GB15193.6 哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验 编制说明

1食品安全国家标准 哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验(征求意见稿)编制说明1、标准起草的基本情况标准起草单位为北京市疾病预防控制中心卫生毒理所。本标准的主要起草人为马玲、赵超英。为了做好标准的制修订工作，中国疾病预防控制中心营养与食品安全所于 2006 年 8 月 1718 日组织召开了食品安全性毒理学评价程序和方法标准制修订课题协作组第一次工作会议，对食品安全性毒理学评价程序和方法 （GB15193.1-15193.21 ）2003 版修订的原则和框架作了充分的讨论。标准起草人在研究和分析国内外相关标准的基础上，通过研究和分析 OECD 化学品测试指南（Guidelines for Testing of Chemicals（No.475 ，21st July 1997）Mammalian Bone Marrow Chromosome Aberration Test）和 US EPA 健康效应测试指南（OPPTS Health Effects Test Guidelines Mammalian Bone Marrow Chromosome Aberration Test (Series 870.5385, 1998)）中“哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验”、 哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验 （GB15193.6-2003 ）和化学品 哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验 （GB/T21772-2008）等国内外标准，执笔起草了本标准。在对哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验 （GB15193.6-2003）方法验证的基础上，进行了修改，形成讨论稿。征求了相关专家的意见，对讨论稿进行了多次修改，形成了征求意见稿。二、标准的重要内容及主要修改情况本部分的主要内容涉及哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验的基本原则、方法和要求，适用于检测食品、食品相关产品以及食品污染物诱发的哺乳动物骨髓细胞染色体畸变。新国家标准的本部分内容包括范围、术语和定义、原理、仪器与试剂、试验方法、数据处理和报告、结果解释。与原标准相比，总体编排上结构更合理，层次更清晰。在内容上确定了本试验部分的适用范围、术语定义、试验原理，在试验方法中对受试物配制、试验动物、剂量与分组、受试物给予、阅片、数据处理和结果解释作了要求和规定，对试验结果的解释作了说明，并对试验报告所需要的基本信息也作了要求，试验内容更具体，更具有可操作性，语言编写更具有通俗性。具体修改内容如下：（一） “范围”中删除了“食品新资源及其成分” 。将“食品添加剂（含营养强化剂） 、食品新资源及其成分、新资源食品、辐照食品、食品容器与包装材料、食品工具、设备、洗涤剂、消毒剂、农药残留、售药残留、食品工业用微生物等，改为“食品原料、食品添加剂（含营养强化剂） 、新资源食品、辐照食品、食品容器与包装材料等食品和食品相关产品以及食品污染物” 。描述更简洁、科学。（二）原理：将“给试验的大、小鼠腹腔注入秋水仙素，抑制细胞分裂时纺锤体的形成，以便增加2中期分裂相细胞的比例” ，修改为“在试验动物给予受试样品后，用中期分裂相阻断剂处理，抑制细胞分裂时纺锤体的形成，以便增加中期分裂相细胞的比例” ，增加“本试验可检测受试物能否引起整体动物骨髓细胞染色体畸变，以评价受试物致突变的可能性。若有证据表明受试物或其代谢产物不能到达骨髓，则不适用于本方法” 。描述更明确、科学；（三）术语和定义增加了“结构畸变” 、 “染色体型畸变” 、 “染色单体型畸变” 、 “染色体数目畸变” 、 “核内复制” 、 “裂隙” 、 “有丝分裂指数”等术语和定义。描述更明确、规范。（四）实验动物：增加了动物起始体重的差异不能超过平均体重的 20%的要求和动物饲养要求。提高了标准的可操作性；（五）剂量：增加“对于在低或无毒剂量下具有特异生物学活性的物质，可以抑制骨髓细胞有丝分裂指数（50%以上）为指标确定最高剂量，按等比级数 2 向下设置中、低剂量组。”的要求。增加“急性毒性试验给予受试物最大剂量（最大使用浓度和最大灌胃容量）动物无死亡而求不出 LD50，并且根据结构相关物质资料不能推断受试样品具有遗传毒性时，则不必设三个剂量。可设一个剂量，连续染毒14d”，与 OECD、EPA 标准及国内相关标准、规范一致；（六）给予受试物方式：增加“一次染毒应分两次采集标本，多次染毒采集一次标本”的规定，与OECD、EPA 标准及国内相关标准、规范一致；（七）阅片要求中，增加“在读片时应记录每个观察细胞的染色体数目，对于畸变细胞还应记录显微镜视野的坐标位置及畸变类型。由于低渗等机械作用的破坏，会导致处于中期的染色体发生丢失，所以，观察的中期相染色体数目应控制在 2n2 内”，提高了可操作性；（八）观察指标中，增加小鼠体细胞主要畸变类型模式图，提高了可操作性；（九）数据处理：增加“每只实验动物作为一个观察单位，每组动物按性别分别计算染色体结构畸变细胞百分率。若雌、雄动物之间无明显的性别感受差异，可合并计算结果。裂隙应单独记录和报告，但一般不计入总的畸变率。 ”的要求，提高了可操作性；（十）将“结果判断”改为“结果解释”并补充相关内容，增加了“对实验报告要求”的内容，体例上与本标准的其他部分一致。三、国际、国内标准情况与本标准对应的国际标准主要有 OECD化学品测试指南及 US EPA健康效应测试指南中“哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验” OECD Guidelines for Testing of Chemicals ，Mammalian Bone Marrow Chromosome Aberration Test（No.475，21st July