胞质内 这些染料被还原成为无色 在进行线粒体的体外染色时 至少要使材料在詹纳斯绿染液中染色15min以上 才能放上盖玻片 以便材料经过氧化 即与空气接触 后 线粒体被染色 三 实验用品 材料 小白鼠肝脏器材 玻璃匀浆器 高速冷冻离心机 普通离心机 剪刀 镊子 小烧杯 离心管 载玻片 盖玻片 滴管 普通光学显微镜 试剂 匀浆介质 詹纳斯绿染色液 四 实验步骤 1 小白鼠断颈致死 用70 乙醇消毒外部后 剖腹取肝 2 用预冷到近0 的匀浆介质洗肝 干净滤纸吸干水分 称重 3 将肝剪碎 按每克肝组织加8ml匀浆介质 加入到玻璃匀浆器中 在冰浴中匀浆 4 待肝组织基本碎裂后 移出到离心管中 在冷冻离心机上4800rpm离心15min 吸取上清液 5 上清液再在冷冻离心机上11000rpm离心20min 6 弃去上清液 沉淀以适量匀浆介质悬浮制成线粒体悬浮液 吸1滴于载玻片上 加1滴詹纳斯绿染色液 染色 室温下 约20min 7 加盖玻片 置显微镜下观察 实验步骤 取材 制成悬液 组织块 细胞 细胞核 线粒体等 4800rpm离心15min 沉淀 组织块 细胞和细胞核等 上清液 11000rpm离心20min 沉淀 mit lys等 上清液 gb er 詹纳斯绿染色 去掉脂肪层 3 对照片 无色 1 2 1 2阳性 3阴性
人人文库> 全部分类> 应用文书 > 事务文书

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论