中药注射剂类过敏研究进展

中药注射剂类过敏研究进展 摘要中药注射剂由于起效迅速，生物利用度高，已被广泛应用在临床危急重症领域。近年来随着其临床不良反应报道的增多，已越来越引起人们重视，其中急性过敏反应为其主要的不良反应。急性过敏包括I型过敏和类过敏，其中后者占77%以上，为中药注射剂的主要不良反应，目前已发现多种中药注射剂包括鱼腥草注射液和生脉注射液等导致严重的类过敏反应的发生。但是国内外对类过敏反应产生的机制尚不完全清楚，均未建立评价中药致敏原的类过敏标准动物模型，有关中药注射剂类过敏反应的技术指导原则尚未制定，相关机制及类过敏成分尚不明确，相关研究方法也比较单一。该文主要从类过敏反应机制、评价指标及评价方法3方面对中药注射剂类过敏进行综述。类过敏反应机制主要包括直接刺激途径、补体途径、凝血途径、激肽释放酶-激肽途径和急性过敏途径共5条途径;评价方法主要包括整体动物模型和体外细胞模型;综述评价指标主要分析了类过敏发生途径的特征指标及类过敏发生后效应物质指标。 关键词中药注射剂;不良反应;类过敏反应 Advance and prospect in studies on anaphylactoid reaction of traditional Chinese medicine injections XU Yu-bin， DOU De-qiang* （College of Pharmacy， Liaoning University of Traditional Chinese Medicine， Dalian 116600， China） AbstractBecause of the rapid action and high bioavailability， traditional Chinese medicine injections （TCMIs） had been widely used in clinical critical field. In recent years， with the increasing reports of clinical adverse reaction， more and more attention was paid to them， and acute allergic reaction was the main adverse reaction. Acute allergic reaction included type-I anaphylaxis reaction and anaphylactoid reaction， the latter had been found in a variety of TCMIs and accounted for 77% of adverse reaction. But the mechanism of anaphylactoid reaction was not completely understood， the standard animal model for TCMIs was not established， and the technical guidance for anaphylactoid reaction was not formulated. Thus the three aspects included mechanism， evaluation index and evaluation methods of TCMIs for anaphylactoid were reviewed. Five ways including direct stimulating pathway， complement pathway， coagulation pathway， kallikrein-kinin pathway and acute allergic pathway were the main mechanism of anaphylactoid reaction; whole animal model and cell model were the main evaluation methods; the occurrence index and effect index were reviewed for the evaluation index analysis. Key wordstraditional Chinese medicine injections; adverse reactions; anaphylactoid reaction doi：10.4268/cjcmm20151416 中药注射剂由于起效迅速，无消化道吸收过程的影响等优势，在疾病的治疗方面，尤其是急重症疾病方面具有重要的作用，目前我国报道的在临床使用的中药注射剂约有100余种。近年来中药注射剂的不良反应报告逐渐增多^1-2。据有关资料统计，中药注射剂不良反应占中药不良反应的75%以上，急性过敏比较严重，急性过敏主要包含I型过敏反应和类过敏反应，而类过敏反应占到77%以上³。目前国内外均未建立评价中药致敏原的类过敏标准动物模型，有关类过敏反应的技术指导原则尚未制定，相关机制及类过敏成分尚不明确，导致中药注射剂类过敏反应的评价受到了很大限制，那么寻找一种能够广泛的用来做类过敏反应评价的动物模型来判断中药注射剂类过敏成分，合理有效地评价类过敏反应从而实现对中药注射剂质量的控制是目前急需解决的问题^4-5。本文对近年来类过敏现象的发现及反应机制、评价指标和评价方法研究等进行了综述。 1类过敏现象的发现及反应机制 类过敏反应一般不由IgE介导，在患者首次用药即可产生。类过敏的研究可追溯到1920年，Karsner H⁶把首次在人体或动物静脉注射胶状物体后引发的类似过敏反应症状的现象，定义为“类过敏”现象。Selye H⁷在19471949年间给大鼠首次静脉注射卵白蛋白、右旋糖酐等胶体物后，引起大鼠面部、舌头和爪子附近发绀，浮肿的现象，定义为“类过敏反应”。在19861988年，类过敏反应在捷克斯洛伐克发现动物首次注射油剂疫苗后，出现典型的过敏反应现象，即不安、流涎、瘙痒、水肿等，而这并不由预先存在的IgE抗体所介导，是由于聚氧乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯（吐温80）引起的，至此类过敏反应得以确证⁸。随后，一系列物质被发现都能造成类过敏反应其中包括造影剂、非甾体类抗炎药、止痛剂、脂质体与胶束溶剂和中药注射剂。 类过敏反应与I型过敏反应均与肥大细胞（MC）或嗜碱性粒细胞（BAS）脱颗粒释放组胺等生物活性介质有关，都属于速发型过敏反应，但两者有着不同的发生机制。型过敏反应是由致敏原在系列免疫因子的介导下引起机体的免疫应答，产生特异性抗体，称为致敏接触⁹。一旦再接触致敏原，则致敏原与MC和BAS细胞膜表面上的IgE抗体结合，释放效应物质包括速发相过敏介质如组胺、类胰蛋白酶等和迟发相过敏介质如前列腺素、白介素等，从而产生一系列生理病理反应^10-13（图1）。 目前类过敏反应产生的机制尚未完全认识，人们根据一些注射剂辅料以及compound 48/80等物质类过敏的研究，推测类过敏反应的发生途径可能包括以下5个方面。 1.1直接刺激肥大细胞途径致敏物如compound 48/80（C48/80）通过激活磷脂酶D（PLD）促使溶血磷脂酸（LPA）生成，LPA与溶血磷脂酸受体（LPAR）结合激活G蛋白^14-15，活化的G蛋白激活磷脂酰肌醇激酶（PI3K），再激活磷脂酶C1（PLC1）促使4，5-二磷酸脂酰肌醇（PIP2）分解生成2个第二信使三磷酸肌醇（IP3）和甘油二酯油（DAG）或者通过G蛋白激活磷脂酶（PLC）促使钙离子内流，通过PKC/PLA2途径致肥大细胞脱颗粒释放炎性介质^16-20。在碱性条件下，致敏原与5-HT1A受体结合激活产生级联反应致肥大细胞脱颗粒¹⁴。 1.2激活补体系统途径血清补体主要有9种（C1C9）。激活经典途径：致敏物通过补体经典途径的起始物质C1激活C2，C4再激活C3继而完成C5C9各成分的连锁反应;激活旁路途径：越过C1，C2，C4直接从C3开始激活而完成一系列级联反应;MBL途径：由MBL结合致敏物从而启动激活。3条途径最终都是通过形成C3转化酶，释放C3a，C5a过敏毒素，过敏毒素促使肥大细胞释放血管活性物质，引起体内一系列生理病理的改变^21-23。 1.3激活凝血系统途径凝血系统包括外源性途径和内源性途径，一般体内都为内源性途径，通过凝血因子11，产生级联反应促使纤维蛋白多肽的产生，造成凝血致肥大细胞脱颗粒²⁴。 1.4激活激肽释放酶-激肽系统（kallikrein-kinin系统，KK系统）途径通过激活激肽原酶产生缓激肽，发生级联反应，进一步激活补体系统致肥大细胞脱颗粒²⁵。 1.5急性过敏途径致敏物质通过IgE介导和过敏毒素C3a的双重作用致肥大细胞脱颗粒11， 26（图2）。 2评价指标 2.1途径评价指标在上述几种途径中补体系统相关的类过敏是目前研究较为成熟的一种类过敏机制，检测补体系统改变的指标^27-31有：CH50检测，即通过检测终端补体复合物（TCC，C5b-9）的含量反映血清补体的总体功能水平;直接检测过敏毒素C3a，C4a，C5a因子，三者均为活性片段，与细胞脱颗粒直接相关，三者水平的改变也可以提示致敏物质是否参与补体系统的激活;检测SC5b-9，SC5b-9为补体系统激活过程中C5和C9因子结合后再与S蛋白（玻璃体结合蛋白）结合而形成，为补体系统的末端复合物，通过检测SC5b-9可反映C5因子的裂解和清除过程;检测Bb因子，Bb因子为补体B因子水解后的片段，为补体旁路激活途径的代表性指标;检测C4d因子，C4d因子为C4水解产物，较为稳定，是补体经典激活途径代表性指标。作为补体途径之外的其他途径中并没有作进一步的深入研究，直接刺激途径目前的研究主要集中在抗过敏药的机制上³²，凝血因子共同参与完成机体的整个凝血途径和激肽释放酶激肽系统途径主要通过机体发生类过敏后纤溶蛋白及机体表征如血液黏稠度等异常变化推测是否有该途径的参与，而其中的代表性指标可能需要从中进行深入研究³³。IgE虽然为型过敏反应的指示性指标^34-35，但是作为类过敏共同通路途径重要的免疫学辅助指标也应该进行深入研究²。 2.2效应物质评价指标类过敏反应通过肥大细胞脱颗粒释放效应物质也包括速发相和迟发相过敏介质，其中速发相介质包括如组胺、类胰蛋白酶等，迟发相介质包括花生四烯酸、白三烯等³⁶。 组胺是过敏反应症状产生的最主要的活性物质之一³⁷，也被作为急性过敏反应最具标志性的血管活力指标，许多药物引起的急性过敏反应都怀疑与组胺有关^38-40，组胺进入细胞外液内，能使机体产生毛细血管后小静脉扩张、血管通透性增加、平滑肌收缩和黏液腺分泌增多等过敏样症状³⁷，其病理作用与其血液中的组胺浓度有关，临床相关文献报道，组胺1 g?L-1时并不引起症状，12 g?L-1时仅有皮肤反应，3 g?L-1发生全身反应，100 g?L-1以上则发生严重反应⁴¹，因此组胺常作为早期诊断指标之一，并被临床医生喻为急性过敏监测的“金标准”²⁸。但是组胺作为检测指标还存在一定的局限性，主要体现在半衰期短，需在症状出现后30 min之内取血检测;对取血要求高，因为溶血会影响血浆组胺测定。 类胰蛋白酶是肥大细胞中含量最丰富的标记蛋白，出现急性过敏反应时浓度可显著升高，能特异性地表明肥大细胞是否发生脱颗粒反应，优点是半衰期长，不受溶血等影响，缺点是灵敏度比较低⁴²。 -氨基己糖苷酶是标记肥大细胞脱颗粒的特异性蛋白，与组胺平行释放。1999年Demo等⁴³首次报道用Annexin V对脱颗粒的肥大细胞进行标记，发现其脱颗粒程度与-氨基己糖苷酸酶释放速度成正比，但是只限于用于体外细胞实验。 白三烯类物质是花生四烯酸通过5-脂氧合酶途径代谢异常合成产物，由肥大细胞及嗜碱性粒细胞分泌，也是其脱颗粒标志性物质之一，具有很好的生理活性，但是在体内含量较低^44-45，Salari H等⁴⁶对卵白蛋白致敏的豚鼠进行离体心脏研究，用卵白蛋白静脉注射攻击离体心脏，用HPLC测定心脏释放的LTB4，LTC4，LTD4和LTE4，LTC4在2 min上调达到最大浓度，然后下降到基线;LTD4在5 min上调到最大浓度，LTE4在10 min被测到，15 min后消失，LTB4在510 min上调到最大浓度，15 min后消失，表明白三烯作为类过敏检测指标对取血时间的要求比较高。 除此之外，血液中C3a-desarg，C5a-desarg，Bb，C3b，C4d，嗜碱性粒细胞和肥大细胞表面的标志物CD63，CD203c^47-48，血小板活化因子⁴⁹、纤维蛋白酶、细胞因子等的研究也正成为热点^50-51，将有助于探索中药注射剂类过敏反应发生的机制。 3实验方法研究 3.1整体动物模型选择一种合适、操作简单的动物模型是目前研究中药注射剂类过敏评价方法最受关注的问题。目前国内外文献报道的类过敏研究动物主要有大、小鼠、豚鼠和Beagle犬，猪、食蟹猴及恒河猴也有报道4， 51-52。 不同动物或不同品系动物模型在易感性和症状表现方面均有所不同⁵³。有较多研究发现对Beagle犬首次静脉注射含吐温80或不含吐温80中药注射剂，Beagle犬都能较快出现烦躁不安、瘙痒、过敏性休克等典型的类过敏症状，对吐温80的敏感性较高，该动物模型通常采用行为异常评分及血液组胺升高率为主要指标，IgE为辅助指标来对中药注射剂进行类过敏强度的评价，并以IgE来区分过敏与类过敏（表1，2）3， 54-56。汪怀山等⁵⁷利用类过敏反应阳性药物（组胺，C48/80）和临床有类过敏反应报道的药物及辅料（优维显、泛影葡胺、万古霉素、吐温80，CrEL）对Wistar大鼠和Beagle犬模型作为类过敏反应模型进行评价，验证动物模型的生理指标（动物平均压MABP、呼吸、心率）以及血浆指标（组胺、总IgE、补体SC5b-9）与类过敏反应的相关性，发现注射上述药物后2种动物血压明显下降，同时伴有呼吸和心率的变化，Wistar大鼠注射C48/80，1%吐温80及5%CrEL血浆组胺水平显著上升，Beagle犬静脉注射（给药体积为5mL?kg-1）C48/80，1%吐温80，5%CrEL，75%RCM泛影葡胺，万古霉素（50 mg?kg-1）后，血浆组胺水平显著上升，都无IgE的变化，其中1%吐温80，5%CrEL，75%RCM泛影葡胺可引起SC5b-9的升高，表明Wistar大鼠和Beagle犬对类过敏反应具有良好敏感性，血浆组胺和补体水平可作为类过敏敏感的检测指标，IgE可以作为区分型过敏和类过敏的辅助指标;在另一实验中静脉不同给药速度滴注清开灵注射液和葛根素注射液，发现清开灵注射液以300 mL?h-1注射30 min可引起Beagle犬MABP较低，葛根素注射液以90 mL?h-1注射90 min可引起犬MABP降低，以300 mL?h-1注射1 min可迅速引起犬血液动力学变化⁵⁸。汪怀山等^59-60对小鼠、豚鼠及Beagle 犬的类过敏症状进行比较研究，发现Beagle犬首次静脉给予含0.5%吐温80 或含0.5%吐温80的鱼腥草注射液后，2 min内迅速典型的类过敏反应，认为 Beagle犬用于吐温80或含有吐温80的中药注射剂类过敏研究，能表现出与临床高度一致的症状，并且敏感性高、重复性好。张嘉等⁶¹对豚鼠、BN大鼠、Beagle犬等多种动物的敏感性进行了试验比较，结果表明Beagle犬对鱼腥草注射液导致的过敏反应很敏感，但试验成本高、条件要求较高。上述研究表明Beagle犬对吐温80的敏感性较好，但对注射剂及其他致敏物质的敏感性有待进一步研究，目前文献报道的以Beagle犬进行类过敏研究的中药注射剂见表3。 研究表明小鼠通常不容易区分典型的“过敏症状”，当用小鼠进行中药注射剂类过敏评价时，通常采用血管通透性实验，并且根据耳廓蓝染动物数、耳廓蓝染发生率和伊文思蓝渗出量来综合评价类过敏反应强度^63-64。李春英等⁶⁰用不同浓度吐温80、鱼腥草注射液和双黄连粉针剂对小鼠和豚鼠进行耳廓血管通透性测试发现小鼠iv（给药体积20 mL?kg-1）0.5%10%吐温80溶液、含0.5%10%吐温80的鱼腥草蒸馏液、150600 mL?kg-1双黄连粉针剂;豚鼠iv（给药体积为3.0 mL?kg-1）0.25%1.0%吐温80溶液、含0.25%1.0%吐温80的鱼腥草蒸馏液、54 mL?kg-1双黄连粉针剂，均可造成小鼠和豚鼠耳廓不同程度蓝染，并且各组随着剂量增高，耳廓蓝染面积增大、染色加深，当吐温80含量>5.0%，豚鼠和小鼠反应率接近100%⁵⁸。易艳等⁶⁵通过耳廓蓝染程度评分和依文思蓝渗出量将ICR小鼠、SCID小鼠和BALB/C 裸鼠用于注射用双黄连（300，600 mg?kg-1，分别相当于临床剂量的等效剂量和2倍剂量）类过敏反应研究，结果显示各剂量注射用双黄连均可引起ICR小鼠耳廓血管通透性增高，耳廓明显蓝染，均未引起SCID和BALB/C小鼠（免疫缺陷小鼠）耳廓蓝染，提示T和B细胞（特异性免疫细胞）可能参与了注射用双黄连的致类过敏反应，但并不是传统的体液免疫或细胞免疫，推测可能是直接刺激T或B细胞产生除组胺外的细胞因子，其具体机制有待研究。目前文献报道的以小鼠或者豚鼠为模型利用血管通透性实验进行类过敏研究的中药注射剂见表4。 用豚鼠进行类过敏实验，黄崇刚等通过直接静脉注射，在0.1，0.2 mL?s-1的注射速度下，在给予双黄连、清开灵、鱼腥草注射液（人临床剂量及临床等效剂量）后45 min，各个剂量组均引起豚鼠发热、竖毛、颤抖、呼吸急促、排粪、舔足等症状，持续时间及反应强弱呈现剂量依赖性，对血清总IgE水平无明显影响⁶⁶。仇士东等利用动脉插管手术分别给予Wistar，BN大鼠2%吐温80（给药体积5.0 mL?kg-1），发现BN大鼠血压变化比Wistar大鼠明显，之后分别给予BN大鼠双黄连（378 mg?kg-1）、清开灵（3.6 mL?kg-1）、葛根素（36 mg?kg-1）、茵栀黄（1.8 mg?kg-1）、黄芪（1.8 mL?kg-1）、红花（1.8 mL?kg-1）、生脉（5.4 mL?kg-1）、灯盖花素（1.8 mg?kg-1）、灯盏细辛（3.6 mL?kg-1）、丹香冠心（1.44 mL?kg-1）注射液，发现给予双黄连、葛根素和红花注射液后都能出现血压的下降，双黄连组和生脉组均出现了组胺，SC5b-9含量升高，IgE不变的趋势，推测为补体介导的类过敏反应，表明BN大鼠对类过敏具有一定的敏感性^67-68。有研究发现采用大鼠皮肤类过敏实验，以蓝斑大小和依文思蓝渗出量为指标也能较好地对中药注射剂进行类过敏评价^69-70。 在I型过敏反应中，郭姗姗等5， 71用清开灵注射液和双黄连注射液（人临床用量的等倍剂量和2倍剂量）对BN大鼠和豚鼠进行过敏反应试验比较，结果表明，在同等条件下，其中第1次攻击静脉注射2倍量清开灵注射液和第2次攻击静脉注射1倍量清开灵注射液时BN大鼠与豚鼠比较有显著性差异，BN大鼠在评价清开灵注射液过敏反应中优于豚鼠，而在双黄连注射液中BN大鼠的总反应率也高于豚鼠，认为BN大鼠可以成为适宜评价中药注射剂过敏反应的造模动物。有研究选用豚鼠和 BN，F344，SD，Wistar 4种品系大鼠，以卵白蛋白（OVA）、天花粉蛋白（TCS）、清开灵注射液、注射用灯盏花素为受试物，分别隔日腹腔注射致敏，共3次，于末次致敏后第 14天静脉注射 2 倍致敏剂量激发，发现阳性药卵白蛋白和天花粉蛋白可引起豚鼠和大鼠发生过敏反应，发生率均为100% ，对于清开灵注射液，4 种品系大鼠的过敏反应发生率从高到低依次为BNSDF344，Wistar大鼠;对于注射用灯盏花素，过敏反应发生率为 F344，BNSDWistar大鼠，表明对致敏原的敏感性在动物不同品系间可能存在差异^72-73。帅维维等直接用卵白蛋白对SD大鼠、BN大鼠和豚鼠进行致敏和激发，发现豚鼠血清中IgE、类胰蛋白酶及-氨基己糖苷酶的变化率均高于SD大鼠和BN大鼠，BN大鼠血清中组胺变化率高于豚鼠和SD大鼠，认为增加不同品种的试验动物及相关检测指标，能更加全面的评价中药注射剂的致敏性⁵²。 中药、天然药物免疫毒性（过敏性、光过敏反应）研究的技术指导原则选择的主动全身过敏动物模型为豚鼠，剂量为5 mL?kg-1，但是并没有对类过敏动物模型进行确定，类过敏一般在一次性大剂量注射的情况下发生，豚鼠由于血管细，最大剂量比较小，豚鼠类过敏试验检测效果并不理想，而Beagle犬等大型动物，对操作要求比较高，而且只对专属性物质如吐温80等特别敏感，相比较而言，BN大鼠更适合对类过敏反应的综合性评价。 3.2体外模型目前类过敏体外实验评价一般都采用原代肥大细胞或RBL-2H3类肥大细胞，肥大细胞是类过敏反应主要效应细胞，肥大细胞能通过脱颗粒分泌组胺，各种炎症和免疫调节物质从而引起机体生理及病理的变化^74-75。 邓向亮等⁷⁶采用血塞通对RBL-2H3细胞及原代肥大细胞的脱颗粒特性进行比较发现两者均具有相同趋势，都可用于中药注射剂的类过敏评价，但是肥大细胞比较敏感，对操作要求实验条件等要求比较严格，从腹腔提取的肥大细胞未经纯化，含量很低，且RPMC不能体外传代培养，一次无菌提取的细胞仅能应用数天，因此不适合作为长期使用的模型⁷⁷，而RBL-2H3细胞比较稳定，应用方便。高婕等用C48/80及几种常用注射液（清开灵、血塞通等）对P815，RBL-2H3，Ku812 3种肥大细胞进行比较发现P815细胞相比后2种细胞更适合作为早期的肥大细胞脱颗粒体外检测模型⁷⁸，但是这需要进一步深入研究，因为后续的研究更多的是采用RBL-2H3细胞模型对类过敏进行评价^79-80，Xiang Z等也建立了以RBL-2H3细胞为体外模型的血塞通注射液及其成分类过敏体外评价方法，并且发现注射剂类过敏强弱与其大分子蛋白成分含量有关⁸¹。RBL-2H3细胞越来越多的被作为类过敏体外评价模型可能跟其灵敏度较高、专属性强、重复性好、操作简单、对实验环境要求相对较低有关。 4展望 急性过敏是中药注射剂的主要不良反应，流行病学研究表明类过敏占77%以上¹¹，因此类过敏也是目前制约中药注射剂开发与应用的关键问题。有关中药注射剂类过敏需要进行系统研究的问题如下。 在动物模型的选取中，大型动物如猪、猴、Beagle犬等虽然跟人临床类过敏症状最接近，并且有些如Beagle犬对注射用辅料吐温80敏感度很高，但研究也发现不同物种，不同品系的鼠对不同中药注射剂，不同物质（如天花粉蛋白和卵白蛋白）的敏感度都有所不同，并且发生类过敏之后体内生物标志物的含量表现也不尽相同，如何寻找到其中的规律有待深入研究。但值得提及的是采用目前中国药典中型过敏评价方法，尤其是只观察动物的行为学指标是不合理的，因为行为学指标是靠主观判断，存在较大误差，应该合理增加一些体内生化指标，如组胺、补体蛋白等再结合行为学指标进行综合评价。 对于不同类中药有效成分类过敏机制进行研究，建立有效的类过敏成分筛查方法。由于中药注射剂成分复杂，其引起过敏反应的因素复杂，致敏机制也不相同。通过多种方法对不同类成分类过敏机制研究，寻找和发现类过敏的生物标记物建立有效的类过敏成分筛查方法，对于根除类过敏不良反应具有重要意义。 建立已知易发生不良反应物质的微量测定方法。目前研究表明中药注射剂较高剂量易发生类过敏反应，且小分子化合物的致敏性较低。由此推测注射剂的类过敏与其中的残留蛋白、鞣质等有关，而目前中国药典规定相应物质的监测方法灵敏度较低，受注射剂中其他物质干扰较大，相关测定方法急需改进。 目前临床中药注射剂静脉注射建议注射速度适中，不易过快。本实验室前期研究表明，一些皂苷类成分在浓度较高时易引起溶血及高铁血红蛋白血症，而类过敏一般是在浓度较高的情况下发生，因此降低注射剂的滴注速度是保证目前中药注射剂使用较为安全的手段。 参考文献 1李黎明，金若敏，李小月. 中药注射剂类过敏反应实验研究进展J. 中药药理与临床，2012，28（1）：187. 2冯宇飞，吕邵娃，王艳宏，等. 中药注射剂安全性问题分析及对策J. 中国实验方剂学杂志，2011，17（9）：278. 3闫位娟，李连达，张美玉，等. 7种中药注射剂对Beagle犬类过敏反应研究J. 中国新药杂志，2010，19（20）：1895. 4Li Z，Gao Y，Wang H，et al. A rat model of Shuang Huang Lian injection-induced anaphylaxisJ. Asian Pac J Allergy Immunol，2010，28（2/3）：185. 5郭姗姗，王意忠，张毅，等. BN大鼠和豚鼠评价双黄连注射液的过敏反应J. 中国药理学与毒理学杂志，2009，23（2）：128. 6Karsner H. Anaphylactoid phenomena from the intravenous administration of various collids， arsenicals and other agentsJ. J Pharmacol Exp Ther，1920（14）：379. 7Selye H. Effect of ACTH and cortisone upon an anaphylactoid reactionJ. Can Med Assoc J，1949，61（6）：553. 8Toman M，Krejci J，Pinka K，et al. Causes of anaphylactoid reactions in cattle after administration of lipoid preparationsJ. Vet Med： Praha，1992，37（8）：417. 9贺福元，邓凯文，周逸群，等. 中药注射剂（类）致敏反应的超分子作用分析与研究方法探讨J. 湖南中医药大学学报，2013，33（9）：3. 10程芳. 注射用双黄连类过敏反应及其机制研究D. 济南： 山东大学，2009. 11Szebeni J. Complement activation-related pseudoallergy： a new class of drug-induced acute immune toxicityJ. Toxicology，2005，216（2/3）：106. 12Galli S J， Nakae S， Tsai M. Mast cells in the development of adaptive immune responsesJ. Nat Immunol，2005，6（2）：135. 13Metcalfe D D，Baram D，Mekori Y A. Mast cellsJ. Physiol Rev，1997，77（4）：1033. 14Palomaki V A，Laitinen J T. The basic secretagogue compound 48/80 activates G proteins indirectly via stimulation of phospholipase D-lysophosphatidic acid receptor axis and 5-HT1A receptors in rat brain sectionsJ. Br J Pharmacol，2006，147（6）：596. 15Hashimoto T，Ohata H，Momose K，et al. Lysophosphatidic acid induces histamine release from mast cells and skin fragmentsJ. Pharmacology，2005，75（1）：13. 16Ferry X，Brehin S，Kamel R，et al. G protein-dependent activation of mast cell by peptides and basic secretagoguesJ. Peptides，2002，23（8）：1507. 17Suh P G，Park J I，Manzoli L，et al. Multiple roles of phosphoinositide-specific phospholipase C isozymesJ. BMB Rep，2008，41（6）：415. 18Carpenter G，Ji Q. Phospholipase C-gamma as a signal-transducing elementJ. Exp Cell Res，1999，253（1）：15. 19Schaloske R H，Dennis E A. The phospholipase A2 superfamily and its group numbering systemJ. Biochim Biophys Acta，2006，1761（11）：1246. 20Ghosh M，Loper R，Gelb M H， et al. Identification of the expressed form of human cytosolic phospholipase A2beta（cPLA2beta）： cPLA2beta3 is a novel variant localized to mitochondria and early endosomesJ. J Biol Chem，2006，281（24）：16615. 21Walport M J. Complement. First of two partsJ. N Engl J Med，2001，344（14）：1058. 22Walport M J. Complement. Second of two partsJ. N Engl J Med，2001，344（15）：1140. 23Hugli T E，Muller-Eberhard H J. Anaphylatoxins： C3a and C5aJ. Adv Immunol，1978，26：1. 24Coors E A，Seybold H，Merk H F，et al. Polysorbate 80 in medical products and nonimmunologic anaphylactoid reactionsJ. Ann Allergy Asthma Immunol，2005，95（6）：593. 25Corbier A，Le Berre N，Rampe D，et al. Oversulfated chondroitin sulfate and OSCS-contaminated heparin cause dose-and route-dependent hemodynamic effects in the ratJ. Toxicol Sci，2011，121（2）：417. 26Jurakic T R，Marinovic B，Lipozencic J. Nonallergic hypersensitivity to nonsteroidal antiinflammatory drugs， angiotensin-converting enzyme inhibitors， radiocontrast media， local anesthetics， volume substitutes and medications used in general anesthesiaJ. Acta Dermatovenerol Croat，2009，17（1）：54. 27Szebeni J，Baranyi L，Savay S，et al. The interaction of liposomes with the complement system： in vitro and in vivo assaysJ. Methods Enzymol，2003，373：136. 28程芳，史艳秋，秦慧迪，等. 药物类过敏反应生物标志物探究J. 生命的化学，2008，28（6）：795. 29徐东进. 系统性红斑狼疮患者免疫球蛋白轻链及补体B因子测定的临床意义J. 检验医学与临床，2012，9（1）：33. 30Xu Y，Narayana S V，Volanakis J E. Structural biology of the alternative pathway convertaseJ. Immunol Rev，2001，180：123. 31Lambris J D. Current topics in complement M.USA： Springer，2008. 32Choi Y H，Yan G H，Chai O H，et al. Inhibitory effects of curcumin on passive cutaneous anaphylactoid response and compound 48/80-induced mast cell activationJ. Anat Cell Biol，2010，43（1）：36. 33Norris L A. Blood coagulationJ. Best Pract Res Clin Obstet Gynaecol，2003，17（3）：369. 34Farnam K，Chang C，Teuber S，et al. Nonallergic drug hypersensitivity reactionsJ. Int Arch Allergy Immunol，2012，159（4）：327. 35王志国，王丹巧，吴兆恩，等. 清开灵注射液引发Beagle犬类过敏反应的实验研究J. 中医杂志，2010，51（4）：362. 36Szebeni J. Hypersensitivity reactions to radiocontrast media： the role of complement activationJ. Curr Allergy Asthma Rep，2004，4（1）：25. 37Hashimoto T，Ohata H，Honda K. Lysophosphatidic acid （LPA） induces plasma exudation and histamine release in mice via LPA receptorsJ. J Pharmacol Sci，2006，100（1）：82. 38Mi Y N，Ping N N，Xiao X，et al. The severe adverse reaction to vitamin k1 injection is anaphylactoid reaction but not anaphylaxisJ. PLoS ONE，2014，9（3）：e90199. 39Kun T，Jakubowski L. Influence of MRI contrast media on histamine release from mast cellsJ. Pol J Radiol，2012，77（3）：19. 40Petersen L J，Mosbech H，Skov P S. Allergen-induced histamine release in intact human skin in vivo assessed by skin microdialysis technique： characterization of factors influencing histamine releasabilityJ. J Allergy Clin Immunol，1996，97（2）：672. 41田玉科. 麻醉期间的过敏反应及类过敏样反应J. 实用医学进修杂志，2004，32（3）：129. 42Rook E J，Van Zanten A P，Van den Brink W，et al. Mast cell mediator tryptase levels after inhalation or intravenous administration of high doses pharmaceutically prepared heroinJ. Drug Alcohol Depend，2006，85（3）：185. 43Demo S D，Masuda E，Rossi A B，et al. Quantitative measurement of mast cell degranulation using a novel flow cytometric annexin-V binding assayJ. Cytometry，1999，36（4）：340. 44Frank Austen K. The mast cell and the cysteinyl leukotrienesM. USA： John Wiley & Sons Ltd，2005. 45Zipser R D，Laffi G. Prostaglandins， thromboxanes and leukotrienes in clinical medicineJ. West J Med，1985，143（4）：485. 46Salari H，Pelletier G. Release of leukotrienes and histamine by the isolated anaphylactic heartJ. Immunopharmacol Immunotoxicol，1987，9（2/3）：217. 47Moghimi S M，Hunter A C，Dadswell C M，et al. Causative factors behind poloxamer 188 （Pluronic F68， Flocor）-induced complement activation in hu