恩度科室演讲幻灯.ppt

抗血管生成治疗及恩度 先声药业抗肿瘤药事业部市场部2006年 Folkman J Tumorangiogenesis therapeuticimplication N Engl J Med 1971 285 1182 1186 肿瘤血管生成理论 JudahFolkman教授肿瘤血管生成理论之父波士顿儿童医院医疗中心外科研究室主任美国国家艺术和科学院以及国家科学院 NAS 院士 抗血管生成疗法 示意图 细胞癌变 小肿瘤 肿瘤生长 分泌生长因子 诱发新生血管 新生血管向肿瘤供养 癌细胞通过血管扩散 肿瘤休眠 血管 阻断新生血管 血管 血管 2003年度世界十大科技突破 引自美国 科学 杂志 血管生成的双向调节机制 目前的研究表明 机体对血管生成调控遵循双向调节的普遍规律 血管生成是受血管生成促进因子和血管生成抑制因子共同调节的 AngiostatinEndostatinThrombospondin 1 VEGFbFGFPDGF 内源性促 抗血管生成因子 StimulatorsInhibitors VEGFbFGFPIGFPDGFTGF a bTNF aIL 8HGFAngiogeninIL 3ProliferinLeptinG CSF Interferonsa bAngiostatinEndostatinVasostatinCanstatinTumstatinPlateletfactor 4Thrombospodin 1IL 1216kDprolactinfragmentIL 18IP 1053kDantithrombinIII 抗血管生成治疗的策略 通过抑制促进因子的表达或者外援性补充抑制因子等方法改变血管生成促进因子和抑制因子之间的相对平衡 来阻断血管生成 直接针对各种血管生长因子抗体或药物 针对生长因子受体的药物 阻断细胞内的信号传导通路 针对血管内皮细胞的药物 抑制内皮细胞的增值和迁移 基质金属蛋白酶抑制剂 阻止基底膜以及细胞外基质的降解 其他 比如抗粘附分子抗体抗整合素 v 3等 抗血管生成治疗目前已经成为肿瘤治疗中最引人瞩目的热点领域之一 经过近30年的探索 近年来已经有几十种新生血管抑制剂药物进入I II III期临床研究 其中最引人注目的便是目前发现的最广谱的血管生成抑制剂Endostatin ES 肿瘤血管生成理论 内皮抑素Endostatin的发现 O reillyMS etal Cell1997 88 277 285 内皮抑素Endostatin的发现 内皮抑素ES最初是从鼠的成血管细胞瘤株培养液中分离提纯得到的一种在动物体内天然存在的蛋白 内皮抑素ES是由细胞外基质成分胶原 的羧基末端水解而来 含有184个氨基酸 分子量为20KD 试验研究发现内皮抑素ES具有强烈抑制血管生成的作用 O reillyMS etal Cell1997 88 277 285 内皮抑素Endostatin的抑瘤试验 内皮抑素Endostatin的抑瘤试验 O reillyMS etal Cell1997 88 277 285 BoehmT etal Nature1997 390 404 407 内皮抑素的作用机理 一 Endostatin能作用于VEGF的受体KDR Flk 1 阻止VEGF与内皮细胞结合 直接阻断VEGF的作用 KimYM etal JBC 2002 277 31 27872 27879 干扰血管生成因子的作用 与bFGF竞争结合 干扰其信号传导通路 下调VEGFmRNA和蛋白表达 直接阻断VEGF受体的信号转导 从而抑制VEGF介导的内皮细胞迁移和血管生成 内皮抑素的作用机理 一 HajitouA etal FASEBJ 2002 16 13 1802 1804 UrbichC etal FASEBJ 2002 16 7 706 708 基质金属蛋白酶MMP 2在血管生成中发挥重要作用 Endostatin能结合MMP 2的催化活性区 阻断其作用 LeeSJ etal FEBSletters 2002 147 152 内皮抑素的作用机理 二 Endostatin能结合于Tropomyosin 破坏微丝的完整性 抑制内皮细胞的迁移 诱导其凋亡 发挥抗肿瘤作用 MacDonaldNJ etal JBC 2001 276 27 25190 25196 内皮抑素的作用机理 三 Endostatin能抑制Wnt信号通路 促进b catenin的降解 抑制内皮细胞移动 导致内皮细胞停滞在G1期 减少内皮细胞在S期的比例引起细胞周期停滞 HanaiJI etal JCB 2002 158 3 529 539 内皮抑素的作用机理 四 对内皮细胞凋亡的影响 ES的促内皮细胞凋亡作用可能与诱导酪氨酸激酶活性 抑制bcl 2 bcl xl和bad表达有关 而没有改变bax p53 cdc 5A p38MAPK的基因表达 ES还能破坏微丝的完整性抑制内皮细胞的运动 诱导内皮细胞凋亡 最终抑制肿瘤的生长 内皮抑素的作用机理 五 ShichiriM etal FASEBJ 2001 15 6 1044 1053 DixeliusJ etal Blood 2000 95 11 3403 3411 FolkmanJ ExperimentalCellResearch 2005 内皮抑素的作用机理 六 Endostatin能下调体内的促血管生成因子 上调体内的血管生成抑制因子 通过改变血管生成调节因子的平衡关系 发挥抗血管生成作用 内皮抑素的作用机理 六 FolkmanJ ExperimentalCellResearch 2005 Endostatininhibits65differenttumortypesandmodifies12 ofthehumangenometodownregulatepathologicalangiogenesiswithoutside effects 抑制65种肿瘤生长 影响占人类基因组12 的与血管生成相关的基因发挥抗血管生成作用 Inhumans endostatinhasvirtuallynotoxicityandhasrevealednoresistanceevenwhenithasbeenadministeredtopatientseverydayforupto 3 5yearswithoutinterruption 国外有患者连续应用endostatin超过3 5年 Endostatin therefore representsamodelofabroadspectrumangiogenesisinhibitorthatinthefuturecouldbeaplatformanti canceragentforcoadministrationwithothertherapies 内皮抑素的作用机理 六 FolkmanJ ExperimentalCellResearch 2005 Endostatin缺失的小鼠体内肿瘤生长速度加快2 3倍 而Endostatin表达水平高1 6倍的小鼠体内肿瘤生长速度相对于正常小鼠减慢3倍 SundM etal PNAS 2005 102 8 2934 2939 内皮抑素的基因敲除试验 内皮抑素与Downsyndrome DownSyndrome DS 又叫21三体综合症 患者具有3条21号染色体 最主要的特点是智力障碍 Endostatin的基因位于21号染色体上 因此 DS患者血中Endostatin水平较正常升高1 3 一个有趣的现象是这类患者中的实体瘤发病率明显较正常人低 ZorickT etal EuropeanJournalofHumanGenetics 2001 9 811 814 国家一类生物新药恩度TM ENDOSTAR 产品一般信息 通用名 重组人血管内皮抑制素注射液注册商标 恩度TMEndostarTM英文名 RecombinantHumanEndostatinInjection类别 生物制品一类新药规格 15mg 3ml 支 2 4 105u 支 代号 YH 16 恩度TM样品 恩度TM Endostar 恩度TM不是单纯的Endostatin 是在ES母体上创造性的添加了9个氨基酸的新型Endostatin 不仅使ES稳定性提高 半衰期延长 而且生物活性增加 恩度TM是纯度大于99 9 高纯生物制剂 恩度TM是人源化蛋白 不会诱导自身抗体产生 恩度TM的蛋白非常稳定 可以室温放置一年仍然保持活性 而国外的同类产品需要 80 冷冻保存 包含体电镜照片 高效表达的蛋白在大肠杆菌内形成大量无活性包含体 超过99 的Endostatin不能复性 Endostatin复性是一个世界性难题 复性 结构不规则 无生物活性 特定三维结构 有生物活性 什么是蛋白质复性 恩度与Endostatin的比较 恩度TM与国外同类产品的质量比较 YH 16样品 中国 高压液相色谱法 纯度比较 恩度TM的纯度远高于国外Endostatin样品 这也是恩度的剂量只有国外十分之一左右的原因 EntreMed公司样品 美国 恩度的活性分析 鸡胚血管生成抑制试验 对照组 恩度组 恩度的活性分析 体外迁移试验 对照组 恩度组 863计划重大科技专项资助 恩度TM临床试验研究 中国医学科学院肿瘤医院内科孙燕院士 恩度TM国内临床试验 2001年7月 2002年3月恩度TMI期临床试验2002年3月 2003年3月恩度TMII期临床试验2003年4月 2004年7月恩度TMIII期临床试验 药代动力学 正常人t1 2为10 小时 全身清除率为2 8L h m2 正常小鼠静脉给药后肾 肺和肝中的浓度高于血浆 肌肉 脂肪和脑浓度最低 主要经肾排泄 荷瘤小鼠静脉注射本品后全身分布与正常小鼠相近 肿瘤组织中分布不高 中国医学科学院肿瘤医院辽宁省肿瘤医院广西医科大学肿瘤医院浙江省肿瘤医院天津医科大学肿瘤医院北京胸部肿瘤医院四川大学华西医院中山大学肿瘤医院天津第二中心医院福建省肿瘤医院第三军医大学新桥医院第三军医大学西南医院 安徽省肿瘤医院福建医学大学协和医院军事医学科学院附属医院西安交通大学第一医院第四军医大学西京医院上海长征医院河南省肿瘤医院河北省肿瘤医院福建医科大学第一附属医院山东大学齐鲁医院山东省肿瘤医院天津市胸科医院 期临床试验参加医院 24家 SunY WangJW LiuYetal ResultsofphaseIIItrialofrh endostatin YH 16 inadvancednon smalllungcancer NSCLC patients ProcASCO2005 23 7138a王金万 孙燕 刘永煜 等 重组人血管内皮抑素联合NP方案治疗晚期NSCLC随机 双盲 对照 多中心III期临床研究 中国肺癌杂志 2005 8 283 290 期临床试验发表论文 研究目的 主要目的 RR CBR TTP 生存期次要目的 QOL 临床症状缓解率 药物的安全性研究设计 随机 双盲 安慰剂平行对照 多中心临床试验质控措施 设立独立疗效评价委员会高频度 高质量的临床监查 III期临床试验 期临床试验设计 NSCLC初治或复治493例PS0 2 期 NVB25mg m2 NVB25mg m2 YH 167 5mg m2 NS250mlIVgtt d1 d2 3 4 d5 d1 14 d21 随机分组 NVB25mg m2 CDDP30mg m2 NVB25mg m2 d21 d1 d2 3 4 d5 安慰剂 NS3 5ml NS250mlIVgtt 全国24个中心 随机 双盲 安慰剂平行对照 多中心临床试验初治 复治 2 1试验组 对照组 2 1 CDDP30mg m2 d1 14 期临床试验 表7 两组患者的疗效比较 两组患者生存Kaplan Meier曲线 试验组中位生存期延长了5个月 14 9月VS9 9月 延长5 0月 P 0 0001 1年生存率提高31 29 P 0 0001 期临床试验 表8 两组患者的不良反应比较 n 493 注 两组不良反应发生率比较无明显差异 总结 恩度与NP联合具有协同作用 能显著延长患者肿瘤缓解及生存时间 恩度不增加化疗的不良反应 在获得临床受益的患者中大多数能伴随肿瘤缓解提高生活质量 例如 缓解肿瘤引起的咳嗽 咯血 疼痛等 患者生存与恩度使用周期相关 临床可推荐患者尽早使用恩度 且在能耐受的情况下尽可能延长使用时间 总结 恩度与化疗联合是一安全 有效的晚期NSCLC治疗方案 也是化疗与抗肿瘤血管生成靶向治疗药物联合应用的成功典范 不仅提高了疗效 而且显著提高了患者生存率 具有令人鼓舞的临床应用前景 恩度TM国外报道 一 NatureBiotechnology 2006 24 2 117 118 JudahFolkman whoisfamiliarwithEndostatin sinceitwasdiscoveredinhislaboratoryattheChildren sHospitalinBostonsays Medgenn hasimprovedonthefunctionofendostatin Hecitestestsinhislaboratorythatshowendostarisatleasttwiceaspotentasendostatininanimaltumormodels Folkman教授证实 恩度在动物试验上的抑瘤效果至少是Endostatin的两倍 NatureBiotechnology 2006 24 2 117 118 恩度TM国外报道 一 恩度TM国外报道 二 ThedevelopmentsinChinarepresentaveryimportantadvance saysFolkman MostoftheangiogenesisinhibitorscurrentlyapprovedintheU S andin28othercountries blockasingleangiogenicfactorproducedbytumors suchasAvastin sblockageofvascularendothelialgrowthfactor VEGF TheChinesehavetakenthenextstep makingavailableabroad spectrumangiogenesisinhibitorthatsuppressesblood vesselgrowthstimulatedby