微生物工程谷氨酸发酵实验报告.doc

谷氨酸发酵实验报告前言：谷氨酸发酵试验是一个基础性的实验，但涉及的内容比较广泛，对学生意义很大。该实验是第一次做，我们做是有了钱一组的少许经验，担仍有很多不足。该实验报告将对其中的错误进行分析，同时分析实验结果，对实验提出意见和建议。关键字：谷氨酸 1、 实验内容该实验是系列实验，包括以下七个小实验：实验一 谷氨酸菌种的制备及扩大培养实验二 发酵罐结构以及空消实验三 发酵培养基制备及实消实验四 谷氨酸发酵过程控制实验五 谷氨酸发酵过程中还原糖的测定实验六 发酵过程中谷氨酸含量的测定实验七 谷氨酸的等电回收及结晶实验具体内容在课件中很详细，再次不详加说明。2、 试验中的误差及错误2.1设备引起的误差及错误 微生物实验需要很好的设备，否则很难将实验做好，仪器将直接决定实验是否成功。能否有产物生成，是否被污染等。2.1.1仪器的气密性所用仪器的气密性还可以，保证在空消和实消时能够消毒彻底，保证实验过程中的调控。2.1.2 PH计所用的仪器PH计不准不能实时测定和调节PH值。只能在取液时做测定，不能做到及时调节。对结果及军中的生长有影响。2.1.3 搅拌机由于在实验中误将玻璃棒掉进了发酵罐中，使得不能用搅拌进行混匀，只能用气体混匀，所以过程中有很多气泡。2.2 操作引起的误差2.2.1 配比时加水过多，在一定量的情况下由于实消时产生的水过多是体积过大，浓度过低。对效果产生影响。2.2.2实时监控对于发酵试验，一定要保证实验过程中的状态，PH、温度、压力、气泡的量等在一定的范围内。3、 实验数据及处理3.1还原糖还原糖的标准曲线制作：glc的含量mg00.080.160.240.320.4OD值00.0590.1850.3090.4360.554发酵液中还原糖的含量的测定：时间吸收值1吸收值2吸收值3平均值Y糖含量mg样品中糖的含量mg/ml 5-29-20:45 稀释400倍0.4010.3880.3850.3910.474106111.89642444923:450.3880.3810.3930.3873330.290527541.162110145 5-30-02:450.3810.3760.360.3723330.280092751.1203710145:450.3480.3620.3580.3560.268730431.074921739有问题6:450.3460.3820.3740.3673330.276614491.1064579717:450.3460.3270.3390.3373330.255744931.022979718:450.2560.2630.2690.2626670.20380290.815211594有问题9:450.3390.3560.3450.3466670.262237681.048950725有问题10:450.3340.3340.3290.3323330.252266671.00906666711:450.2260.2190.2190.2213330.175049280.700197101有问题12:45稀释333倍0.3870.3810.3440.3706670.278933330.92977777813:450.3450.3660.360.3570.269426090.89808695714:450.3310.3320.3330.3320.252034780.84011594215:450.3330.3410.3380.3373330.255744930.85248309216:450.320.3240.330.3246670.246933330.8231111113.2谷氨酸GLu标准曲线Glu的含量mgOD值1OD值2#DIV/0!00000020600.0190.03600.0245401200.2430.3331200.288601800.5780.4971800.5375802400.8220.8232400.82251003000.8540.7923000.823实验过程中Glu含量的测定值如下（忽高忽低）：时间6:45:007:458:459:4510:4511:4512:4513:4514:45对应PH6.36.96.36.865.976.974、 实验结果分析5.1 对于葡萄糖标注曲线很准确，实时测定虽然有一定的波动，但是总体的趋势是正确的。5.2对于谷氨酸的标准曲线，我深有体会，做了十几遍，但是仍有不足，还需要继续改正。整组数据已接近正确，可以使用。对于实时定量的谷氨酸测量，波动很大，基本上没有规律。原因很多：测量不准确，最主要的原因是没有得到充分的搅拌（发酵罐中有一根玻璃棒，无发使用搅拌），取样的随机性很大，测量结果的波动时一定的。6、心得谈谈实验的了解我最了解的莫过于谷氨酸标准曲线的制作。因为我做了几十遍。但是最后一组的实验结果仅仅是勉强可以，仍有很多的不足。结合我的经验谈谈对它的看法。 取液是要用取样枪，因为移液管的误差比较大。 在所都的液体都加入后在摇