毕业论文-银杏叶加蝇蛆喂鸡对鸡免疫性能的影响.doc

毕 业 设 计（论 文） 题 目： 银杏叶加蝇蛆喂鸡对鸡免疫性能的影响 学生姓名 指导教师 学院动物科学与技术学院 专 业 动物医学 班级 M07动医 学号 0721115615 提交日期 年 月 日 答辩日期 年 月 日 金陵科技学院学士学位论文 目录目 录摘 要IIAbstractIII1 绪 论12正文22.1试验区概况22.2试验动物与试验材料22.3试验方法2.4 样品采集方法2.5实验所需结果的测定3 实验结果34讨论5参考文献6致 谢8III金陵科技学院学士学位论文 摘要银杏叶提取物加蝇蛆喂鸡对鸡免疫性能的影响摘 要本实验主要研究银杏叶提取物加蝇蛆喂鸡对鸡免疫性能的影响，将120只1日龄鸡随机分成3组，每组40只。A组鸡喂食普通饲料，B组鸡饲喂0.1%银杏叶提取物的饲料，C组饲喂0.1%银杏叶提取物和1%蝇蛆的饲料。45天后，检测鸡的胸腺指数、鸡的脾脏指数、鸡的法氏囊指、鸡的总蛋白含量。结果显示银杏叶提取物加蝇蛆的鸡胸腺指数、脾脏指数、法氏囊指数均差异不显著（P0.05），只有总蛋白含量有略微提高, 差异不显著（P0.05）。实验结果表明银杏叶提取物加蝇蛆对鸡免疫性能无明显改变。关键字：银杏叶提取物；蝇蛆；免疫器官指数、总蛋白，鸡。金陵科技学院学士学位论文 AbstractGinkgo biloba extractincreasesfly larvaefeed the chickenson theimmune functionofchickens AbstractThis experiment studies of Ginkgo biloba extract increases fly larvae feed the chickens on the immune performance of chickens, 120 chickens of 1 day were divided into 3 groups of 40. A group of chickens fed with normal diet, B group of chickens fed 0.1% Ginkgo biloba extract in the feed, C group was fed 0.1% Ginkgo biloba extract and 1% of the fly larvae feed. 45 days, testing the chicken thymus index, spleen index of chicken and chicken bursa refers to the total protein content of chicken. The results showed that ginkgo biloba extract increases maggot chicken thymus index, spleen index and thymus index were not significantly different (P 0.05), only slightly increased total protein content, the difference was not significant (P 0.05). The results showed that ginkgo biloba extract increases the immune performance of chickens fly larvae did not change significantly.Keywords: Ginkgo biloba extract; fly larvae; immune organ index, total protein, chicken.金陵科技学院学士学位论文 第一章 绪论1 绪 论众所周知，苍蝇是四害之一，是人类公认的害虫，但是当它们被人类所繁殖起来，我们就会把苍蝇变害为利。因为蝇蛆能向人类提供廉价的动物蛋白质饲料资源。根据国内为对蝇蛆的化验分析的结果都充分证明：蝇蛆（风干物）含粗蛋白达到了59.3%-65.43%、脂肪含量是10.55%-12.61%，而且各种氨基酸、尤其是几种必需氨基酸都比较全面，是我们饲养畜禽比较理想的动物蛋白质饲料资源1。人工的饲养成本很低，而且不需要太多的设备支持，也不需要特定的环境。从目前国内饲养的吃蝇蛆的鸡来看，一般吃蝇蛆的鸡具有较高的蛋白质、低脂肪、无药残、口感好营养价值高等特点。蝇蛆喂鸡以后鸡生的蛋里面富含多样的维生素、类胡萝卜素，蛋内脂肪含量不过才3%，但是蛋白质含量却超过了12%，含有人体必需的多种氨基酸，钠锂钾钙等矿物质和维生素B、E等2。在我国，银杏叶被用作药物已经有500多年的历史，它具有益心敛肺、化湿止泻的功效3。早在明代时期，我国古代的医生就用它来入药，用于治疗老年性心血管疾病，但是银杏叶中含有氢氰酸，可加速心率，副作用较大。到了70年代后德国Schwade制药公司1991年专利生产了银杏叶提取物，避免了这一副作用4。银杏叶提取物中含有黄酮类、内酯类、酚类等多种生物活性成分，已经成为一种全天然、无公害的绿色饲料添加剂，在畜禽养殖中的应用前景十分的广泛5。研究结果表明，银杏叶提取物对脑循环、中枢神经系统、心血管系统都有影响，具有降低血脂、抑制血小板凝集、抗血小板活化因子、抗衰老作用、提高机体的耐缺氧能力、提高记忆力、提高机体组织特别是脑组织对糖的利用能力等功效 6,7。除了以上的功能之外，银杏叶提取物能够提高机体的免疫力。它具有促进机体免疫器官的发展的作用、具有对单核巨噬细胞及自然杀伤细胞的免疫促进作用、具有对体液免疫的促进作用、具有对细胞免疫的促进作用、具有对细胞因子的影响、具有对红细胞免疫的影响、对粘膜免疫的影响等等8。如上所述，二者都是极具前景的饲料的添加剂，如果能够用到我们日常饲养的饲料中，对我们人类将会是有着不少的收益。至今还未见用银杏叶提取物加蝇蛆饲喂鸡对鸡免疫性能的影响的报道。本实验把蝇蛆和银杏叶提取物同时添加到鸡的日常饲料中喂鸡，观察其对鸡的免疫性能的影响。2正文2.1 试验区概况 本次试验时间为2011年2月到4月，在南通文圣生态特种养殖有限公司进行，场址位于江苏省南通市海安县墩头镇，本养殖场改变了传统的养殖模式，形成了有自己特色的生态养殖模式。用饲料养猪，畜禽粪便养蛆，再用鲜活蝇蛆喂养畜禽、水产等。以降低饲料成本，提高畜禽、水产的生长速度，同时提高畜禽、水产抗病能力及产品的品质，也更好的解决了家畜、家禽粪便的排放问题，改善了环境。本次试验正是借助于养殖场内的设施，以及专门的养殖人员，科学的饲养管理条件下进行的试验。 2.2 试验动物与试验材料120只1日龄草鸡雏鸡、高速离心机(sigma 3-18k)、水浴锅(HH-4数显恒温水浴锅)、移液枪（Pipetlite SL-100）、液氮罐（成都液氮容器厂 金凤牌YDS-10）、电子天平（北京赛多利斯天平有限公司产）、分光光度计（UV765 上海精科产）、BUN、ALT及AST测定试剂盒（南京建成生物工程研究所产）等。2.3 试验方法将雏鸡随机分成3组，分别为：A.饲喂普通饲料（对照组）B.饲喂普通饲料+0.1%银杏叶提取物C.饲喂普通饲料+1%蝇蛆粉+0.1%银杏叶提取物。在正式试验开始前，先将小鸡进行3天的适应性饲养，严格按照鸡场日常饲养标准进行。小鸡前22天饲喂全价颗粒饲料，配以不同浓度的蝇蛆和银杏叶提取物，22天之后饲喂的是自配饲料（即：28%豆粕+62%玉米+5%预混料+5%麸皮）。试验期间自由饮水和采食，试验全程24h/d的光照。试验开始后每天早晚各投料一次，并记录投料量以及次日剩余的饲料量，每一周称量一次体重并记录。及时注意观察各组小鸡的死亡数量并记录。整个试验过程采取正常的饲养管理及免疫程序。2.4 样品采集方法在严格按照试验要求和饲养管理程序饲养了45天以后，每组随机取25只鸡，采取心脏采血的方式，每只鸡采血4ml放入离心管，随即放入离心机以3000rpm离心10min，用移液枪取上层血清，放入血清管标号并冷冻保存，用于测定血清中总蛋白。2.5实验所需结果的测定总蛋白量的测定方法1. 样本前处理：血清可以直接进行检测。组织匀浆：准确称取待测组织的重量，按体重体积比1:9加生理盐水制备成10%的组织匀浆，1000-3000转/分，离心10min（根据所测试指标不一样则所需转速不一样，一般为2500转/分左右），然后取组织匀浆上清液待测。2. 操作：取5ml试管一支加入0.05ml蒸馏水和2.5ml双缩脲试剂测定空白管OD值取5ml试管一支加入标准液0.05ml和2.5ml双缩脲试剂测定标准管OD值从A组、B组、C组取得的鸡的血清中每组取20个样本。分别加入0.05ml待测液，再分别加入双缩脲试剂2.5ml。混匀，37水浴10min，流水冷却后，波长450nm，光径1cm，蒸馏水调零，测各管OD值。计算公式：蛋白浓度mg/ml=（测定管OD值-空白管OD值）/（标准管OD值-空白管OD值）*蛋白标准品浓度（mg/ml）胸腺指数、法氏囊指数、脾脏指数的测定从A组、B组、C组取得的鸡的脾脏、法氏囊，胸腺中每组取20个样本，然后称重。免疫器官重量（g）/体重（g）即等于各项指数，例如胸腺指数=胸腺重量（g）/体重(g)3实验结果图一 总蛋白含量的变化由图可见，B组比A组总蛋白含量略微升高。C组鸡的总蛋白量比上A组鸡的总蛋白量也是略微升高。图二 胸腺指数的变化由图可见，B组对比与A组鸡的胸腺指数有略微的下降，C组鸡的胸腺指数对比与A组鸡也只有略微的下降。图三 脾脏指数的变化由图可见：A组和C组鸡的脾脏指数相比。C组的鸡的脾脏指数几乎相同，没有变化，只有一点升高。B组鸡的脾脏指数对比于A组鸡来说，其脾脏指数降低了。图四 法氏囊指数的变化由图可见A组和B组鸡相比，B组鸡的法氏囊指数略微下降。A对比于C组来说，C组鸡的法氏囊指数也是略微下降。4讨论鸡的免疫系统主要包括脾脏、胸腺、法氏囊和淋巴组织。胸腺法氏囊为中枢免疫器官，主要产生免疫细胞，介导细胞免疫反应9。免疫器官指数是目前研究机体免疫体况的方法之一 ,胸腺 、法氏囊和脾脏的质量可用于评价鸡的免疫状态 ,其绝对质量和相对质量的增加可说明机体细胞免疫和体液免疫机能的增强 10 。因此胸腺指数 、法氏囊指数和脾脏指数的变化能够直接反映机体的免疫性能。覃红斌证明( 2004)应用单克隆抗体和放射性渗入法检测胸腺 T细胞和刀豆蛋白A诱导的脾细胞增殖反应技术探讨银杏叶提取物对大鼠免疫功能的作用时发现银杏叶提取物可增加胸腺Thy21细胞百分率, 明显增强刀豆蛋白A 诱导的脾细胞增殖。增加腹腔巨噬细胞的吞噬功能, 提高外周血T 淋巴细胞酯酶染色率, 使血清 Ig G含量增加, 明显增加胸腺、脾脏的重量。所以, 银杏叶提取物可作为免疫增强剂11。王雪静证明饲料中添加了0.6%银杏叶提取物明显提高了肉雏鸡的日增重和料重比 , 提高肉雏鸡胸腺 、法氏囊和脾脏的相对重量12。与他们的试验不同，本实验中只添加了0.1%银杏叶提取物的B组鸡的胸腺指数，法氏囊指数，脾脏指数都是下降了，但是都没有显著的差异。与他们的实验相比胸腺指数和脾脏指数我们都没有明显差异。造成这个结果可能的原因可能是鸡的品种不同，鸡吃的饲料的配料不同，鸡生活环境不同。同时添加了银杏叶提取物和蝇蛆的饲料喂食的第三组鸡，其胸腺指数，法氏囊指数对比于A组鸡都只有略微的下降，脾脏指数有略微升高，但是差异不显著。所以说银杏叶加蝇蛆喂鸡对鸡的胸腺指数、脾脏指数、法氏囊指数都没有明显影响。13:1seusndication of immune dep 血清总蛋白由血清白蛋白和球蛋白组成。其中球蛋白中的-蛋白占血浆体活性的绝大球部分，是由肝外、淋巴结内、脾脏、骨髓网内皮素系统的细胞形成的。沈海中等用噻唑蓝比色法和髓过氧化物酶微量测定法分别检测了银杏叶3种提取物对小鼠淋巴细胞活性和中性粒细胞吞噬杀伤功能的影响。结果显示,银杏叶提取物可明显增强小鼠淋巴细胞线粒体脱氢酶(p0.001)和中性粒细胞的释放(p0.010.001)。由此可见,银杏叶提取物具有提高小鼠机体免疫细胞功能的作用。银杏叶提取物可明显增强小鼠淋巴细胞线粒体脱氢酶的活性及中性粒细胞髓过氧化物酶的释放,提高小鼠机体免疫细胞功能13。覃红斌应用单克隆抗体和放射性渗入法检测胸腺T细胞和刀豆蛋白A诱导的脾细胞增殖反应技术探讨银杏叶提取物对大鼠免疫功能的作用。结果表明银杏叶提取物可增加胸腺Thy-1细胞百分率,明显增强刀豆蛋白A诱导的脾细胞增殖。增加腹腔巨噬细胞的吞噬功能,提高外周血T淋巴细胞酯酶染色率,使血清IgG含量增加,明显增加胸腺、脾脏的重量。结论:银杏叶提取物具有提高大鼠免疫功能的作用,可作为免疫增强剂11。 本实验中，实验鸡总蛋白指数：加0.1%银杏叶提取物饲料的B组鸡，其对比于普通组来说都没有明显的差异，只有略微提高。加0.1%银杏叶提取物和1%蝇蛆的饲料的B组，总蛋白指数只有略微提高。但是林跃鑫等证明添加 0 .1%、0.2%银杏叶可显著提高肉鸡血清总蛋白和血清球蛋白 ,与对照组差异显著,血清总蛋白分别提高了 32.02%和 10.41% 14。与他们所得结果不同。B组鸡的总蛋白含量对比于A组鸡大约提高了20%，C组鸡总蛋白含量对比于第一组鸡大概提高了10%。 可能因为加了蝇蛆的作用，因为李广宏证明2蝇蛆里面的蛋白质含量丰富，所以导致我们B组、C组提高的量跟他们的实验结果有差异。本实验结果表明，饲喂鸡银杏叶提取物加蝇蛆的饲料对鸡的免疫性能无明显改变。 13金陵科技学院学士学位论文 第二章 数控加工动态仿真技术综述金陵科技学院学士学位论文 第三章 一种可用于仿真系统开发的平台ACIS金陵科技学院学士学位论文 第四章 其他方面5 结论本实验得出，在鸡的饲料中添加银杏叶提取物和蝇蛆来饲喂鸡，对鸡的胸腺指数、脾脏指数、法氏囊指、鸡的总蛋白含量均无明显影响。金陵科技学院学士学位论文 第五章 结论金陵科技学院学士学位论文 参考文献参考文献1刘杏宝.笼养蝇蛆喂鸡效益好J湖北省新洲县畜牧局 10-122李广宏，钟昌珍，宗良炳，雷朝亮，鲁汉平.蝇蛆蛋白粉的营养评价J中国大学昆山研究所，1997 34（6）3陈发兴, 赖钟雄. 银杏愈伤组织细胞生长及其黄酮苷含量J. 福建农林大学学报: 自然科学版, 2004, 33( 4) : 456- 458.4 邵继平，王伯初，陈欣，段传人。银杏叶提取物药用价值的研究进展J 重庆大学 生物工程学院教育部生物力学和组织工程重点实验室，重庆400445陈伟,张瑞霞,曹阳春.饲料级银杏叶提取物的主要功能及应用前景J 长兴大洋生物饲料有限公司, 浙江长兴 313104 6杨小燕 , 林跃鑫 , 李焰。银杏叶提取物对肉鸡生产性能 、屠宰性能和免疫指标的影响J 龙岩学院生物科学与工程系 ,福建 龙岩 3640007 谢伟。银杏叶提取物对小鼠抗疲劳能力影响的实验研究J8 黄其春，何玉琴，李焰，杨小燕。银杏叶提取物的免疫调节作用研究进展J 龙岩学院9 董平祥。中药制剂对肉仔鸡免疫器官及生长性能的影响 广东省肇庆工程技