盐酸文拉法辛胶囊的有关物质测定方法的建立.pdf

2017年08月 技术管理 盐酸文拉法辛胶囊的有关物质测定方法的建立 黄艳 1 杨雪峰 2 陈雪云 2 符乃光 1 钟霞 1 1 海南医学院药学院 海南海口 571199 2 海口南陆医药科技股份有限公司 海南海口 570311 摘要 目的 建立高效液相色谱法测定盐酸文拉法辛胶囊的 有关物质 方法 采用symmetry C8 250 mm 4 6 mm 5 m 乙 腈 0 1mol L 1磷酸二氢铵溶液 30 70 为流动相 检测波长为 230 nm 流速0 8 mL min 1 结果 文拉法辛与相邻杂质峰以及 各杂质峰之间的分离度均大于1 5 检测限为0 4 1 6ng 定量 限为1 6 6 5ng 供试品溶液8h内有一定的降解 溶液应临用新 制 结论 该方法简便 灵敏和准确 适用于文拉法辛胶囊有关 物质的测定 关键词 高效液相色谱法 文拉法辛 有关物质 文拉法辛为苯乙胺衍生物 是一种全新的抗重性抑郁症 药 主要药理机制为抑制突触前膜对5 羟色胺 5 HT 及去甲肾 上腺素 NE 的再摄取 增强中枢5 HT及NE神经递质的功能 发挥抗抑郁作用 对于抑郁病人 可用于治疗抑郁症和广泛性 焦虑症 具有起效快 疗效可靠 不良反应轻微 可用于长期治 疗的特点 1 一般用药1 2周后即可出现明显抗抑郁作用 比 某些三环类抗抑郁药 TCA 起效快 且不良反应轻微 适宜长期 服用 2 3 应用前景良好 本文建立了高效液相色谱法 对自制 的文拉法辛胶囊的有关物质进行检查 该法简便 灵敏 准确 1仪器与试药 Agilent1220液相色谱仪 Ezchrom Elite色谱工作站 乙腈为 色谱纯 水为双蒸水 磷酸二氢铵为分析纯 盐酸文拉法辛胶囊 自制 批号为140301 140302 140303 盐酸文拉法辛对照品 中检院 批号为100543 200401 杂质a对照品 USP 批号为 F01357 杂质b对照品 TRC 批号为3 VCP 179 1 杂质c对 照品 TRC 批号为8 GJF 54 4 杂质d对照品 molcan corpora tion 批 号 为 130312 杂 质 e 对 照 品 TLC 批 号 为 1530 034A5 杂质f对照品 TRC 批号为4 VCP 13 3 2 方法与结果 2 1 溶液的配制 取装量差异项下的内容物 混合均匀 精密称取适量 加流 动相制成每1ml中含盐酸文拉法辛0 4mg的溶液 滤过 取续滤 液作为供试品溶液 精密量取适量 加流动相制成每1ml中含 4 g的溶液 作为对照溶液 2 2 色谱条件与系统适用性试验 4 5 色谱柱为 symmetry C8 250 mm 4 6 mm 5 m 以乙腈 0 1mol L 磷酸二氢铵溶液 30 70 为流动相 检测波长为 230 nm 流速0 8 mL min 1 分别精密称取盐酸文拉法辛及杂质a b c d e f对照品适 量 分别加流动相溶解并稀释制成每1mL中约含各对照品10 g的溶液 摇匀 作为对照品溶液 分别精密量上述各种对照品 溶液 1mL 混合均匀 作为混合溶液 精密量取上述溶液各 20 L 分别注入液相色谱仪 记录色谱图 混合溶液结果见图 1 理论塔板数按盐酸文拉法辛主峰计算为12593 盐酸文拉法 辛与相邻杂质峰的分离度均大于1 5 各杂质峰之间的分离度 均大于1 5 图1 混合溶液色谱图 1 杂质e 2 杂质c 3 杂质d 4 杂质a 5 文拉法辛 6 杂质b 7 杂质f 2 3 1 对照溶液进样精密度试验 取2 1项下的对照溶液20 L注入液相色谱仪 连续进样6 次测定 结果主峰峰面积的RSD为0 26 表明方法的进样精 密度良好 2 4 专属性试验 2 4 1 破坏性实验 精密称取140301批样品 约含盐酸文拉 法辛20mg 共6份 分别置50 mL量瓶中 按以下条件试验 一 份加流动相使溶解并稀释至刻度 摇匀 滤过 取续滤液 一份 加10ml流动相使溶解 再加1 的过氧化氢溶液5ml 摇匀 室 温放置2小时 加流动相稀释至刻度 摇匀 滤过 取续滤液 一 份于4500 500lx照射10天 加流动相溶解并稀释至刻度 摇匀 滤过 取续滤液 一份加10ml流动相使溶解 加0 1mol L盐酸溶 液5ml 摇匀 室温放置4小时 用0 1mol L氢氧化钠溶液5ml中 和 加流动相稀释至刻度 摇匀 滤过 取续滤液 一份加10ml流 动相使溶解 加0 1mol L氢氧化钠溶液5ml 摇匀 室温放置4小 时 用0 1mol L盐酸溶液5ml中和 加流动相稀释至刻度 摇匀 滤过 取续滤液 一份加10ml流动相使溶解 置沸水浴中加热1 小时 取出 放冷至室温 加流动相稀释至刻度 摇匀 滤过 取 续滤液 分别精密量取上述6种溶液各20 L注入液相色谱仪 分析 结果见图2 a f 2 4 2 溶剂与辅料干扰实验 按处方比例取本品的混合辅料 151 2017年08月 技术管理 适量 加流动相稀释至刻度 摇匀 滤过 分别精密量取20 L溶 剂及续滤液注入液相色谱仪分析 结果见图2 g h 结果表 明 本品溶剂及空白辅料对供试品的测定不造成干扰作用 2 5 检测限和定量限 分别精密称取盐酸文拉法辛及杂质a b c d e f对照品适 量 分别加流动相溶解并稀释制成每1mL中约含各对照品10 g的溶液 再分别逐级稀释 取20 L注入液相色谱仪 经分析 文拉法辛的检测限为0 4ng S N 3 定量限为1 6ng S N 10 杂质a的检测限为1 6ng S N 3 定量限6 5ng S N 10 杂质b 的检测限为0 9ng S N 3 定量限1 7ng S N 10 杂质c的检 测限为0 4ng S N 3 定量限1 6ng S N 10 杂质d的检测限 为 1 3ng S N 3 定量限 2 5ng S N 10 杂质 e 的检测限为 0 4ng S N 3 定量限1 6ng S N 10 杂质f的检测限为0 4ng S N 3 定量限1 6ng S N 10 2 6重复性和溶液稳定性试验 取140301批样品6份 精密称定 照2 1项下的方法制备溶 液 分别取20 L注入液相色谱仪 记录色谱图 按面积归一化 法计算杂质量 结果单个最大杂质量的RSD为1 89 总杂质量 RSD为1 76 表明方法重复性良好 取其中一份溶液 分别放 置0h 2h 4h 6h 8h后测定 结果单个最大杂质峰面积的RSD为 3 43 总杂质峰面积的RSD为3 55 总杂质有增加的趋势 表 明供试品溶液8h内有一定的降解 溶液应临用新制 2 7 耐用性试验 本品柱温在25 35 流速0 6ml min 1 0ml min 流动 相组成比例 28 72 32 68 之间变动时 未影响到本品有关 物质的检查 表明方法的耐用性良好 2 8 供试品有关物质检查 取3批供试品 照2 1项下的方法制备溶液 照2 2项下的色 谱条件检查有关物质 结果单个最大杂质分别为 0 0103 0 0105 0 0108 总杂质分别为0 0204 0 0213 0 0219 3 讨论 3 1专属性试验表明 盐酸文拉法辛在酸 碱 高温破坏条件下 均有一定的降解 采用DAD检测器对主峰以及降解峰进行峰 纯度检测并记录3D图 提取230nm波长处的色谱图 通过色谱工作站提供的 全波长法 分析以上色谱图中 盐 酸文拉法辛在强酸 强碱 氧化 强光和高温破坏条件下 盐酸 文拉法辛主峰的纯度指数值均大于990 000 表明各降解杂质 峰均与主峰的分离度良好 3 2 有关物质限度的确定 通过对3批供试品有关物质的测定 并结合本品稳定性考 察结果 将本品的有关物质限度确定为 供试品溶液的色谱图 中如显杂质峰 单个杂质不得过0 2 各杂质峰面积的和不得 大于对照溶液的主峰面积 1 0 参考文献 1 李焕德 李革晖 一种杂环类抗抑郁新药VENLAFAXINE J 国外医学药学分册 1996 23 2 70 2 刘海涛 周立春 余立 HPLC 法测定盐酸文拉法辛胶囊 有关物质 J 中国药品标准 2012 13 3 178 181 3 邹万芹 新型抗抑郁药的临床应用及研究进展 J 中国药 房 2008 19 14 1105 1107 4 中华人民共和国国家药典委员会 中国药典 S 四部 北 京 中国医药科技出版社 201