药物的杂质检查二药物分析与检验技术ppt课件.ppt

三铁盐检查法 第一法硫氰酸盐法 Ch P USP 1 原理 红色 1 2 操作 供试品标准品溶液 样品规定项下一定量 比色管 加水至25ml 稀HCl4ml 过硫酸铵50mg 加水至35ml 加30 硫氰酸铵溶液3ml 加水至50ml 立即比色 三铁盐检查法 2 观察 3 3 讨论 1 试剂的作用 a 稀HCl 防止Fe3 水解 避免弱酸盐如醋酸盐 磷酸盐干扰 以50ml加稀HCl4ml为宜 此时生成淡红色最显著 三铁盐检查法 4 b 过硫酸铵 NH4 2S2O8作用 氧化剂 氧化供试品中Fe2 Fe3 可防止由于光线使硫氰酸铁还原或分解褪色 三铁盐检查法 5 2 最适检出浓度 标准铁溶液10 g mlFe3 由硫酸铁铵配制 最适检出浓度 10 50 gFe3 50ml 三铁盐检查法 6 3 供试品管和对照管颜色不一致时 加正丁醇或异戊醇提取后再比色 三铁盐检查法 7 第二法巯基醋酸法 BP 原理 巯基醋酸 HSCH2COOH 还原Fe3 为Fe2 在氨碱性溶液中作用生成红色配位离子 与一定量标准铁溶液经同法处理后产生的颜色比较 三铁盐检查法 8 第二法巯基醋酸法 BP 特点 与硫氰酸盐法相比 灵敏度高 但试剂较贵 三铁盐检查法 9 四重金属检查法 1 重金属的概念工业上指比重在5以上的金属 重金属是指在实验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠作用呈色的金属 如 Ag Pb Hg Cu Cd Bi Sb Sn As Ni Co Zn等 10 四重金属检查法 以Pb为代表 在药物生产中遇到铅的机会较多 铅易蓄积性中毒 11 显色剂 溶于碱而不溶于稀酸或在稀酸中产生沉淀的药物用硫化钠为显色剂 溶于水 稀酸 乙醇的药物以硫代乙酰胺为显色剂 pH为3 0 3 5 四重金属检查法 12 第二法 炽灼后的硫代乙酰胺法 适用于含芳环 杂环及水 稀酸 乙醇中难溶的有机药物 第一法 硫代乙酰胺法 适用于溶于水 稀酸 乙醇的药物 是最常用的方法 四重金属检查法 13 第三法 硫化钠法 难溶于稀酸但能溶于碱性溶液 如巴比妥类 磺胺类等 第四法 又称微孔滤膜法 适用于含2 5 g重金属杂质检查 四重金属检查法 14 第一法硫代乙酰胺法适用于溶于水 稀酸 乙醇的药物 要求在实验条件下溶液澄清 无色 对检查无干扰 或经处理后对检查无干扰 四重金属检查法 15 四重金属检查法 16 四重金属检查法 17 2操作方法 样品管 对照管 四重金属检查法 18 观察 19 3 讨论 标准铅溶液用Pb NO3 2先配制贮备液 为了防止铅盐的水解加入硝酸 临用前稀释成10 g ml 最适检测范围10 20 gPb2 27ml 四重金属检查法 20 改用硫代乙酰胺为显色剂 95版起 硫代乙酰胺在实验条件下水解产生H2S 与重金属离子反应 四重金属检查法 21 溶液的pHpH在3 0 3 5时 呈色较完全 酸度增大 呈色变浅甚至不呈色 用pH3 5的醋酸盐缓冲液控制溶液的pH 若供试品用强酸溶解 在加入硫代乙酰胺前 加氨水至中性 四重金属检查法 22 供试品溶液有颜色时的处理方法 重金属检查时常用外消色法来消除供试品溶液颜色的影响 外消色法不能使供试品管颜色与对照品管颜色相同时 可使用内消色法 四重金属检查法 23 在加硫代乙酰胺试液之前用稀焦糖溶液调节对照管颜色与样品管颜色一致 四重金属检查法 用对测定不干扰的指示剂调节对照管颜色与样品管颜色一致 24 b内消色法 与氯化物检查时的处理方法类似 四重金属检查法 25 在弱酸性溶液中氧化H2S析出S 影响检查 a 供试品中的微量Fe3 加入抗坏血酸或盐酸羟胺使Fe3 还原为Fe2 消除Fe3 的影响 如 葡萄酸亚铁中重金属的检查 四重金属检查法 26 b 大量的Fe3 即样品本身为Fe3 Fe3 HCl HFeCl6 2 黄色 用乙醚提取后 水层加氨试液调至碱性 残存的Fe3 可用KCN掩蔽 第三法检查 Na2S试液 如 枸橼酸铁铵的重金属检查 四重金属检查法 27 c 药物本身能生成不溶性硫化物 可加入掩蔽剂消除干扰 如 葡萄酸锑钠或硫酸锌中重金属的检查 加掩蔽剂KCN 使Sb Zn形成稳定的配合物后 用第三法 Na2S 四重金属检查法 28 第二法 炽灼后的硫代乙酰胺法 适用于在水 稀酸或碱 乙醇中难溶 或与金属离子形成配位化合物的有机药物 如具有芳环 杂环的有机药物中重金属的检查按中国药典的第二法检查 四重金属检查法 29 重金属与药物的芳环 杂环形成较牢固的共价键 不能直接被检出 供试品要炽灼破坏后 加硝酸加热处理 重金属游离后 再按第一法检查 四重金属检查法 30 2 操作方法 缓缓炽灼放冷H2SO40 5 1 0ml供试品炭化加热HNO3500 600 H2SO4除尽放冷完全灰化蒸干HCl2ml水15ml中性按第一法检查蒸干氨试液注意 做空白试验 四重金属检查法 31 3 讨论1 炽灼温度 500 600 2 HNO3处理后 必须蒸干 除尽NO3 含钠或氟的有机药物改用铂坩埚或硬质玻璃 玛瑙 蒸发皿 例 盐酸氟奋乃静中Pb2 四重金属检查法 32 第三法硫化钠法 用于不溶于稀酸或在稀酸中难溶的药物但能溶解于碱性溶液的重金属的检查 如 磺胺 巴比妥的检查 四重金属检查法 33 1 原理 在碱性介质中 以Na2S为显色剂 Pb2 与S2 作用生成PbS的混悬液 与一定量标准铅溶液经同法处理所呈颜色比较 判断供试品中重金属的限量 四重金属检查法 34 2 方法 取供试品加NaOH5ml和水20ml使溶解后加Na2S5滴 摇匀 与一定量标准铅溶液经同法处理所呈颜色比较 四重金属检查法 35 3 讨论 Na2S对玻璃有腐蚀性 久置产生絮状物 应临用新配 四重金属检查法 36 第四法微孔滤膜法 适用于重金属限量低的药物 2 5 g1 原理同第一法2 方法比较滤膜上的铅斑 四重金属检查法 3 讨论供试品溶液有色或浑浊 应进行预滤 直至滤膜无污染 37 原理 同第一法使重金属生成的硫化物富集于微孔滤膜上 铅斑 提高检查的灵敏度 38 硫代乙酰胺 0 01 0 02mgPb2 27ml 3 3 5 NaOH 3 3 5 0 002 0 005mg 硫化钠 硫代乙酰胺 可溶于水 稀酸和乙醇的药物 不溶于水 稀酸和乙醇的药物 溶于碱的药物 2 5 g重金属 有色溶液 39 白田道夫法 JP 古蔡氏法 Ch P JP BP Ag DDC法 Ch P JP USP 奇列氏法 BP 五砷盐检查法 40 一 古蔡氏法 Gutzeit 1 原理 ChP BP JP利用金属锌与酸作用产生新生态的氢 与药物中微量砷盐反应生成具挥发性的砷化氢 遇溴化汞试纸产生黄色至棕色的砷斑 与同条件下一定量标准砷溶液所生成的砷斑比较 判断砷盐的含量 五砷盐检查法 41 反应式如下 五砷盐检查法 42 2 操作 1 装置 检砷瓶 砷化氢发生瓶A导气管B配套具孔塞C A B C 五砷盐检查法 43 2 方法 五砷盐检查法 44 2操作方法 加锌粒2g 立即将装妥的导气管B密塞与A瓶 置25 40 水浴中 反应45分钟 取出溴化汞试纸 比较砷斑 导气管B中装入醋酸铅棉花 60mg 再于旋塞C的平面上放一片溴化汞试纸 样品 对照品分别置于检砷瓶中 加盐酸5ml与水21ml 再加2 5 碘化钾试液5ml与0 3 酸性氯化亚锡试液5滴 在室温放置10分钟 五砷盐检查法 45 砷斑 46 3 讨论 1 试剂的作用 a KI的作用 还原剂 五价砷反应速度比三价砷反应速度慢 加入KI使五价砷还原为三价砷 以增大生成AsH3的速度 五砷盐检查法 47 b 酸性SnCl2的作用 1 还原剂 表现在3方面 As5 As3 五砷盐检查法 48 进而促进AsH3不断生成 稳定的络离子 将KI被氧化生成的I2再还原为I 五砷盐检查法 49 五砷盐检查法 SnCl2与Zn粒表面形成Zn Sn齐 起去极化作用 使氢气均匀而连续地发生 50 C PbAc2棉花的作用排除硫化物的干扰 五砷盐检查法 51 d HgBr2试纸的作用与AsH3作用较HgCl2灵敏 但所成砷斑不够稳定 反应中 应保持干燥和避光 并立即比较 五砷盐检查法 52 2 反应最佳条件 Zn粒的大小及用量大小 能通过1号筛 850 2000 m 用量 约2g所用Zn粒应不含砷 五砷盐检查法 53 试剂浓度 KI试液2 5 酸性SnCl20 3 供试液酸度2mol L盐酸标准砷溶液1 g ml 反应时间及温度25 40 C 反应40min 五砷盐检查法 54 排除方法 加入浓硝酸处理 3 古蔡氏法中干扰物的排除 1 供试品是硫化物 亚硫酸盐 硫代硫酸盐 五砷盐检查法 55 2 供试品是铁盐 Fe3 消耗还原剂 KI SnCl2 并能氧化砷化氢 排除方法 先加酸性SnCl2试液使Fe3 Fe2 五砷盐检查法 如枸橼酸铁铵中砷盐的检查 56 排除方法 要先进行有机破坏 酸破坏法和碱破坏法 五砷盐检查法 57 碱破坏法a加入氢氧化钙500 600 C灼烧例 酚磺酞b加入无水碳酸钠碱融例 苯甲酸钠 酸破坏法加稀硫酸与溴化钾例 葡萄糖中砷盐检查 五砷盐检查法 58 4 含锑药物不用古蔡氏法 改用白田道夫法 五砷盐检查法 59 4 优点 缺点 优点 灵敏度高 1 gAs即被检出 缺点 Sb干扰 SbH3灰白色 五砷盐检查法 60 2 白田道夫法 Betterdorff 1 原理SnCl2在HCl中能将As盐还原为棕褐色的胶态砷 与一定量的标准砷溶液按同法处理后进行比较 判断供试品中砷盐的限量 2As3 3SnCl2 6HCl 2As 3SnCl4 6H 深褐色 与标准溶液同法处理比较 五砷盐检查法 61 2 优点 缺点 优点 不受Sb干扰 缺点 灵敏度低 20 gAs2O3 10ml加入少量HgCl2 灵敏度提高至2 gAs2O3 10ml 五砷盐检查法 62 Ch P USP收载 可用于限量检查和微量砷盐的含量测定 3 二乙基二硫代氨基甲酸银法 Ag DDC法 五砷盐检查法 63 原理 第一步 同古蔡氏法生成砷化氢第二步 砷化氢还原Ag DDC的吡啶溶液 产生红色的胶态银 与同条件下一定量标准砷溶液所呈颜色用目视比色法或在510nm波长处测定吸收度 进行比较判断 五砷盐检查法 64 65 2 优点 缺点 优点 a灵敏度高0 5 gAs 30mlb重现性好 仪器测定cSb干扰小 缺点 吡啶恶臭 用三乙氨 氯仿代替 但灵敏度降低 五砷盐检查法 66 4 奇列氏法 次磷酸法 1 原理在盐酸酸性溶液中 次磷酸还原砷盐为棕色的游离砷 与标准砷溶液同法处理后比较颜色 五砷盐检查法 67 NaH2PO2 HCl H3PO2 NaCl3H3PO2 H3AsO3 3H3PO3 2As BP收载 五砷盐检查法 68 2 优点 缺点 优点 不受S2 SO32 Sb Hg Ag干扰 缺点 灵敏度低 五砷盐检查法 69 Sb 100ug Sb 500ug Sb 500ug Zn HClKI SnCl2HgBr2 Zn HClKI SnCl2Ag DDC SnCl2HCl 黄棕色砷斑 红色胶态银 棕褐色胶态砷 70 71 六干燥失重 72 中国药典采用的测定法常压干燥法干燥剂干燥法减压干燥法 六干燥失重 73 一 常压恒温干燥法适用于受热较稳定的药物干燥温度一般为105 供试品平铺在称量瓶中的厚度一般不超过5mm 74 二 干燥剂干燥法适用于受热易分解或挥发的药物干燥剂 H2SO4 硅胶 P2O5 最常用 75 三 减压干燥法适用于熔点低 受热不稳定或水分难赶除的药物可用减压干燥剂干燥法 第二次及以后各次称重均应在规定条件下继续干燥1h后进行 76 八炽灼残渣 77 一 方法1 坩埚中炭化2 加硫酸低温继续炭化3 700 800 灰化至恒重 八炽灼残渣 78 方法样品炭化后 H2SO4湿润 700 800 炽灼至恒重 称重 若残渣需留作重金属检查 则改在500 600 炽灼至恒重 第二次及以后各次称重均应在规定条件下继续炽灼0 5h后进行 79 八炽灼残渣 80 a 坩埚 斜置 缓缓加热含氟药物b 温度c 恒重 二 注意事项 八炽灼残渣 81 恒重系指供试品连续两次干燥或灼烧后的重量差异在0 3mg以下的重量 干燥至恒重的第二次级以后各次称重均应在规定条件下干燥1h后进行干燥炽灼至恒重的第二次称重应在继续炽灼30min后进行 八炽灼残渣 82 一 酸碱滴定法 二 指示液法 三 pH值测定法 十二酸碱度检查法 83 一 酸碱滴定法在一定指示液下 用酸或碱滴定供试品中碱性或酸性杂质 以消耗滴定液的ml数作为限度指标 十二酸碱度检查法 84 例 NaCl的酸碱度样品5 0g 水50ml溶解 溴麝香草酚蓝 pH6 0 7 6 黄 蓝 指示液2滴 十二酸碱度检查法 85 a 若显黄色 加0 02mol LNaOH滴定液0 1ml 应变兰色b 若显蓝色或绿色加0 02mol LHCl滴定液0 1ml 应变黄色 十二酸碱度检查法 86 十二酸碱度检查法 87 例 蒸馏水的酸碱度样品10mla 甲基红 pH4 2 6 3 红 黄 指示液2滴 不得显红色 b 溴麝香草酚蓝指示液5滴 不得显蓝色 蒸馏水的pH范围4 2 7 6 十二酸碱度检查法 88 十二酸碱度检查法 89 微孔滤膜法是用来检查A 氯化物B 砷盐C 重金属D 硫化物E 氰化物 90 重金属检查中 加入硫代乙酰胺时控制最佳的pH值是A 1 5B 3 5C 7 5D 9 5E 11 5 91 中国药典重金属检查法中 所使用的显色剂是A 硫化氢试液B 硫代乙酰胺试液C 硫化钠试液D 氰化钾试液E 硫氰酸铵试液 92 葡萄糖中进行重金属检查时 适宜的条件是A 用硫代乙酰胺为标准对照液B 用10ml稀硝酸 50ml酸化C 在pH3 5醋酸盐缓冲溶液中D 用硫化钠为试液E 结果需在黑色背景下观察 93 现有一药物为苯巴比妥 欲进行重金属检查 应采用 中国药典 上收载的重金属检查的哪种方法A 一法B 二法C 三法D 四法E 以上都不对 94 下面哪些方法为 中国药典 收载的重金属检查方法A 500 600 炽灼残渣后 按一法操作B pH3 3 5条件下 加入硫化氢试液C 碱性下 加入硫化钠试液D 按一法操作后再用微孔滤膜过滤后观察色斑E 以上都对 95 Ag DDC法检查砷盐的原理为砷化氢与Ag DDC吡啶作用 生成的是A 砷斑B 锑斑C 胶态砷D 三氧化二砷E 胶态银 96 古蔡氏法中 SnC12的作用有A 使As5 As3 B 除去H2SC 除去I2D 组成锌锡齐E 除去其它杂质 97 所含待测杂质的适宜检测量A 0 002mgB 0 01 0 02mgC 0 01 0 05mgD 0 05 0 08mgE 0 2 0 5mg1 硫酸盐检查法中 50ml溶液中2 铁盐检查法中 50ml溶液中3 重金属检查法中 27ml溶液中4 古蔡氏法中 反应液中5 氯化物检查法中 50ml溶液中 E C B A D 98 适用于A 古蔡氏 Gutzeit 法B 二乙基二硫代氨基甲酸银法C A和B均可D A和B均不可106 在连接砷化氢发生瓶的导管装入醋酸铅棉花107 使用的标准砷溶液为2m1108 测定结果要与标准砷斑相比较109 要测定吸收度110 要用酸碱滴定法 C C A B D 99 在用古蔡法检查砷盐时 导气管中塞入醋酸铅棉花的目的是A 除去I2B 除去AsH3C 除去H2SD 除去HBrE 除去SbH3 100 A 硝酸银试液B 氯化钡试液C 硫代乙酰胺试液D 硫化钠试液E 硫氰酸铵试液 药物中铁盐检查 磺胺嘧啶中重金属检查 药物中硫酸盐检查 葡萄糖中重金属检查 药物中氯化物检查 E D B C A 101 可用于检查的杂质为A 氯化物B 砷盐C 铁盐D 硫酸盐E 重金属96 酸性溶液中与氯化钡生成浑浊液的方法97 酸性溶液中与硫氰酸盐生成红色的方法98 实验条件下与硫代乙酰胺形成均匀混悬溶液的方法99 Ag DDC法100 古蔡氏法 D C E B B 102 中国药典收载的古蔡法检查砷盐的基本原理是A 与锌 酸作用生成H2S气体B 与锌 酸作用生成AsH3气体C 产生的气体遇氯化汞试纸产生砷斑D 比较供试品砷斑与标准品砷斑面积大小E 比较供试品砷斑与标准品砷斑颜色强度 103 杂质检查所用的试剂为A 稀盐酸B 盐酸C 稀硫酸D 甲基红E 醋酸盐缓冲液 pH3 5 1 砷盐的检查2 重金属的检查3 铁盐的检查4 硫酸盐的检查5 酸度的检查 B E A A D 104 Ag DDC法检查砷盐时 所产生的红色溶液是A HDDC吡啶溶液B Ag吡啶溶液C Ag的胶态溶液D Ag DDC 溶液E AsAg3溶液 105 Ag DDC法检查砷时 加入碘化钾和氯化亚锡的作用为A 将As5 还原为As3 B 有利于AsH3生成反应C 抑制SbH3的生成D 形成Zn Sn齐以均匀而连续地发生氢气E 催化加速生成AsH3反应 106 葡萄糖中砷盐的检查 需要的试剂应有A Pb2 标准液B SnCl2试液C KI试液D ZnE 醋酸铅棉花 107 古蔡氏法检砷 药典规定制备标准砷斑时 应取标准砷溶液A 1mlB 5mlC 2mlD 依限量大小决定E 以上都不对 108 例10 14A 稀HClB 锌粒C 稀硫酸D 甲基红指示剂E 醋酸盐缓冲液 pH3 5 10 砷盐检查11 重金属检查12 铁盐检查13 硫酸盐检查14 酸碱度检查 B E A A D 109 例15 古蔡氏法检查所用的溶液是A 强碱性溶液B 强酸性溶液C 含稀盐酸2ml 50ml溶液D 含稀硝酸10ml 50ml溶液E 含强氧化剂 硝酸或过硫酸铵 溶液 110 例1 炽灼残渣检查法一般加热恒重的温度为A 500 600 B 600 700 C 700 800 D 800 1000 E 1000 1200 111 炽灼残渣检查后 将残渣留作重金属检查时 炽灼温度应为A 500 600 B 400 500 C 600 700 D 700 800 E 800 1000 112 例4 炽灼残渣的限量一般为A 1 B 0 5 1 C 0 4 0 5 D 0 2 0 3 E 0 1 0 2 113 硒 氟 硫的检查法溶液颜色 澄清度检查法水分测定易炭化物检查法有机溶剂残留量测定法 114 第三节特殊杂质的检查方法 第三章药物的杂质检查 115 特殊杂质是指在该药物生产和储藏过程中 根据其生产方法 工艺条件及药物本身性质可能引入的杂质 116 特殊杂质的检查法 化学性质的差异 物理性质的差异 117 臭味及挥发性差异颜色差异溶解行为差异旋光性质的差异光学性质的差异 一 物理性质上的差异 118 一 臭味及挥发性差异 119 二 颜色差异 3 药物自身无色 杂质有色 例 盐酸胺碘酮中检查游离碘4 溶解行为差异例 葡萄糖中糊精的检查乙醇中葡萄糖溶解 而糊精不溶 检查样品的澄清度 一 物理分析法 120 四 旋光性质的差异 一 物理分析法 5 旋光性质的差异比旋度是否偏离规定范围 来判断1 药物有旋光度而杂质无例 黄体酮在乙醇中的比旋度为 186 198 2 杂质有旋光度而药物无例 硫酸阿托品 50mg ml 中莨菪碱的检查 规定旋光度 0 4 121 二 色谱分析法 122 一 薄层色谱法 TLC 灵敏 简便 快速 不需要特殊的设备 费用低 具有分离和鉴定双重作用 1 优点 123 首先确认存在的待检杂质是什么 并且能够得到杂质对照品 1 杂质对照品法 2 常用方法 124 供试品溶液 50mg ml的甲醇液对照品溶液 N 甲基哌嗪50 g ml的甲醇液板 硅胶G点样 10 l展开剂 CHCl3 CH3OH NH3 H2O 13 5 1 显色 碘蒸气中 判断 供试品溶液如显与对照品溶液相应的杂质斑点 其颜色不得深于对照品溶液的斑点 例 枸橼酸乙胺嗪中检查N 甲基哌嗪 125 126 2 供试品自身稀释对照法 适用于杂质的结构不能确定 或无杂质对照品的情况 将供试品按限量要求稀释到一定的浓度作为杂质对照液 127 供试液 3mg ml对照液 60 g ml 供试液稀释50倍 供试液与对照液分别点于同一薄层板 例 氢化可的松中 其他甾体 检查 128 判断 供试品溶液的杂质斑点数 3个 且供试品溶液的杂质斑点颜色 对照液主斑点颜色 129 供试液 20mg ml对照液 0 2mg ml 供试液稀释100倍 供试液与对照液分别点于同一硅胶GF254薄层板 例 吡罗西康中有关物质的检查 130 展开剂 氯仿 丙酮 甲醇 25 25 5 紫外灯 254nm 观察判断 供试品溶液如显杂质斑点其颜色 对照液主斑点颜色 131 3 杂质对照品法与供试品自身稀释对照法并用 当药物中存在多个杂质时 有杂质对照品的用杂质对照品法 杂质的结构不能确定 或无杂质对照品的情况用供试品自身稀释对照法 132 选用质量符合规定的与供试品相同的药物作为杂质对照品 要求所选用的对照品中所含待检杂质应为规定的限量水平 且稳定性要好 4 对照药物法 133 5 在一定供试品及检查条件下不允许有杂质斑点存在 在试验条件下显色剂对杂质的最小检出量来控制杂质限量 134 6 选用可能存在的某种物质作为杂质对照品 当药物中的杂质没有完全确认以前 或待检杂质不只一种时 可以根据药物的合成路线 化学性质等推断可能存在的杂质 并且能获得此物质的对照品时可采用这个方法 135 1 检测灵敏度2 比移值3 分离效能 3 TLC的系统适用性实验 136 1 内标法加校正因子法 2 外标法 3 加校正因子的主