高一生物下学期 4.1.1DNA的粗提取课件 苏教版.ppt_第1页
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文档简介

dna的粗提取 1 实验原理 1 dna在nacl溶液中的溶解度伴随nacl溶液浓度的变化而改变 当nacl溶液的物质的量浓度为0 14mol l时 dna的溶解度最低 通过改变nacl溶液浓度 可使溶解在nacl溶液中的dna分离出来 2 dna不溶于酒精溶液 但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液 根据这一原理 可以进一步提取出含杂质较少的dna 2 实验步骤 3 实验中应注意的问题 1 获取较多dna的关键是向鸡血细胞液中加入足量的蒸馏水 以便使细胞膜和核膜破裂 核内物质释放出来 2 在dna粗提取实验中两次搅拌为什么要朝同一方向 如果搅拌的方向很乱 就把彼此靠近的dna絮片打破了 这样不能聚合起来形成沉淀物 搅拌的方向具有一致性 这样形成物理学中所谓的一个方向相同的作用力 在这个作用力的作用下 有利于物质的聚集 3 在实验步骤2和4中都需要加入蒸馏水 两次加入蒸馏水的作用相同吗 为什么 步骤2中加水是为了使血细胞吸水涨破 步骤4中加水是为了稀释nacl溶液 因为将蛋白质和dna分离后 在较高浓度的nacl溶液中 染色质或染色体中的蛋白质容易解聚 这样dna就游离出来 向含有dna的浓度较高的nacl溶液中加入大量蒸馏水 稀释nacl溶液 dna的溶解度会下降 当nacl溶液的物质的量浓度为0 14mol l时 溶解度最低 从而析出dna 1 做dna的粗提取和鉴定实验时 实验材料用鸡血而不用猪血的原因是 a 鸡血的价格比猪血的价格低b 猪的红细胞没有细胞核 不易提取到dnac 鸡血不凝固 猪血会凝固d 用鸡血提取dna比用猪血提取操作简便 解析 这是对dna的提取实验的考查 解题关键是知道哺乳动物成熟的红细胞中没有细胞核 在动物血液中的红细胞一般都是成熟的红细胞 dna主要存在于细胞核中 因此 如果用猪血做实验 则不能提取到dna 实验中一般用鸡血 这是因为鸡属于鸟类 血液中的红细胞数量较多 并且其红细胞中有细胞核 因此可以提取较多的dna 答案 b 2 下表关于dna粗提取与鉴定实验中所使用的材料 操作及其作用的表述正确的是 多选 解析 在dna的粗提取实验中 对鸡血处理时 加入柠檬酸钠的目的是防止血液凝固 在较高浓度的含dna的nacl溶液中加入蒸馏水的作用是稀释nacl溶液 降低其浓度 从而使dna从溶液中析出 答案 ac 3 下列关于实验中丝状物的叙述 正确的是 a 该丝状物是细胞中的染色体b 该丝状物能溶解于nacl溶液c 该丝状物能与玻璃器皿发生化学反应d 该丝状物的主要成分易溶解于酒精 解析 在该实验中 析出的丝状物主要成分是dna dna溶解于nacl溶液 其溶解度随着nacl浓度的变化而改变 当nacl的物质的量浓度为0 14mol l时 dna的溶解度最低 dna不溶于酒精溶液 但其他有机物质可以溶于酒精 利用这一原理 可以提纯dna 玻璃表面带电荷 dna中的磷酸基也带电荷 因此dna可吸附于玻璃器皿表面 但不是发生化学反应 答案 b 4 在dna的粗提取实验过程中 先后两次向烧杯中加入蒸馏水的作用分别是 a 稀释血液 冲洗样品b 使血细胞破裂 降低nacl浓度使dna析出c 使血细胞破裂 增大dna溶解量d 使血细胞破裂 提取含杂质较少的dna答案 b 5 2010 枣庄模拟 在dna析出过程中加入冷酒精的目的是 a 溶解dnab 除去dna中所有杂质c 析出dnad 稀释溶液降低浓度解析 dna不溶于酒精 但是细胞中的其他有机物质可以溶于酒精 根据这一原理 加入酒精 使dna析出 可以进一步提取含杂质较少的dna 答案 c 6 下图为 dna的粗提取与鉴定 实验装置 1 实验材料选用鸡血细胞液 而不用鸡全血 主要原因是鸡血细胞液中有较高含量的 2 在图a所示的实验步骤中加蒸馏水的目的是 通过图b所示的步骤取得滤液 再在溶液中加入2mol l的nacl溶液的目的是 图c所示实验步骤中加蒸馏水的目的是 3 为鉴定实验所得丝状物的主要成分是dna 可滴加 溶液 结果在水浴加热的条件下发生溶液变蓝的现象 解析 图a b c所示为本实验的三个关键步骤 图a通过添加蒸馏水 血细胞与蒸馏水相混合而使血细胞处于极度低渗的环境之中 细胞因大量吸水而导致最终破裂 并释放出胞内物 图b通过纱布过滤使血细胞释放出的dna滤入收集的滤液中 将大量胶状物滤出 再在滤液中加入2mol l的nacl溶液使dna的溶解度增加 dna在不同浓度的nacl溶液中溶解度不同 如在0 14mol l的nacl溶液中溶解度只有水中的1 而在1mol l的nacl溶液中的溶解度为水中的2倍 即使dna溶于nacl溶液 图c在dna浓盐溶液中加入蒸馏水 大量 可使溶液的nacl浓度降至较低 由于dna在较低浓度的nacl溶液中溶解度很低 在0 14mol l的nacl溶液中溶解度最低 浓度再变小则dna溶解度将增大 使dna低渗析出 经过滤等手段可以收集到dna dna与二苯胺反应溶液变蓝 可作为dna鉴定的方法 答案 1 dna 2 使血细胞破裂使滤液中的dna溶于浓nacl溶液使dna析出 3 二苯胺 7 萝卜贮藏根组织细胞中是否存在蛋白质和dna 某生物小组对此进行研究 他们从网上查阅资料得知 蛋白质在10 的nacl溶液中可沉淀析出 在蛋白质溶液中 加入双缩脲试剂 溶液呈现特有的颜色 dna溶于10 的nacl溶液 但在95 的酒精中呈白色絮状沉淀析出 实验材料 白萝卜 实验用具 粉碎机 烧杯 漏斗 试管 滤纸 玻璃棒 镊子 载玻片 天平 纱布 药品及试剂 蒸馏水 nacl 95 的酒精 甲基绿染液 双缩脲试剂 蛋白质标准样品 请你根据所提供的条件参与实验设计并完成实验 1 材料处理 2 提取 3 鉴定及结果 4 讨论 蛋白质在萝卜贮藏根组织细胞中所起的作用是 dna主要来自萝卜贮藏根组织细胞的 解析 此题考查蛋白质 dna的提取和鉴定 蛋白质在10 的nacl溶液中可沉淀析出 将白萝卜粉碎后的滤液用10 的nacl溶液处理 得到的沉淀用于蛋白质的鉴定 蛋白质与双缩脲试剂作用产生紫色反应 向除去蛋白质的滤液中加入95 的酒精 可使dna析出 dna遇甲基绿染液呈现蓝绿色 答案 1 材料处理 称取50g白萝卜洗净切块 加水30ml 用粉碎机粉碎 将匀浆经纱布过滤 2 提取 向经纱布过滤得到的滤液中加入10 的nacl溶液 直至有沉淀析出 经滤纸过滤 将滤纸上的沉淀物放入试管中 加入1ml蒸馏水 振荡 用于蛋白质鉴定 在除去蛋白质的滤液中 加入95 的酒精 用玻璃棒轻轻搅拌 见有白色絮状沉淀产生 经滤纸过滤 用镊子将滤纸上的絮状沉淀置于载玻片上 用于dna鉴定 3 鉴定及结果 在用于蛋白质鉴定的实验试管中 加入双缩脲试剂 产生紫色反应 同时将蛋白质标准样品和1ml蒸馏水放入另一试管中 加入双缩脲试剂产生紫色反应 观察到两试

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