高考生物一轮复习 与酶相关的实验探究课件.ppt

与酶相关的实验探究 实验6 突破点三法破解酶实验难题 知识精讲 探究酶的催化作用 专一性 高效性及影响酶活性的因素 是高考的热点和难点 遵循 对照原则 利用 对比法 进行探究 是解答此类试题最基本的思路和方法 分组编号 施加实验条件 观察实验现象 得出结论 是此类实验最基本的步骤 下面对 破解 酶实验难题的三个方法进行分类分析 1 用 试剂检测法 鉴定酶的本质 1 实验原理和方法 2 设计方案 同理 也可利用吡罗红能使rna呈红色来设计实验验证酶是rna 2 用 对比实验法 探究或验证酶的高效性 专一性及影响酶活性的因素 1 验证酶的高效性 设计思路验证酶高效性的方法是 对比法 即通过对不同类型催化剂催化底物的反应速率进行比较 得出结论 设计方案 2 验证酶的专一性 设计思路验证酶专一性的方法也是 对比法 常见的有两种方案 底物相同但酶不同或底物不同但酶相同 最后通过观察酶促反应能否进行得出结论 设计方案 3 用 梯度法 确定酶的最适温度和ph 1 设计思路常用 梯度法 来探究酶的最适温度 或ph 设计实验时需设置一系列不同温度 或ph 的实验组进行相互对照 最后根据实验现象得出结论 酶促反应时间最短的一组所处的温度 或ph 即最适温度 或ph 相邻组间的差值 即梯度值 越小 测得的最适温度 或ph 就越精确 实验变量分析 1 自变量 是指人为改变的变量 如氯化铁和肝脏研磨液 酶促反应温度 ph的变化等 2 因变量 是指随着自变量的变化而变化的变量 如h2o2的分解速率或酶活性 3 无关变量 是指除自变量外 其他对实验结果能造成影响的可变因素 如h2o2浓度 肝脏研磨液新鲜程度等 考题示例 示例1 2013 江苏改编 为了探究温度 ph对酶活性的影响 下列实验设计合理的是 a 实验 b 实验 c 实验 d 实验 解析本题考查影响酶活性的因素的实验设计 意在考查考生的实验设计与分析能力 过氧化氢受热易分解 不宜用过氧化氢酶探究温度对酶活性的影响 故实验 不合理 蔗糖酶不能催化淀粉水解 故实验 不合理 淀粉在酸性条件下也会发生水解反应 不适合用于探究ph对酶活性的影响 故实验 不合理 答案b 示例2 2012 全国大纲卷 33 某同学为了探究ph对人唾液淀粉酶活性的影响 设计了如下实验步骤 在a b c d e5支试管中分别加入ph5 0 6 0 7 0 8 0 9 0的适宜浓度缓冲液5ml 再分别加入质量分数为1 的淀粉液1ml 各试管中分别加入适当浓度的唾液稀释液1ml 摇匀 将5支试管放入70 恒温水浴中 保温时间相同且合适 取出各试管 分别加入斐林试剂2ml 摇匀 观察各试管溶液的颜色 通过颜色深浅判断唾液淀粉酶作用的最适ph 上述实验步骤中有2处错误 请更正并说明更正的理由 不考虑试剂的浓度和加入量 ph梯度以及实验重复次数 以便实验能得到正确的预期结果 1 2 解析 1 唾液淀粉酶的最适温度为37 70 环境中该酶将失活 2 斐林试剂与还原糖在50 65 水浴加热条件下 才产生砖红色沉淀 答案 1 中70 应改为37 因为人唾液淀粉酶作用的最适温度为37 2 在观察各试管中溶液的颜色之前应将各试管放在50 65 水浴中一段时间 因为在高温条件下斐林试剂与还原糖反应显色 二 讨论与分析 1 实验中设置试管乙的目的是 实验步骤 中a处应为 b处为 2 两支试管最可能的实验结果是试管甲 色 试管乙 色 3 实验中加入缓冲液的作用是 4 有同学提出由于cuso4溶液呈蓝色 用上述步骤的检测方法可能会对实验结果产生干扰 请你提出另外一种结果检测方法并预估实验结果 检测方法 预估结果 a管 b管 解析本实验的自变量是铜离子的有无 因此试管乙属于对照组 应在试管中加入蒸馏水和ph6 8的缓冲液各1ml 在试管中加入缓冲液的目的是维持反应ph的稳定 排除ph对实验结果的影响 酶催化的反应要在一定温度下进行 因此 两支试管还需要在37 恒温水浴中保温一段时间 为了排除cuso4溶液本身颜色对结果的影响 本实验还可以检测还原糖的产生 检测还原糖时只需往试管中加入斐林试剂 恒温水浴加热观察颜色变化即可 试管甲中有铜离子 酶的活性受到抑制 因此加碘液检测时试管中溶液呈蓝色 加斐林试剂检测时试管中不会出现砖红色沉淀 而试管乙酶活性正常 淀粉反应完全 生成还原糖 因此 加碘液检测时 试管中溶液呈现碘液的颜色 加斐林试剂检测时试管中出现砖红色沉淀 答案 1 对照蒸馏水和ph6 8缓冲液各1ml放入37