高中生物 专题二 课题1 微生物的实验室培养课件 新人教版选修1.ppt

专题2微生物的培养与应用课题1微生物的实验室培养 栏目链接 科学家在南极数百英尺的冰层下面 在没有光和氧气的环境中 发现了一种微生物 据推测 它们已经生存了150万年之久 基因检测显示 它们类似今天海洋环境中的微生物 科学家认为 这些微生物曾经生活在海洋里 150万 200万年前海洋被冰川截断形成像大池塘的水面 后来又被冰川覆盖 从此 这些微生物与世隔绝了 栏目链接 请思考 1 微生物是如何获得能量维持生存的 2 它们还需要哪些营养物质 栏目链接 栏目链接 1 概念人们按照微生物对 的不同需求 配制出供其 的营养基质 2 种类按照培养基的 划分为 培养基和 培养基 一 培养基 营养物质 生长繁殖 物理状态 液体 固体 栏目链接 3 营养要素各种培养基一般都含有水 此外还要满足微生物生长对 以及 的要求 碳源 氮源 无机盐 ph 特殊营养物质 氧气 栏目链接 二 无菌技术 1 获得纯净培养物的关键是防止 的入侵 具体操作如下 1 对实验操作的 操作者的衣着和手进行 和 2 将用于微生物培养的 和 等器具进行灭菌 外来杂菌 空间 清洁 消毒 器皿 接种用具 培养基 栏目链接 3 为避免周围环境中 的污染 实验操作应在 进行 4 实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与 相接触 微生物 酒精灯火焰附近 周围的物品 栏目链接 2 消毒和灭菌 1 消毒是指使用较为 的物理或化学方法仅杀死物体表面或 微生物 不包括芽孢和孢子 常用的方法有 消毒法和 消毒法 2 灭菌是指使用 的理化因素杀死物体内外 的微生物 包括芽孢和孢子 常见的方法有 灭菌 灭菌 灭菌 温和 内部一部分 煮沸 化学药剂 强烈 所有 灼烧 干热 高压蒸汽 栏目链接 三 大肠杆菌的纯化培养 牛肉膏蛋白胨 称量 灭菌 栏目链接 2 纯化大肠杆菌 1 纯化培养方法 在牛肉膏蛋白胨培养基上纯化大肠杆菌 最常用的方法有 法和 法 2 纯化培养的原理 想方设法在培养基上得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的 即获得较纯的菌种 3 平板划线法 通过 在琼脂固体培养基表面连续 的操作 将聚集的菌种逐步 分散到培养基的表面 其具体操作是 平板划线 稀释涂布平板 菌落 接种环 划线 稀释 栏目链接 将 放在火焰上燃烧 直到接种环烧红 在火焰旁冷却 并打开棉塞 将试管口通过 将已冷却的接种环伸入菌液中 沾取一环菌液 将试管口通过火焰 并塞上棉塞 左手将皿盖打开一条缝隙 右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内 划三到五条 线 盖上皿盖 注意不要划破培养基 接种环 接种环 火焰 平行 栏目链接 灼烧 待其冷却后 从第一区域划线的末端开始往第二区域内划线 重复以上操作 在三 四 五区域内划线 注意不要将最后一区的划线与第一区相连 将平板 放入培养箱中培养 4 稀释涂布平板法 将菌液进行一系列的梯度 然后将不同稀释度的菌液分别 到琼脂固体培养基的表面 进行培养 其操作步骤是 系列稀释 梯度稀释 操作 接种环 倒置 稀释 涂布 栏目链接 栏目链接 酒精 表面 酒精 频繁使用的菌种 需长期保存的菌种 栏目链接 栏目链接 一 制备培养基 1 配制原则 1 目的明确 不同微生物需求不同 根据培养目的进行配制 2 营养要协调 营养物质的浓度和比例要适宜 3 ph要适宜 为维持ph的相对恒定 可在培养基中加入缓冲剂 常用磷酸氢二钾或磷酸二氢钾 栏目链接 2 培养基的营养成分及功能 栏目链接 栏目链接 对异养微生物来说 含c h o n的化合物既是碳源又是氮源 能源 一些天然营养物质 如酵母膏 蛋白胨 动植物组织提取液等可为微生物提供生长因子 不同微生物对营养的需求不同 因此 首先根据不同微生物的营养需求配制针对性强的培养基 营养物质过少不能满足微生物的营养需要 过多对微生物的生长有抑制作用 特别提醒 栏目链接 例1下列关于配制培养基的有关叙述中 正确的是 a 制作固体培养基必须加入琼脂b 发酵工程中一般用液体培养基c 氮源主要是为微生物提供能量d 牛肉膏主要为微生物提供氮元素 栏目链接 解析 制作固体培养基时必须加入凝固剂 琼脂是常用的凝固剂 但不是唯一的凝固剂 例如明胶也可作为凝固剂 发酵工程一般都是用液体培养基 原因是液体培养基便于调节ph 温度 溶氧等 而且液体培养基还能有利于微生物充分利用营养物质 氮源主要是作为微生物合成蛋白质和核酸的原料 牛肉膏主要为微生物提供碳源 磷酸盐和维生素 答案 b 栏目链接 变式训练 1 下列制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述 错误的是 a 操作顺序为计算 称量 溶化 倒平板 灭菌b 将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯c 将培养基冷却至50 左右时进行倒平板d 将平板冷却凝固约5 10min后将平板倒过来放置 栏目链接 变式训练 解析 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算 称量 溶化 灭菌 倒平板 顺序不能颠倒 牛肉膏容易吸潮 所以当牛肉膏溶化并与称量纸分离后 用玻棒取出称量纸 将培养基冷却至50 用手触摸锥形瓶感觉刚刚不烫手时倒平板 平板冷却后还需倒置 答案 a 栏目链接 二 消毒与灭菌的比较 栏目链接 酒精消毒时 70 的酒精杀菌效果最好 原因是浓度过高 菌体表面蛋白质变性过快从而凝固成一层保护膜 乙醇分子不能渗入其中 浓度过低 杀菌能力减弱 特别提醒 栏目链接 例2细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽 酒精 火焰灼烧等几种不同的处理方法 这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌 a 接种针 手 培养基b 高压锅 手 接种针c 培养基 手 接种针d 接种针 手 高压锅 栏目链接 解析 高压蒸汽灭菌锅是灭菌的一个设备 通常用于培养基的灭菌 用酒精擦拭双手是消毒的一种方法 火焰灼烧 可以迅速彻底地灭菌 适用于微生物的接种工具 如接种环 接种针 答案 c 栏目链接 2 下列操作与消毒和灭菌无关的是 a 接种前用火焰灼烧接种环b 接种前用酒精擦拭双手c 将平板倒置 放入培养箱中培养d 接种在酒精灯的火焰旁完成 变式训练 栏目链接 解析 要建立 有菌观念 接种用具 器皿 空气中都充满了微生物 都有污染的可能 必须严格地消毒 灭菌 a b d都是实验操作过程中常用的消毒和灭菌方法 将平板倒置 放入培养箱中培养与消毒 灭菌无关 答案 c 变式训练 栏目链接 三 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基及纯化大肠杆菌 1 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的过程 栏目链接 栏目链接 2 纯化大肠杆菌操作过程中的注意事项 1 平板划线法中几次灼烧接种环的目的 栏目链接 2 稀释涂布平板法操作比较复杂 且各个细节均需保证无菌操作 应特别注意 酒精灯与培养皿的距离要适宜 吸管头不要接触其他任何物体 吸管要在酒精灯火焰周围使用 涂布器末端浸在盛有70 酒精的烧杯中 取出时 要让多余的酒精在烧杯中滴尽 然后将沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃 注意防火 栏目链接 在稀释涂布平板操作中 每个步骤都要注意无菌操作 以防培养基被污染 影响实验效果 每一稀释倍数菌液都至少要涂布三个平板 作为实验重复 求平均值 若其中有菌落数与其他实验差距悬殊者 应舍弃该实验数据 不进行统计 计算 平板冷凝后 皿盖上会凝结成水珠 凝固后的培养基表面的温度也比较高 将平板倒置 既可以使培养基表面的水分更好地挥发 又可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染 特别提醒 栏目链接 例3关于平板划线操作的叙述正确的是 a 使用已灭菌的接种环 培养皿 在操作过程中不需要再灭菌b 打开含菌种的试管 需通过火焰灭菌 取出菌种后 需马上塞上棉塞c 将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内 划三至五条平行线即可d 最后将平板倒置 放在培养箱中 栏目链接 解析 使用已灭菌的接种环 培养皿 操作过程仍要灭菌 打开含菌种的试管需要通过火焰灭菌 取出菌种后含菌种的试管需要通过火焰灭菌后再塞好棉塞 将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内 划三至五条平行线后盖上皿盖 最后应