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第二期各种不同色谱柱在填料上的化学差别2014-02-17蒋竞波谱分析色谱柱是什么1)反相色谱柱C8,C18,phenyl,氰基柱,这些反相色谱柱都是硅胶基质,然后利用硅胶上面的硅羟基,连接不同的键合相,从而得到不同类型的的色谱柱。下面这张图是色谱柱里面硅胶的围观结构2)键合相是通过什么样的办法连接上硅胶的呢?它们是通过氯硅烷与硅羟基反应脱去一份子HCl完成键合和连接的,下图中R的种类决定了柱子的型号,如果R是C8则这个柱子是C8柱,如果R是C18则这个柱子就是C18柱子。3)为什么不同的色谱柱会产生不同的分离效果呢?这主要是由不同的R基团与样品的相互作用的差异造成的,比如C8 和C18的柱子的差别在疏水性,phenyl柱如果遇到含有苯环的化合物除了有疏水作用还会产生苯环与苯环两个平面的相互作用,下面是一组化合物在不同的填料上的出峰情况,4)什么是色谱柱的封端,色谱柱为何要封端?色谱柱封端指的是用四甲基硅氯封住硅胶表面裸露的羟基,有与TMSCl比键合相分子要小很多,所以它有机会与更多的羟基反应,实现封端,封端的目的主要是为了减少硅胶上的OH与急性样品形成比较强的氢键左右而形成拖尾。下面就是柱子封端示意图。5)那么应该如何根据结构来选择色谱柱呢?请看下回分解上一期主题是:HPLC方法开发如何选择流动相pH, 在对话框中直接回复pH即可收到相关主题,抛砖引玉,
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