天然产物活性评价方法概述.ppt

2019 12 27 天然产物活性评价方法概述 2019 12 27 天然产物生物活性评价程序 活性的一般筛选治疗的潜力长期给药的作用评价 2019 12 27 天然产物生物活性评价方法 体外评价方法例 小柴胡汤对人肝癌细胞株和胆管细胞癌株的抑制作用 动物体内评价动物体内评价例 小柴胡汤致有丝分裂直接加到细胞培养基中具有致有丝分裂作用 但血清药理则无此作用 其原因可能由一些大分子物质不能从胃肠道吸收或其有效成分经消化道及肝脏代谢失效所致 基因组学方法对疾病相关基因的研究为药物筛选提供靶基因例 香港科技大学生物技术研究所利用基因芯片技术筛选知母的有效成份 生物大分子相互作用新方法例 抗凝血药物筛选 2019 12 27 体外评价方法 体外评价方法生化实验方法例 抗氧化活性 抗凝血 细胞培养方法例 抗肿瘤活性 免疫活性 离体器官法例 抗血栓活性 药物对心脏活动的影响 特点简便 敏感性高 用药量少 成本低 间接 2019 12 27 动物 体内评价程序 一般动物法动物模型法 2019 12 27 动物 体内评价方法 实验动物小白鼠 mouse 大白鼠 rat 豚鼠 cavy 蛙或蟾蜍 frogortoad 家兔 rabbit 狗 dog 2019 12 27 动物 体内评价方法 实验动物的选取种类鼠 兔 猫 狗 选择敏感动物 例催吐 性别 年龄 纯种新生鼠缺乏许多酶系统 分组随机原则实验组 对照组 空白 阳性 重复实验动物标记 染色法 苦味酸 中性红 耳孔法 烙印法 挂牌法等标记编号方式 2019 12 27 动物 体内评价方法 动物模型的确立正常动物麻醉动物病症动物模型确定剂量剂量折算剂量范围 2019 12 27 动物 体内评价方法 给药 administration 灌胃给药 intragastricinjection i g 腹腔注射 intraperitonealinjection i p 肌肉注射 intramuscularinjection i m 静脉给药 intravenousinjection i v 皮下注射 subcutaneousinjection s c 2019 12 27 动物 体内评价方法 麻醉 anesthesia 局部麻醉 localanesthesia 例 以0 5 2 普鲁卡因 procaine 给兔颈部皮下作浸润麻醉 全身麻醉 generalanesthesia 吸入麻醉 inhalationanesthesia 注射麻醉 injectionanesthesia 2019 12 27 动物 体内评价方法 采血尾尖取血眶动脉和眶静脉取血 摘眼球 球后静脉丛 post glomusvenousplexus 取血心脏取血断头取血处死 2019 12 27 动物 体内评价方法 研究内容时效性量效性数据分析显著性分析 2019 12 27 动物实验技能的视频 动物实验http myweb polyu edu hk bcmybio bio abct bio html细胞培养http www polyu edu hk abct teaching php 点击physiologyonline 点击excelwithlaboratoryedge 选择tissueculture 2019 12 27 生物活性评价新方法 生物大分子相互作用法原理 生物大分子与靶蛋白特异结合而产生生物活性 通过一种基于表面等离子共振技术的生物传感免疫分析系统 bia 系统对生物大分子与靶蛋白结合动力学过程的描述 表征生物大分子的活性大小 实现对生物大分子活性的在线监测 特点 直接 快速应用 药物筛选建立以受体 酶为作用靶的分子水平的药物筛选系统 2019 12 27 生物活性评价新方法 基因组法生物活性评价新方法1 基因的选择与实验设计根据表达谱数据库选择5000 10000个与发育及疾病相关的基因 2 细胞的培养与药物刺激根据目的药物及表达谱数据库种细胞表达谱选择适当的细胞系 用适当计量的药物加入液中 不同的时间取样 抽提刺激前后的mrna 3 大白鼠饲养与药物刺激用常规方法饲养大白鼠 用适当计量的药物喂养大白鼠 不同的时间取大白鼠的适当器官 根据所筛选的药物而定 抽提刺激前后的mrna 4 刺激前后的mrna的制备即标记5 杂交及扫描6 数据分析及学分析用表达谱数据库及配套软件分析受药物诱导的基因 针对这些基因的功能确定药物的疗效 2019 12 27 参考文献 aboodr r pharmacypracticeandthelaw gaithersburg md aspen 1994 kayseroliver pharmaceuticalbiotechnology drugdiscoveryandclinicalapplications johnwiley c2004 2019 12 27 应用实例 多糖促进睡眠功能的动物实验方案 2019 12 27 直接睡眠实验 实验动物成年小鼠 性别单一 18 22g 每组12只 剂量分组及