实验八、蛋黄卵磷脂的制备　.ppt

实验八 蛋黄卵磷脂的制备 专业综合实验2 化学与环境工程学院 主讲 孟江平 一 实验目的 1 了解并掌握鸡蛋黄卵磷脂的制备工艺原理和方法 教学重点 1 鸡蛋黄卵磷脂的制备工艺原理和方法 教学方法 讲授 实际指导 教学时数 8学时 教学过程 三 实验原理 卵磷脂最早发早发现于1844年 由法国学者葛布利 gobley 从蛋黄中分离出来 故而得名 卵磷脂是构成生物体细胞膜的重要成分之一 广泛存在于动植物体内 虽然许多食物中都含有一定的卵磷脂 其中大豆 卵黄和动物肝脏中的卵磷脂含量较高 卵磷脂既是一种重要且安全的食品乳化剂 有事一种保健食品 此外还广泛应用于临床上心脑血管及肝 肿瘤等疾病的治疗 及作为药物载体 卵磷脂为两性分子 既具有脂溶性 又具有亲水性 其等电点约为ph6 7 卵磷脂外观为浅黄色至浅棕色粉末或半透明黏稠状液态物质 有清淡柔和的风味和香味 卵磷脂可溶于乙醇 甲醇 氯仿等有机溶剂中 也能溶于水成为胶体状态 但不溶于丙酮 且不同的磷脂在有机溶剂中溶解度不同 故可用有机溶剂来提取分离卵磷脂 但单纯用溶剂萃取制备卵磷脂是所得产品纯度不高 如果在萃取过程中加入酸 碱或盐类物质 利用金属离子或酸 碱对卵磷脂分子的选择性 可以获得较高纯度的卵磷脂 本实验使用有机溶剂从鸡蛋卵黄中提取卵磷脂 利用金属盐沉淀纯化卵磷脂 并对卵磷脂的质量进行分析 二 实验材料 试剂与仪器 1 材料 新鲜鸡蛋 卵磷脂对照品 2 试剂 乙醇 95 无水乙醇 丙酮 石油醚 氯化锌 氯仿 甲醇 碘 均为分析纯 3 仪器 紫外可见分光光度计 旋转蒸发仪 真空干燥箱 恒温磁力搅拌器 离心机 gf250硅胶板 10cm 20cm 薄层色谱展开缸 玻璃毛细管 内径0 9 1 1mm 壁厚0 10 0 15mm 管长100mm 等 三 实验实验方法与步骤 1 蛋黄的收集采用放置于冰箱保存的新鲜鸡蛋 打蛋是要注意保证蛋黄的完整性 分离蛋黄 备用 2 卵磷脂的提取取100g鸡蛋卵黄于烧杯中 加入200ml95 乙醇 置磁力搅拌器室温下搅拌1h 3000r min离心分离10min 将沉淀物再加入95 乙醇 重复以上步骤3次 收集上清液 45 下减压蒸馏至近干 用少量石油醚溶解 得石油醚溶液 于石油醚溶液中加入适量丙酮 分离出沉淀物 置搪瓷盘中摊平 厚度不易超过1 5cm 40 左右减压真空干燥2 4h 得淡黄色的卵磷脂粗品 准确称量 记录 3 卵磷脂的纯化 将2 5g粗卵磷脂溶于25ml无水乙醇中 加入相当于卵磷脂质量10 的zncl2的水溶液3ml 室温下搅拌0 5h 得金属盐卵磷脂络合物沉淀 过滤 收集沉淀物 加入冰冷丙酮50ml洗涤沉淀物 搅拌1h 过滤 收集沉淀物 置搪瓷盘中摊平 厚度不易超过1 5cm 40 左右减压真空干燥2 4h 可得淡黄色蜡状的精制卵磷脂 准确称量 记录 4 卵磷脂的检测 1 薄层层析分析将卵磷脂样品与对照品分别配成2 的氯仿溶液 用gf250硅胶板进行层析 展开剂为氯仿 甲醇 水 65 25 4 层析完毕后 取出薄板 干燥 用碘蒸汽显色 观察并拍照 2 紫外分光光度法测定将自制的卵磷脂