临床免疫学与免疫检验绪论ppt课件.ppt

临床免疫学与免疫检验 ClinicalImmunologyandImmunoassay 绪论 Introduction 1 教学目标与要求 一 掌握临床免疫学与临床免疫检验的定义 掌握抗原 抗体及免疫细胞等免疫学基本要素的基本特征 二 掌握临床免疫检验在临床医学中的重要价值 三 熟悉临床免疫检验的现状 四 了解临床免疫检验中值得关注的几个问题 五 了解临床免疫检验的发展方向 2 CongenitalHarelip 3 Causeofcongenitalharelip 1 nutrientdeficiency vitamindeficiency 2 medicinetherapy suchasaspirinandhormone 3 depression 4 geneticfactors 5 infection suchasrubellavirus 6 otherfactors suchasradioactivitysubstance smokinganddrinketc 4 TORCH感染 T 弓形虫 toxoplasmagondii O 其它病原微生物 others R 风疹病毒 rubellavirus C 巨细胞病毒 cytomegalovirus H 单纯疱疹病毒 herpessimplexvirus TORCH感染病原体常可通过胎盘传给胎儿 引起围生期感染 导致流产 死胎 早产 先天畸形和智力障碍等各种异常结果 5 6 如何发现TORCH感染呢 临床免疫学检验 临床分子生物学检验 病原体分离 培养与鉴定 7 免疫学 Immunology 研究免疫系统的结构与功能 研究免疫应答的机制 研究有效的免疫措施 实现以防病 治病为目的的一门现代生命科学 感染性疾病疫苗肝脏疾病肿瘤 8 临床免疫学 澳大利亚于30年前即成立了临床免疫学科 将临床免疫学工作定为三种形式 即 1 临床诊断和治疗 2 临床实验免疫学 3 前两者兼而有之 英国将临床免疫学定义为 对那些在发病或治疗过程中涉及免疫系统的疾病的诊断和处理工作 临床免疫学是将免疫学基础理论与免疫学技术相结合 用于研究临床疾病的发病机制 诊断与鉴别诊断 治疗与预后判断等领域的新兴的边缘学科 9 临床免疫学范畴 临床免疫检验内科免疫学外科免疫学儿科免疫学生殖免疫学感染免疫学移植免疫学免疫病理学 10 临床免疫检验 Clinicalimmunoassay 采用免疫学的技术与方法检测人体内的免疫活性物质或其它生命化学物质 为临床疾病的诊断 治疗方案的选择以及疾病的预后判断提供有效的实验室依据 11 SwineInfluenzaA H1N1 outbreak VirusisbeingdescribedasanewsubtypeofA H1N1notpreviouslydetectedinswineorhumans 12 SwineFlu CaseDefinitions Source AmericanCDC 13 学好临床免疫检验 必须掌握 一个核心 三个要素与四个标记 一个核心 抗原抗体反应 Antigen antibodyinteraction 三个要素 抗原 抗体和免疫细胞四个标记 酶标记技术 放射免疫标记技术 荧光素标记技术与化学发光标记技术 14 抗原 Antigen 抗原 能够刺激机体免疫系统产生抗体和致敏淋巴细胞 并能在体内外与抗体或致敏淋巴细胞发生特异性反应的物质 蛋白质脂多糖核酸等 15 抗原的基本特性 免疫原性 Immunogenicity 指抗原能够刺激机体免疫系统产生抗体和致敏淋巴细胞等免疫活性物质的特性 抗原性 Antigenicity 指抗原能在体内外与抗体或致敏淋巴细胞发生特异性反应的特性 16 抗原特异性的物质基础是抗原决定族 Antigenicitydeterminant 抗原决定族 指存在于抗原表面决定抗原特异性的特殊化学基团 是TCR BCR及抗体特异性结合的基本单位 启动免疫应答 又称表位 epitope 其化学性质 数目和空间构象决定了该抗原的特异性和免疫原性的强弱 17 18 抗体 定义 抗体 Antibody Ab 是机体在抗原刺激下 由浆细胞合成与分泌的 能与抗原特异性结合的具有免疫功能的球蛋白 基本结构 1 四肽链 2 NH2 端和COOH 端 3 V区与C区 19 20 可变区 variableregion 即VL和VH 位于Ig分子的N端 该区氨基酸组成与排列顺序有较大差异 并决定Ag与Ab的特异性 高变区 Hypervariableregion VL和VH中3个区域氨基酸组成与排列顺序特别容易变化 又称互补决定区 CDR 此乃Ag与Ab特异性结合的部位 恒定区 Constantregion 同一种属中 恒定区氨基酸组成与排列顺序恒定 21 22 多克隆抗体 polyclonalantibody 用含多种抗原决定族的抗原物质免疫动物 刺激多个B细胞克隆所获得的免疫血清 含多种单克隆抗体的混合物 此为多克隆抗体 23 单克隆抗体 monoclonalantibody McAb 借助小鼠B细胞杂交瘤 hybridoma 技术 所制备的高度均一 属同一类 亚类 型别 单一特异性 仅针对特定抗原表位 的抗体 24 25 基因工程抗体 EngineerAntibody 借助于基因重组技术和蛋白表达技术 按照人们的意愿在基因水平对Ig进行切割 连接或修饰 组装成新颖Ab分子 称为基因工程抗体 26 鼠IgG的DNA人IgG的DNA VmCmVhCh VmCh 鼠源性单抗的V区 人Ig的C区 人 鼠嵌合抗体 chimericantibody 27 免疫细胞 免疫细胞 包括所有参与免疫应答或与免疫应答有关的细胞及其前体细胞 如造血干细胞 淋巴细胞 肥大细胞以及红细胞等 免疫活性细胞 具有特异性抗原受体 被抗原刺激后能活化 增殖 分化并产生免疫物质 发生特异性免疫应答的细胞 28 免疫细胞具有不同的表面标志 B细胞T细胞BCRTCRCD19 CD21和CD81CD3 CD4或CD8CD40CD40LB7CD28补体受体CD2丝裂原受体丝裂原受体 29 30 免疫细胞数目的检测免疫细胞功能的检测免疫细胞的分离 31 二 临床免疫检验在临床医学中具有重要价值 32 疾病的诊断疗效的观察复发的评估预后的判断 33 hepatitis CausesofhepatitisViralHepatitis A B C D E F G TTVetc Otherviruses CMV EBV HSV Dengueetc DrugsAlcoholIschaemiaSystemicDiseasesandInfections 34 HBVserologicmarker 35 SLE Systemiclupuserythematosus SLEisanautoimmunediseasecharacterizedbyimmunedysregulationresultingintheproductionofantinuclearantibodies ANA generationofcirculatingimmunecomplexes andactivationofthecomplementsystem InSLEthereisapredilectionforclinicalinvolvementofthejoints skin kidney brain serosa lug heartandgastrointestinaltract Butterflyerythema 36 TheAmericanRheumatologyAssociation ARA criteria 37 ANA 38 Arealstoryabouttumormarker Place ThecityofBirmingham AL U S ACharacter ApastcolleagueworkingintheUniversityofAlabamaatBirmingham Hydatidiformmole 葡萄胎 Suggection TimeThefrequencyofdetecting hCGFirstthreemonth1 weekNextninemonth1 monthNextyear1 halfyear 39 40 HIVandAIDS 41 CD4 CellcountandCD4 CD8 InpatientswithAIDS totalTcellsandCD4 Cellsdecreasesignificance 1 5 109 Land 2 0 4 0 108 L furthermore CD4 CD8 1 0 Monitorcurativeeffect 42 43 44 对应的章节 二十二章 感染免疫及其免疫检测二十三章 超敏反应疾病及其免疫检测二十四章 自身免疫性疾病及其免疫检测二十五章 免疫增殖性疾病及其免疫检测二十六章 免疫缺陷性疾病及其免疫检测二十七章 肿瘤免疫及其免疫检测二十八章 移植免疫及其免疫检测 45 三 临床免疫检测的现状 近年来 随着生物学 基础医学和计算机技术 特别是单克隆抗体技术与免疫标记技术的快速发展 免疫学检验取得了明显的进步 大量新的检测方法及检测指标不断出现 并向自动化 微量化及定量化方向飞速发展 46 早期的免疫检验方法逐渐退出检验市场 免疫标记技术在免疫检测中占主导地位 免疫检验自动化已逐渐普遍 免疫检验的对象不断增加 47 早期的免疫检验方法逐渐退出检验市场 早期的一些免疫学检测技术 常通过肉眼观察是否有沉淀 凝集以及溶血现象的发生来进行免疫学分析 如免疫扩散 凝集实验以及经典的补体结合反应等 尽管这些方法具有成本低廉 操作简单等优点 但是大部分只是半定量 定性实验 且需要耗费较长时间 越来越难以满足临床诊断的需要 已慢慢地被随后发展起来的各种先进的免疫学检测技术所代替 48 凝集反应 Agglutinationreaction 49 50 免疫标记技术在免疫检测中占主导地位 标记免疫技术 所谓免疫标记技术是将可微量检测的标记物 如放射性核素 荧光素以及酶等 标记一定的抗原或抗体 用以检测未知的抗体或抗原 如放射免疫技术 酶标记免疫技术 荧光素标记免疫技术等 51 52 FIGURE6 15 Separationoffluorochrome labeledcellswiththeflowcytometerwhichusesalaserbeam lightdetector differentAgindifferentcells differentlevelsofAginthesametypeofcell fluorescenceintensity thesizeofcells 10 Flowcytometry Fluorescence 53 免疫检验自动化已逐渐普遍 免疫自动化分析是指用自动化仪器对待测物进行分析 它应包括两方面的内容 一是加样 测定以及仪器洗涤的自动化 二是数据处理的自动化 当前中国已能见到一系列的全自动免疫分析仪 54 55 免疫自动化分析与传统的手工操作相比较具有明显的优势 免疫自动化分析快速 标本报告时间缩短 一般数小时内即可向临床汇报检验结果 免疫自动化分析尤适用于大批量样品的测定 可节约大量的人力 物力 而且同一标本可同时用于检测几种待测物 血清用量少 通常以 l计 免疫自动化分析重复性好 干扰因素少 结果判断更加准确 客观 更有利于质量控制 免疫自动化分析能够避免标本对人的感染及标本之间的相互污染 56 免疫检验的对象不断增加 经典的免疫活性物质其它生命化学物质IgGCERIgMTrfIgACRPC3AATC4 1MG 57 HAPATITIS CANCER FERTILITY PROTEINS TDMs DRUGS TYROID ANEMIA HBVHCV M107 10 10 15 10 4g L AFPFERCEACA199 PRLHCGLHFSHGHMyoglobin RHFIgGC3ASOCERTRFAAG QUIGENAMIPHY FT3FT4DigT3T4TSHProg 免疫分析谱 58 对应的章节 第二章 二十二章 59 四 临床免疫检验中值得关注的几个问题 临床免疫学检验如何快速应对重大突发性传染病 蛋白芯片用于免疫检测值得期待 应建立有免疫检验特色的质量控制体系 60 免疫学检验如何快速应对重大突发性传染病 近年来 重大突发性传染病偶有发生 如SARS 禽流感以及猪链球菌感染等 这些疾病不仅严重危害人体健康 而且具有极高的传染性 如何尽快准确地为临床提供病原体感染的标志物 成为广大医学检验工作者的重要任务 由于单克隆抗体的飞速发展 众多的床旁测试也采用免疫学检测 如HCG HBsAg以及TB AB的检测等 因此建立重大突发性传染病的快速检测或床旁测试试剂值得免疫学检验工作人员的关注 61 SARS severeacuterespiratorysyndrome 病原体的确定与检测现状 62 电子显微镜发现为某种冠状病毒 63 基因组测序锁定为新型冠状病毒 64 复制出相应的动物模型 65 建立新的检测方法 PCR法间接免疫荧光法ELISA 66 67 快速免疫检验与重大突发性传染病 68 过敏原千千万 69 蛋白芯片用于免疫检测值得期待 蛋白芯片是将大量蛋白质分子按预先设置的排列固定于一种载体表面行成微阵列 根据蛋白质分子间特异性结合的原理 构建微流体生物化学分析系统 以实现对生物分子的准确 快速 大信息量的检测 70 71 72 鉴于蛋白芯片具有高通量 大容量 低成本以及可自动化 是未来免疫学检验重要的发展方向