宫颈病变检测人乳头瘤病毒感染的意义

宫颈病变检测人乳头瘤病毒感染的意义 摘要 目的 探讨人乳头瘤病毒（HPV）感染与宫颈病变的关系。方法 用荧光定量PCR 法检测15例正常宫颈，57例宫颈尖锐湿疣，78例宫颈上皮内瘤变（CIN），43例宫颈尖锐湿疣合并CIN，13例宫颈癌的 HPV 感染情况。 结果本组宫颈病变中HPV 感染率92.72%，单一型HPV感染率89.52%，高危型HPV 感染率98.25%；宫颈尖锐湿疣以HPV52感染为主（41.18%）；CIN 以HPV16感染为主（41.67%）；尖锐湿疣合并CIN感染HPV58者占25.00%，感染HPV16和HPV52的各占15.00%；60.00%宫颈癌感染HPV16；多重型HPV感染以HPV亚型双重感染为主。 结论 HPV检测对于宫颈病变的筛查及临床分流监测有重要价值。 关键词 宫颈病变；人乳头状瘤病毒；宫颈上皮内瘤变；宫颈癌；尖锐湿疣 中图分类号 R711.3文献标识码 B文章编号 1673-9701（2014）15-0145-03 Significance of infection with human papillomavirus in cervix lesions HAN Shuzhen1 WANG Fuqiang2 WANG Zhijing2 WANG Dujuan1 ZHAO Yinghai2 CHEN Xiaoyi2 1.Department of Pathology, Affiliated Dongguan Houjie Hospital, Guangdong Medical College,Dongguan 523945,China;2.Department of Pathology, Basic Medical Sciences of Guangdong Medical College,Zhanjiang 524023,China Abstract Objective To investigate the relationship between human papillomavirus infection and cervix lesions. Methods HPV infection was detected by fluorogenic quantitative polymerase chain reaction in all specimens included 15 cases of normal cervix, 57 cases of cervical condyloma acuminatum, 78 cases of cervical intraepithelial neoplasia（CIN）, 43 cases of cervical condyloma acuminatum combining CIN, 13 cases of cervical carcinoma. Results In this groups of cervix lesions,HPV infection rate was 92.72%, HPV single infection rate was 89.52%, high risk HPV subtypes infection rate was 98.25%. Cervical condyloma acuminatum cases were most commonly infected with HPV52(41.18%). CIN cases were most commonly infected with HPV16(41.67%). Cervical condyloma acuminatum combining CIN cases were more often infected with HPV58 (25.00%), HPV16 (15.00%) and HPV52 (15.00%). 60.00% of cervical carcinoma cases were infected with HPV16. Multiple infection HPV subtype cases were more often infected with dual infection subtype. Conclusion The detection of HPV infection has great value for screening and triage of patients with cervix lesions. Key words Cervix lesions； Human papillomavirus；Cervical intraepithelial neoplasia； Cervical carcinoma；Condyloma acuminate人乳头瘤病毒（human papillomavirus,HPV）是一种嗜生殖道黏膜和皮肤上皮细胞的病毒,性接触是HPV感染的主要途径之一， HPV可根据其致病性的不同分为低危型和高危型1。研究结果表明,HPV 感染与宫颈尖锐湿疣、宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia,CIN）及宫颈癌的发生密切相关2-6，若能早期发现亚临床和潜伏性HPV感染，并鉴定其亚型有助于临床诊治。本研究以宫颈尖锐湿疣、CIN、尖锐湿疣合并CIN、宫颈癌等病变作为研究对象，对在我院筛查宫颈癌的部分患者进行阴道镜检查并取宫颈活检，用荧光定量PCR 技术检测宫颈HPV-DNA，以探讨分型检测HPV对于宫颈病变筛查及临床分流监测的意义。 1 资料与方法 1.1标本来源 2012年112月, 用液基细胞学方法对东莞市厚街镇有性生活史妇女进行宫颈癌筛查，共检13 610例，选择其中同时进行HPV检测和宫颈活检的15例正常宫颈和191例不同类型宫颈病变为研究对象，所有对象均为非孕期，无自身免疫性疾病，取材前3 d内无阴道冲洗及阴道用药。宫颈活检病理诊断为宫颈尖锐湿疣57例， CIN 78例（其中CIN 10例、CIN 21例、CIN 47例），宫颈尖锐湿疣合并CIN 43例，宫颈癌13例。宫颈病变（除外宫颈癌）患者的年龄17 79岁，平均 33.1岁。宫颈癌患者年龄34 54岁，中位年龄40岁，平均年龄43.2岁。 1.2 HPV-DNA 亚型检测 专用取样器于宫颈口刷取宫颈脱落细胞，将毛刷放入专用细胞保存液内。用荧光定量PCR 技术对样本进行HPV-DNA 亚型检测，上述检测法不能明确HPV 型别的标本用基因芯片技术检测。 1.3 阴道镜检查并取活检 对阴道镜下黏膜有充血、水肿、粗糙、糜烂、溃疡者在病变处取材，对阴道镜下无明显病变者在宫颈管鳞柱上皮交界处2、4、8、10 点处取材。所有患者均知情同意，所有活检组织均有病理诊断结果。 2 结果 2.1 正常宫颈及宫颈病变中HPV感染的检测情况 本组206例病例中，15例正常宫颈HPV感染率为0（0/15），191例宫颈病变HPV 感染率为92.72%（191/206），其中单一型HPV 感染有171例，占89.52% （171/191），多重型HPV感染20例，占10.48%（20/ 191）。191例不同宫颈病变中单一型或多重型HPV感染情况见表1。171例单一型HPV感染的宫颈病变中高、低危型HPV感染情况见表2。 表1 191例不同宫颈病变中单一型或多重型HPV感染情况n（%） 表2 171例单一型HPV感染的宫颈病变中高、低危型HPV感染情况n（%） 2.2 不同宫颈病变中HPV亚型感染情况 宫颈尖锐湿疣组HPV 亚型以HPV52（41.18%） 为主,其次为HPV11（11.76%）、HPV66（11.76%）、HPV 16 （5.88%）、HPV56（5.88%）、HPV68（5.88%）、HPV35 （5.88%）、HPV39 （5.88%）、HPV51（5.88%）。CIN 组HPV 亚型以HPV16（41.67%）为主，其次为HPV58（20.83%）、HPV52（16.67%）、HPV18（8.33%）、HPV33（8.33%）、HPV66 （4.17%）。尖锐湿疣合并CIN组HPV 亚型以HPV58（25.00%）为主，其次为HPV16（15.00%）、HPV52（15.00%）、HPV33（10.00%）、HPV51（10.00%）、HPV11（5.00%）、HPV18（5.00%）、HPV39（5.00%）、HPV56（5.00%）、HPV68 （5.00%）。13例宫颈癌均为单一型HPV感染，以HPV16（60.00%） 为主，其次为HPV31 （20.00%）、HPV33 （20.00%）。 2.3 20例多重型HPV感染的宫颈病变中HPV亚型感染情况 20例多重型HPV感染的宫颈病变中，3例为3个不同亚型HPV感染，病理诊断为尖锐湿疣1例 （HPV33、52、68），CIN 1例 （HPV16、18、68），尖锐湿疣合并CIN 1例 （HPV31、51、58），余下17例均为2个不同亚型HPV感染，病理诊断为尖锐湿疣6例，检测出1例HPV 16+52、1例HPV39+58、1例HPV42+52、1例HPV51+56、1例HPV51+66、1例HPV52+68；CIN 4例，检测出1例HPV16+18、1例HPV31+52、1例HPV51+56、1例HPV52+68；CIN 5例，检测出1例HPV16+52、1例HPV16+68、1例HPV18+31、1例HPV18+52、1例HPV52+58；尖锐湿疣合并CIN 2例，检测出1例HPV18+52、1例HPV58+66。本组实验结果与文献报道相一致，即多重型HPV感染患者中以HPV亚型双重感染为主7，8。 此外，本组多重型HPV感染检测结果显示，HPV52的检出率最高（50%, 10/20），其次是HPV16（25%, 5/20）和HPV18（25%, 5/20），HPV68（20%, 4/20），HPV51（20%, 4/20），HPV31（15%, 3/20），HPV58（15%, 3/20），HPV66（10%, 2/20），HPV33（5%, 1/20），HPV39（5%, 1/20）。 3 讨论 近年来HPV在性活跃人群中经生殖道传播和感染率明显上升，根据HPV致癌性强弱分为低危型和高危型，低危型包括HPV6、11、42、43、44 等，主要引起尖锐湿疣；高危型包括HPV 16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68等，主要引起CIN和宫颈癌8-10。 有文献报道，高危型HPV感染与CIN及宫颈癌密切相关，低危型HPV感染见于尖锐湿疣病变中；HPV多重感染可能与宫颈疾病的病变程度无关6。本研究结果显示，宫颈尖锐湿疣、CIN、宫颈尖锐湿疣合并CIN和宫颈癌患者高危型HPV感染率明显高于低危型，单一型HPV感染明显高于多重型感染，提示东莞市厚街镇的大多数宫颈尖锐湿疣患者感染高危型HPV，并且多数为单一型感染。 本组单一型HPV感染患者中，宫颈尖锐湿疣组HPV 亚型高危型以HPV52感染为主，其次是HPV66，低危型为HPV11感染；CIN 组HPV 亚型高危型以HPV16感染为主，其次是HPV58、HPV52，无低危型HPV感染；尖锐湿疣合并CIN组HPV 亚型高危型以HPV58 感染为主，其次是HPV16、HPV52 ，低危型为HPV11感染；13例宫颈癌均为高危型HPV感染，以HPV16为主，其次是HPV31、HPV33。上述结果提示，不同型别HPV 亚型的致病性不同，高危型HPV感染在东莞市厚街镇不同宫颈病变患者中均有较高的检出率，尤其是HPV16、HPV52、HPV58在宫颈病变患者的感染中均占有较高比例；HPV16在CIN及宫颈癌病变中感染率较高，证明HPV16与该地区妇女CIN及宫颈癌的发生有关。 本组多重型HPV感染患者以HPV亚型双重感染为主，与文献报道一致7，8，但本组最常见多重感染亚型不是HPV16，而是 HPV52（50%, 10/20），其次是HPV16（25%, 5/20）和HPV18（25%, 5/20）。这一结果可能与样本数量偏小有关，也可能与地区人群差异有关9，还可能是由于HPV52在东莞市厚街镇的妇女中感染率较高。 本组宫颈病变（除外宫颈癌）患者的年龄17 79岁，平均年龄33.1岁；宫颈癌患者年龄34 54岁，中位年龄40岁，平均年龄43.2岁。分析本组患者的年龄结构，我们发现HPV感染人群绝大多数处于性活跃年龄段，宫颈癌患者绝大多数是中青年女性，因此加强生殖健康教育、临床上加强HPV分型检测的应用以发挥其对HPV 感染高危人群的提示作用，加强对高危人群的监测、随访，定期复查、早期诊治、积极治疗等，从而降低宫颈癌的发生率及病死率，对提高广大妇女的生活质量有重要意义。 此外，值得注意的是近年来宫颈尖锐湿疣发病率明显上升，多数患者同时伴发生长在大小阴唇、阴道口、尿道口或阴道壁等处的尖锐湿疣，患者乃至医生往往只注重外阴部明显疣体的治疗，而忽视HPV会感染宫颈部引起病变。因此，对于外阴部尖锐湿疣患者，应同时进行宫颈部HPV分型检测、阴道镜检及宫颈组织病理活检，发现高危型HPV感染的宫颈尖锐湿疣患者一定要进行合理的临床分流监测，尤其是同时合并CIN的患者更应该密切观察，及早治疗。 参考文献 1Tao P，Zheng W，Wang Y，et al.Sensitive HPV genotyping based on the flow-through hybridization and gene chipJ. J Biomed Biotechnol，2012，2012:938780 2McCormack PL，Joura EA Spotlight on quadrivalent human Papillomavirus(Types 6,11,16,18) recombinant vaccine( Gardasil?) in the prevention of prem alignant genital lesions，genital cancer，and genital warts in womenJ. Bio Drugs, 2011, 25（5）: 339-343 3何倩,孙丽萍. 人乳头瘤病毒与子宫颈病变关系的研究J. 中国妇幼保健, 2010, 25（14）:1929-1930. 4王贵宇, 刘春