高中生物 专题五课题1 DNA粗提取与鉴定课件 新人教版选修1.ppt_第1页
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文档简介

课题1dna的粗提取与鉴定 专题五dna和蛋白质技术 一 提取dna分子的基本思路 利用dna与rna 蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异 提取dna 去除其他成分 二 提取dna分子的基本原理 原理 利用 分子的溶解性原理 利用 分子的耐受性 dna的溶解性 dna和蛋白质等其他成分在不同浓度的nacl溶液中溶解度不同 dna不溶于酒精溶液 但是细胞中的蛋白质则可以溶于酒精 利用这一原理 可以将dna与蛋白质进一步分离 dna分子的耐受性 蛋白酶能水解蛋白质 但是对dna没有影响 大多数蛋白质不能忍受60 80 c的高温 而dna在80 c以上才会变性 洗涤剂可以溶解细胞的细胞膜 去除脂质和蛋白质 但对dna没有影响 三 dna分子的鉴定 dna与二苯胺 沸水浴 min 会染成蓝色 因此 二苯胺可以作为鉴定dna的试剂 注意 二苯胺在使用时再配制 四 实验设计的注意事项 一 实验材料的选取 二 破碎细胞 获取含dna的滤液 三 去除滤液中的杂质 四 dna的析出与鉴定 一 实验材料的选取 鱼卵 猪肝 菜花 香蕉 鸡血 猕猴桃 洋葱 豌豆 菠菜 在液体培养基中培养的大肠杆菌 凡是含有dna的生物材料都可以考虑 但选用dna含量相对较高的 以及提取比较容易的生物组织 成功的可能性更大 原则 材料 二 破碎细胞 获取含dna的滤液 1 动物细胞 2 植物细胞 动物细胞的破碎较易 例如 在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水 同时用玻璃棒搅拌 过滤后收集滤液即可 植物细胞需要先用一定的洗涤剂和食盐溶解细胞膜 洗涤剂是一些离子去污剂 能溶解细胞膜 有利于dna的释放 食盐的主要成分是nacl 有利于dna的溶解 三 去除滤液中的杂质 为了纯化提取的dna需要将滤液作进一步处理共三套方案 教材55页 方案一 方案二 方案三 的溶解性 不受蛋白酶的影响 的耐高温性比较强 四 dna的析出与鉴定 dna的析出用的是与滤液体积相等的冷却的酒精溶液 体积分数为95 静置2 3min 溶液中会出现白色丝状物 用玻璃棒沿一个方向搅拌 卷起丝状物 这就是粗提取dna 1 dna的析出 2 dna的鉴定 鉴定dna时在试管中先加入浓度为2mol l的nacl溶液5ml于两只试管中 其中一只加入dna丝状物 各加入二苯胺试剂4ml 混合均匀后 将试管置于沸水中加热5min 待试管冷却后 比较两只试管中溶液颜色的变化 看看溶解有dna的溶液是否有蓝色 观察你提取的dna颜色 如果不是白色丝状物 说明dna中的杂质较多 二苯胺鉴定出现蓝色说明实验基本成功 如果不呈现蓝色 可能所提取的dna含量低 或是实验操作中出现错误 需要重新制备 五 课题成果评价 实验探究 设计实验进行 的粗提取和鉴定 要求 以植物细胞为
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