高中生物4月10日_4月16日新人教版.docx

4月10日 基因工程（一）高考频度： 难易程度：基因工程技术包括一系列的分子生物学操作步骤。请回答下列问题：（1）基因工程操作的核心步骤是_。（2）限制酶、DNA连接酶和_是基因工程的基本操作工具。其中限制酶的特点是_。（3）Mullis教授因发明PCR技术获1993年诺贝尔奖，PCR技术中需要的酶是_，若PCR进行20轮循环，理论上可获得_个基因片段。（4）将目的基因导入动物受体细胞的方法是_。（5）周光宇教授提出的花粉管通道法为我国的转基因抗虫棉作出重要贡献，请写出分子水平检测抗虫基因是否表达的方法_。【参考答案】 （1）构建基因表达载体 （2）运载体 能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，在特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开（或在特定的部位断开） （3）热稳定DNA聚合酶（Taq酶） 220 （4）显微注射法 （5）抗原抗体杂交技术 【试题解析】试题分析：梳理DNA重组技术的基本工具、基因工程的基本操作程序的相关知识，并结合题意进行相关试题的解答。（1） 基因工程操作的核心步骤是构建基因表达载体 。 （2） 限制酶、DNA连接酶和运载体是基因工程的基本操作工具。限制酶的特点是：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，在特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开（或在特定的部位断开）。 （3） PCR技术中需要热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。PCR技术的原理是双链DNA 复制的原理，因此PCR进行20轮循环，理论上可获得220个基因片段。 （4） 将目的基因导入动物受体细胞的方法是显微注射法。 （5） 在分子水平上，检测抗虫基因（目的基因）是否表达，可采用抗原抗体杂交技术。1下列关于基因工程工具的说法不正确的是A 构建基因文库和构建基因表达载体都需要限制酶和DNA连接酶B DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列有专一性要求C 载体能将外源基因导入受体细胞并使其在受体细胞中稳定遗传并表达D 在基因工程操作中，被用作载体的质粒，都是经过人工改造的2下列有关基因工程中限制性核酸内切酶的描述，错误的是A一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列B限制性核酸内切酶的活性受温度的影响C限制性核酸内切酶能识别和切割RNAD限制性核酸内切酶可从原核生物中提取3如图是将某细菌的基因A导入大肠杆菌内，制备“工程菌”的示意图。请据图回答：（1）获得A有两条途径：一是以A的mRNA为模板，在_酶的催化下，合成互补的单链DNA，然后在_作用下合成双链DNA，从而获得所需基因；二是根据目标蛋白质的_序列，推测出相应的mRNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测其DNA的_序列，再通过化学方法合成所需基因。（2）利用PCR技术扩增DNA时，需要在反应体系中添加的有机物质有_、_、4种脱氧核糖核苷酸和耐热性的DNA聚合酶，扩增过程可以在PCR扩增仪中完成。（3）由A和载体B拼接形成的C通常称为_。（4）在基因工程中，常用Ca2+处理D，其目的是_。1【答案】B【解析】构建基因文库和构建基因表达载体都需要用到限制酶和DNA连接酶，A正确；DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列不具有专一性要求，B错误；运载体的作用是将外源基因导入受体细胞，同时使目的基因在受体细胞中稳定遗传并表达，C正确；在基因工程操作中，被用作载体的质粒，一般都是经过人工改造的，D正确。2【答案】C【解析】大部分酶是蛋白质，少数酶是RNA。酶的活性受温度和pH的影响；限制性核酸内切酶的特点是一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的位点切割DNA分子。限制性核酸内切酶主要是从原核生物中分离出来的。3【答案】（1）逆转录 DNA聚合酶 氨基酸 脱氧核苷酸（2）引物 模板（A基因）（3）基因表达载体（4）使其成为感受态细胞，有利于吸收重组DNA分子【解析】（1）在利用逆转录过程获得目的基因时，先是以mRNA为模板在逆转录酶的作用下合成单链DNA，然后以该单链DNA为模板在DNA聚合酶的作用下形成双链DNA分子；在利用蛋白质工程合成目的基因时，先根据蛋白质的氨基酸序列推测相应的mRNA，然后按照碱基互补配对推测DNA的碱基序列。（2）在PCR扩增中，需要添加引物、模板、脱氧核苷酸、耐高温的DNA聚合酶。（3）目的基因和运载体结合形成的物质称为基因表达载体。（4）将目的基因导入大肠杆菌中时，需要先用钙离子处理使之成为感受态细胞，有利于大肠杆菌吸收重组DNA分子。4月11日 基因工程（二）高考频度： 难易程度：图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点，且限制酶的切点是唯一的，外源DNA插入会导致相应的基因失活，请回答下列问题。（1）基因工程中最常用的载体是 ，而作为基因表达载体，除图1所示结构外，还需具有 。（2）根据图中所给信息，构建基因表达载体时，应选用的限制酶是 。若将基因表达载体导入大肠杆菌，一般用 处理，使其处于 ，以利于吸收周围环境中的DNA分子。（3）为了筛选含目的基因的大肠杆菌，应在培养基中添加 ，培养一段时间后，平板上长出的菌落，用PCR技术鉴定时，所用的引物组成为图2中 。【参考答案】（1）质粒 目的基因和终止子（2）BclI和Hind Ca2+ 感受态（3）四环素 引物甲和引物丙【试题解析】（1）基因工程中最常用的载体是质粒，基因表达载体包括：启动子、目的基因、终止子、标记基因。（2）BamHI酶会破坏标记基因，而运载体中除BamHI酶外只有BclI和Hind酶的切割位点，而要切割产生目的基因需要同时用BclI和Hind酶。若将基因表达载体导入大肠杆菌，一般用Ca2+处理，使其处于感受态，以利于吸收周围环境中的DNA分子。（3）为了筛选含目的基因的大肠杆菌，应在培养基中添加四环素。图2中用引物甲和引物丙进行PCR能复制出目的基因片段。1下列有关获取目的基因的叙述，正确的是A获取目的基因是实施基因工程的第一步，也是基因工程的核心B从基因组文库中获取的基因均可在物种间进行交流C利用PCR技术获取目的基因时需要耐热性的解旋酶D如果基因比较小，核苷酸序列又已知，可以用化学方法直接人工合成2下列关于基因工程的叙述中，正确的是A在基因工程操作中为了获得重组质粒，必须用相同的限制性内切酶剪切目的基因和质粒，最后在细胞内形成重组质粒B运用基因工程技术让牛合成并分泌人类抗体，该技术将导致定向的变异C若要生产转基因抗病水稻，可将目的基因先导入到大肠杆菌中，再转入水稻细胞中D基因治疗主要是对具有缺陷的身体细胞进行基因修复3根据基因工程的有关知识，回答下列问题：（1）cDNA文库属于_基因文库，其构建方法是：用某种生物发育的某个时期的_通过反转录产生cDNA片段，与_连接后储存在一个受体菌群中。（2）切割DNA分子的工具是_，它能使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的_断开，形成黏性末端或平末端。（3）基因工程中所使用的DNA连接酶有两类。既可以“缝合”黏性末端，又可以“缝合”平末端的是_DNA连接酶。（4）将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是_；如果受体细胞是大肠杆菌，需要用_处理细胞，使之成为感受态细胞，才能吸收DNA分子。1【答案】D【解析】获取目的基因是基因工程的第一步，但不是基因工程的核心，基因工程的核心是构建基因表达载体，故A错误；从基因组文库中获取的基因，部分可以进行基因交流，故B错误；利用PCR技术扩增目的基因时需要耐高温的DNA聚合酶，故C错误；如果基因比较小，核苷酸序列已知，通常用化学方法直接人工合成，故D正确。2【答案】B【解析】在基因工程操作中为了获得重组质粒，必须用相同的限制性内切酶剪切目的基因和质粒，最后在细胞外形成重组质粒，A错误；运用基因工程技术让牛合成并分泌人类抗体，该技术将导致定向的变异，B正确；将目的基因导入植物细胞可采用农杆菌转化法，C错误；基因治疗主要是对具有缺陷的身体细胞进行基因替换，D错误。3【答案】（1）部分 mRNA 载体（2）限制性核酸内切酶 磷酸二酯键（3）T4（4）农杆菌转化法 Ca2+【解析】（1）cDNA属于部分基因文库，构建方法是利用某种生物发育的某个时期的mRNA通过反转录产生cDNA片段，与载体连接后储存在一个受体菌群中。（2）切割DNA分子要用限制性核酸内切酶，它能将相邻的两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键断开，可以形成黏性末端或平末端。（3）DNA连接酶有两类：EcoliDNA连接酶（大肠杆菌中分离的）和T4DNA 连接酶（T4噬菌体中分离的），其中只有T4DNA 连接酶既可以“缝合”黏性末端，又可以“缝合”平末端。（4）将目的基因导入植物细胞的方法有：农杆菌转化法，基因枪法，花粉管通道法。而采用最多的方法是农杆菌转化法。如果受体细胞是大肠杆菌，需要用Ca2+处理细胞，使之成为感受态细胞，才能吸收DNA分子。4月12日 细胞工程（一）高考频度： 难易程度：下图为A、B不同物种间体细胞杂交示意图，请回答下列问题。（1） 去除细胞壁而不损伤细胞可用_、_处理。（2）促进原生质体融合常用的促融剂是_，促进A、B原生质体融合依据的生物学原理是_。（3）融合细胞中可能包含_种类型，其中杂种细胞的遗传物质组成是_。（4）由杂种细胞经人工诱导培养，经_分裂增加细胞数目并不断分化，逐渐发育成C植株。此过程应用了细胞工程的_技术。该技术包括_和_两个阶段，依据的生物学原理是_。（5）此种方法培育杂种植株的意义是_。【参考答案】 （1）纤维素酶 （2）果胶酶 聚乙二醇（PEG） 细胞膜的流动性 （3）3 A、B植物的遗传物质之和 （4）有丝 植物组织培养 脱分化 再分化 植物细胞的全能性 （5）克服远缘杂交不亲和的障碍【试题解析】采用纤维素酶和果胶酶去掉植物细胞的细胞壁，诱导原生质体融合的化学试剂是聚乙二醇，其理论基础是细胞膜的流动性，原生质体融合时，有AA、BB、AB三种类型。（1）植物细胞细胞壁的成分是纤维素和果胶，因此采用纤维素酶和果胶酶去掉细胞壁。（2）诱导原生质体融合的化学试剂是聚乙二醇；原生质体融合的理论基础是细胞膜的流动性。（3）原生质体融合时，有AA、BB、AB三种类型；杂种细胞具有融合的两种植物的遗传物质。（4）在植物组织培养过程中，涉及有丝分裂；植物组织培养包括脱分化和再分化，其原理是植物细胞具有全能性。（5）植物体细胞杂交的优点是克服远缘杂交不亲和的障碍。1如图是“白菜甘蓝”杂种植株的培育过程。下列说法正确的是A植物体细胞杂交技术体现出了植物细胞膜的功能特点 B愈伤组织是由排列紧密的薄壁细胞组成 C上述过程中包含了有丝分裂、细胞分化和减数分裂等过程 D“白菜甘蓝”杂种植株具有的性状是基因选择性表达的结果2下列属于植物细胞工程实际应用的是制造人工种子培育抗盐植物培育抗病毒烟草培育单倍体生产脱毒植株A B C D3克隆羊“多莉”的培育过程采用的技术包括细胞培养 基因工程技术胚胎移植胚胎分割移植体外受精细胞核移植A B C D1【答案】D【解析】植物体细胞杂交技术体现出了植物细胞膜的结构特点，即细胞膜的流动性，A错误；脱分化形成愈伤组织由排列疏松的薄壁细胞组成，B错误；上述过程中包含了有丝分裂、细胞分化，但是没有减数分裂过程，C错误；杂种植物具有的相应性状是相关基因选择性表达的结果，D正确。2【答案】C【解析】通过植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，通过人工薄膜包装得到的种子，正确；植物组织培养过程中容易发生基因突变，通过筛选可获得抗盐植物，属于植物细胞工程的应用，正确；培育抗病毒烟草属于基因工程的应用，错误；利用花粉离体培养技术培育单倍体幼苗，正确；利用分生区（如茎尖）细胞进行组织培养，形成脱毒苗，正确。3【答案】A【解析】首先将要克隆的羊的体细胞核移植到受体母羊的去核卵细胞中，运用了细胞核移植，接着进行细胞体外培养运用了细胞培养技术，然后再将胚胎移植到同期发情的母羊的子宫中，运用了胚胎移植技术；没用到基因工程技术；因为做的是克隆技术，没有用到体外受精，也没有胚胎分割移植。故选A。4月13 日 细胞工程（二）高考频度： 难易程度：我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪在东北农业大学的种猪场自然分娩产出，这标志着我国在转基因克隆猪技术领域已达到世界领先水平。下图为我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图，请据图回答：（1）一个完整的基因表达载体除了带有绿色荧光蛋白基因以外，还必须含有复制原点、启动子、终止子和_。启动子是一段有特殊结构的DNA片段，它是_酶识别和结合的部位；而起始密码子的化学本质则是_（DNA或RNA）。（2）过程将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞后，要通过DNA分子杂交技术，来检测绿色荧光蛋白基因是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的_上。（3）从猪中取胎儿成纤维细胞，用_处理，然后进行分散培养。培养时，将培养瓶置于含一定量CO2的培养箱中进行培养，CO2的作用是_。（4）过程表示通过显微操作法吸出卵母细胞中的细胞核，微型吸管除了将细胞核吸除外，往往还要将_一并吸出。（5）本实验所用到的现代生物科学技术有_（填序号）。A动物细胞培养 B胚胎移植C细胞核移植 DDNA重组技术【参考答案】 （1）标记基因 RNA聚合 RNA （2）染色体DNA （3）胰蛋白酶（或胶原蛋白酶） 维持培养液的pH （4）第一极体 （5）ABD【试题解析】据图分析，表示获取绿色荧光蛋白基因，表示基因表达载体的构建，表示将目的基因导入受体细胞，表示去除卵母细胞的细胞核，表示核移植，表示早期胚胎的培养，表示胚胎移植，表示妊娠分娩获得绿色荧光蛋白转基因克隆猪。（1）基因表达载体除含有绿色荧光蛋白基因（目的基因）外，还含有启动子、终止子和标记基因，其中启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，启动转录；由于起始密码在mRNA上，所以其本质是RNA。（2）目的基因是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的染色体上，可用DNA分子杂交技术进行检测。（3）动物细胞培养时，需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理动物组织，使动物细胞分散成单个细胞。动物细胞培养时要放入到95%的空气（保证细胞代谢）和5%CO2（调节培养液的pH）培养箱中。（4）过程表示通过显微操作法吸出卵母细胞中的细胞核，微型吸管除了将细胞核吸除外，往往还要将极体一并吸出。（5）绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程涉及的现代生物技术有动物细胞培养、胚胎移植、细胞核移植等。1在下列过程中，需要用到植物组织培养技术的是利用秋水仙素处理萌发的四倍体小黑麦种子或幼苗获得八倍体植株利用紫草细胞获得治疗烫伤的紫草素利用茎尖大量繁殖三倍体无子西瓜利用细胞工程培养“番茄马铃薯”杂种植株培育转基因“向日葵豆”植株A B C D2下列属于动物细胞工程应用的有几项 大规模生产干扰素，用于抵抗病毒引起的感染 为大面积烧伤的病人提供移植的皮肤细胞 大规模生产食品添加剂、香料等 加速家畜遗传改良进程，加快优良种畜的繁殖A 一项 B 二项 C 三项 D 四项1【答案】D【解析】利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，获得多倍体植株，不需要采用植物组织培养技术，错误；利用紫草细胞获得治疗烫伤的紫草素，需要运用植物组织培养技术将离体的紫草细胞经脱分化培养成愈伤组织，正确；无子西瓜的大量繁殖，需要采用植物组织培养技术，正确；利用细胞工程培育“番茄马铃薯”杂种植株，需要采用植物组织培养，正确；培育转基因“向日葵豆”植株时，需要把含有目的基因的受体细胞培养成转基因植物体，需要采用植物组织培养技术，正确。2【答案】C【解析】生产许多有价值的蛋白质生物制品，如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等都可以借助于动物细胞的大规模培养来生产，是动物细胞工程的应用，正确；用灼伤病人皮肤的健康细胞进行培养，可以获得大量自身的皮肤细胞，为大面积烧伤的病人提供移植的皮肤细胞，是动物细胞工程的应用，正确；大规模生产食品添加剂、杀虫剂等是植物细胞工程的应用，错误；利用胚胎移植技术，可以加快优良种畜的繁殖，也属于动物细胞工程的应用，正确，故C正确。4月14日 期中检测（一）高考频度： 难易程度：科研人员以抗四环素基因为标记基因，通过基因工程的方法让大肠杆菌生产鼠的-珠蛋白，治疗鼠的镰刀型细胞贫血症。下列相关实验设计中，不合理的是A用编码序列加启动子、抗四环素基因等元件来构建表达载体B利用小鼠DNA分子通过PCR克隆出-珠蛋白基因的编码序列C用含有四环素的培养基筛选出已经导入-珠蛋白编码序列的大肠杆菌D用Ca2处理大肠杆菌后，将表达载体导入具有四环素抗性的大肠杆菌中【参考答案】D【试题解析】基因表达载体包括启动子、目的基因（-珠蛋白基因）、标记基因（抗四环素基因）、终止子等，A正确；-珠蛋白基因属于目的基因，可以利用PCR技术扩增，B正确；导入重组质粒的大肠杆菌能抗四环素，因此可以用含有四环素的培养基筛选出已经导入-珠蛋白编码序列的大肠杆菌，C正确；抗四环素基因是标记基因，用于筛选导入重组质粒的受体细胞，因此受体细胞（大肠杆菌）不能含有四环素抗性基因，D错误。1以下有关动物细胞、组织培养的表述中正确的是A动物细胞培养中，含5CO2的恒温培养箱用来调控pH和温度B动物组织培养过程中不会出现组织分化C传代培养的细胞因最接近于体内细胞的生长特性，常用于药物测试研究D动物细胞培养过程中，首先要用胃蛋白酶处理部分组织使细胞分散获得单个细胞2关于细胞全能性的理解不确切的是A动物细胞培养获得大量骨髓瘤细胞，证明了动物体细胞也具有全能性B细胞内含有个体发育所需的全部基因是细胞具有全能性的内在因素C经植物组织培养得到的试管苗，是植物细胞在一定条件下表现全能性的结果D大量的科学事实证明，高度分化的植物体细胞仍具有全能性1【答案】A【解析】动物恒温培养箱可以调控温度，其中的二氧化碳可以调控pH，A正确；动物组织培养过程中可以出现组织分化和器官形成，B错误；传代培养的10代以内的细胞最接近体内细胞的生长特性，50代之后的细胞遗传物质发生了改变，与体内细胞不同，C错误；动物细胞培养过程中，要使用胰蛋白酶分散细胞，而不能采用胃蛋白酶，D错误。2【答案】A【解析】细胞全能性是指已经分化的细胞，仍然具有发育成完整个体的潜能，其标志是已经分化的细胞发育成完整的个体，因此动物细胞培养获得大量骨髓瘤细胞，不能证明动物体细胞具有全能性，A项错误；已分化的细胞内含有该物种个体发育所需的全部基因是细胞具有全能性的内在因素，B项正确；经植物组织培养得到的试管苗是一个完整的生物个体，因此是植物细胞在一定条件下表现全能性的结果，C项正确；高度分化的植物体细胞含有该物种个体发育所需的全部基因，所以仍具有全能性，D项正确。4月15日 期中检测（二）高考频度： 难易程度：科学家培养出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。下列说法正确的是A将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞，可以用花粉管通道法B人的生长激素基因只存在于小鼠的膀胱上皮细胞中C进行基因转移时，通常要将外源基因转入受精卵中D采用抗原抗体杂交技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组【参考答案】C【试题解析】花粉管通道法用于将目的基因导入植物细胞，A错误；小鼠的体细胞是由同一个受精卵分裂和分化来的，核遗传物质相同，故小鼠的膀胱上皮细胞中也含有人的生长激素基因，B错误；由于受精卵的全能性最高，所以进行基因转移时通常将外源基因转入受精卵中，C正确；检测外源基因是否插入了小鼠的基因组通常采用DNA分子杂交技术，D错误。1动物细胞培养的特点是细胞贴壁有丝分裂分散生长接触抑制减数分裂原代培养一般在同一个培养瓶内A B C D2关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，错误的是A动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同B动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶C烟草叶片离体培养能产生新个体，小鼠杂交瘤细胞可离体培养增殖D动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖培养可用于植物脱去病毒3下面是蛋白质工程的基本途径，试回答下列有关问题：（1）图中过程的主要依据是每种氨基酸都有其对应的 ，它位于 分子上，其上的碱基与基因中的碱基配对时遵循 。（2）通过过程获得的脱氧核苷酸序列不是完整的基因，要使这一序列能够表达、发挥作用，还必须在序列上、下游加上 和 ，在这个过程中需要 酶的参与。（3）完成过程需要涉及 工程技术。1【答案】A【解析】动物细胞培养时，悬液中分散的细胞很快就贴附在甁壁上，称为细胞贴壁，正确； 动物细胞增殖的过程中，细胞通过有丝分裂方式增殖，正确； 动物细胞培养时不会分散生长，错误；当细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，即接触抑制，正确；动物细胞培养过程中，细胞的增殖方式是有丝分裂，不是减数分裂，错误； 从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。2【答案】B【解析】动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同，动物细胞培养采用的是液体培养基、植物组织培养采用的是固体培养基，A正确；动物细胞培养需要用胰蛋白酶处理，但植物组织培养过程不需要胰蛋白酶处理，B错误；给予适宜的条件，有的植物可在愈伤组织的基础上直接发育成新个体，C正确；细胞培养产生出变异的新植株，为选择有益性状的新作物创造了条件，D正确。【名师点睛】植物组织培养和动物细胞培养的比较比较项目植物组织培养动物细胞培养原理细胞的全能性细胞增殖培养基性质固体培养基液体培养基培养基成分营养物质（蔗糖）、植物激素等营养物质（葡萄糖）、动物血清等培养结果植物体细胞株、细胞系培养目的快速繁殖、培育无毒苗等获得细胞或细胞产物分散处理无有脱分化有无3【答案】（1）密码子 mRNA 碱基互补配对原则（2）启动子 终止子 DNA连接（3）基因【解析】（1）图中过程表示蛋白质工程从氨基酸序列推测相应基因中的脱氧核苷酸序列，氨基酸与脱氧核苷酸之间的联系枢纽是mRNA，mRNA由DNA转录形成，其上的碱基与基因中的碱基配对时遵循碱基互补配对原则；而密码子是mRNA上特定的能决定一个氨基酸的三个相邻的碱基序列。（2）由人工合成的基因只是基因的编码序列，完整的基因还包括启动子、终止子等结构；把启动子、终止子等DNA片段连接到基因的编码区需要DNA连接酶的参与。（3）完成过程，即由基因合成蛋白质需要涉及基因工程。4月16日 期中检测（三）高考频度： 难易程度：下列有关蛋白质工程的叙述错误的是A蛋白质工程可合成自然界不存在的蛋白质B蛋白质工程可对酶的催化活性、抗氧化性、热变性等加以改变C蛋白质工程是通过对基因的修饰和合成来实现对蛋白质的改造D蛋白质工程成功率低的原因主要是蛋白质种类太少，原料不足【参考答案】D【试题解析】蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质，A正确；蛋白质工程可对酶的催化活性、抗氧化性、热变性等加以改变，B正确；蛋白质工程是通过对基因的修饰和合成来实现对蛋白质的改造，C正确；蛋白质工程成功率低的原因是密码子的简并性，很难预测蛋白质的结构，获得相应的目的基因，D错误。1下列关于植物组织培养和动物克隆的说法错误的是A植物组织培养获得的试管苗，可能为杂合子，也可能为纯合子，可能为单倍体，也可能为二倍体B同一株绿色开花植物不同部位的细胞经组织培养获得的愈伤组织基因型一定相同C动物克隆的技术基础是动物的细胞和组织培养D为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素2下图为某科研小组采用“基因靶向”技术先将小鼠的棕褐毛基因导入黑色纯种小鼠的胚胎干细胞（ES细胞）中，再将改造后的胚胎干细胞移植回囊胚继续发育成小鼠的过程。据图分析回答：（1）天然质粒往往需要经过改造才能作为基因工程中的运载体，经改造后的质粒同时具备的条件有_（填序号）。标记基因 多个限制酶切割位点 对受体细胞无害 启动子 起始密码子（2）该过程使用了工具酶_和DNA连接酶，完成目的基因的获取和_。（3）过程III常用的方法是_，第III步操作后，还需经过筛选出含_的重组DNA分子胚胎干细胞的过程，才能将该胚胎干细胞注射到囊胚中。（4）改造后的胚胎干细胞移植回囊胚能继续发育成小鼠，其根本原因是_。（5