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文档简介

1 1 1细菌染色法 单染色法 只用一种染料染色 能清楚观察菌体大小 形态与排列 不能鉴别细菌 复染色法 鉴别染色 采用两种以上的不同染料进行先后染色 可将细菌染成不同的颜色 以便鉴别细菌 抗酸染色 用于检查结核分枝杆菌 麻风分枝杆菌等抗酸性细菌 一些一旦用某些方法染色后 能够抵抗酸性酒精脱色的细菌 阳性者为红色 特殊染色 荚膜染色 芽胞染色 鞭毛染色 极体染色 用于白喉杆菌异染颗粒染色 2 1 2革兰氏染色法 革兰染色法是丹麦内科医生ChristainGram于1884年创立的一种细菌复染色方法 已有130多年的历史 仍在广泛使用 3 1 3革兰氏染色法的原理 通透性学说 等电学说 化学学说 4 1 3革兰氏染色的意义 鉴别细菌 把细菌分成G 和G 两大类 选择抗菌药物 例如G 球菌对青霉素敏感 G 杆菌耐药 了解细菌的致病机理 G 菌大多产生外毒素 G 菌产生内毒素 革兰染色的步骤涂片 干燥 固定 染色 5 实验器材与材料 接种环 细菌分离培养物 上次实验平板 接种环接种针 酒精灯 生理盐水2支 镜油瓶 拭镜纸1套 吸水纸1本 载玻片4张 细菌分离培养物 上次实验平板 革兰氏染色液 6 2涂片的制备 灭菌接种环 7 2涂片的制备 细菌合适 细菌较多 接种环取盐水3ul 2滴 水滴间距小于2cm 取菌苔少许 1mm小菌落半个 与盐水混匀 涂成大于1cm2均匀涂膜 涂毕 环移至涂膜中央侧立 待环内菌膜破裂 接种环烧灼灭菌 8 2涂片的制备 固定Fixation 涂片smear 干燥dry 手持载玻片一端 涂膜朝上 两个涂膜快速通过火焰外层3次 时间2 3秒钟 促使菌体蛋白质凝固 固定在载玻片上 以免染色水洗的时候 细菌被水洗掉 9 初染 结晶紫染液染1min水洗 甩干媒染 卢戈氏碘液染1min水洗 甩干脱色 95 乙醇脱色约30s水洗 甩干复染 复红染液染30s水洗 甩干印干油镜观检 染色 关键步骤 3革兰氏染色的方法和步骤 10 生物安全警告BIOHAZARD 本次实验操作 可产生几十至几百个微生物气溶胶颗粒 气溶胶粒径 100um沉降很快 50um在0 4s内扩散开 5um通过呼吸道直接到达肺泡 实验室感染统计分析结果发现 不明原因的感染高达82 大多数是气溶胶在空气中扩散引起的 实验时应坐稳 很专注 不分心
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