高中生物 6.2基因工程及其应用课件3.ppt

基因工程的基本操作程序 基因工程的基本操作程序 获取目的基因 第一步 基因工程的基本操作程序 获取目的基因 构建表达载体 第一步 第二步 基因工程的基本操作程序 获取目的基因 构建表达载体 导入受体细胞 第一步 第二步 第三步 基因工程的基本操作程序 获取目的基因 构建表达载体 导入受体细胞 目的基因检测与鉴定 第一步 第二步 第三步 第四步 原核细胞的基因结构 补充内容 原核细胞的基因结构 补充内容 原核细胞的基因结构 补充内容 原核细胞的基因结构 补充内容 编码区 原核细胞的基因结构 补充内容 编码区 原核细胞的基因结构 补充内容 非编码区 非编码区 编码区 原核细胞的基因结构 补充内容 非编码区 非编码区 编码区 编码区上游 原核细胞的基因结构 补充内容 非编码区 非编码区 编码区 编码区上游 编码区下游 原核细胞的基因结构 补充内容 非编码区 非编码区 编码区 编码区上游 编码区下游 原核细胞的基因结构 补充内容 非编码区 非编码区 编码区 编码区上游 编码区下游 启动子 原核细胞的基因结构 补充内容 非编码区 非编码区 编码区 编码区上游 编码区下游 启动子 与rna聚合酶结合位点 原核细胞的基因结构 补充内容 非编码区 非编码区 编码区 编码区上游 编码区下游 启动子 终止子 与rna聚合酶结合位点 原核细胞的基因结构 补充内容 非编码区 非编码区 编码区 编码区上游 编码区下游 启动子 终止子 原核细胞基因结构 与rna聚合酶结合位点 原核细胞的基因结构 补充内容 非编码区 非编码区 编码区 编码区上游 编码区下游 启动子 终止子 原核细胞基因结构 与rna聚合酶结合位点 原核细胞的基因结构 补充内容 非编码区 非编码区 编码区 编码区上游 编码区下游 启动子 终止子 编码区 原核细胞基因结构 与rna聚合酶结合位点 原核细胞的基因结构 补充内容 非编码区 非编码区 编码区 编码区上游 编码区下游 启动子 终止子 编码区 非编码区 原核细胞基因结构 与rna聚合酶结合位点 原核细胞的基因结构 补充内容 非编码区 非编码区 编码区 编码区上游 编码区下游 启动子 终止子 编码蛋白质 连续不间断 编码区 非编码区 原核细胞基因结构 与rna聚合酶结合位点 原核细胞的基因结构 补充内容 非编码区 非编码区 编码区 编码区上游 编码区下游 启动子 终止子 编码蛋白质 连续不间断 编码区 非编码区 原核细胞基因结构 与rna聚合酶结合位点 原核细胞的基因结构 补充内容 非编码区 非编码区 编码区 编码区上游 编码区下游 启动子 终止子 不编码蛋白质 编码蛋白质 连续不间断 编码区 非编码区 原核细胞基因结构 与rna聚合酶结合位点 原核细胞的基因结构 补充内容 非编码区 非编码区 编码区 编码区上游 编码区下游 启动子 终止子 不编码蛋白质 编码蛋白质 连续不间断 编码区 非编码区 原核细胞基因结构 调控遗传信息表达 上游有启动子 下游有终止子 与rna聚合酶结合位点 原核细胞的基因结构 补充内容 真核细胞的基因结构 补充内容 编码区上游 编码区下游 与rna聚合酶结合位点 启动子 终止子 非编码区 真核细胞基因结构 非编码区 非编码区 编码区 编码区 真核细胞的基因结构 补充内容 编码区上游 编码区下游 与rna聚合酶结合位点 启动子 终止子 非编码区 真核细胞基因结构 内含子 外显子 非编码区 非编码区 编码区 编码区 真核细胞的基因结构 补充内容 编码区上游 编码区下游 与rna聚合酶结合位点 启动子 终止子 非编码区 真核细胞基因结构 内含子 外显子 外显子 能编码蛋白质的序列内含子 不能编码蛋白质的序列 非编码区 非编码区 编码区 编码区 真核细胞的基因结构 补充内容 编码区上游 编码区下游 与rna聚合酶结合位点 启动子 终止子 不编码蛋白质 非编码区 真核细胞基因结构 内含子 外显子 外显子 能编码蛋白质的序列内含子 不能编码蛋白质的序列 非编码区 非编码区 编码区 编码区 真核细胞的基因结构 补充内容 编码区上游 编码区下游 与rna聚合酶结合位点 启动子 终止子 不编码蛋白质 非编码区 真核细胞基因结构 调控遗传信息表达 上游有启动子 下游有终止子 内含子 外显子 外显子 能编码蛋白质的序列内含子 不能编码蛋白质的序列 非编码区 非编码区 编码区 编码区 一 目的基因的获取 一 目的基因的获取 一 从基因文库中获取目的基因 一 目的基因的获取 一 从基因文库中获取目的基因 将含有某种生物不同基因的许多片段 导入受体菌的群体中储存 各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因 称为基因文库 一 目的基因的获取 一 从基因文库中获取目的基因 1 基因组文库 将含有某种生物不同基因的许多片段 导入受体菌的群体中储存 各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因 称为基因文库 2 部分基因文库 一 目的基因的获取 一 从基因文库中获取目的基因 1 基因组文库 将含有某种生物不同基因的许多片段 导入受体菌的群体中储存 各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因 称为基因文库 受体菌包含了某种生物所有的基因 该受体菌群体称为这种生物的基因组文库 2 部分基因文库 一 目的基因的获取 一 从基因文库中获取目的基因 1 基因组文库 将含有某种生物不同基因的许多片段 导入受体菌的群体中储存 各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因 称为基因文库 受体菌包含了某种生物所有的基因 该受体菌群体称为这种生物的基因组文库 2 部分基因文库 受体菌包含了一种生物部分基因 该受体菌群体称为这种生物的部分基因文库 如cdna文库 3 基因文库的构建 3 基因文库的构建 1 基因组文库的构建 3 基因文库的构建 1 基因组文库的构建 提取某生物全部dna 3 基因文库的构建 1 基因组文库的构建 提取某生物全部dna 用适当限制酶切割 3 基因文库的构建 1 基因组文库的构建 提取某生物全部dna 用适当限制酶切割 许多dna片段 每个受体菌含有一段不同的dna片段 3 基因文库的构建 1 基因组文库的构建 提取某生物全部dna 用适当限制酶切割 许多dna片段 与载体连接导入受体菌群 每个受体菌含有一段不同的dna片段 3 基因文库的构建 1 基因组文库的构建 提取某生物全部dna 用适当限制酶切割 许多dna片段 与载体连接导入受体菌群 该生物基因组文库 每个受体菌含有一段不同的dna片段 3 基因文库的构建 1 基因组文库的构建 提取某生物全部dna 用适当限制酶切割 许多dna片段 与载体连接导入受体菌群 该生物基因组文库 每个受体菌含有一段不同的dna片段 2 cdna文库的构建 mrna反转录形成 3 基因文库的构建 1 基因组文库的构建 提取某生物全部dna 用适当限制酶切割 许多dna片段 与载体连接导入受体菌群 该生物基因组文库 每个受体菌含有一段不同的dna片段 2 cdna文库的构建 mrna反转录形成 mrna 3 基因文库的构建 1 基因组文库的构建 提取某生物全部dna 用适当限制酶切割 许多dna片段 与载体连接导入受体菌群 该生物基因组文库 每个受体菌含有一段不同的dna片段 2 cdna文库的构建 mrna反转录形成 mrna 逆转录酶 3 基因文库的构建 1 基因组文库的构建 提取某生物全部dna 用适当限制酶切割 许多dna片段 与载体连接导入受体菌群 该生物基因组文库 每个受体菌含有一段不同的dna片段 2 cdna文库的构建 mrna反转录形成 mrna 逆转录酶 杂交双链 3 基因文库的构建 1 基因组文库的构建 提取某生物全部dna 用适当限制酶切割 许多dna片段 与载体连接导入受体菌群 该生物基因组文库 每个受体菌含有一段不同的dna片段 2 cdna文库的构建 mrna反转录形成 mrna 逆转录酶 杂交双链 核酸酶h 3 基因文库的构建 1 基因组文库的构建 提取某生物全部dna 用适当限制酶切割 许多dna片段 与载体连接导入受体菌群 该生物基因组文库 每个受体菌含有一段不同的dna片段 2 cdna文库的构建 mrna反转录形成 mrna 逆转录酶 杂交双链 核酸酶h 单链dna 3 基因文库的构建 1 基因组文库的构建 提取某生物全部dna 用适当限制酶切割 许多dna片段 与载体连接导入受体菌群 该生物基因组文库 每个受体菌含有一段不同的dna片段 2 cdna文库的构建 mrna反转录形成 mrna 逆转录酶 杂交双链 核酸酶h 单链dna dna聚合酶 3 基因文库的构建 1 基因组文库的构建 提取某生物全部dna 用适当限制酶切割 许多dna片段 与载体连接导入受体菌群 该生物基因组文库 每个受体菌含有一段不同的dna片段 2 cdna文库的构建 mrna反转录形成 mrna 逆转录酶 杂交双链 核酸酶h 单链dna dna聚合酶 双链dna 3 基因文库的构建 1 基因组文库的构建 提取某生物全部dna 用适当限制酶切割 许多dna片段 与载体连接导入受体菌群 该生物基因组文库 每个受体菌含有一段不同的dna片段 2 cdna文库的构建 mrna反转录形成 mrna 逆转录酶 杂交双链 核酸酶h 单链dna dna聚合酶 双链dna 与载体连接导入受体菌群 3 基因文库的构建 1 基因组文库的构建 提取某生物全部dna 用适当限制酶切割 许多dna片段 与载体连接导入受体菌群 该生物基因组文库 每个受体菌含有一段不同的dna片段 2 cdna文库的构建 mrna反转录形成 mrna 逆转录酶 杂交双链 核酸酶h 单链dna dna聚合酶 双链dna 与载体连接导入受体菌群 该生物cdna文库 基因组文库 基因组dna文库与cdna文库的比较 cdna文库 4 如何从基因文库中得到所需要的基因 4 如何从基因文库中得到所需要的基因 依据 目的基因的有关信息 如 根据 基因的核苷酸序列基因的功能基因在染色体上的位置基因的转录产物mrna基因翻译产物蛋白质等特性 二 利用pcr技术扩增目的基因 二 利用pcr技术扩增目的基因 1 原理 二 利用pcr技术扩增目的基因 1 原理 pcr是聚合酶链式反应 polymerasechainreaction 它是利用dna双链复制的原理 将基因的核苷酸序列不断的加以复制 使其数量呈指数方式增加 因为整个过程是在体外进行 所以又叫做体外dna扩增技术 2 过程 2 过程 2 过程 高温变性 90 95 2 过程 高温变性 90 95 低温退火 55 60 2 过程 高温变性 90 95 低温退火 55 60 中温延伸 70 75 2 过程 高温变性 90 95 低温退火 55 60 中温延伸 70 75 多次重复 2 过程 高温变性 90 95 低温退火 55 60 中温延伸 70 75 多次重复 3 特点 指数形式扩增 2 过程 高温变性 90 95 低温退火 55 60 中温延伸 70 75 双链dna是在高温条件下解链为单链dna的 因此整个过程不需要解旋酶 多次重复 3 特点 指数形式扩增 三 通过dna合成仪直接合成目的基因 三 通过dna合成仪直接合成目的基因 当基因比较小 蛋白质的氨基酸序列可以测得或核苷酸序列已知时 可采用此种方法 三 通过dna合成仪直接合成目的基因 蛋白质的氨基酸顺序 当基因比较小 蛋白质的氨基酸序列可以测得或核苷酸序列已知时 可采用此种方法 三 通过dna合成仪直接合成目的基因 蛋白质的氨基酸顺序 推测 当基因比较小 蛋白质的氨基酸序列可以测得或核苷酸序列已知时 可采用此种方法 三 通过dna合成仪直接合成目的基因 蛋白质的氨基酸顺序 mran核苷酸序列 推测 当基因比较小 蛋白质的氨基酸序列可以测得或核苷酸序列已知时 可采用此种方法 三 通过dna合成仪直接合成目的基因 蛋白质的氨基酸顺序 mran核苷酸序列 推测 推测 当基因比较小 蛋白质的氨基酸序列可以测得或核苷酸序列已知时 可采用此种方法 三 通过dna合成仪直接合成目的基因 蛋白质的氨基酸顺序 mran核苷酸序列 基因dna的核苷酸序列 推测 推测 当基因比较小 蛋白质的氨基酸序列可以测得或核苷酸序列已知时 可采用此种方法 三 通过dna合成仪直接合成目的基因 蛋白质的氨基酸顺序 mran核苷酸序列 基因dna的核苷酸序列 推测 推测 合成 当基因比较小 蛋白质的氨基酸序列可以测得或核苷酸序列已知时 可采用此种方法 三 通过dna合成仪直接合成目的基因 蛋白质的氨基酸顺序 mran核苷酸序列 基因dna的核苷酸序列 目的基因 推测 推测 合成 当基因比较小 蛋白质的氨基酸序列可以测得或核苷酸序列已知时 可采用此种方法 三 通过dna合成仪直接合成目的基因 dna合成仪 蛋白质的氨基酸顺序 mran核苷酸序列 基因dna的核苷酸序列 目的基因 推测 推测 合成 当基因比较小 蛋白质的氨基酸序列可以测得或核苷酸序列已知时 可采用此种方法 目的基因提取的方法的比较 目的基因提取的方法的比较 操作简便广泛使用 目的基因提取的方法的比较 操作简便广泛使用 工作量大 盲目 分离出来的有时并非一个基因 目的基因提取的方法的比较 操作简便广泛使用 工作量大 盲目 分离出来的有时并非一个基因 专一性强 目的基因提取的方法的比较 操作简便广泛使用 工作量大 盲目 分离出来的有时并非一个基因 专一性强 操作过程麻烦 mrna很不稳定 要求的技术条件较高 目的基因提取的方法的比较 操作简便广泛使用 工作量大 盲目 分离出来的有时并非一个基因 专一性强 操作过程麻烦 mrna很不稳定 要求的技术条