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特种蛋白 市场中心 1 免疫比浊法检测抗链球菌 2 免疫比浊法检测抗链球菌 项目简介 A组链球菌的代谢产物之一 可以溶解人红细胞 具有很强的抗原性 抗链球菌溶血素O 机体因咽炎 扁桃体炎 猩红热 丹毒 脓皮病 风湿热等感染A组链球菌后 可产生链球菌溶血素O抗体 即 Anti StreptolysinO ASO 3 反应原理 样本中的ASO与超敏化的抗ASO抗体胶乳颗粒试剂反应 形成免疫复合物 在波长570nm处检测其浊度变化 其变化程度与样本中的ASO含量成正比 4 试剂构成 试剂1 R1 氨基乙酸缓冲液试剂2 R2 乳胶颗粒超敏化的链球菌素O胶乳颗粒0 12w v 5 样本指标 新鲜血清 样本稳定性 2 8 保存稳定2天 20 保存更长时间 样本中胆红素 60 mol L 血红蛋白 12mg dL 肝素 20IU mL EDTA 300 M时未观察到明显干扰 6 操作方法 1 用去离子水将ASO校准液按倍比稀释 以水为零点 建立工作曲线 校准品另购 建议使用RANDOX或其它有溯源性的校准品 稀释方法如下 7 2 参数设置 biobase 主 副波长 578nm 700nm比色杯光径 1 0cm温度 37 分析类型 终点法3 自动分析 自动化生化分析仪操作程序的设置按手工操作法的设置 根据各实验室拥有的分析仪型号及操作说明书而设置 4 适合仪器 BIOBASE系列分立式全自动生化分析仪 日立 OLYMPUS东芝等全自动生化分析仪 计算方式 样本 A样本ASO浓度 标准浓度标准 A 8 R1 试剂1R1 100 lS 校准品或U 样品3 l 预孵预时间 延迟时间 读数时间 读取吸光度A1 读取吸光度A2 计算 A 操作过程 R2 试剂2 R2 170 l 9 性能指标 1 试剂空白吸光度 1 0000 570nm lcm光径 2 精密度 重复性 10 批间相对极差R 10 3 准确度 相对偏差为 10 4 线性范围 0 1200IU mL r 0 990 5 稳定性 本试剂在2 8 无腐蚀性气体的避光环境中贮存12个月 10 参考范围 小于166IU mL 临床意义 用于检测人体血清中抗链球菌溶血素O ASO 的含量 机体被链球菌感染后可产生抗链球菌溶血素O抗体 ASO 此抗体是链球菌的外毒素 检测ASO有助于诊断由溶血性链球菌引起的疾病如类风湿 急性肾小球疾病 猩红热和扁桃体炎等疾病 11 注意事项 1 试剂含有叠氮化钠 有毒性 误入眼 口中或沾染到皮肤上请立即用水彻底冲洗 必要时到医院就诊 叠氮化钠可以和铜 铅等金属发生强烈的反应生成叠氮化金属 故废弃时请充分稀释废液和冲洗排水管 以免在排水管中有残留 2 不同批号试剂不能混用 更换试剂批号时 请重新定标 3 试剂开封后应按指定方法密闭储存 4 接触过检测标本的试管等器具应按医疗废弃物处理办法进行处置 12 参考文献 1 全国临床检验操作规程 NationalGuidetoClinicalLaboratoryProcedures 第3版 ThirdEdition 中华人民共和国卫生部医政司 叶应抚 王毓三 申子瑜 2 现代临床生化检验学 张秀明 李健斋 3 实用医学检验学 朱忠勇 13 免疫比浊法检测C反应蛋白 14 免疫比浊法检测C反应蛋白 项目简介 C反应蛋白 C reactiveprotein CRP 1930年Tillet和Francis在急性大叶性肺炎患者血清中发现能在钙离子存在时与肺炎球菌C多糖起沉淀反应而得名 是人类重要的急性期反应蛋白 急性期浓度可升高上千倍 循环中的CRP半衰期为19小时 人类CRP是由肝脏产生 由五个相同的亚基依靠非共价键形成的环状五聚体 这一特征性结构使其归类于五聚素 一组具有免疫防御特性的钙结合蛋白 家族 低等动物同样存在CRP 如在鲎 河蚌等中也发现过 但并不一定起急性期反应蛋白的作用 CRP特征反应是能在钙离子存在的条件下特异性结合磷酸胆碱基团 通过与配体 凋亡与坏死的细胞 或入侵的细菌 真菌 寄生虫等的磷酰胆碱 结合 激活补体和单核吞噬细胞系统 将载有配体的病理物质或病原体清除 识别外来物质 激活补体系统 增强条理作用 增强吞噬细胞吞噬作用与血小板激活因子 RAF 结合 降低炎症反应 与染色体结合 消除坏死组织里的细胞DNA 15 反应原理 样本中的CRP与超敏化的抗CRP抗体胶乳颗粒试剂反应 形成免疫复合物 在波长570nm处检测其浊度变化 其变化程度与样本中的CRP含量成正比 16 试剂构成 试剂1 R1 氨基乙酸缓冲液试剂2 R2 乳胶颗粒超敏化的CRP抗体液0 20w v 17 样本指标 新鲜血清或肝素抗凝血浆 样本稳定性 15 25 可稳定3天 2 8 保存稳定6天 20 保存至少可稳定6个月 样本中胆红素 100 mol L 血红蛋白 5 0mg dL时未观察到明显干扰 18 测定条件 主波长570nm副波长800nm比色杯光径1 0cm温度37 分析类型终点法校准程序 用去离子水将CRP校准液按倍比稀释 以水为零点 建立工作曲线 校准品另购 建议使用RANDOX或其它有溯源性的校准品 稀释方法如下 19 操作步骤 R1 试剂1R1 100 l 预孵预时间 延迟时间 读数时间 计算方法样本 A样本CRP浓度 标准浓度标准 A 蒸馏水 U或S 2 l R2 试剂2 R2 100 l 读取吸光度A2计算 A 读取吸光度A1 20 性能指标 1 试剂空白吸光度 1 0000 570nm lcm光径 2 精密度 重复性 10 批间相对极差R 10 3 准确度 相对偏差 10 4 线性范围 0 32 0mg dL r 0 990 5 稳定性 本试剂在2 8 无腐蚀性气体的避光环境中贮存12个月 21 参考值 0 0 6mg dL 临床意义 CRP是一种急性时相反应蛋白 在机体发炎时 患者血清中的CRP升高 尤其以肺炎球菌感染 组织感染等多种疾病升高明显 在1930年 CRP由Tillet在急性感染患者血清中发现 现在CRP已成为检测感染和发炎的敏感指标 并对手术等患者的监视和对婴儿感染的早期诊断有一定的帮助 研究还发现 正常值范围内的高水平CRP与心肌疾病的死亡率有关 是心血管疾病的一个独立危险因素 22 参考文献 1 全国临床检验操作规程 NationalGuidetoClinicalLaboratoryProcedures 第3版 ThirdEdition 中华人民共和国卫生部医政司 叶应抚 王毓三 申子瑜 2 现代临床生化检验学 张秀明 李健斋 3 实用医学检验学 朱忠勇 23 免疫比浊法检测前白蛋白 24 免疫比浊法检测抗链球菌 项目简介 前白蛋白 甲状腺转运蛋白 是一类富含色氨酸55KDa的蛋白 由肝细胞合成 主要作用是结合与转运 反应原理 先将样本与缓冲液温育 然后加入前白蛋白抗体试剂 340nm读取混浊液的吸光度与样本中前白蛋白浓度成正比 样本浓度值可由标准曲线上求得 25 试剂构成 试剂1 R1 Tris HCl缓冲液试剂2 R2 抗人前白蛋白抗体Tris HCl缓冲液 26 样本指标 新鲜血清 在2 8 保存稳定72小时 20 可保存6个月 样本中胆红素 1000umol L 类风湿因子 600IU mL 血红蛋白 200mg dL 血脂 甘油三酯 500mg dL时未观察到明显干扰 27 测定条件 主波长340nm副波长700nm比色杯光径1 0cm温度37 分析类型终点法校准程序 用去离子水将PALB校准液按倍比稀释 以水为零点 建立工作曲线 校准品另购 建议使用RANDOX或其它有溯源性的校准品 稀释方法如下 28 操作步骤 计算方法样本 A样本PALB浓度 标准浓度标准 A R1 试剂1R2 试剂2S 校准品U 样品 预孵育时间 延迟时间 蒸馏水 U或读取吸光A1R2 75 l读取吸光度A2S 6 l R1 255 l计算 A 29 性能指标 1 试剂空白吸光度 1 1000 340nm lcm光径 2 精密度 重复性CV 10 批间相对极差R 10 3 准确度 相对偏差 10 4 线性范围 0 60mg dL r 0 990 5 稳定性 本试剂在2 8 无腐蚀性气体的避光环境中贮存12个月 30 参考范围 20 40mg dL 临床意义 前白蛋白是反映体内蛋白状态的优良指标 前白蛋白降低见于蛋白质营养不良 PCM 肝功能损伤 肝硬化 外伤及感染 皮质醇 帕金森氏病 饮酒和口服避孕药可导致前白蛋白升高 31 注意事项 1 试剂含有叠氮化钠 有毒性 误入眼 口中或沾染到皮肤上请立即用水彻底冲洗 必要时到医院就诊 叠氮化钠可以和铜 铅等金属发生强烈的反应生成叠氮化金属 故废弃时请充分稀释废液和冲洗排水管 以免在排水管中有残留 2 不同批号试剂不能混用 更换试剂批号时 请重新定标 3 试剂开封后应按指定方法密闭储存 4 接触过检测标本的试管等器具应按医疗废弃物处理办法进行处置 32 参考文献 1 全国临床检验操作规程 NationalGuidetoClinicalLaboratoryProcedures 第3版 ThirdEdition 中华人民共和国卫生部医政司 叶应抚 王毓三 申子瑜 2 现代临床生化检验学 张秀明 李健斋 3 实用医学检验学 朱忠勇 33 免疫比浊法检测转铁蛋白 34 项目简介 是血浆中主要的含铁蛋白质 负责运载由消化管吸收的铁和由红细胞降解释放的铁 以TRF Fe3 的复合物形式进入骨髓中 供成熟红细胞的生成 TRF分子量约7 7万 为单链糖蛋白 含糖量约6 TRF可逆地结合多价离子 包括铁 铜 锌 钴等 每一分子TRF可结合两个三价铁原子 TRF主要由肝细胞合成 半衰期为7天 血浆中TRF的浓度受铁供应的调节 在缺铁状态时 血浆TRF浓度上升 经铁有效治疗后恢复到正常水平 35 反应原理 标本中的转铁蛋白与试剂中抗人转铁蛋白抗体在缓冲液中快速形成抗原抗体复合物 使反应液出现浊度 当反应液中保持抗体过剩时 形成的复合物随抗原量增加而增加 反应液的浊度亦随之增加 在340nm以终点法监测吸光度变化 与校准品对照 即可计算出未知标本中转铁蛋白的含量 36 试剂构成 试剂1 R1 PBS缓冲液 磷酸盐缓冲液 叠氮化钠试剂2 R2 抗人转铁蛋白抗体叠氮化钠 37 样本指标 标本为离心分离除去血液凝块的新鲜血清 血清样本可在2 8 C下储存不超过一周 如果需要保存更长的时间 标本必须冷冻 样本中乳糜 0 3 胆红素 500uM 肝素钠 100U mL 血红蛋白 5g L VC 0 5g L时未观察到明显干扰 38 测定条件 主波长340nm副波长700nm比色杯光径1 0cm温度37 分析类型终点法校准程序 用去离子水将TRF校准液按倍比稀释 以水为零点 建立工作曲线 校准品另购 建议使用RANDOX或其它有溯源性的校准品 稀释方法如下 39 操作步骤 计算方法样本 A样本TRF浓度 标准浓度标准 A R1 试剂1R2 试剂2S 校准品U 样品 预孵育时间 延迟时间 蒸馏水 U或读取吸光A1R2 80 l读取吸光度A2S 3 l R1 240 l计算 A 40 性能指标 1 试剂空白吸光度 0 3000 340nm lcm光径 2 精密度 重复性CV 6 批间相对极差R 8 3 准确度 相对偏差 10 4 线性范围 0 400mg dL r 0 990 5 稳定性 本试剂在2 8 无腐蚀性气体的避光环境中贮存12个月 41 参考范围 170 340mg dL 临床意义 前白蛋白是反映体内蛋白状态的优良指标 前白蛋白降低见于蛋白质营养不良 PCM 肝功能损伤 肝硬化 外伤及感染 皮质醇 帕金森氏病 饮酒和口服避孕药可导致前白蛋白升高 42 注意事项 1 本品仅用于体外诊断 如与人体接触 应用大量水冲洗 2 如仪器内无指定波长 选择波长接近的数值输入 3 建议各实验室建立自己的正常值范围 4 不同批号试剂不能混用 更换试剂批号时 请重新定标 5 试剂如需废弃 请用大量水稀释后再处理 43 参考文献 1 全国临床检验操作规程 NationalGuidetoClinicalLaboratoryProcedures 第3版 ThirdEdition 中华人民共和国卫生部医政司 叶应抚 王毓三 申子瑜 2 现代临床生化检验学 张秀明 李健斋 3 实用医学检验学 朱忠勇 44 紫外速率法检测葡萄糖 6 磷酸脱氢酶 45 项目简介 一种存在於人体红血球内 协助葡萄糖进行新陈代谢之酵素 在这代谢过程中会产生一种叫NADPH的物质能以保护红血球免受氧化物质的威胁 G6PD缺乏时 若身体接触到具氧化性的特定物质或服用了这类药物 红血球就容易被破坏而发生急性溶血反应 46 反应原理 G6PD在NADP存在条件下催化6磷酸葡萄糖生成6磷酸葡萄糖醛酸和NADPH 在340nm处测定NADPH的生成速率 即可测定葡萄糖6磷酸脱氢酶的活性 G6PD葡萄糖6磷酸 NADP NADPH 6磷酸葡萄糖醛酸结合血红蛋白含量或者溶血指数的测定 可以计算出每克血红蛋白中葡萄糖6磷酸脱氢酶的活性 47 试剂构成 试剂1 R1 Tris缓冲液200mmol L氯化钠120mmol L试剂2 R2 葡萄糖6磷酸5 0mmol LNADP2 5mmol L 48 样本指标 全血标本处理以及保存 肝素或EDTA K抗凝全血 2 8 可保存1周 取EDTA K抗凝全血 在3000转 分钟条件下 离心5分钟 去掉上清 吸取下层压积红细胞20uL加入1mL去离子水中 稀释51倍 充分混匀待红细胞完全溶解后 15 30分种 测定 G6PD在红细胞中很稳定 但溶血处理后 活性在1h内丧失30 样本应尽快处理 样本中铜离子 100 mol L 硫酸盐 5mmol L时未观察到明显干扰 49 测定条件 主波长340nm副波长405nm比色杯光径1 0cm温度37 分析类型速率法校准程序 采用因子法定标 50 操作步骤 计算方法计算方法 A min Vt 1000溶血液G6PD活性 U L A min F1 e Vs d压积红细胞中G6PD活性 U L 溶血液G6PD活性 51 F2 A min比色杯光径为1cm时 F2 F1 51 204970 蒸馏水 U 15 lR1 270 l R2 90 l 读取吸光度A2 计算 A min R1 试剂1R2 试剂2U 样品 预孵育时间 延迟时间 读数时间 读取吸光度A1 51 性能指标 1 试剂空白吸光度 0 3000 340nm lcm光径 2 精密度 重复性CV 6 批间相对极差R 8 3 准确度 相对偏差 10 4 线性范围 0 76500U L r 0 990 5 稳定性 本试剂在2 8 无腐蚀性气体的避光环境中贮存12个月 52 参考范围 采用肝素抗凝血 大于1100U L 采用EDTA抗凝血 大于1300U L 临床意义 葡萄糖6磷酸脱氢酶缺乏症常见于我国长江流域及其以南各省 葡萄糖6磷酸脱氢酶缺乏症是由基因突变引起的遗传性疾病 由于该基因为X连锁不完全显性遗传 男性发病率高于女性 G6PD缺乏是诱发伯氨奎啉类药物性溶血 蚕豆病 新生儿病理性黄疸 某些感染性贫血的主要原因 对高发病区人群进行该项指标的筛查 可以有效预防溶血症的发生 进行婚前体检和产前检查对优生优育和有效预防新生儿黄疸有重要意义 53 注意事项 1 本品仅用于体外诊断 如与人体接触 应用大量水冲洗 2 如仪器内无指定波长 选择波长接近的数值输入 3 不同批号试剂不能混用 更换试剂批号时 请重新定标 4 试剂如需废弃 请用大量水稀释后再处理 54 参考文献 1 全国临床检验操作规程 NationalGuidetoClinicalLaboratoryProcedures 第3版 ThirdEdition 中华人民共和国卫生部医政司 叶应抚 王毓三 申子瑜 2 现代临床生化检验学 张秀明 李健斋 3 实用医学检验学 朱忠勇 55 免疫比浊法检测D二聚体 56 项目简介 D 二聚体是纤维蛋白单体经活化因子 III交联后 再经纤溶酶水解所产生的一种特异性降解产物 是一个特异性的纤溶过程标记物 D 二聚体来源于纤溶酶溶解的交联纤维蛋白凝块 人体纤溶系统 它对保持血管壁的正常通透性 维持血液的流动状态和组织修复起着重要作用 D 二聚体血浆中水平增高说明存在继发性纤溶过程 而先生凝血酶 后又有纤溶系活化 并且也反映在血栓形成的局部纤溶酶活性或浓度超过血浆2 抗纤溶酶活性或浓度 溶栓治疗是指用药物来活化纤维蛋白溶解系统 一般为投入一种纤溶酶原活化物如尿液酶 链激酶或组织型纤溶酶原活化物 tpA 使大量纤溶酶生成 从而加速已形成血栓的溶解 FDP或D 二聚体生成 则表明达到溶栓效果 纤溶蛋白降解产物中 唯D 二聚体交联碎片可反映血栓形成后的溶栓活性 因此 理论上 D 二聚体的定量检测可定量反映药物的溶栓效果 及可用于诊断 筛选新形成的血栓 但是 到目前为止 商品的D 二聚体检测手段都尚存在一定局限性 其中D 二聚体的胶体金免疫过滤检测法 由于其快速测定 灵敏度高 阴性预报值高 重复性良好 临床医师较多采用 57 反应原理 试剂中包含胶乳颗粒与抗DD的单克隆抗体结合 胶乳颗粒在570nm产生吸收 当和样本中的DD发生凝集 在570nm吸光度上升 吸光度上升决定于DD的浓度 根据标准曲线可以检测出样本中DD含量 58 试剂构成 试剂1 R1 Tris缓冲液PH7 4试剂2 R2 胶乳颗粒包被的抗体 59 样本指标 新鲜血清或肝素抗凝血浆 避免溶血 血清可在 20 C下保存1个月 样本中乳糜 0 5 胆红素 500uM RF 500U mL 血红蛋白 10g L VC 0 5g L时未观察到明显干扰 60 测定条件 波长570nm比色杯光径1 0cm温度37 分析类型终点法校准程序 用去离子水将DD校准液按倍比稀释 以水为零点 建立工作曲线 校准品另购 建议使用RANDOX或其它有溯源性的校准品 稀释方法如下 61 操作步骤 计算方法样本 A样本DD浓度 标准浓度标准 A R1 试剂1R2 试剂2S 校准品U 样品 预孵育时间 延迟时间 蒸馏水 U或读取吸光A1R2 60 l读取吸光度A2S 10 l R1 180 l计算 A 62 性能指标 1 试剂空白吸光度 2 0000 570nm lcm光径 2 精密度 重复性CV 10 批间相对极差R 15 3 准确度 相对偏差 10 4 线性范围 0 20 g mL r 0 990 5 稳定性 本试剂在2 8 无腐蚀性气体的避光环境中贮存12个月 63 参考范围 小于1 0 g mL 临床意义 前白蛋白是反映体内蛋白状态的优良指标 前白蛋白降低见于蛋白质营养不良 PCM 肝功能损伤 肝硬化 外伤及感染 皮质醇 帕金森氏病 饮酒和口服避孕药可导致前白蛋白升高 64 注意事项 1 本品仅用于体外诊断 如与人体接触 应用大量水冲洗 2 如仪器内无指定波长 选择波长接近的数值输入 3 不同批号试剂不能混用 更换试剂批号时 请重新定标 4 试剂如需废弃 请用大量水稀释后再处理 65 参考文献 1 全国临床检验操作规程 NationalGuidetoClinicalLaboratoryProcedures 第3版 ThirdEdition 中华人民共和国卫生部医政司 叶应抚 王毓三 申子瑜 2 现代临床生化检验学 张秀明 李健斋 3 实用医学检验学 朱忠勇 66 免疫比浊法检测补体C3C4 67 项目简介 C3主要是由巨噬细胞 单核细胞 淋巴组织 骨髓 腹膜和肝脏等合成的一种 球蛋白 C3在C3裂解酶的作用下进一步裂解 参与所有补体的激活 C4是补体经典激活途径的一个重要组分 它的测定有助于SLE等自身免疫性疾病诊断 治疗和病因探讨 68 反应原理 以免疫比浊法为测定原理 补体C3 C4抗体与补体C3 C4抗原引起抗原抗体反应 形成免疫复合物 在340nm波长处检测其浊度的变化 其变化程度与样本中的补体C3 C4含量成正比 69 试剂构成 C3试剂1 R1 Tris缓冲液pH7 618 16mmol L聚乙二醇氯化钠123 20mmol L表面活性剂与防腐剂试剂2 R2 Tris缓冲液pH7 618 16mmol L抗人C3抗体防腐剂C4试剂1 R1 Tris缓冲液pH7 618 16mmol L氯化钠123 20mmol L表面活性剂与防腐剂聚乙二醇试剂2 R2 Tris缓冲液pH7 618 16mmol L抗人C4抗体防腐剂 70 样本指标 血清 肝素或EDTA血浆也能作为样本被使用 样本中脂血 5g L 胆红素 600umol L 溶血 5g L时未观察到明显干扰 71 测定条件 主波长340nm副波长700nm比色杯光径1 0cm温度37 分析类型终点法校准程序 用去离子水将C3 C4校准液按倍比稀释 以水为零点 建立工作曲线 校准品另购 建议使用RANDOX或其它有溯源性的校准品 稀释方法如下 72 操作步骤 蒸馏水 U lR1 2 0 l R2 0 l 读取两次吸光度 计算 A min R1 试剂1R2 试剂2U 样品 预孵育时间 延迟时间 读数时间 计算方法样本 A样本补体浓度 标准浓度标准 A 读取吸光度A1 读取吸光度A1 73 C3 性能指标 1 试剂空白吸光度 0 2000 340nm lcm光径 2 精密度 重复性CV 10 批间相对极差R 10 3 准确度 相对偏差 10 4 线性范围 0 520mg dL 0 5 20g L r 0 990 5 稳定性 本试剂在2 8 无腐蚀性气体的避光环境中贮存12个月 C4 性能指标 1 试剂空白吸光度 0 5000 340nm lcm光径 2 精密度 重复性CV 10 批间相对极差R 10 3 准确度 相对偏差 10 4 线性范围 0 130mg dL 0 1 3g L r 0 990 5 稳定性 本试剂在2 8 无腐蚀性气体的避光环境中贮存12个月 74 参考范围 C3成人 82 180mg dL 0 82 1 80g L C4成人 10 40mg dL 0 1 0 4g L 单位换算 mg dLx0 01 g L 临床意义 C3是补体系统中含量最多 最重要的一个组分 它是补体两条主要激活系统的中心环节 C3含量减低主要见于免疫复合物引起的肾炎 系统性红斑狼疮 反复性感染 皮疹 肝炎 肝硬化 关节疼痛等 狼疮性肾炎患者血清C3含量减少 病情缓解后可恢复正常 故C3的测定不仅有助于诊断 还可以观察疗效和监测预后 C4含量降低见于自身免疫性慢性活动性肝炎 SLE 多发性硬化症 类风湿性关节炎 LgA肾病 在SLE C4的降低常早于其它的补体成份 且缓解时较其它成份回升迟 狼疮性肾炎较非狼疮性肾炎C4值显著低下 C4含量增高常见于风湿热的急性期 结节性动脉周围炎 皮肌炎 心肌梗塞 Rditer s综合症和各种类型的多关节炎 75 注意事项 1 试剂含有叠氮化钠 有毒性 误入眼 口中或沾染到皮肤上请立即用水彻底冲洗 必要时到医院就诊 叠氮化钠可以和铜 铅等金属发生强烈的反应生成叠氮化金属 故废弃时请充分稀释废液和冲洗排水管 以免在排水管中有残留 2 不同批号试剂不能混用 更换试剂批号时 请重新定标 3 试剂开封后应按指定方法密闭储存 4 接触过检测标本的试管等器具应按医疗废弃物处理办法进行处置 76 参考文献 1 全国临床检验操作规程 NationalGuidetoClinicalLaboratoryProcedures 第3版 ThirdEdition 中华人民共和国卫生部医政司 叶应抚 王毓三 申子瑜 2 现代临床生化检验学 张秀明 李健斋 3 实用医学检验学 朱忠勇 77 免疫比浊法检测免疫球蛋白 78 项目简介 免疫球蛋白 immunoglobulin 指具有抗体活性的动物蛋白 主要存在于血浆中 也见于其他体液 组织和一些分泌液中 人血浆内的免疫球蛋白大多数存在于丙种球蛋白 球蛋白 中 免疫球蛋白可以分为IgG IgA IgM IgD IgE五类 79 反应原理 基于IgA IgM IgG抗体与IgA IgM IgG抗原间的反应 形成免疫复合物 分别在340 340 700nm波长处检测其浊度变化 其变化程度与样本中的IgA IgM IgG含量成正比 80 IgA 试剂构成 试剂1 R1 Tris缓冲液pH7 618 16mmol L氯化钠聚乙二醇防腐剂试剂2 R2 Tris缓冲液pH7 618 16mmol LIgA抗体防腐剂 IgM试剂1 R1 Tris缓冲液pH7 618 16mmol L氯化钠123 20mmol L聚乙二醇防腐剂试剂2 R2 Tris缓冲液pH7 618 16mmol LIgM抗体防腐剂 IgG 试剂组成 试剂1 R1 Tris缓冲液pH7 618 16mmol L氯化钠123 20mmol L聚乙二醇防腐剂试剂2 R2 Tris缓冲液pH7 618 16mmol LIgG抗体防腐剂 81 样本指标 血清 肝素或EDTA抗凝血浆 血清或血浆应当在收集后2小时内从血细胞中被分离 样本稳定性 2 8 下保存3个月 样本中胆红素 600 mol L 溶血 5g L 血脂 5g L时未观察到明显干扰 82 测定条件 主波长IgA IgM IgG700nm比色杯光径1 0cm温度37 分析类型终点法校准程序 用去离子水将IgA IgM IgG校准液按倍比稀释 以水为零点 建立工作曲线 校准品另购 建议使用RANDOX或其它有溯源性的校准品 稀释方法如下 83 操作步骤 计算方法样本 A样本免疫球蛋白浓度 标准浓度标准 A R1 试剂1R2 试剂2S 校准品U 样品 预孵育时间 延迟时间 蒸馏水 U或读取吸光A1R2 l读取吸光度A2S l R1 25 l计算 A 84 性能指标 1 试剂空白吸光度 0 2500 340nm lcm光径 2 精密度 重复性 10 批间相对极差R 10 3 准确度 相对偏差 10 4 线性范围 0 550mg dL r 0 990 5 稳定性 本试剂在2 8 无腐蚀性气体的避光环境中贮存12个月 性能指标1 试剂空白吸光度 0 1500 340nm lcm光径 2 精密度 重复性CV 10 批间相对极差R 10 3 准确度 相对偏差 10 4 线性范围 0 500mg dL 0 5g L r 0 990 5 稳定性 本试剂在2 8 无腐蚀性气体的避光环境中贮存12个月 性能指标 1 试剂空白吸光度 0 0300 700nm lcm光径 2 精密