气相色谱研究.doc

一定是正负极性反了代码是0与1你只要在控制面板上调一下就行了出现负峰的情况也就几种可能。一、极性反，二、工作站连接、三、水分干扰；四、组分干扰，如：氩空气和氢气的流量比例可能发生改变，空气流量减小。把空气流量适当调大一些，负峰就消失了。我的色谱就这样处理的。以氢气做载气的话，氧气浓度在.以下的时候出的是负峰，高于这个浓度时候出的是正峰这是正常的现象，因为氢气做载气的时候就会有出负峰的情况操作FID时，低电离效率的溶剂（如CS2）或杂质出现，使原基流较高的输出基线减少而显示为负峰；操作FID时，在无极化电压，样品量较大可能出现负峰。FID经常点不着火的故障比较常见，一般注意以下几点：1、检查一下FID喷嘴是否污染，长期使用样品燃烧后在FID喷口处结碳造成喷口口径变细，使得载气和燃气混合后流出喷口的线速度增加，不易点火，建议清洗检测器喷嘴，扩宽回复喷口内径，2、注意检查一下载气、燃气、助燃气比率关系： 载气1：燃气1：助燃气10 ，填充柱色谱分析时在气流速不宜过大，取决于FID喷嘴的内经，毛细管色谱分析时注意尾吹流量不宜过大、否则不易点火。原因同上1、所述1。氢空比是否正常2。看看喷嘴里是否有石墨碎片，用那根细钢丝通通喷嘴3。检测器温度不够不容易点着火4。点火时把氢气开大空气关小只要保证FID检测器氢气正常燃烧，供给燃烧消耗的空气中的氧气量充分（氢气：空气=1:810），样品中微量的氧不会影响检测器的检测限FID条件的最佳选择FID是我们日常气相分析中常用的检测器，几乎所有能汽化的有机物质在FID上都有响应，正确控制好载气、氢气、空气的流速是我们顺利完成分析工作的必要重要条件。 虽然离子室结构与物质的响应值有着很大的关系，但是对于一台色谱离子室的结构是相对固定的，要使一组组分有良好的分离和较高的响应值，我们只有从三种气体的流速着手。 1、载气的流速：FID可用载气有N2、Ar 、He、H2等，由于氮气价廉易得、响应值大，故是常用的一种载气。氮气的流速会影响灵敏度和分离度。较高的流速虽然能提高灵敏度，但是某种程度上使分离度变差，较低的流速虽然能使组分得到完全的分离，但会使灵敏度变低，所以在实际分析工作中要根据色谱柱的分离效率调整载气到合适的流量。保证在有较主高灵敏度的基础上，又能使组分得到良好的分离。 2、氢气的流速：氢气做为燃烧气体，其流速也影响检测器的灵敏度。当氮气流速相对固定时，随着氢气流量的增大，响应值也逐渐增大，增至一定值后又逐渐降低；当氮气流速不同时，最佳的氢气流速也不同，即氮气、氢气流速有一个最佳的比值。当氮气、氢气流速比相对最佳值时，不但响应值大，而且流速有微小变化时对信号的影响最小。一般氮气、氢气流速最佳比为（11.5）：1。切记氢气流量不宜过大，否则会使噪声增加，仪器工作不稳定。 3、空气的流速：空气作为助燃气体，并为离子化过程提供氧气，同进起着清扫离子室的作用。空气的流速也影响灵敏度。随着空气流量的增加，灵敏度也相对渐趋稳定，空气与氢气的比约为（1020）：1；一般情况下为250500ml/min 比较合适。当然最好根据实际情况进行确定，一般在选定氢气和氮气流速之后，逐渐增大空气流速到基流不再增大，再过量50 ml/min就足够了.色谱仪中尾吹气的使用 尾吹气是从色谱柱出口直接进进检测器的一路气体，又叫补充气或辅助气。填充柱不用尾吹气，而毛细管大多采用尾吹气。这是由于毛细管柱内载气流量太低（常规为13ml/min），不能满足检测器的最佳操纵条件（一般检测器要求20ml/min的载气流量）。在色谱柱后增加一路载气直接进进检测器，就可保证检测器在高灵敏度状态下工作。尾吹气的另一个重要作用是消除检测器的死体积的柱外效应。经分离的化合物流出色谱柱后，可能由于管道体积的增大而出现体积膨胀，导致流速缓慢，从而引起谱带展宽。加进尾吹气后就消除了这一现象。 那么，尾吹气流量究竟多少合适呢？这要看所用检测器和色谱柱的尺寸而定。比如，用0.53mm大口径柱时，柱内流量可达15ml/min，这对微型TCD和单丝TCD来说已经够大了，就没有必要再加尾吹气了。而对于FID、NPD、FPD则需要至少10ml/min的尾吹气的流量，对于ECD就需要20ml/min的尾吹气（ECD一般需要载气总流量大于25ml/min）。使用常规或微径柱时，尾吹气流量应相应加大。经验参考值为：FID、NPD、FPD需要柱内载气和尾吹气的流量之和为30ml/min左右，ECD则需要4060ml/min。当需要在最高灵敏度状态下工作时，应针对具体样品优化尾吹气流量以及其他气体流量。一般情况下尾吹气所用气体类型应与载气相同。 尾吹气流量是在安装好色谱柱后，在检测器出口处用皂膜流量计测定的。留意，测定尾吹气流量时要封闭其他气体（如使用FID时要封闭空气和氢气），用0.32以下内径的色谱柱时，可不封闭柱内载气，这时测得的流量为柱内载气和尾吹气流量之和。气相色谱仪器系统检测器操作要点检测器操作要点一、尾吹气的使用 尾吹气是从色谱柱出口直接进入检测器的一路气体，又叫补充气或辅助气。填充柱不用尾吹气，而毛细管大多采用尾吹气。这是因为毛细管柱内载气流量太低(常规为13ml/min)，不能满足检测器的最佳操作条件(一般检测器要求20ml/min的载气流量)。在色谱柱后增加一路载气直接进入检测器，就可保证检测器在高灵敏度状态下工作。尾吹气的另一个重要作用是消除检测器的死体积的柱外效应。经分离的化合物流出色谱柱后，可能由于管道体积的增大而出现体积膨胀，导致流速缓慢，从而引起谱带展宽。加入尾吹气后就消除了这一现象。 那么，尾吹气流量究竟多少合适呢？这要看所用检测器和色谱柱的尺寸而定。比如，用0.53mm大口径柱时，柱内流量可达15ml/min，这对微型TCD和单丝TCD来说已经够大了，就没有必要再加尾吹气了。而对于FID、NPD、FPD则需要至少10ml/min的尾吹气的流量，对于ECD就需要20ml/min的尾吹气(ECD一般需要载气总流量大于25ml/min)。使用常规或微径柱时，尾吹气流量应相应加大。经验参考值为：FID、NPD、FPD需要柱内载气和尾吹气的流量之和为30ml/min左右，ECD则需要4060ml/min。当需要在最高灵敏度状态下工作时，应针对具体样品优化尾吹气流量以及其他气体流量。一般情况下尾吹气所用气体类型应与载气相同。 尾吹气流量是在安装好色谱柱后，在检测器出口处用皂膜流量计测定的。注意，测定尾吹气流量时要关闭其他气体(如使用FID时要关闭空气和氢气)，用0.32以下内径的色谱柱时，可不关闭柱内载气，这时测得的流量为柱内载气和尾吹气流量之和。二、FID使用注意事项1. FID虽然是通用型检测器，但是有些物质在此检测器上的响应值很小或无响应。这些物质包括永久气体、卤代硅烷、H2O、NH3、CO、CO2、CS2、Ccl4等等。所以，检测这些物质时不应使用FID。2. FID是用氢气和空气燃烧所产生的火焰使被测物质离子化的，故应注意安全问题。在未接色谱柱时，不要打开氢气阀门，以免氢气进入柱箱。测定流量时，一定不能让氢气和空气混合，即测氢气时，要关闭空气，反之亦然。无论什么原因导致火焰熄灭时，应尽快关闭氢气阀门，直到排除了故障，重新点火时，再打开氢气阀门。高档仪器有自动检测和保护功能，火焰熄灭时可自动关闭氢气。3. FID的灵敏度与氢气、空气和氮气的比例有直接的关系，因此要注意优化。一般三者的比例接近或等于1：10：1 ，如氢气3040ml/min ，空气300400ml/min ，氮气3040ml/min 。另外，有些仪器设计有不同的喷嘴分别用于填充柱和毛细柱，使用时要查看说明书。4.为防止检测器被污染，检测器温度设置不应底于色谱柱实际工作的最高温度。一旦检测器被污染，轻则灵敏度下降或噪声增大，重则点不着火。消除污染的办法是清洗，主要是清洗喷嘴表面和气路管道。具体办法是拆下喷嘴，依次用不同的溶剂(丙酮、氯仿和乙醇)浸泡，并在超声波水浴中超声10min以上。还可用细不锈钢丝穿过喷嘴中间的孔，或用酒精灯烧掉喷嘴内的油状物，以达到彻底清洗的目的。有时使用时间长了，喷嘴表面会积碳(一层黑色的沉积物)，这会影响灵敏度。可用细纱纸轻轻打磨表面除去。清洗之后将喷嘴烘干，再装在检测器是进行测定。三、TCD使用注意事项1. 确保热丝不被烧断！在检测器通电之前，一定要确保载气已经通过了检测器，否则，热丝可能被烧断，致使检测器报废！同时，关机时一定要先关检测器电源，然后关载气。任何时候进行有可能切断通过TCD载气流量的操作，都要关闭检测器电源。这是TCD操作必须遵循的规则！2. 载气中含有氧气时，会使热丝寿命缩短，所以有TCD时载气必须彻底除氧。而且不要使用聚四氟乙烯作载气输送管，因为它会渗透氧气。3. 载气种类对TCD的灵敏度影响较大。原则是讲，载气与被测物的传热系数之差越大越好，故氢气或氦气作载气时比氮气作载气时的灵敏度高。当然，要测定氢气时就必须用氮气作载气。四、NPD使用注意事项1. NPD是在FID基础上发展起来的，它与FID的不同在于增加了一个热离子源(由铷盐珠构成)，其用微氢焰。在热离子源通电加热的条件下，含氮和含磷化合物的离子化效率大为提高，故可选择性地检测这两类化合物。由于用氢气，NPD的安全问题与FID相同。2.热离子源的温度变化对检测器灵敏度的影响极大。温度高，灵敏度就高，但铷盐珠的寿命就会缩短。增加热离子源的电压，加大氢气流量，均可提高灵敏度。然而必须要注意，空气流量太底又会导致检测器的平衡时间太长；氢气流量太高，又会形成FID那样的火焰，大大降低了铷盐珠的使用寿命，而且破坏了对氮和磷的选择信性响应。气体流量一般设定为，氢气34ml/min ，空气100120ml/min ，用填充柱和大口径柱，载气流量在20ml/min左右，不用尾吹气，用常规毛细柱时，尾吹气设定为30ml/min左右。3. 在调节和设置热离子源的电压时，切记关闭检测器电源，以免不小心烧毁铷盐珠。4. 热离子源的活性元素(铷盐)容易被污染缩短使用寿命。要延长其使用寿命应注意；第一，避免SiO2进入检测器，色谱柱要很好的老化，尤其硅氧烷类固定液，其液膜要薄。还要避免衍生化后样品中有SiO2残留进入色谱柱。第二，关闭载气(如换钢瓶或换色谱柱)前，应将热离子源的电压调为0 ，否则没有载气通过，铷盐珠会在几分钟内烧毁。第三，在满足灵敏度要求的条件下，尽可能用低的热离子源电压。第四，仪器存放要避免潮湿，当仪器不用时，最好保持检测器温度在100以上(热离子源电压要关闭)。第五，如果一段时间不进样分析(如过夜)，就应该降低热离子源电压，但不要关闭。因为减低电压后铷盐珠仍是热的，再进样时升高电压很快就能稳定。如果关闭后再通电压，则检测器需要几小时的平衡时间。 五、ECD使用注意事项1. 防止放射性的污染。ECD都有放射源(一般为63Ni)，故检测器出口一定要管道接到室外，最好接到通风出口。不经过特殊培训，不要自己拆开ECD。要遵循实验室有关放射性的管理条例。比如，至少6个月应测试有无放射性泄露。2.ECD的操作温度一般要高一些，常用温度范围为250300。无论色谱柱温度多么低，ECD温度均不应低于250。这是因为温度低时，检测器很难平衡。3. 用ECD 时载气一般有两种选择，一是用氮气，二是用含5%甲烷的氩气。前者灵敏度高一些，但噪声也高；用后者时检测限与前者基本相同，只是线性范围更宽一些。氢气也可以做载气，但是要用氮气做尾吹气。载气与尾吹气的流速之和一般为60ml/min。流量太小会使峰拖尾严重，而流量太大又会降低灵敏度。4. ECD要避免与氧气或湿气接触，否则噪声会明显增大。因此载气和尾吹气要求很好地净化。此外，检测器污染测试和泄漏测试都要严格按照仪器操作规程进行。六、FPD使用注意事项1. FPD也可以用氢火焰，故安全问题与FID相同(见上面FID使用注意事项)2. FPD的氢气、空气和尾吹气与FID不同，一般氢气为6080ml/min，空气为100120ml/min，而尾吹气和柱流量之和为2025ml/min。气相色谱仪中氢火焰离子检测器的常见故障分析及处理本文根据实际工作经验，总结出氢火焰离子检测器的一些常见故障及其解决办法，以帮助使用者掌握一些仪器故障原因的分析及维修方法。氢火焰离子化检测器(FID)是目前使用最广泛的检测器，它能检测大多数有机物，灵敏度高，响应速度快，线性范围宽，恒温要求不高，结构简单，操作方便。在其使用过程中，由于使用不当或者一些意外因素，也经常会出现故障。常见故障有:1.氢焰点不着火，或者反复熄灭；2.放大器不能调零；3.基线漂移、噪声大；4.进样后不出峰；5.灵敏度显著降低等。现对故障的查找及解决方法分述如下:1.由于点火装置使用频繁，无论是高压打火还是低压加热，都容易造成损耗，所以点不着火或者反复熄灭是一个常见故障。对此应首先检查连接导线并打开离子室顶盖，对低压点火可直接观察热丝是否发红，热丝接地是否接触不良。对高压点火可从检测器中取出在外面打火，调节打火距离并检查充电电容是否漏电而使放电电压不够。如果点火装置正常但仍不能点火或点火后反复熄灭，就必然是气路有问题，例如氢气漏气、氢气流量不足、氢气载气流量比太低、喷嘴堵塞或部分堵塞等。2.整个氢焰检测电路不能调零。首先检查记录仪是否完好，当衰减拨到档或把信号输出线路断开时，记录笔应当回到零点。接着把检测器与放大器连接的同轴端卸下，检查放大器本身能否调零。如果不能调零，证明放大器有毛病，就应检查调频电位器是否失灵，负反馈线是否接通，尤其要检查第一级的工作是否正常，整个管子是否受潮或污染。对于长期使用的旧设备应考虑更换管子。如果放大器可以调零则可肯定它是好的。点火后记录笔又偏移很远，就应该检查气路系统和检测器，气体流量是否合适，固定液是否严重流失，系统是否污染或漏气等。3.基线漂移或噪声较大是不能进样分析的。这时应判断漂移和噪声是来自放大器还是检测器。当衰减拨到档或者信号输出线段，开始记录笔并不抖动，证明记录仪是好的。然后依次改变衰减档，若噪声依次变化，证明衰减器是好的；若噪声并不随之改变，则连接电缆和衰减器可能有接触不良或污染。接着让放大器空白运转，如果噪声继续存在，说明放大器本身有问题。此时应仔细检查放大器电源是否有交流声，接触部位是否接触良好，第一级探头是否污染受潮或屏蔽不好。若晶体管或集成运算放大器的噪声太大，则应更换新器件。如果放大器的噪声很小但连接检测器后噪声增加、基流过大，说明气路系统有问题。可分别断开氢气源、空气源、载气源进行检查。氢气流量太高、空气流量太低、或者柱温太高、控温准确度低等都会使噪声增大。采取措施使噪声降低后，可用基流补偿旋钮进行补偿。4.如果进样后不能出峰，情况很复杂，需要对很多部位分别进行细致的检查。主要从气路系统和离子室两方面着手。在气路系统方面有可能是管路、注射器，或者是气化室漏样造成的。也有可能是由于样品被色谱柱或者连接管路吸附或吸收。在离子室中有可能存在的问题是收集极被污染、收集极位置发生偏离、喷嘴堵塞或部分堵塞、由于喷嘴的损坏导致漏样、极化电压未加或偏低。5.灵敏度的降低也是操作中经常出现的问题。有很多因素可以造成灵敏度的降低，如接触不良，氢气流量不是最佳数值，空气流量太低、气路有漏洞等，这些都应当重新检查和调整。注射器、气化室、色谱柱接头、喷嘴等有可能漏气、漏样的部位发生泄漏，以及电极被污染都有可能发生灵敏度下降，需要逐一进行检查。总之，对分析仪器来说，避免故障的最主要的做法是正确的操作和调节，切忌盲目操作。对核心部位如离子室、微电流放大器等减少震动和碰撞，保证绝缘，根据不同的检测目的合理调节仪器的操作条件，并减少各种因素对仪器的污染和干扰。只有这样，才能减少故障发生的可能性。基线不稳故障（FID）基线不稳故障排除：在使用氢火焰检测器分析样品时，首先要求色谱仪器要有一个稳定、平直的基线。为了达到这一点，除了正确选择各种操作条件外，往往还要着手分析和解决引起基线不稳定的各种因素和作用原因。引起氢火焰检测器基线不稳定的原因是复杂的，至少常见的有以下这些：(1) 气路中氢气、空气和载气的流量配比不适当；(2)氢火焰离子室受潮，收集极绝缘不良；(3)色谱柱固定液严重流失；(4)气源压力太低，气源压力波动；(5)氢气与空气管路及载气污染或气源不纯；(6)柱室与检测室温度波动与漂移；(7)氢火焰离子室喷嘴玷污；(8)气路系统有漏气；(9)极化电压不稳定，引起接触不良；(10)信号电缆接触不良或振动过大；(11)微电流放大器供电电压太低、高电阻受潮、内部焊点松动；(12)记录仪不稳定故障、仪器接地不良、电源干扰、仪器周围静电场干扰太大；(13)衰减器触点或焊点接触不良；(14)氢火焰离子室出口有强风吹过；(15)仪器环境空气中尘埃太多。上面列出了造成氢火焰检测器基线不稳定故障的各种可能原因。由于原因太多，为了提高检查效率，下面给出了相应的检查步骤：(1)环境检查：首先用直观的方法检查仪器所处环境中尘埃是否太多、离子室出口是否有强风吹过、离子室附近是否有强静电场存在，以及仪器工作台是否有强烈振动。(2)灭火检查：关闭氢气后，氢火焰熄灭。此时观察仪器基线记录情况，如果基线记录变好，能走出一较理想的合格基线，则判定为气路故障；若基线记录仍不合格，说明电路部分(包括检测器电路在内)有故障。(3)气路配比检查：气路中氢气流量、空气流量和氮气流量，三者的相对大小对于稳定的火焰来说关系很大。当火焰不稳定时基流和噪声也就增大；在各流路流量配比恰当时，可获得最大的灵敏度和理想的基线。如果调节气路流速比之后，基线无明显好转，或各气路根本调不到最佳，则应转入下步检查，作进一步的了解。(4)基线漂移与波动检查：检查基线不稳定性的表现，是单纯性的基线漂移与波动，还是其它噪声表现形式，若属于前者转入(5)，属于后者转入(14)，按基线噪声故障处理。（5）证实进样后组分峰是否出完。（6）高沸点组分的消除：当有些组分在柱中保留时间太长，影响后面正常进样时，可采取气路反吹的方法消除。气路反吹时间至少不少于原进样出峰时间。另一种方法是适当加快流速和提高柱温，让高沸点组分尽快逸出，以缩短进样周期。（7）温控变化趋势检查：分别观察检测柱室温度与检测器温度的变化。检测中应特别注意柱室与检测器的温度变化趋势是否和基线漂移趋势相同，核对两者周期是否一致。如两者有同步现象，则是温控系统故障；如温度没有可观察到的变化，或者虽然有变化，但是与基线漂移不同步，则应进行（9）的检查。（8）温控系统故障：温控精度下降现象属于温控系统中的一个典型故障。（9）系统漏气检查。（10）系统漏气修理。（11）气源压力太小及波动检查。（12）换气源及增加气阻：调节空气和氢气流量在最佳状态。（13）离子室、喷嘴冷凝：在离子室温度低于柱温或冷凝物的沸点时，有可能造成样品中的高沸点物或水蒸气在离子室，特别是喷嘴中冷凝。这时应考虑升高离子室温度以消除这种冷凝现象。（14）降低柱温观察基线稳定性：由于色谱柱中固定相的流失与柱温下降是指数关系，因此如果固定相流失大，则应降低柱温其值将大幅度下降。用这种方法可以较快地判定是否柱流失过大。（15）固定相流失大的处理：首先需考虑固定液允许使用的最高温度，如果此值很接近所用柱温，那么使用时势必有流失过大的现象；如果此时仍必须使用，则应在低灵敏挡进行；如分析方法允许，可采取其它种类色谱柱。柱流失的另一常见原因是柱子没有充分老化，如果升温老化柱子一段时间后，基线趋于稳定则证实是此种原因。当柱子使用中不慎发生损坏时，需更换新的色谱柱。（16）火焰颜色检查：挡住周围的强光仔细观察喷嘴处氢火焰的颜色。正常时火焰应呈浅蓝色或看不到，如果火焰处有明显的色彩，如黄色、红色或跳动的亮点，则认为火焰有玷污。（17）关断氮气，观察噪声：在用氮气作载气时，切断氮气流量调节阀，暂时使载气流量降到零，如果是用氮气作辅助气（也称尾吹气），则关死辅助气控制阀。此后观察基线稳定性能否变好，如变好则证明氮气气路有污染。（18）氮气气路污染：氮气气路污染，包括氮气不纯和整个管路被污染。如果氮气气源不纯，可以更换新的过滤净化器（如分子筛）之后，基线短时期内稳定这一点而加证实。如更换过滤净化器之后，基线噪声消失，需考虑更换无污染的氮气气源；如果更换过滤净化器之扣基线噪声无变化，需考虑管路被污染。通常在用氮气作载气时，需首先考虑柱子到离子室之间的管路。当然柱前气路也可能被污染，区别两者的一个方法是仔细观察基线噪声的形态，如果在基线上夹有出峰状的不规则干扰应考虑为柱前污染，如果无出峰状干扰则考虑为柱后污染。对污染的气路要及时进行清洗。（19）空气、氢气污染处理：如果空气和氢气气路污染，也会影响氢火焰的基线稳定性。证实并区别氢气和空气哪一路污染的方法，是固定氮气，逐渐增加和减少氢气并观察是否有一最大基流出现。如果氢气增大后一直没有最大基流存在，即随着氢气增大，基流一直单方向上升，则可认为是氢气气路污染；否则就认为是空气气路有污染发生。判别气路污染是由于气源不纯还是由于气路管道不洁所造成的，可用更换过滤净化器后基线的噪声变化情况而实现。如在更换过滤净化器之后，基线有短期处于稳定，则说明过滤器之后的管路没有污染，污染发生于气源或过滤器之前的管路。此时需考虑更换气源及清洗前面管路。如更换过滤器之后不起作用，则需要对氢气或空气管路进行清洗了。（20）喷嘴玷污：一般说来除了柱大量流出物会明显改变火焰颜色外，能够改变火焰颜色的就是喷嘴处玷污了。当喷嘴表面有有机物覆盖时，火焰一点燃，就会受到其影响。这时可拆下离子室外罩，单独用乙醇清洗喷嘴，必要时可拆下喷嘴组件在乙醇中浸泡几分钟，再用毛刷或绸布轻擦，用热风吹干后装回原处。此时应注意三点：一是不要再用手触摸喷嘴表面，使其再度污染；二是装回时要更换一个适当的密封垫片，而且装完后用干净橡皮堵住出口进行试漏；三是安装喷嘴时，扳手一定不要碰到喷嘴，否则喷嘴易碰碎或根部碰裂，造成漏气事实上，很多朋友在作分析称量时都没有考虑过，所以其实验数据常常不可靠，也特别容易受到别人的质疑（尤其是到国外发表文章时，或者和国外合作时）。这里给大家一个判断的基本方法:样品的取样量应该这样来确定：如果采用一步直接溶解配制溶液：称样量=天平的感量*2/0.2%；公式中的“天平的感量”代表了在称量样品时可能出现的最大误差；将其乘以2是因为在称量样品时，有两个过程：归零和称量，如果称量者的运气足够的臭，这时可能产生的绝对误差就是感量的两倍；0.2%代表了常规分析时我们对实验数据的误差所允许的限度。所以，对万分之一天平而言，感量为0.1mg，至少应该称样为0.1*2/0.2%=100 mg；对十万分之一天平，感量为0.01mg，至少应该称样为0.01*2/0.2%=10 mg。如果你手里没有十万分之一的天平，可以采用楼上战友描述的“二步稀释法”进行配制。即，称取100mg，配制溶液到1000ml；或者先称取100mg，配制为100ml的储备液，再吸取1ml，稀释到10ml，即可。气相分析方法的建立气相分析方法的建立简单说就是选择并优化一系列的样品预处理条件、色谱条件后对某物质进行有效的测定，并能给出一个客观、较为接近真值的结果。分析方法的建立主要包括两大部分，第一个就是分析条件的选择和优化，第二个就是对建立的分析方法进行评价。只有完成了上述两个方面，才能算是建立了完整的分析方法。一.分析条件的选择和优化在对分析条件进行选择和优化之前，要做好充分的准备工作。准备工作包括了解样品的结构式信息，如果可能的话最好知道样品的合成工艺以及可能的副反应和副产物，是否有异构体存在等等。因为异构体的存在对将来的分离可能会带来麻烦。准备工作做的足够细致是下一步工作顺利进行的保证，下面就可以进行分析条件的选择和优化了：1.检测器的选择气相色谱使用的检测器可以分为两种，通用型和选择型的；通用型的，顾名思义，就是对所有的物质均有响应（比如TCD），但是对某些物质的灵敏度不太好，除非不得已，一般不选择这个检测器，当然了，检测器的选择也和你的定量方法有关，如果你要用内标、外标定量的话，还是选择一个对目标物有较高灵敏度的检测器，此时不建议使用通用型检测器，如果用的是面积归一化法定量的化，通用型检测器还是有优势的；除了通用型检测器之外的其它检测器都是选择型的，比如FID，ECD等等，这类检测器只对部分物质或者大部分物质有响应，绝大多数检测器都属于这个类型。在对色谱条件优化之前一定要明确到底选择什么检测器！2.色谱柱的选择色谱柱的选择是整个色谱分析条件优化过程中最重要的一环。色谱柱选择的是否恰当直接决定了分析结果的准确性、数据的重现性、峰型的美观等等。目前气相色谱中使用的色谱柱分为填充柱和毛细管柱两大类。从使用范围来看，毛细管柱更广泛一些，但并不意味着填充柱不重要，比如说一些永久性气体的分析、水份的测定等还必须用填充柱来做，简单说就是各有各的应用范围。由于本人填充柱应用的比较少，没什么可以讲的，就简单说一下毛细管柱使用时选择的一些注意事项。（1）“相似相溶”原理是首要指导方针。在选择柱子的时候，根本的原则是相似相溶，简单说就是分析非极性物质用非极性的柱子，极性物质用极性的柱子。相似相溶的道理比较简单，被分析物和固定液之间作用的次数越多，理论塔板数就越大，柱效也就越高，有助于难分离组分的分离，同时峰的对称性也较好；如果被分析物和固定液之间没有作用力，或者作用力很弱的话，也就说几乎不保留的话，这时几乎不可能有分离了，所有组分都死时间出峰，这不是我们的目的。因此选择柱子的时候一定要先对分析物的极性有个大致的判断，根据相似相溶的基本原理进行选择，选择不当的话有什么后果呢？以某二羰基化合物的分析为例，不同柱子的结果如图所示：两张图对比鲜明，该选择谁，一目了然！（2）特殊样品需要用特殊柱子分析。在很多搞新项目研发的公司（比如我们单位）做分析工作的话，经常会遇到一些稀奇古怪的样品，根本没有任何标准可以参考，都得自己摸索，经常会遇到一些常用柱子无法分析的项目，比如胺类物质、杂环化合物等等，这些你用普通柱子几乎无法完成，由于这些物质多少都有碱性，对常规柱子伤害较大，且做出来的结果可靠性、峰型等不确定因素较多，因此对这类样品应该选择针对性较强的柱子，此时选择柱子最好的办法就是多查阅相关资料、文献，再加上适当的实验摸索，才能选到合适的分析柱！再举个例子，之前做过一个胺类物质，当时手头没有合适的柱子，就用一个非极性柱子（DB-1）走了一下，结果如图，峰型奇丑无比！更换针对性更强的某品牌的胺基柱之后，结果如下图所示！对比很是鲜明！（3）必要的时候需用不同极性的柱子对目标物进行对比分析。对于多组分的研发反应液来说，仅仅靠一根柱子就定方法的话，存在有些杂质和目标峰没有分开（或者完全包在主峰里面）的风险，因此采用不同极性做出来的结果进行对比可以有效的避免类似的事件的发生。如果二者一致的话，一切都好说；如果二者不一致的话，需结合其它定性手段综合分析，决定柱子的选择！这个需要多摸索，多实践，多积累来完成！(4)色谱柱参数对分离的影响. 毛细管色谱柱的参数主要包括四个方面:固定液极性、柱长、内经、膜厚等。根据固定液极性的强弱可以非极性柱（DB-1或者等同的其它品牌）、弱极性柱（DB-5或者等同的其它品牌）、中等极性柱（DB-17或者等同的其它品牌）、强极性柱（DB-WAX或者等同的其它品牌），在选择柱子的时候应该根据样品本身极性的强弱依据“相似相溶”原理进行选择；柱长对分离的影响也很明显，通常柱子越长，分理效果越好，但是保留时间增加的也很明显，这本身是个矛盾，需要找到一个平衡点！对于特别难分离的物质，一般可以选用长柱子。内径对柱容量和柱效有较大的影响，内径越小，柱效会变高，但柱容量会下降，这个参数选择的空间不是很大。膜厚是一个选择空间比较大的参数，通常膜厚越厚，对分析物的保留会增加，保留时间增大，有助于分离，但是由于传质阻力的增加，柱效会降低，因此，如果你分析的是保留弱的物质(比如一些小分子)，可以考虑试试厚液膜的柱子；反之则选择薄液膜的柱子。3.温度程序的优化对气相色谱而言，仅仅依靠温度程序的优化是无法从根本上改变分离度的，只能在一定范围内改善分离度。举个例子，如果你选定其它的色谱条件（柱子，载气），A物质和B物质在某个温度程序下是一个峰（就是没有任何分离迹象）的话，此时无论你怎么改变温度程序，A和B能分开的可能性都很小，此时最有效的办法就是更换其它极性不同的柱子或者换根长柱子试试！所以说温度程序的优化对难分离物质对的分离作用很有限!经常有板油发贴子问：我想分析某个物质（已知结构式），该用什么程序呢？对于这种问题，最简单的办法，你自己试几个温度程序不就行了吗，很多物质的分析试没有现成的分析方法的，色谱是一门实践的学科，自己多试几个温度程序，哪个分离度好就用那个！这个需要自己去摸索，实践！还有一个问题，很多板油会问，到底是恒温分离度好还是程升分离度好？对于这个问题，个人觉得很难回答！其实首先要明确程序升温的目的是干吗的，程升多应用于组分沸程宽的混合物的分离的，简单说就是分析样品中各组分的沸点差异比较大的样品多用程升来做，如果不是这样的情况，不建议使用程序升温。下面以一个例子的分离来说明恒温和程序升温对难分离物质对进行分离的影响，如图所示，B的温度程序是180起,10/min程序升温至300;A的温度程序是240,恒温12min后20/min升温至300. 从图中对比可以看出,程升时大峰后面的两个小峰分离度较差,且和大峰的分离度也不是很好,经过较高的一个温度恒温后,那两个小峰的分离度得到了有效的改善,效果还是比较明显的!但这并不意味着恒温的分离度一定优于程序升温,不能一概而论,要具体问题具体分析再具体解决!二.分析方法的评价分析方法建立后需要对方法的准确性、稳定性、可行性进行一个评估，需要做的实验包括：检出限、线性范围、重现性、回收率等。检出限是指所建立方法可以检测到的最小样品浓度，通常以3倍信噪比计算；检测限可以间接说明方法的灵敏度。线性范围通常有检测器的特性所