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免疫学检查 Immunologictest 陕西中医学院诊断学教研室 1 一 检查内容 1 评估机体的免疫功能状态2 检测与自身免疫病相关的抗体或致敏T细胞3 检测与过敏性疾病相关的变应原或IgE抗体4 检测某些致病微生物的抗原或抗体5 检测某些肿瘤抗原 激素含量 2 二 常用的免疫检查方法 1 沉淀试验2 凝集试验3 补体结合试验4 中和试验5 荧光免疫技术6 酶免疫技术7 放射免疫技术8 发光免疫技术9 时间分辨荧光免疫技术10 流式细胞仪分析技术11 分子生物学分析技术 3 三 机体免疫功能检查 一 非特异性免疫功能测定1 血清蛋白区带电泳 白蛋白 1 2球蛋白 1 2球蛋白 球蛋白血清蛋白区带电泳示意图谱 4 2 外周血中性粒细胞计数 趋化 吞噬 杀菌功能测定 趋化功能降低 易反复感染 齿龈炎 中耳炎 Chediak Higashi综合征 迟钝性白细胞综合征 有肌蛋白功能不全 高于IgE综合征等 吞噬功能降低 中性粒功能异常综合征 补体所致调理缺陷症 膜糖蛋白缺陷症 慢性肉芽肿 肌动蛋白功能不全等 杀菌功能降低 慢性肉芽肿 多发性骨髓瘤 巨球蛋白血症 慢性粒白血病 糖尿病等 三 机体免疫功能检查 5 3 血清总补体 C3 C4 B因子 溶菌酶测定 补体降低 自身免疫病 易反复感染等 补体增高 风湿热急性期 结节性多动脉炎 皮肌炎 心梗 Reiter综合征等 B因子降低 表示补体旁路途径激活 溶菌酶 见于白血病 肾脏疾病 见于肿瘤患者 三 机体免疫功能检查 6 2 B淋巴细胞功能检查 血清IgG含量测定 特异性抗体产生能力的体内试验白喉类毒素 破伤风类毒素 肺炎球菌多糖抗原 流感嗜血杆菌多糖抗原接种后5 7天能检测到IgM型抗体 再次免疫后1周产生IgG型抗体 特异性抗体产生能力的体外试验洗涤 低倍镜下计数酶点数 抗体生成细胞数 Ag吸附醋纤膜 外周血单个核细胞 5 CO237 6h 生物素温育抗体洗涤 酶复合物底物 三 机体免疫功能检查 7 3 淋巴结或组织活检浅皮质区 B细胞的居住地深皮质区 T细胞的居住地髓质 浆细胞 受抗原刺激 髓索及髓窦 静止淋巴结 直肠粘膜固有层有丰富的浆细胞和IgA抗体分泌细胞常见与体液免疫功能缺陷的疾病1 性联无丙种球蛋白血症2 普通变异型免疫缺陷病3 高IgM综合征4 选择性IgA缺陷病5 IgG亚类缺陷症 三 机体免疫功能检查 8 三 细胞免疫功能检查1 T细胞数量检查CD3 成熟T细胞 69 4 4 86 CD4 辅助T细胞 诱导T细胞 杀伤T细胞 单核吞噬细胞 41 17 5 28 CD8 抑制T细胞 毒性T细胞 反抑制T细胞 24 58 4 02 2 T细胞功能检查 T细胞转化试验 60 80 抑制性T细胞功能检测 40 10 T细胞介导细胞毒试验 三 机体免疫功能检查 9 3 mIL 2R细胞检测mIL 2R阳性细胞是T细胞活化的标志 正常人的PBMC静息状态为2 6 PHA诱导培养后为22 39 静息时过度表达提示有免疫病理损害诱导后表达率降低提示患者细胞免疫功能不全4 婴幼儿侧位胸片若不见胸腺阴影 提示有T细胞缺陷5 淋巴结活检若皮质区和副皮质区界线不清 生发中心消失 提示有T细胞缺陷6 成人PPD5u 48 72h后红肿 硬结或直径 5mm 提示有细胞免疫功能不全 三 机体免疫功能检查 10 三 NK细胞活性检查C PDAFDA 活性降低 肿瘤 白血病 自身免疫病 对病毒 真菌易感活性增高 多发性骨髓瘤 骨髓移植 EBV HSV TB感染的早期 习惯性流产注PDA 乙酰乙酸羧基荧光素 FDA 羧基荧光素 K562FDA 5 CO237 4h NK K562 K562FDA 流式细胞仪测定活的K562细胞的荧光来推知NK细胞的活性 三 机体免疫功能检查 11 1 ANAHep 2细胞做抗原片最敏感 荧光图像最清晰 若结合灵长类动物器官组织冷冻切片做抗原 能检出更多的自身抗体 均质型 抗组蛋白抗体 见于所有活动期SLE者周边型 抗ds DNA 见于SLE 特别伴肾炎者核仁型 抗核糖体或抗U3RNP 见于SLE SSc散在斑点型 抗着丝点抗体 见于Crest综合征斑点型 抗uRNP抗体 核糖核蛋白 高滴度见于MCTD SLE SSc抗SM抗体 U族RNA 见于30 40 SLE抗Scl 70抗体 非组蛋白染色体蛋白 见于15 20 SSc抗SSA Ro抗体 Y1 Y5RNP 见于SLE pSS抗SSB La抗体 RNA聚合酶 转录物 见于pss ssc抗K抗体 非组蛋白酸性核蛋白 见于SLE SSc 四 自身抗体检查 12 2 ENA extractablenuclearantigen 是源于小牛胸腺 猪脾 在盐水中溶解的一部分核抗原 通过免疫印迹技术将不同分子量的抗原分开 可检出抗SM 抗uRNP 抗SSA 抗SSB 抗Sc1 70 抗Jo 1等 由于方法学十分敏感 在临床上只有初筛意义 阳性者应进一步用对流免疫电泳法或双扩散法进一步确认 四 自身抗体检查 13 常见的器官特异性疾病异常免疫指标结节病 sarcoidosis 1 BALF中淋巴细胞比例 28 CD4 CD8 3 0 IgG IgM IgA 2 血清sIL 2R SACE 3 Kveim抗原试验 90 阳性 支气管哮喘1 过敏原皮肤试验呈阳性 bronchialasthma 2 放射性过敏原吸附试验 RAST 或ELISA呈阳性3 嗜碱粒细胞脱颗粒试验 HBDT 70 阳性 4 血浆组胺 正常 1 8 2 7 mol L 尿组胺 正常 1 17 10 4 mol L 5 血清及痰中IL 4 IL 3 IL 5 IL 6 IL 8 TNF 3 常见的器官特异性自身免疫病及异常免疫指标 14 过敏性支气管肺曲霉菌病1 烟曲菌抗原皮肤试验呈速发和迟发型双相反应 allergicbrochopulmonary2 血清特异性IgE呈阳性 总IgE Aspergiuosis ABPA 3 血及痰中嗜酸粒细胞计数 特发性肺间质纤维化1 BALF中淋巴细胞比例 15 idiopathicpulmonary2 血清r 球蛋白 IgA IgM IgG fibrosis IPE RF ANA 外源性变应性肺泡炎1 血清特异性抗原沉淀抗体 90 extrinsisallergicalreolitis EAA 2 BALF中淋巴细胞 肥大细胞 CD4 CD8 sIL 2R 透明质酸酶 3 血清sIL 2R CRP RF Ig 3 常见的器官特异性自身免疫病及异常免疫指标 16 肺嗜酸粒细胞浸润症1 外周血及痰中嗜酸粒细胞计数 pulmonaryinfiltration2 血清及BALF中IgE Ig witheosinophilia PIE 3 过敏原皮肤试验呈阳性慢性浅表性胃炎 chronicsurface血及胃液中胃壁细胞抗体 PCA gastritis CSG 23 6 67 5 慢性萎缩性胃炎内因子抗体 IFA 53 chronicatrophicgastritis CAG 溃疡性结肠炎 ulcerativecolitis UC 血清ANCA UC可达48 88 克罗恩病 Crohndisease Crohn病为7 25 3 常见的器官特异性自身免疫病及异常免疫指标 17 自身免疫性肝炎1 血清ANA 74 SMA 86 91 autoimmune 肝肾微粒体 LRM 1抗体 Ig hepatitis 2 抗细胞色素P450 D6抗体 IgA肾病1 血清IgA FN聚合物 IgA IgA IgAnephropathy 型RF 30 以上 IgA CIC 33 2 肾活检组织冰冻切片有IgA沉积3 尿Tamm Horsfall TH 蛋白包裹红细胞 60 新月体性肾小球肾炎1 血清抗肾小球基底膜 GBM 抗体 crecenticglomeru ANCA CIC lonephritis 2 肾活检显示新月体内有大量纤维蛋白沉积 3 常见的器官特异性自身免疫病及异常免疫指标 18 膜性增生性肾小球肾炎1 血清CIC CH50 C3 C1q membranopnoliferativeC4 Glomerulonephritis MPGN 2 尿液免疫复合物 UIC 3 肾活检显示肾小囊腔和肾小管基底膜有C3沉积肾小管间质性肾炎1 血清抗肾小管基底膜 TBM 抗体 tubwlointerstitial抗TH抗体 抗集合管抗体 nephritis TIN 2 尿TH蛋白 1 血NK细胞活力 CD3 CD4 心肌炎 myocarditis CD8 C3 T细胞转化率 2 血清ANA 抗心肌抗体 RF 心肌病 myocardialdiseases 血清抗ADP ATP载体 ANT 抗体 急性炎性脱髓鞘性多发性神经病 acuteinflammatorydemyelinatingCSF中抗病原体抗体 糖脂抗体 硫Polyneuropathy AIDPorGuillain 脂抗体 蛋白 细胞数正常 Barresyndrome GBS 3 常见的器官特异性自身免疫病及异常免疫指标 19 重症肌无力血清抗AchR抗体 抗横纹 银环蛇 myastheniagravis MG 毒 川楝毒 蝮毒素抗体 IL 2 C3 全植物神经功能不全血清抗交感神经组织抗体 pandysautonomia 毒性弥漫性甲状腺肿血清甲状腺球蛋白抗体 TGA 30 Gravesdisease 甲状腺微粒体抗体 TMA 20 TSH受体抗体 TRAb 90 慢性淋巴细胞性甲状腺炎血清TGA TMA TPOAb 甲状腺过氧 Hashimotothyroiditis HT 化物酶抗体 95 TR Ab 15 3 常见的器官特异性自身免疫病及异常免疫指标 20 型糖尿病血清胰岛细胞抗体 ICAs 胰岛素抗体 IAAs type diabetesmellitus 谷氨酸脱羧酶抗体 GADAb 自身免疫性多腺体综合征血清抗肾上腺抗体 抗类固醇细胞抗体 抗卵 autoimmunepolyglan 巢或睾丸组织抗体 TGA TMA dularsyndrome 天疱疮1 血清抗棘细胞间物质抗体 抗桥粒芯糖蛋白 3 pemphigus Desmoglein 3 Dsg 3 抗Dsg 1抗体 2 组织活检显示表皮细胞间有IgG C3沉积免疫性不育 孕 男方 1 精浆免疫抑制物 精子制动抗体 immunologicinfertility 2 血清或精浆抗精子抗体 AsAb 精子凝集抗体 女方 1 血清精子凝集抗体 精子制动抗体 卵巢功能早衰血清抗卵巢抗体 AoAb 抗透明带抗体 AzpAb prematureovarianfailure 抗类固醇生成细胞抗体 ANA SOF 3 常见的器官特异性自身免疫病及异常免疫指标 21 免疫性流产1 母体抗父体淋巴细胞毒抗体 immunologicabortion 2 血清抗磷脂抗体 抗ENA 子宫内膜异位症1 血清抗子宫内膜抗体 EMAb endometriosis ANA 抗磷脂 组蛋白 DNA抗体 2 腹腔液中IgG IgA C3 C4 妊娠高血压综合征1 血清CIC C1q C3 C4 CD8 EPH syndrome 2 血清抗磷脂抗体 抗心脂抗体 抗血管内皮细胞抗体 3 常见的器官特异性自身免疫病及异常免疫指标 22 4 类风湿因子 rheumatoidfactor RF RF是以变性IgG的FC段为靶抗原的自身抗体 可以分为IgM IgG IgA3种类型IgG型RF与RA病人的滑膜炎 血管炎和关节外症状密切相关IgA型RF是RA临床症状活动的标志IgM型RF见于80 的RA患者 与疾病的活动性无密切关系 也见于SLE pSS SSc PM DM 慢活肝 结核 老年人5 抗链球菌溶血素O试验 antistreptolysionOtest ASO 增高 表明病人在近期曾感染溶血性链球菌6 C反应蛋白 C reativeprotein CRP 一种能与肺炎链球菌C多糖反应的急性时相反应蛋白 能激活补体 促进吞噬 及其他免疫调理作用 在起病后数小时产生 病变好转后下降至正常 增高见于各种急 慢性感染 组织损伤 恶性肿瘤 心梗 手术创伤 放射损伤等 3 常见的器官特异性自身免疫病及异常免疫指标 23 7 红细胞沉降率 erythrocytesedimentationrate ESR 血液中的红细胞由于胞膜表面唾液酸所带负电荷而使其相互排斥 彼此分散悬浮 当血浆纤维蛋白原增加 或红细胞大小 形态 电荷变化而影响血沉 8 人血细胞抗原B27检查 humanleukocyteantigenB27test HLA B27 AS患者中阳性检出率约为90 PA ReiterSyndrome 肠病性关节炎患者阳性检出率比一般人群 4 8 高五 致病微生物抗原 抗体检测 3 常见的器官特异性自身免疫病及异常免疫指标 24 肥达试验 Widaltest 1896年 注 若O12 1 80 d 1 160 或1周后抗体有4倍增高 可诊断为伤寒感染 若O12 1 80 a b c 1 80 或1周后抗体有4倍增高 可诊断甲 乙 丙型副伤寒感染 Vi抗原有阳性反应 提示病人为伤寒带菌者 若O12 1 80的阳性反应 可能为非特异性刺激反应或回忆反应 用凝集试验做病原检测的试剂盒还有沙门菌属 志贺菌属 致病性大肠艾希菌 霍乱弧菌 百日咳杆菌 脑膜炎奈瑟菌